COPD患者外周血SIRT1及NF-KB、MMP-9的表达水平分析

探讨COPD患者外周血沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)及核因子κB (NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平及作用。比较患者SIRT1、NF-κB、MMP-9等水平情况。结果显示患者血清SIRT1水平随病情加重而降低,患者血清NF-κB、MMP-9水平随病情加重而增高。COPD稳定期组和急性加重组患者SIRT1mRNA和蛋白相对表达量明显低于对照组; NF-κB、MMP-9 mRNA和蛋白相对表达量明显高于对照组。实验证明COPD患者SIRT1表达水平降低与肺功能下降相关,可作为COPD潜在标志物; SIRT1可能通过对NF-κB、MMP-9的调节作用来调控COPD的发生与发展。     

沉默信息调节因子2相关酶1在慢性阻塞性肺疾病患者血清中的表达水平及临床意义

目的探讨沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)患者血清中的表达水平及临床意义。方法选取本院慢阻肺急性加重期患者40例、慢阻肺稳定期患者30例作为研究组,另选体检健康者20例作为对照组。对所有受试者进行肺功能检查。应用酶联免疫吸附法和蛋白免疫印迹检测血清SIRT1、核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平。结果与对照组相比,慢阻肺稳定期组和慢阻肺急性加重组患者第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%pred)及第1秒用力呼吸容积占用力肺活量百分比(FEV1/FVC)均显著降低(均P0.05)。与慢阻肺稳定期组相比,慢阻肺急性加重组患者FEV1%pred及FEV1/FVC均显著降低(P0.05)。与对照组相比,慢阻肺稳定期组和慢阻肺急性加重组患者血清SIRT1水平均显著降低,而NF-κB和MMP-9水平均显著增加(P0.05)。与慢阻肺稳定期组患者相比,慢阻肺急性加重组患者血清SIRT1水平显著下降,而NF-κB和MMP-9水平均显著增加(均P0.05)。经Pearson直线相关法分析,血清SIRT1水平与慢阻肺患者FEV1%pred(P0.05)、FEV1/FVC(P0.05)等肺功能指标呈显著正相关。血清SIRT1水平与NF-κB(P0.05)、MMP-9(P0.05)蛋白表达水平呈显著负相关。结论慢阻肺患者血清SIRT1水平降低与肺功能下降相关,有可能作为慢阻肺的潜在生物标志物。     

SIRT1信号通路在新生儿坏死性小肠结肠炎肠组织中的表达研究

目的:分析沉默信息转录调控因子1(SIRT1)信号通路在新生儿坏死性小肠结肠炎(NEC)肠组织中的表达,初步探讨SIRT1在NEC发生过程中的作用。方法:选取本院35例接受一期造瘘术治疗的NEC患儿的回肠组织为NEC组,以上35例NEC患儿二期封瘘术时回肠组织标本为对照组。采用qRT-PCR法检测SIRT1、转录因子-核因子(NF-κB)及SUMO特异性蛋白酶1(SENP1)mRNA表达水平;免疫组化法与蛋白免疫印迹法(WB)检测SIRT1、NF-κB及SENP1蛋白表达。结果:NEC组肠组织中SIRT1 mRNA、蛋白阳性表达率、平均光密度值及蛋白相对表达量均显著低于对照组(P<0.05),而NF-κB、SENP1 mRNA、蛋白阳性表达率、平均光密度值及蛋白相对表达量均显著升高(P<0.05)。结论:SIRT1在NEC患儿肠组织中呈低表达,其可能原因为SIRT1信号通路被抑制进而促使NEC发生。     

