ELISA法检测血清HIV抗原抗体的测量不确定度评定

目的:本文依据JJF1059-1999《测量不确定度评定与表示》,希望能探索一种较为合理的ELISA法检测结果不确定度的评定模式。方法:用ELISA法检测含弱阳性HIV1型抗体和弱阳性HIV抗原的混合血清,分析不确定来源并评定各分量的标准不确定度、合成标准不确定度和扩展不确定度。结果:混合血清的样品吸光度值与cutoff值的比值为4.335,U=1.2(k=2);Urel=0.27。结论:ELISA法检测血清HIV抗原抗体的结果判定应考虑样品吸光度值与cutoff值的比值(B)测量不确定度对结果的影响,可有效降低假阴性出现的风险。分析不确定度各分量对测量结果的相对贡献,可以看出影响检测质量的主要因素,有利于实验室的质量控制和提高检测质量。     

临床生化检验中血脂测量不确定度的评定

目的通过对血脂两项甘油三酯（TG）和胆固醇（CHOL）测量不确定度（measurement uncertainty,MU）的评定,熟悉临床检验项目测量不确定度的来源及评定过程。方法遵照《测量不确定度表达指南》（GUM）,根据血脂两项甘油三酯和胆固醇的检测原理,评估检测中测量不确定度的来源,确定各不确定度分量的大小,最终计算合成不确定度和扩展不确定度。结果甘油三酯和胆固醇的合成不确定度分别为6．00％、5．70％;取95％的置信区间K=2时,扩展不确定度对应为12．00％、11．40％。结论综观血脂评定的过程可以得出,测量不确定度能够更全面地反映检测的质量,测量不确定度有别于误差,其量值明显大于误差理论中的常规条件下的变异（RCV）和最适条件下的变异（OCV）值。熟悉检验项目测量的不确定度并积极开展其评定,最大限度地降低其量值的大小,有利于检验工作的持续改进。     

测量不确定度

本文介绍了测量不确定度的基本概念,及实验中采用的不确定度的表示方法,并以具体实例进行了不确定度的估算。     

旋光标准石英管标准器组测量不确定度评定

本文介绍了旋光标准石英管标准器组各分量不确定度的构成及数学模型,并结合实例对该测量标准的总不确定度以及重复性和稳定性进行了分析评定.     

奶粉中蛋白质测量不确定度评定

奶粉与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解的氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再以盐酸标准溶液滴定，根据盐酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质的含量。[第一段]     

实验室内分泌项目测量不确定度的评定研究

目的 采用“自上而下”的方法评定内分泌试验检验项目的测量不确定度。方法 采用CNAS-CL01-G003: 2021《医学实验室—测量不确定度的评定与表达》技术报告中的“自上而下”的方法,收集实验室的室内质控数据和2019—2021年北京市临床检验中心的室间质评结果,评定游离三碘甲状腺原氨酸（free triiodothyronine,FT3）、总三碘甲状腺原氨酸（total triiodothyronine,TT3）和游离甲状腺素（free thyroxine,FT4）等11项内分泌试验检测指标的测量不确定度。结果 11项内分泌试验检测项目在低浓度水平时的相对扩展不确定度分别为FT3：12.658%、TT3：13.372%、FT4：10.468%、总甲状腺素（total thyroxine,TT4）：32.382%、促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone,TSH）：8.594%、雌二醇（estradiol,E2）：18.656%、卵泡刺激素（follicle-stimulating hormone,FSH）：14.650%、促黄体生成素（luteinizing hormone,LH）：29.384%、孕酮（progesterone,PRO）：28.806%、催乳素（prolactin,PRL）：13.810%、睾酮（testosterone,TESTO）：31.610%;在正常浓度水平时的相对扩展不确定度分别为FT3：12.424%、TT3：12.462%、FT4：8.606%、TT4：14.130%、TSH：12.536%、E2：19.586%、FSH：14.382%、LH：23.400%、PRO：38.346%、PRL：16.014%、TESTO：39.352%;在高浓度水平时的相对扩展不确定度分别为FT3：13.882%、TT3：14.096%、FT4：11.040%、TT4：8.614%、TSH：7.782%、E2：14.366%、FSH：13.436%、LH：14.804%、PRO：11.574%、PRL：17.742%、TESTO：39.322%。TT4、LH在低浓度水平附近时、PRO在低浓度和正常浓度水平附近时、TESTO在3种浓度水平附近时的相对扩展测量不确定度高于目标不确定度（25%）,其余项目均小于目标不确定度。结论 利用实验室的质控数据,可评定美国雅培i2000SR全自动化学发光免疫分析仪对FT3、TT3、FT4等11个内分泌检测项目的测量不确定度,具有一定的临床应用价值。     

不确定度评定在中药领域中的应用

综述了近年来不确定度评定技术在中药领域中的应用研究情况,讨论了不确定度评定技术在中药领域中应用所存在的问题,并对其应用前景进行了展望。     

水质检测中碱度测量不确定度评定在实验工作中的应用实例

本文通过对某一水样进行碱度测量,分析了影响碱度测量结果不确定度的因素,探索了水样碱度测量结果不确定度的计算方法.     

