猴肝组织与Hep-2细胞联合检测抗核抗体的临床意义

本文探讨猴肝组织和人类上皮细胞(Hep-2细胞)检测血清抗核抗体(ANA)的临床意义.检测结果示Hep-2细胞检测ANA阳性率高于猴肝组织检测ANA阳性率,应用两种基质联合对疾病的诊断,减少抗核抗体的检测的漏检是有重要意义.     

猴肝组织与Hep—2细胞联合检测抗核抗体的临床意义

本文探讨猴肝组织和人类上皮细胞(Hep-2细胞)检测血清抗核抗体(ANA)的临床意义。检测结果示Hep-2细胞检测ANA阳性率高于猴肝组织检测ANA阳性率，应用两种基质联合对疾病的诊断，减少抗核抗体的检测的漏检是有重要意义。     

自身抗体在自身免疫性疾病患者中的检查价值研究

目的研究自身抗体在自身免疫性疾病(AID)患者中的检查价值。方法选择2014年9月至2015年5月在本院进行治疗的AID患者120例,全部患者都在空腹情况下进行采血,采血3ml,并在2小时之内将血清分离备用。ANA检测应用的方法为间接免疫荧光法(IIF),抗原片选用Hep-2细胞/猴肝组织复合片。检测抗ds-DNA应用IIF法,选取绿蝇短膜虫为抗原片。检测抗ENA应用免疫印迹法。观察并记录所有患者血清ANA、抗ds-DNA及抗ENA测定结果以及不同ANA荧光模式下各AID疾病的分布情况。结果经过计算统计,全部AID患者的ANA阳性率为84.2%,抗ds-DNA阳性率:38.3%,其中,SLE病人检测出的抗ds-DNA的阳性率是65.2%,特异性为96.6%,抗ENA阳性率是56.7%。经过本次研究一共检测出SLE患者共计69例,ANA阳性率达到91.3%,镜下显示为单一核型以颗粒型阳性率最高为23.8%,如镜下显示为多种核型则以颗粒/核仁/其他为主,阳性率为36.5%。以上统计结果显示,SLE患者ANA阳性荧光核型图谱以颗粒型为主。PSS患者ANA阳性荧光核型以核仁型为主。结论在诊断AID的过程中,检测ANA、抗ds-DNA、抗ENA多肽抗体能够显著提升检测的阳性率,提升检测的准确性,为AID的分类与提升疗效提供准确的依据。     

肝功能异常患者血清中自身抗体检测及意义

目的 探讨肝病相关自身抗体在肝功能异常患者血清中的阳性率及其诊断价值.方法 以生物薄片马赛克技术制备的Hep-2细胞、猴肝、心肌、鼠肝、鼠肾、胃共6种组织细胞为抗原基质,间接免疫荧光法检测肝病相关自身抗体,根据荧光反应强弱判定结果.结果 80例肝功异常患者(肝脏功能异常,ALT＞50 U/L)自身抗体阳性率为11.25%,其中抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)及抗线粒体抗体(AMA)的阳性率分别为7.5%、5%和6.25%;女性患者自身抗体的检出率明显高于男性患者(P＜0.05);病毒性肝炎标志物阴性组自身抗体检出率明显高于阳性组(P＜0.05).结论 高滴度自身抗体对自身免疫性肝病的诊断有一定的价值,肝功能异常的非病毒性肝炎病人适合进行肝病相关自身抗体的检测.     

用Hep—2细胞作抗原的过氧化物酶染色法检测抗核抗体

对181例各种类型的自身免疫病患者血清抗核抗体ANA使用Hep-2细胞作抗原的过氧化物酶技术进行了ANA检测,并与间接免疫荧光法进行了比较。证实两种方法的相符率较高,特别是对红斑狼疮、结缔组织病、硬皮病的检测,符合率为93.3％～100％,对用其它方法检出率较低的类风湿的检测符合率也可达71.4％。在敏感性和特异性方面两法没有明显区别。认为用Hep-2细胞作抗原的酶染色法,具有方法简便、不需使用荧光显微镜、细胞及核仁体积较大、易于分型等优点。     

