NF-κB信号通路在推拿促进膝骨性关节炎软骨修复中的作用

推拿作为临床广泛应用的中医外治疗法之一,对膝骨性关节炎(Knee osteoarthritis, KOA)疗效显著,但其作用机制尚不明确。信号通路介导的KOA软骨细胞增殖、凋亡日益被人们关注,与KOA发病机制、靶向治疗的相关研究也逐渐起步。核因子-κB(NF-κB)信号通路在KOA软骨中存在病理性激活,其所介导的炎症反应与软骨细胞凋亡和KOA发病过程密切相关。本文拟从推拿调控炎症反应的角度,探讨其通过抑制NF-κB信号通路病理性激活促进KOA软骨修复的作用机制,为推拿治疗KOA的基础研究提供新的思路。     

p38 MAPK信号转导通路在骨关节炎中的相关研究

骨关节炎(osteoarthritis,OA)又称骨关节病、骨性关节炎,是机械性和生物性因素的共同作用,破坏关节软骨细胞、细胞外基质和软骨下骨正常合成与降解偶联的结果[1].根据流行病学研究,我国60岁以上的人群患病率可达50％,75岁以上的人群高达80％,该病的致残率高达53％[2].随着社会老龄化人口的增加,OA的发病率呈逐年上升趋势,故它不仅是医学问题,而且也成为社会问题,日益引起人们的重视.近年来,从p38 MAPK信号转导通路研究OA的发病机制与防治越来越广泛,现综述如下.     

p38 MAPK通路在糖尿病周围神经病变中的作用及中药干预的研究进展

糖尿病周围神经病变（DPN）是指糖尿病患者在排除其他原因后发生的周围神经功能障碍的症状和/或体征，DPN是糖尿病最常见的并发症之一，后期可导致残疾、足部溃疡、截肢等。其发病机制与高糖诱导的神经组织的炎症损伤、氧化应激、线粒体障碍，细胞凋亡关系密切。p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）信号通路是介导DPN神经组织炎症因子、氧化因子、凋亡因子表达等关键机制，高糖等因子激活p38 MAPK的磷酸化驱动诱发的炎症反应、氧化应激损伤和细胞凋亡，引起细胞脂质过氧化、蛋白质修饰、核酸受损，导致轴突变性和脱髓鞘改变。目前西医药治疗DPN存在明显不良反应、成瘾倾向等不足。近年来中医药在DPN的防治中的研究逐渐增多，中药干预p38 MAPK通路转导改善DPN的探索也取得了一定进展。该文搜集国内外近10年来关于p38 MAPK通路与胰岛素抵抗和周围神经病变的关系、其在DPN病理进程中参与炎症调节、氧化应激、多元醇途径调控、雪旺细胞凋亡等分子生物学机制进行归纳梳理总结；也对中药单体、中成药及中药复方基于p38MAPK通路抑制DPN周围神经炎症反应、氧化损伤、细胞凋亡反应等途径，抗神经轴突变性和脱髓鞘改...     

MAPK信号通路在防治类风湿关节炎中的作用及中药干预研究进展

类风湿关节炎（RA）是一种对称性小关节累及的自身免疫性疾病,临床上常表现为小关节肿胀、晨僵、进行性疼痛,甚至可见关节畸形、功能缺失。因免疫机制复杂,RA发病机制尚不透彻。但众多研究表明,RA的发病与免疫机制异常、滑膜炎症反应激增、RA纤维样滑膜细胞（RA-FLSs）生物学行为异常、细胞外基质异常降解等方面相关。丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）具有调控细胞的生长、增殖、分化和凋亡等多种生物学过程的作用,密切参与RA炎症介质异常释放与活化、RA-FLSs增殖、迁移和侵袭能力异常改变、滑膜血管新生、骨侵蚀和软骨破坏。中医药几千年的实践经验表明,中医药可有效改善RA患者关节肿胀、晨僵、疼痛等临床症状,延缓关节畸形的发生,并具有整体调控、个体化治疗、作用途径、靶点多样、安全性高、不良反应少、质量稳定的特点和优势。同时,现代研究证实中医药可通过干预MAPK信号通路,减少炎症因子、抑制RA-FLSs异常增殖、迁移与侵袭、调控RA-FLSs细胞凋亡、保护细胞外基质等作用,发挥防治RA的作用。该文拟通过综合国内外研究文献,阐述MAPK信号通路在RA发生进展中的关键作用,并总结中药干预MAPK信号通路防治RA的最新研究成果。旨在为开发中药新药及临床应用中药防治RA提供依据。     