空气中二氧化硫浓度测定的不确定度评定

目的对空气中二氧化硫浓度测定进行不确定度评定。方法通过分析测定空气中二氧化硫浓度方法,找出引起测量不确定度的来源并对其进行量化,进行不确定度的评定。结果用本方法测定的二氧化硫浓度相对合成标准不确定度为0.108,如果测定样品的浓度为0.410 mg/m3,则标准不确定度为0.044 mg/m3。结论测定空气中二氧化硫浓度的主要不确定度来自于采样体积的测定、标准物质的不确定度及实验总体误差。     

GUF法和蒙特卡洛法在TBil参考测量程序测量结果不确定度评定中的应用*

目的：用测量不确定度表示指南(gudie to the expressin of uncertainty in measurement, GUM)不确定度框架法(GUM uncertainty framework, GUF)与蒙特卡洛法(Monte Carlo method, MCM)评定本实验室条件下根据国际检验医学溯源联合委员会推荐的Doumas血清总胆红素(total bilirubin, TBil)浓度测量结果的不确定度,比较两种评定结果并寻找和探讨适用的不确定度模式。方法：应用Doumas参考测量程序测定国际临床化学和检验医学联合会2014年参考实验室外部质量评价计划(external quality assessment scheme for reference laboratories, RELA)样本A和B,分析测定过程中各中不确定度分量来源,建立实验室TBil参考测量程序的测量数学模型。用GUF法与MCM评定测量结果的不确定度,并以自适应(adaptive MCM)对GUF法进行验证。结果：本实验室条件下TBil浓度测定GUF法评定结果：RELA样本A为(39.37±1.20) mg/L(k=1.96),95%置信区间为[38.16 mg/L, 40.57 mg/L],样本B为(18.70±0.59) mg/L(k=1.96),95%置信区间为[18.11 mg/L, 19.29 mg/L]。MCM评定结果：RELA样本A为(39.37±1.18)mg/L(k=1.96),95%置信区间为[38.19 mg/L, 40.55 mg/L],样本B为(18.70±0.58) mg/L(k=1.96),95%置信区间为[18.12 mg/L, 19.29 mg/L]。用自适应MCM验证GUF法包含区间,两组绝对偏差dlow和dhigh值均大于数值容差0.05,GUF法的结果未通过MCM验证。结论：MCM是一种更为准确的不确定度评定方法, GUF法较为简易方便。MCM 对GUF法的结果验证后,发现GUF 法虽然简单方便,但与 MCM 存在一定差异。     

3种检测系统测定糖化血红蛋白测量不确定度的评估

目的:对3种不同检测系统测定糖化血红蛋白(HbA1c)的测量不确定度进行评估,探讨3种检测系统测定HbA1c结果的可比性及各自检测性能的差异.方法:分别以离子交换高效液相色谱(HPLC)法为检测原理的Bio-Rad D-10 HbA1c分析仪、Affinion AS100与Roche Modular全自动生化分析仪为实验检测系统,应用正常和异常水平的HbA1c质控品进行批内、批间精密度测定,选用有证定值HbA1c参考物评价不同检测系统的方法偏倚,综合以上主要变量评估3种检测系统测定HbA1c的测量不确定度.结果:Bio-Rad D-10 HbA1c分析仪、Affinion AS100分析仪和Roche Modular生化分析仪测定HbA1c结果在正常水平浓度测量不确定度为4.73％～6.15％,在异常水平浓度测量不确定度为3.14％ ～ 5.59％.结论:3种检测系统测定HbA1c精密度高,准确性好,测量不确定度之间无明显差异,能满足临床需求.     

临床生化检验测量不确定度的初步研究

目的 初步探索测量不确定度在临床生化检验中的应用. 方法遵循《测量不确定度表示指南》(GUM),采用A、B类评定方法,评定实验室几个常规生化项目(AST、LDH、TP、P)的测量不确定度,并与实验室常规评定不确定度的结果(2CV)进行比较.结果 几个常规生化项目的不确定度不尽相同(表2);与常规评定不确定度的结果(2CV)比较,除P外,其余3个项目的不确定度均小于2CV.结论 本研究采用A、B类评定方法,考虑仪器测定本身存在的不确定度以及临床检测过程的不确定度2个分量,作为临床检验工作的不确定度研究的初步探索,为进一步的深入研究提供一点思路和线索.     