辛伐他汀对慢性心力衰竭兔心肌沉默信息调节因子2相关酶2/核因子-κB信号通路的影响

目的研究辛伐他汀对慢性心力衰竭兔心肌沉默信息调节因子2相关酶2(SIRT2)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响。方法 24只雄性新西兰大白兔随机分为正常组、心力衰竭组和辛伐他汀组,每组8只。心力衰竭组和辛伐他汀组兔每日经耳缘静脉注射1 g·L-1阿霉素生理盐水注射液建立慢性心力衰竭模型,正常组兔经耳缘静脉注射相同剂量的生理盐水注射液;同时,辛伐他汀组兔每日给予1.5 mg·kg-1辛伐他汀灌胃,正常组和心力衰竭组兔给予相同剂量生理盐水灌胃,均连续12周。造模结束时各组兔做心脏超声观察心功能情况,并处死取左心室做石蜡包埋切片,苏木精-伊红染色观察心肌组织变化,免疫组织化学法检测各组兔心肌细胞中SIRT2、NF-κB蛋白表达,反转录-聚合酶链式反应检测心肌组织中SIRT2 mRNA、NF-κB mRNA的变化。结果与正常组比较,心力衰竭组和辛伐他汀组兔的左心室射血分数(LVEF)降低(P<0.01),左心室舒张末期内径(LVDd)增高(P<0.01);辛伐他汀组兔的LVEF高于心力衰竭组(P<0.01),LVDd低于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率降低(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率升高(P<0.01),且辛伐他汀组兔心肌细胞SIRT2蛋白阳性表达率高于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率升高(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率降低(P<0.01),且辛伐他汀组兔心肌细胞NF-κB蛋白阳性表达率低于心力衰竭组(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量降低(P<0.05),辛伐他汀组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量升高(P<0.01)。与心力衰竭组比较,辛伐他汀组兔心肌组织中SIRT2 mRNA相对表达量升高(P<0.01)。与正常组比较,心力衰竭组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量升高(P<0.01),辛伐他汀组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量降低(P<0.01);与心力衰竭组比较,辛伐他汀组兔心肌组织中NF-κB mRNA相对表达量降低(P<0.01)。结论辛伐他汀可能通过上调SIRT2的表达而抑制NF-κB的表达,从而改善兔的心功能。     

miR-9-5p通过SIRT1/NF-κB通路促进胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 探讨miR-9-5p通过调控SIRT1及NF-κB表达对胰腺癌细胞(PANC-1)凋亡相关基因Caspase-3表达的影响。方法 使用miR-9-5p mimic慢病毒转染人胰腺癌PANC-1细胞建立稳转株(mimic组),空载体转染作为阴性对照组(NC组),以未处理的PANC-1细胞作为空白对照组(空白组)。采用qRT-PCR检测PANC-1细胞中miR-9-5p、SIRT1及Caspase-3 mRNA的表达水平；Western Blot检测SIRT1、NF-κB通路相关蛋白及Caspase-3蛋白表达量；ELISA检测细胞裂解液中SIRT1及Caspase-3蛋白表达；双荧光素酶报告基因实验明确miR-9-5p和SIRT1的靶向关系；Pearson相关分析确定miR-9-5p、SIRT1及Caspase-3 mRNA表达的相互关系。结果 mimic组miR-9-5p mRNA表达较对照组明显升高，结果有统计学意义，提示转染成功。与空白组及NC组相比，mimic组SIRT1 mRNA及蛋白表达水平下调(P<0.01),p-NF-κB p65与NF-κB p65上调(P&...     

不同吸烟量对大鼠肺组织核因子κB和E-选择素表达的影响

目的 研究不同吸烟量对大鼠肺组织中核因子κB(NF-κB)和E-选择素表达水平的影响,探讨吸烟与COPD肺组织炎症的关系.方法 雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照组、小量吸烟组和大量吸烟组,每组8只.吸烟时间为20周.采用免疫组化和原位杂交半定量检测各组支气管上皮细胞NF-κB和E-选择素的表达.结果 小量吸烟组、大量吸烟组NF-κB与E-选择素mRNA及蛋白表达均较对照组显著增高,小量吸烟组较大量吸烟组表达降低.E-选择素mRNA和蛋白的表达水平与NF-κB mRNA和蛋白的表达水平呈正相关.结论 吸烟可引起大鼠气道上皮细胞NF-κB和血管内皮细胞E-选择素mRNA及其蛋白的表达水平升高,且随着吸烟量的增加其表达水平增高.     

PF4通过NF-κB上调巨噬细胞MMP-9表达

目的观察血小板因子4(PF4)是否通过核因子κB(NF-κB)上调THP-1单核源性巨噬细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达。方法佛玻酯诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞。巨噬细胞分别在NF-κB抑制剂(PDTC)缺乏或存在情况下与溶媒或PF4(100μg/L)孵育一定时间,RT-PCR检测MMP-9 mRNA水平;同时,巨噬细胞与PF4(25~200μg/L)单独或结合Toll样受体4(TLR4)阻断剂(抗体HTA125,anti-TLR4)孵育,ELISA法检测NF-κB含量。结果 PF4较对照组上调巨噬细胞MMP-9 mRNA水平。而NF-κB抑制剂抑制PF4诱导的巨噬细胞MMP-9表达上调。PF4呈浓度依赖性增加巨噬细胞的NF-κB含量,最大效应浓度为100μg/L。TLR4阻断剂逆转PF4诱导的巨噬细胞NF-κB含量增加。结论 PF4可能通过NF-κB上调巨噬细胞MMP-9的表达。TLR4可能是PF4-NF-κB通路中NF-κB的上游信号分子。     