中药通过调控信号通路治疗骨关节炎作用机制研究概述

多种信号通路在骨关节炎的发生与发展中起着重要作用,涉及炎症反应的调控、软骨细胞的破坏及胞外基质的降解等。中药治疗骨关节炎具有一定优势,近年来研究发现单味中药有效成分及中药复方可通过抑制核因子-κB的活化及核转位,降低白细胞介素-6、白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α等炎症因子及基质金属蛋白酶-13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶-5等基质降解酶的水平,减轻关节炎症反应及软骨破坏,减缓骨关节炎进展;通过调控Wnt/β-连环蛋白信号通路,减轻软骨细胞的破坏和细胞外基质的降解,同时上调Runt相关转录因子2及骨钙素的表达,促进骨膜间质干细胞的增殖和成骨细胞分化;通过抑制丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases, MAPK)信号通路中关键蛋白如p38MAPK、细胞外调节激酶、c-Jun氨基末端激酶等的表达及激活,降低软骨破坏;通过激活转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)信号通路,上调TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4等关键蛋白及TGF-β I型、II型受体的表达,降低基质金属蛋白酶-1...     

基于p38 MAPK信号通路分析槲皮素保护骨性关节炎关节软骨的机制

目的:探讨槲皮素通过靶向干预p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路保护膝关节骨性关节炎关节软骨的作用机制。方法:笔者通过网络药理学技术,科学的对槲皮素保护骨性关节炎患者关节软骨的靶点因子、信号通路进行预测,并对其进行分析。选择一条与骨性关节炎相关密切的预测通路对其采用体外细胞实验进行验证,通过细胞计数试剂-8(CCK-8)方法筛选出药物最佳干预浓度,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)对骨性关节炎及密切相关炎性因子白细胞介素(IL)-1β,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)进行检测,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测槲皮素干预后p38 MAPK信号通路下的相关mRNA,蛋白的表达。结果:通过网络药理学预测MAPK信号通路与骨性关节炎患者(OA)存在十分密切的相关性,并选取该通路中最为密切的p38 MAPK信号通路进行研究,通过药物浓度筛查发现在100μmol·L^-1的槲皮素干预后相关炎性因子降低最为明显,并且,在该浓度的槲皮素干预下抑制p38 MAPK信号通路中p38,磷酸化(p)-p38,基质金属蛋白酶-13(MMP-13),解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)等关键相关因子表达,促进Ⅱ型骨胶原蛋白(CollagenⅡ)的表达。结论:槲皮素在骨性关节炎疾病防治中具有降低软骨炎性因子表达的作用,可通过抑制p38MAPK通路相关因子表达而向好发展,所有结果显示,槲皮素具有降低OA炎性因子表达,保护OA患者关节软骨的作用。     

骨关节炎与MAPK信号通路关系的研究概况

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)是生物体内重要的细胞信号传递途径之一,参与调节细胞功能活动。MAPK信号通路包括多个亚家族如细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)通路、氨基末端激酶(JNK)通路、P38MAPK等。ERK、JNK、P38信号传导途径被活化后参与骨关节炎软骨细胞的增殖、凋亡与分化反应,加速骨关节炎软骨组织病理性降解,导致骨关节炎(Osteoarthritis,OA)的发生。文章对近年来OA与MAPK信号通路关系进行综述。     

中医药对p38 MAPK通路介导糖尿病肾病的研究进展

<正>糖尿病肾病(DN)是糖尿病最严重的慢性合并症之一,是导致慢性肾衰的主要病因,而炎症在其发病机制中的作用举足轻重,可通过信号通路的激活、炎症因子、细胞因子的相互作用等参与DN的发生发展。其中,p38 MAPK介导炎症在DN发生发展中的起到重要的作用。现代最新研究以p38 MAPK通路为治疗靶点,新兴的p38 MAPK抑制剂越发成为研究的热点。传统中医药在治疗DN具有独特的优势,结合中医药辨     