自身免疫在丙型肝炎病毒感染中的意义

目的:探讨慢性丙肝患者血清中自身抗体的检测与临床意义。方法:80例丙型肝炎合并有自身抗体患者血清采用荧光定量聚合酶链反应检测HCV-RNA、用ELSIA法检测抗一HCv抗体、用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)、用免疫印迹法分别检测丙肝抗体(HCVAb)阳性血清中的抗线粒体AMA-M2亚型抗体、抗Sp100抗体、抗gp210抗体、抗肝肾微粒体-1(LKM-I)抗体、抗肝特异性胞质1型(LC-1)抗体、抗Ro-52抗体、抗核抗体(ANA)。结果:80例丙型肝炎感染者中有24例出现自身抗体阳性,总阳性率为30%(24/80);其中ANA阳性19例,占23.8%(19/80),抗核抗体以低滴度为主。另外还检测到抗线粒体AMA-M2亚型抗体、抗Sp100抗体、抗gp210抗体等自身抗体;30例丙肝病毒复制指标HCV-RNA(+)的患者,自身抗体检出率为43.3%(13/30),50例丙肝病毒复制指标HCV.RNA(-)的患者,自身抗体检出率为22%(11/50),两者检出率差别有统计学意义(P<0.05)。结论:丙型肝炎病毒感染可诱发机体自身免疫反应,产生多种自身抗体,尤其HCV-RNA阳性患者更为突出,探讨HCV感染合并自身免疫现象和自身免疫性肝炎时自身抗体的发生率和抗体水平具有重要意义。     

用小鼠艾氏腹水癌细胞检测抗核抗体

抗核抗体(ANA)是以细胞核成份为靶抗原的自身抗体的总称。常用检测方法为免疫荧光法和免疫酶法。ANA 的检测已被列入 SLE 的诊断标准。长期以来,检测中所用抗原片或为小鼠肝匀浆片或为传代细胞(HEP-2细胞系),因来源困难而使此项检查在基层实验室难以开展。我们试用小鼠艾氏(Ehrlich)腹水癌细胞为 ANA 的抗原片,经与人羊膜细胞、小鼠骨髓瘤细胞、小鼠肝匀浆抗原片比较,发现其灵敏度高,结果清晰,适于大量制备,现报告如下:     

分析自身抗体检测对自身免疫性肝病诊断的意义

目的研究分析自身抗体检测对自身免疫性肝病诊断的意义。方法使用间接免疫荧光法进行检测抗线粒体抗体(AMA)、血清抗核抗体(ANA)以及抗平滑肌抗体(SMA)。采用免疫印迹法对抗溶性肝抗原/肝胰抗原和抗肝特异性胞浆抗原体Ⅰ型抗体以及抗肝肾微粒体Ⅰ型等肝脏疾病有关的自身抗体均给予检测。结果 ANA阳性检查率分别为;AIH检出21例占(84%),PBC检出36例占(90%),PSC检出3例占(20%)。几组比较差异有统计学意义,P0.05。结论自身免疫性肝病的诊断和分型采用自身抗体检测,检出率高,具有较高的临床诊断价值。     

乙型肝炎患者血清抗核抗体的检测及其临床意义

目的 检测乙型肝炎患者血清抗核抗体（ANA）并分析其临床意义。抗核抗体（ANA）作为一种自身免疫抗体，可能参与乙型肝炎病毒（HBV）感染者的自身免疫反应，在乙型慢性肝炎病程进展中发挥了重要作用。研究表明，慢性肝炎患者血清中存在抗核抗体。方法 采用间接免疫荧光法（HF），所用试剂由德国欧蒙公司提供，以猴肝组织切片和人传代Hep-2细胞为抗原基质，用间接免疫荧光法检测慢性乙型肝炎患者血清中ANA，以了解自身免疫在乙型肝炎慢性化发展中的作用机制。结果 乙型肝炎患者抗核抗体（ANA）总阳性率为18.8％，明显高于正常对照组，有显著性差异（P〈0．05）。结论 观察乙型肝炎患者抗核抗体（ANA）的滴度对乙型肝炎患者的治疗有一定的参考价值。     