外周血MMP-9及NF-κB在OSAHS合并高血压中的表达及其相关性研究

目的 探讨血浆基质金属蛋白酶9(MMP-9)和核转录因子kappa B(NF-κB)在阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)合并高血压发病中的作用.方法 选取2014年1月至6月在该院呼吸内科及神经内科行多导睡眠监测的受试者,根据睡眠监测检查结果及是否合并高血压进行分组,鼾症组23 例,OSAHS组 32例,OSAHS合并高血压组31例;并根据高血压级别对OSAHS合并高血压组进行亚组分型,其中OSAHS合并高血压1级组9例,2级组9例,3级组13例.分别采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR的方法检测血浆MMP-9水平及单个核细胞中 MMP-9 和 NF-κB基因的表达水平.结果 OSAHS合并高血压组血浆MMP-9水平、单个核细胞MMP-9 mRNA和NF-κB mRNA的表达水平均明显高于鼾症组和OSAHS组,差异有统计学意义(P<0.05).OSAHS合并高血压3级组血浆MMP-9水平、单个核细胞MMP-9 mRNA和NF-κB mRNA的表达水平均明显高于OSAHS合并高血压1级组及2级组,比较差异有统计学意义(P<0.05).血浆MMP-9水平、 MMP-9 mRNA及NF-κB mRNA的表达与呼吸暂停低通气指数(AHI)、氧减指数(ODI)呈正相关(P<0.05),与最低血氧饱和度(LSaO2)呈负相关(P<0.05).血浆MMP-9水平与单个核细胞MMP-9 mRNA的表达呈正相关(P<0.05).单个核细胞MMP-9 mRNA的表达与NF-κB mRNA的表达呈正相关(P<0.05).结论 血浆MMP-9水平、 MMP-9 mRNA及NF-κB mRNA的表达水平在OSAHS合并高血压患者中明显增高并与疾病的严重程度相关,MMP-9在OSAHS合并高血压发病中起着重要作用,可能受NF-κB通路的调节.     

二甲双胍对饱和脂肪酸诱导的大鼠H9C2型心肌细胞损伤的保护作用研究

目的 探讨二甲双胍(Met)对饱和脂肪酸所诱导的大鼠H9C2型心肌细胞损伤作用的保护机制.方法 在对照、棕榈酸(PA)及3种不同浓度梯度Met与PA联合组培养液中培养大鼠H9C2型心肌细胞株24 h.采用蛋白质印迹法(Western blot)测定各组细胞核因子κB(NF-κB)p65、细胞间黏附因子(ICAM1)、磷酸化核因子κB抑制蛋白(p-IκBα)及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(p-AMPK)的蛋白表达,实时荧光定量PCR测定各组细胞NF-κB、单核细胞趋化因子(CCL2)和ICAM1的mRNA表达.结果 与对照组相比,PA组的细胞中NF-κB p65、ICAM1、p-IκBα蛋白表达量增加(P<0.05);与PA组相比,Met+PA联合组细胞NF-κB p65、ICAM1、p-IκBα的蛋白表达量随Met浓度梯度增加表现为不同程度递减(P<0.05),p-AMPK蛋白表达量随Met浓度增加而显著增加(P<0.05).与对照组相比,PA组CCL2、ICAM1的mRNA表达量增加(P<0.05);与PA组相比,Met+PA联合组细胞CCL2和ICAM1的mRNA表达量下降(P<0.05).结论 Met可以减轻由饱和脂肪酸诱导细胞黏附因子和趋化因子表达增加而引起的大鼠H9C2型心肌细胞损伤.     