高静水压下益气活血汤通过p38MAPK信号通路对兔椎体终板软骨细胞的调控作用

目的观察益气活血汤含药血清在高静水压下对兔终板软骨细胞p38MAPK信号通路的调控作用,探讨益气活血汤治疗椎间盘退行性病变的可能作用机制。方法选用3月龄新西兰白兔制备益气活血汤含药血清,体外分离培养第3代兔椎体终板软骨细胞,建立体外高静水压加载干预模型,确定益气活血汤含药血清最佳干预条件。将体外培养的第3代终板软骨细胞随机分为空白组、模型组及含药血清组,空白组无任何干预,其余2组分别施加1 MPa静水压干预24 h后收集终板软骨细胞,运用Western Blot法检测各组终板软骨细胞p38、磷酸化p38蛋白表达情况。结果持续高静水压干预下,1μg/μL含药血清促终板软骨细胞增殖作用最明显。各组终板软骨细胞p38蛋白表达量比较差异无统计学意义;模型组磷酸化p38蛋白表达量显著高于空白组,而含药血清组磷酸化p38蛋白表达量显著低于模型组(P0.05)。结论益气活血汤可以提高持续高静水压下终板软骨细胞增殖率,抑制软骨细胞凋亡,可能与其降低磷酸化p38蛋白表达水平,抑制p38MAPK信号通路的激活有关,推测益气活血汤可能通过调控p38MAPK信号通路发挥延缓椎间盘退行性病变的作用。     

苍膝通痹胶囊调控circRNA＿0008365/miR-1271/p38 MAPK通路轴促进膝骨关节炎软骨细胞自噬的机制研究

该研究旨在探讨苍膝通痹胶囊通过调控circRNA＿0008365/miR-1271/p38 MAPK通路轴促进软骨细胞自噬抑制膝骨关节炎(KOA)进展的机制。于体内、体外分别构建软骨细胞和大鼠的骨关节炎模型,分别给予苍膝通痹胶囊、circRNA＿0008365干扰、空载对照、以及苍膝通痹胶囊合用circRNA＿0008365干扰进行干预。应用流式细胞术观察细胞凋亡,透射电镜观察自噬小体,Western blot观察各组软骨细胞自噬指标微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)Ⅱ/Ⅰ、自噬效应蛋白-1(Beclin-1)、选择性自噬接头蛋白p62/sequestosome 1(selective autophagy junction protein p62/sequestosome 1,p62)、软骨细胞外基质代谢(collagenⅡ、ADAMTS-5)及p-p38 MAPK的蛋白表达,qRT-PCR观察各组软骨细胞circRNA＿0008365、miR-1271、collagenⅡ、ADAMTS-5的表达水平,...     

膝关节骨性关节炎病变与细胞凋亡及相关基因表达关系

软骨细胞凋亡在骨性关节炎的发病中具有重要作用,其凋亡的途径有NO途径和Fas途径;主要受Bcl-2基因家族、Bax、P53、和ICE基因家族调控;软骨细胞外基质的降解,可诱导软骨细胞凋亡。     

抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态及IGF-1,p38MAPK表达的影响

目的观察抗骨增生片对兔膝骨关节炎软骨组织病理形态及胰岛素样生长因子1（IGF-1）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）表达的影响。方法将40只成年雄性大耳白兔随机分为正常组（A组）10只和造模组30只。膝关节腔内注射1.6%木瓜蛋白酶,造成兔膝骨关节炎模型。造模成功后,再将造模组随机分为模型组（B组）、抗骨增生片低剂量组（C组）、高剂量组（D组）各10只,C、D组分别灌胃0.36,0.72 g/（kg·d）的抗骨增生片,1次/d;A、B组每天灌胃等量生理盐水。4周后,取膝关节软骨组织,观察软骨组织病理形态变化,用免疫组化法检测软骨组织中IGF-1、p38MAPK的表达情况。结果 C组、D组软骨组织破坏程度较B组明显减轻（P均〈0.01）;C组、D组IGF-1的表达较B组显著升高（P均〈0.05）,p38MAPK的表达较B组显著降低（P均〈0.01）。结论抗骨增生片能抑制兔骨关节炎软骨病理损害,机制可能与其上调IGF-1、下调p38MAPK的表达,抑制过度的软骨细胞凋亡有关。     