定量检测ProMBP双抗体夹心ELISA方法的建立

目的:建立定量检测ProMBP的双抗体夹心ELISA方法.方法:采用Protein A亲和层析法纯化自制的抗ProMBP单克隆抗体(mAb),并行SDS-PAGE和Western blot对纯化抗体特性进行鉴定;利用简易过碘酸钠法对抗ProMBP mAb进行标记辣根过氧化物(HRP)后行抗体配对实验;通过方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度;以纯化的妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)/ProMBP抗原为标准品建立标准曲线;以重复性、灵敏性和回收性实验评价ELISA方法,初步对人血清中的ProMBP水平进行检测.结果:最佳配对组合为抗ProMBP mAb 4C6E5B9和HRP标记的抗ProMBP mAb 9G4A6G10,最适工作浓度分别为2.5 μg/ml和1:3 000,该方法的批内、批间变异系数分别为4.6%～6.2%和4.6%～10.5%,灵敏度达2.0 ng/ml,回收率为92%～113%.正常非妊娠血清、9～11周妊娠血清、15～17周妊娠血清ProMBP水平分别为(26.37±2.90)ng/ml、(357.71±33.60)ng/ml和(1088.77±58.13)ng/ml.结论:建立了一种可用于检测ProMBP的双抗体夹心ELISA方法.     

HPLC标准曲线法测定氟康唑杂质校正因子的测量不确定度评定

通过对HPLC标准曲线法测定氟康唑杂质校正因子的实验过程进行不确定度评定,探索影响杂质校正因子测定准确性的主要共性因素,为提高测定结果的准确性提供研究思路。首先分别建立了氟康唑及其杂质A、B、C、D、F、I相应的拟合直线,计算各杂质及其对应主成分的拟合直线斜率之比作为该杂质的校正因子。接着以GUM法为基础,根据已经建立的校正因子测定过程的不确定度评定方案,分别计算得到标准曲线法测定各杂质校正因子的不确定度。氟康唑杂质A、B、C、D、F、I校正因子分别为1.068±0.046、0.102±0.005、0.0582±0.003、1.382±0.121、0.802±0.067和1.383±0.119,其中包含因子k=2。最后计算各不确定度分量的贡献率,氟康唑杂质A、B、C、D、F、I校正因子测定的相对合成标准不确定度urel(f)中主成分和杂质的线性方程斜率不确定度urel(K)贡献率之和占比均大于85%;在线性方程斜率不确定度urel(K)中,12组数据中的8组溶液浓度不确定度贡献率占比在80%以上,其中由对照品含量在溶液浓度中引入的不确定度贡献率约为80%。由此可见,标准曲线法测定杂质校...     

Establishment and application of SPA-co-operated ELISA for detection of anti-HCV-IgM

Summary A staphylococus aureus protein A co-operated ELISA (SPA-ELISA) for the detection of anti-HCV-IgM has been established using HCV antigenic polypeptide, SPA-bearing germs and horseradish peroxidase labelled anti-human IgM. The specificity of SPA-ELISA has been confirmed by some substitution tests, blocking tests and destroying test with 2-mercaptoethanol. The results showed that the rate of anti-HCV-IgG in a group of patients with acute hepatitis and there were significant difference in anti-HCV-IgM was higher than that of anti-HCV-IgM detected rates between patients with acute hepatits and those with chronic hepatitis (32.26%,P<0.01). On the other hand, the positive rates of anti-HCV-IgM were 53.66 % and 63.41 % in transfusion associated hepatitis, 38.10 % and 42.86 % in sporadic hepatitis, 6.11 % and 16.33 % in people who have had active social activities, 40.00 % and 10.00% in a group of blood donors respectively. Furthermore, taking into account the characteristics of HCV polypeptide used, its easiness of manipulation, and elimination of the interference of anti-HCV-IgG in sera, the new SPA-ELISA is believed to be of practical value in clinical and epidemiological studies of hepatitis C.     

HPLC法测定氧氟沙星注射液含量的不确定度分析

目的 使氧氟沙星注射液含量测定的测量受控.方法 建立HPLC法测定氧氟沙星注射液含量的不确定度评定方法.结果 量化各不确定度分量,提出了该法的合成不确定度评估结果.结论 计算出扩展不确定度U＝1.80%（k=2）,称样量较少、样品的重复测定是测定结果的最主要影响因素.     

胶体金免疫层析法和ELISA法在HBsAg检测中的方法学评价

目的：对胶体金免疫层析法（GICA）和ELISA两种方法检测HBsAg进行方法学比较。方法：用胶体金纸条和ELISA试剂同时检测HBsAg血清标本。结果：与ELISA相比,胶体金免疫层析法检测HBsAg的灵敏度为96%,特异性为100%。胶体金免疫层析法与ELISA相比特异性基本一致,但胶体金免疫层析法灵敏度稍差。结论：HBsAg胶体金纸条与ELISA试剂相比有较高的特异性,但灵敏度有待于进一步提高。     

生活饮用水中苯测定的不确定度评定

目的对生活饮用水中苯测定进行不确定度评定。方法通过分析生活饮用水中苯测定的方法,找出引起测量不确定度的来源并对其进行量化。结果生活饮用水中苯测定的扩展不确定度为1.22μg/L。结论生活饮用水中苯测定的测量不确定度标准物质和校准曲线拟合贡献最大,其次是标准系列配制的贡献较大。