核因子-κB及单核细胞化学趋化蛋白-1在慢性阻塞性肺疾病大鼠中的表达

目的：探讨核因子-κB（NF-κB）及其调控的单核细胞化学趋化蛋白-1（MCP-1）在慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型中的表达.方法：36只Wistar大鼠随机分为空白对照组、COPD组、布地奈德治疗组和茶碱治疗组,每组9只;用ELISA法检测各组大鼠外周血单个核细胞（PBMC） NF-κB和MCP-1的表达水平,用免疫组织化学染色和原位杂交技术检测各组大鼠细支气管上皮细胞NF-κB和MCP-1的表达水平.结果：（1）COPD组大鼠PBMC中NF-κB和MCP-1水平以及细支气管上皮细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比、MCP-1 mRNA和蛋白表达明显高于正常对照组;（2）布地奈德治疗组和茶碱治疗组大鼠PBMC中NF-κB、MCP-1水平以及细支气管上皮细胞NF-κB核染色阳性细胞百分比、MCP-1 mRNA表达和蛋白表达明显低于COPD组.结论：NF-κB基因及其调控蛋白MCP-1参与了COPD的发病过程,用激素和茶碱治疗后可延缓COPD的发展.     

受体TLR4在血管平滑肌细胞上的表达意义

目的研究受体TLR4在血管平滑肌细胞上的表达意义。方法培养入主动脉平滑肌细胞(HASMCs),传到7-9代,以10 ng／mL脂多糖(LPS)作用于HASMCs24h。应用琼脂糖电泳鉴定基质金属蛋白酶(MMP)-2、9的逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)产物:Western-印记法测定LPS作用24h后,MMP-2、9蛋白表达量的变化:明胶酶谱法测定MMP-2、9的活性; EMSA法测定动脉平滑肌细胞核因子-κB(NF-κB)的结合活性、抗受体TLR4抗体抑制LPS激活受体(TLR4)及吡咯烷二硫代氨基甲酸盐抑制NF-κB的结合活性。结果LPS通过其受体TLR4调节MMP-9 mRNA的表达,上调的MMP-9 mRNA同时能够翻译表达更多量的MMP-9蛋白;而对MMP-2蛋白的表达无影响。LPS通过其受体TLR4使血管平滑肌细胞内MMP-9表达增加的同时,使MMP-9酶解活性相应增加;而LPS对MMP-2的酶解活性也没有产生影响。LPS能够通过其受体TLR4影响血管平滑肌细胞内NF-κB的结合活性。受体TLR4依赖NF-κB激活途径调节MMP-9的表达。结论LPS通过TLR4-NF-κB途径调节血管平滑肌细胞MMP-9 mRNA和蛋白表达及其活性;而激活受体TLR4对MMP-2 mRNA和蛋白表达及其活性无影响。     

流感病毒介导的巨噬细胞SIRT1/NF-κB调控机制的研究

目的研究巨噬细胞SIRT1-NF-κB信号转导途径在流感病毒感染中的调节机制,为干预流感病毒感染提供新思路。方法以小鼠巨噬细胞Ana.1为研究对象,分别用流感病毒蛋白HA、NP以及NF-κB的抑制剂(PDGF-BB)和激活剂(SC7273)、SIRT1的抑制剂(EX527)和激活剂(SRT1720)处理Ana.1细胞,Western blot观察TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18、SIRT1、NF-κB蛋白相对表达水平,免疫荧光检测SIRT1、NF-κB蛋白在细胞内空间的分布。结果 HA、NP蛋白可诱导Ana.1细胞中SIRT1高表达以及NF-κB的低表达,同时SIRT1与NF-κB在细胞核内都有明显聚集;进一步研究发现,NF-κB被激活时SIRT1表达降低,而NF-κB被抑制时SIRT1表达升高;此外IL-6、IL-1β、IL-18、TNF-α被发现在SIRT1被激活及NF-κB被抑制的情况下表达下调,而在相反情况及流感病毒HA、NP刺激后表达升高。结论流感病毒可能通过HA与NP蛋白激活巨噬细胞SIRT1并进一步抑制NF-κB的表达,形成NF-κB负反馈的现象进而影响机体的炎症反应或免疫应答。     

NF-κB的激活及基质金属酶-9的表达在腹主动脉瘤形成中的意义

目的探讨核转录因子NF-κB(nuclear factor-kappaB)的激活及基质金属酶9(MMP-9)的表达在腹主动脉瘤形成中的作用。方法成年雄性WISTER大鼠24只,随机分为腹主动脉瘤组、正常对照组(每组各12只)。用弹力酶灌注法建立大鼠腹主动脉瘤模型,免疫组织化学分析NF-κB,MMP-9的蛋白表达,RT-PCR方法检测其mRNA的表达。结果腹主动脉瘤组可见明显炎症细胞浸润,NF-κB被激活,同时伴有MMP-9表达增高。正常对照组未见明显炎症细胞浸润,仅有少量NF-κB的表达。结论NF-κB的激活、MMP-9表达增加在腹主动脉瘤病变的发生与发展过程中起着重要作用。     