益气养阴消癥通络中药对早期糖尿病大鼠肾组织p38 MAPK信号通路的影响

目的:探讨益气养阴消癥通络中药对早期糖尿病大鼠肾组织p38MAPK信号通路的作用。方法:将SD大鼠随机分为6组:单纯肾切组、模型组、厄贝沙坦组、中药低、中、高剂量组,按各组相应药物剂量灌胃。于第6周末检测各组大鼠24 h尿蛋白(UPro)量及肾功能水平;肾皮质p38MAPK mRNA,p-p38MAPK蛋白表达水平。结果:厄贝沙坦、中药低、中剂量组与模型组比较Upro量显著下降(P0.05);治疗组与模型组比较,肾功能明显改善(P0.05),且p38MAPK mRNA,p-p38MAPK蛋白表达水平显著下降(P0.05)。结论:益气养阴消癥通络中药可能通过抑制p38MAPK信号通路表达,发挥对糖尿病肾病大鼠的治疗作用。     

基于中医肝肾二脏的膝骨关节炎研究述评

膝骨关节炎(KOA)主因关节滑膜、软骨、细胞外基质和软骨下骨发生损害及病变,导致膝关节活动障碍,甚至畸形.中医认为,KOA属本虚标实之证,肝肾亏虚为本,血瘀筋伤为标.现代研究也表明肝肾功能与KOA有密切关系.本文基于中医肝肾二脏辨治KOA现状进行述评,为中医相关治疗提供借鉴.     

糖尿病肾病肾组织炎症信号通路p38MAPK的调节机制及中药的干预作用

在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的发展过程中,炎症相关信号通路——p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路与肾组织损伤密切相关。一方面,高血糖、血流动力学异常、氧化应激以及前炎症因子等多种因素在上游激活p38MAPK信号通路;另一方面,活化的p38MAPK信号通路进一步诱导下游炎症细胞活化,促进炎症介质表达,增加炎症因子产生,最终,导致肾组织炎症性损伤。中药对p38MAPK信号通路的干预作用是通过多途径实现的,主要包括抑制炎症因子表达、调节磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK,p-p38MAPK)表达、减少致纤维化因子表达等。     

Cinnamophilin Isolated from Cinnamomum philippinense Protects against Collagen Degradation in Human Chondrocytes

To investigate the therapeutic potential of naturally occurring cinnamophilin against cartilage degradation and its action mechanisms, its effects on matrix metalloproteinase (MMP)‐1 and ?13 induction were examined in the human SW1353 chondrocytic cell line. Human chondrocytes (SW1353) were stimulated with interleukin (IL)‐1β, and then mitogen‐activated protein kinase (MAPK) and c‐Jun activations, inhibitory κB‐α (IκB‐α) degradation, and MMP‐1, and 13 expressions were assayed by a Western blot analysis. Cinnamophilin strongly inhibited MMP‐1 and ?13 induction in IL‐1β‐treated (30 ng/mL) SW1353 cells in a concentration‐dependent manner, and it also reduced MAPK family members including extracellular signal‐regulated kinase (ERK), p38 MAPKs, and c‐Jun N‐terminal kinase. Moreover, nuclear factor (NF)‐κB signaling activation through IκB‐α degradation, IκB kinase (IKK)‐α/β, and p‐65 phosphorylation was restored by cinnamophilin upon IL‐1β stimulation. Importantly, results showed that IL‐1β‐induced activation of phosphorylated (p)‐c‐Jun in chondrocytes was significantly inhibited by cinnamophilin. These results indicate that cinnamophilin inhibited MMP‐1 and ?13 expressions in IL‐1β‐treated chondrocytes through either NF‐κB or ERK/p38 MAPK downregulation and/or suppressing p‐c‐Jun pathways. Furthermore, these findings suggest that cinnamophilin may have the potential for chondroprotection against collagen matrix breakdown in cartilage of diseased tissues such as those found in arthritic disorders. Copyright © 2012 John Wiley & Sons, Ltd.     