脂多糖对大鼠膀胱上皮细胞中Toll样受体4与核因子-κB表达的影响

目的观察体外培养的大鼠膀胱上皮细胞中Toll样受体4(TLR4)与核因子-κB(NF-κB)在脂多糖(LPS)刺激下的表达变化。方法分离幼龄Sprague-Dawley大鼠膀胱黏膜,培养上皮细胞。将分离纯化的上皮细胞分为对照组和LPS刺激1、2、3组;对照组不给予任何干预措施,LPS刺激1、2、3组给予LPS(0.01 g·L-1)分别作用1、5、24 h。采用实时定量荧光酶联免疫反应及Western blot技术检测TLR4与NF-κB p65表达量的变化。结果对照组和LPS刺激1、2、3组的TLR4 mRNA相对表达量分别为1.00±0.10、1.32±0.27、1.81±0.10、1.61±0.35;TLR4蛋白相对表达量分别为1.00±0.18、1.36±0.12、1.95±0.08、1.79±0.21。与对照组比较,LPS刺激1、2、3组TLR4 mRNA和蛋白的相对表达量均增多(P<0.05);LPS刺激2、3组TLR4 mRNA和蛋白相对表达量较LPS刺激1组增多(P<0.05);LPS刺激2、3组TLR4 mRNA和蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。对照组和LPS刺激1、2、3组NF-κB p65 mRNA相对表达量分别为1.00±0.08、1.60±0.05、1.51±0.06、1.39±0.04;NF-κB p65蛋白相对表达量分别为1.00±0.08、1.87±0.11、1.69±0.10、1.94±0.18。与对照组比较,LPS刺激1、2、3组NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达量均增多(P<0.05);LPS刺激1、2、3组间NF-κB p65 mRNA和蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 LPS可上调膀胱上皮细胞中TLR4与NF-κB p65的表达。     

基于HMGB1/NF-κB通路探讨温经通络汤对IL-1β诱导小鼠原代软骨细胞炎症的影响

目的 观察温经通络汤对IL-1β诱导关节软骨细胞炎症的影响并探讨其作用机制。方法 从小鼠膝关节软骨中提取原代软骨细胞,并用甲苯胺蓝染色法鉴定;IL-1β诱导软骨细胞炎症模型,采用慢病毒RNAi-HMGB1转染软骨细胞,干扰HMGB1的表达;后用不同浓度的温经通络汤含药血清干预细胞;Western blot分析各组细胞中HMGB1、NF-κB信号通路蛋白的表达水平;qPCR检测HMGB1、NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平;ELISA检测细胞上清中炎症因子IL-6、PGE-2和TNF-α的表达水平。结果 与正常培养的细胞相比,IL-1β诱导软骨细胞炎症模型中HMGB1的表达水平显著上升(P<0.01),且p-IκBα/IκBα和p-P65/P65蛋白的相对表达量与NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平均有所提高(P<0.01);与模型组比较,RNAi-HMGB1慢病毒转染可显著下调HMGB1的表达水平(P<0.01),并抑制p-IκBα/IκBα和p-P65/P65蛋白的相对表达量(P<0.01)与NF-κB1、NF-κB2 mRNA的表达水平...     

NF-κB的激活及MMP-9的表达在腹主动脉瘤形成中的意义

目的 探讨核转录因子NF-κB (nuclear factor-kappa B) 的激活及基质金属酶9（MMP-9）的表达在腹主动脉瘤形成中的作用。方法 成年雄性WISTER大鼠24只，随机分为腹主动脉瘤组、正常对照组(每组各12只)。用弹力酶灌注法建立大鼠腹主动脉瘤模型，免疫组织化学分析NF-κB、MMP-9的蛋白表达，RT-PCR方法检测其mRNA的表达。结果 腹主动脉瘤组可见明显炎症细胞浸润， NF-κB被激活，同时伴有MMP-9表达增高。正常对照组未见明显炎症细胞浸润，仅有少量NF-κB的表达。结论 NF-κB的激活、MMP-9表达增加在腹主动脉瘤病变的发生与发展过程中起着重要作用。     

OSAHS患者缺氧诱导因子1α与血清肺表面活性蛋白水平的变化及意义

目的 探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)患者缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与血清肺泡表面活性蛋白-A(SP-A)、肺泡表面活性蛋白-D(SP-D)水平的影响及意义.方法 选择2016年8月至2017年2月贵州省人民医院门诊及住院行睡眠监测患者83例,分为对照组20例、轻度OSAHS组20例、中度OSAHS组23例、重度OSAHS组20例.检测HIF-1α与核因子(NF)-κB mRNA水平及蛋白表达水平,血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、SP-A和SP-D水平.结果 重度OSAHS组HIF-1α mRNA、NF-κB mRNA水平及蛋白表达水平,TNF-α、IL-6水平明显高于对照组(P＜0.05);中、重度OSAHS组SP-A、SP-D水平明显高于对照组(P＜0.05);血清SP-A水平与HIF-1α mRNA相对表达水平呈正相关(P＜0.05).结论 缺氧可激活HIF-1α信号通路,释放NF-κB、TNF-α、IL-6等炎症因子,并引起SP-A、SP-D水平升高.     

急性肺损伤大鼠肺组织基质金属蛋白酶2及其抑制因子蛋白和mRNA的表达

目的探讨内毒素致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子(TIMP-2)蛋白和mRNA表达的变化。方法 20只雄性Wistar大鼠随机分为2组:对照组、LPS模型组,每组再分为4 h和8 h两个亚组。尾静脉注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg)建立大鼠急性肺损伤模型。检测血白细胞计数、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量,采用免疫组化ABC法和实时荧光定量PCR分别测定肺组织NF-κB、MMP-2、TIMP-2蛋白及其mRNA的表达,并观察肺组织病理变化。结果与对照组相比,模型组4 h和8 h时大鼠肺组织中的NF-κB、MMP-2蛋白染色阳性面积率及其mRNA表达均显著增高(P<0.01)、TIMP-2蛋白染色阳性面积率及其mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。病理学观察显示,模型组大鼠肺组织出现出血及坏死。结论内毒素致急性肺损伤的发病机制可能与NF-κB、MMP-2蛋白及其mRNA表达升高、TIMP-2蛋白及其mRNA表达降低有关。     

外周血NLRP3 mRNA、NF-κB、PCT水平与COPD患者肺功能及肺动脉高压的关系

目的 探讨NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3信使RNA(NLRP3 mRNA)、核因子激活的B细胞的κ-轻链增强(NF-κB)、降钙素原(PCT)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者肺功能及肺动脉高压的关系。方法 选取COPD稳定期患者47例、COPD急性加重期(AECOPD)未合并肺动脉高压患者47例及AECOPD合并肺动脉高压患者47例,以同期体检健康人群为对照组(n=47),抽取4组受检者空腹静脉血,采用酶联免疫吸附法检测血液NF-κB和PCT表达,采用聚合酶链式反应(PCR)法检测外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA的表达;采用肺功能仪检测对照组、COPD稳定期组及AECOPD未合并肺动脉高压组受检者的肺功能指标[第一秒用力呼气容积(FEV₁ )、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC、FEV₁占预计值的百分比(FEV₁%pred)];采用超声心动仪测量AECOPD未合并肺动脉高压组和AECOPD合并肺动脉高压组受检者的肺动脉高压、右心房径及右心室径。结果 受检者外周血PCT、NLRP3 mRNA、NF-κB水平表现...     

表皮生长因子促进胆囊癌细胞株GBC-SD侵袭转移的实验研究

目的:研究表皮生长因子(EGF)对胆囊癌细胞GBC-SD生物动力学,及对uPA,MMP-2,MMP-9,COX-2和NF-κB的mRNA及蛋白表达的影响。方法:通过侵袭、黏附和增殖实验观察在EGF作用下胆囊癌细胞株GBC-SD生物动力学变化;使用RT-PCR和Western Blot检测胆囊癌细胞株GBC-SD的uPA,MMP-2,MMP-9,COX-2和NF-κB的mRNA和蛋白表达,以及在NF-κB抑制物PDTC作用下上述指标的变化。结果:EGF能够显著提高胆囊癌细胞株GBC-SD的侵袭力,但对增殖及黏附力无显著影响;除MMP-2外,随着EGF浓度的增加,uPA,MMP-9,COX-2和NF-κB的mRNA和蛋白表达显著增强;PDTC可以抑制EGF诱导的上述基因mRNA和蛋白水平变化,但MMP-2未见显著变化。结论:EGF可以通过NF-κB途径上调uPA,MMP-9,COX-2和NF-κB表达,促进胆囊癌细胞的侵袭和转移。