麝香乌龙丸对兔膝骨关节炎软骨组织形态及p38MAPK,Caspase-3表达的影响

目的: 观察兔膝骨关节炎(KOA)软骨组织形态及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3)的表达,探讨麝香乌龙丸治疗兔KOA的作用机制。 方法: 将40只成年雄性大耳白兔,随机分为正常组(A)10只,造模组30只。采用关节腔内注射1.6%木瓜蛋白酶方法建立兔KOA模型,造模成功后随机分为模型组(B)、麝香乌龙丸低、高剂量组(C,D,n=10),ig给予麝香乌龙丸0.6,1.2 g·kg^-1·d^-1,灌胃4周后处死动物切取软骨组织,观察软骨组织形态变化,免疫组化染色检测关节软骨细胞中p38MAPK,Caspase-3的表达。 结果: 麝香乌龙丸低、高剂量组均能减轻兔软骨的病理损害,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);麝香乌龙丸低、高剂量组均能降低软骨中p38MAPK及Caspase-3表达,与模型组比较具有显著差异(P<0.01)。 结论: 麝香乌龙丸能够减轻兔骨关节炎软骨病理损害;麝香乌龙丸治疗骨关节炎的机制,与其能降低p38MAPK,Caspase-3的表达,抑制软骨细胞过度凋亡有关。     

电针治疗对膝骨关节炎兔膝关节软骨细胞凋亡的影响

目的:观察电针治疗对膝骨关节炎兔膝关节软骨细胞凋亡的影响,探讨电针治疗膝骨关节炎的作用机制.方法:将30只健康新西兰大白兔随机分为正常对照组、模型对照组和电针治疗组,每组10只.采用Hulth法对模型对照组及电针治疗组实验兔左膝关节进行造模,造模后第5周开始对电针治疗组实验兔进行电针治疗,正常对照组、模型对照组同期正常饲养,不作任何治疗.治疗4周后同时处死3组实验兔,取左膝关节股骨端制成切片,观察各组实验兔软骨组织形态及软骨细胞凋亡情况.结果:①软骨组织形态.正常对照组软骨表层光滑、平整,4层结构清晰,软骨细胞分布均匀、无簇聚,潮线完整;模型对照组关节软骨厚度减小,表面毛糙,可见明显纤维化、裂隙、软骨细胞簇聚,潮线断裂;电针治疗组关节软骨厚度减小,表面不光滑,少见纤维化、裂隙、软骨细胞簇聚,潮线断裂.②软骨细胞凋亡情况.3组实验兔软骨细胞凋亡率比较,差异有统计学意义(F=126.753,P=0.000);进一步两两比较,模型对照组软骨细胞凋亡率大于正常对照组和电针治疗组(LSD -t=3.769,P=0.000;LSD-t=7.000,P =0.000),电针治疗组软骨细胞凋亡率大于正常对照组(LSD -t=10.769,P =0.000).结论:电针治疗可以通过抑制软骨细胞凋亡,减轻膝骨关节炎软骨的损伤,这可能是电针治疗膝骨关节炎的机制之一.     

电针“内关”对心肌肥厚模型大鼠p38丝裂原激活蛋白激酶信号通路的影响

目的:探讨电针“内关”穴治疗心肌肥厚的作用机制.方法:SD大鼠40只用随机数字表法分为正常组、模型组、模型+p38抑制剂组、模型十电针组,每组10只.采用皮下注射盐酸异丙肾上腺素3 mg/(kg·d)建立心肌肥厚大鼠模型,模型+p38抑制剂组在造模基础上每日皮下注射0.3 mg/kg p38丝裂原激活蛋白激酶(p38 MAPK)特异性抑制剂SB 203580;模型十电针组电针“内关”穴,采用连续波,频率2 Hz,强度1 mA,通电20 min,1次/d,共14 d.其他两组不予治疗干预.放射免疫法技术检测心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)含量,免疫印迹法检测p38MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)含量.观察电针“内关”穴对TNF-α和IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK的影响.结果:与正常组大鼠比较,模型组大鼠TNF-α和IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK均显著升高(均P＜0.01);经抑制剂和电针处理后,模型+p38抑制剂组和模型十电针组大鼠TNF-α、IL-1β、p38 MAPK、p-p38 MAPK均明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(均P＜0.05),与正常组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01);模型+p38抑制剂组和模型十电针组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:电针“内关”可以明显抑制心肌肥厚p38 MAPK的磷酸化,这种保护作用可能通过抑制TNF-α、IL-1β等炎性因子的表达实现对p38 MAPK信号通路调节.