自身免疫性肝病患者自身抗体的检测及临床应用

目的了解自身免疫性肝病患者可能出现的各种自身抗体阳性率,以提高对该病的认识。方法分别应用间接免疫荧光法和免疫印迹法检测92例自身免疫性肝病患者和30名健康人的抗核抗体(ANA),抗平滑肌抗体(SMA),抗线粒体抗体(AMA)、AMA-M2、抗肝肾微粒体Ⅰ型(LKM-1)抗体、抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原(SLA/LP)抗体、抗核点(Sp100)抗体、抗核膜(gp210)抗体、抗肝细胞胞质抗原1型抗体(抗LC-1抗体)。92例患者分为4组:自身免疫性肝炎27例;原发性胆汁性肝硬化29例;原发性硬化性胆管炎6例;不明原因肝损伤30例。结果自身免疫性肝炎组ANA、SMA、抗LKM-1抗体、抗SLA/LP抗体、抗LC-1抗体的阳性率分别为81.5%、51.9%、11.1%、18.5%、14.8%。原发性胆汁性肝硬化组ANA、AMA、AMA-M2、抗Sp100抗体、抗gp210抗体阳性率为89.7%、93.1%、89.7%、58.6%、31.0%。原发性硬化性胆管炎组检测ANA 1例(16.7%),不明原因肝损伤ANA 9例(30%),AMA 3例(10%)。结论多数自身免疫性肝病伴有特异性自身抗体的出现;自身抗体的检测对临床肝病学具有重要的意义。     

SNL细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞

目的 为便于人胚胎干细胞(ES细胞)的培养和研究,寻找一种建系细胞作为人ES细胞的饲养层细胞.方法 以小鼠成纤维细胞系SNL细胞作为饲养层细胞培养人ES细胞株hES1.传代17代后,检测hES细胞表面特异性标志,包括碱性磷酸酶(AKP)、Oct-4、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-3和SSEA-4的表达;同时观察细胞的多向分化潜能.结果 hES1细胞在SNL细胞饲养层上能持续生长.经多次传代后持续表达人ES细胞表面特异性标志,其注射于重症联合免疫缺陷小鼠皮下仍能形成畸胎瘤组织.结论 SNL细胞能够作为饲养层细胞用于人ES细胞的培养,且操作更方便;该细胞已转染了耐受新霉素的基因,为将来对人ES细胞基因操作时进行药物筛选提供了可能.     

SNL细胞作为饲养层细胞培养人胚胎干细胞

目的为便于人胚胎干细胞(ES细胞)的培养和研究,寻找一种建系细胞作为人ES细胞的饲养层细胞。方法以小鼠成纤维细胞系SNL细胞作为饲养层细胞培养人ES细胞株hES1。传代17代后,检测hES细胞表面特异性标志,包括碱性磷酸酶(AKP)、Oct-4、阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-3和SSEA-4的表达;同时观察细胞的多向分化潜能。结果hES1细胞在SNL细胞饲养层上能持续生长。经多次传代后持续表达人ES细胞表面特异性标志,其注射于重症联合免疫缺陷小鼠皮下仍能形成畸胎瘤组织。结论SNL细胞能够作为饲养层细胞用于人ES细胞的培养,且操作更方便;该细胞已转染了耐受新霉素的基因,为将来对人ES细胞基因操作时进行药物筛选提供了可能。     

干细胞来源的胰岛素分泌细胞的研究进展

Ⅰ型糖尿病是由于胰岛β细胞被自身免疫系统攻击、破坏,不能正常释放胰岛素,导致血糖升高.患者需终生注射胰岛素,由于给药过程缺乏理想的血糖感应系统,常导致糖尿病大血管病变、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、神经病变及糖尿病足等慢性并发症的发生,是糖尿病死亡的主要原因[1].为了有效控制血糖,防止糖尿病并发症的发生,提高糖尿病患者的生存质量,目前主要采用两种治疗策略来改进胰岛素的治疗,一是胰岛素输入方式的改进:临床上广泛应用的胰岛素泵就是通过24 h不停地向患者体内输入微量胰岛素,模拟正常胰岛素分泌模式,控制血糖水平,减少并发症的发生.其次是寻找方法替代被患者自身免疫系统破坏的胰岛素分泌细胞,包括胰腺或胰岛移植、对非β细胞进行基因修饰以及对干细胞的诱导分化.70年代初,Lacy等成功地证明了移植胰岛细胞能够改善糖尿病大鼠的高血糖状态,胰岛细胞移植开始蓬勃开展起来.     

肝脏NK/NKT细胞及其生物学意义

对天然杀伤细胞（NK cell）的研究近年受到高度关注。研究发现，肝脏NK/NKT细胞含量在机体天然免疫反应时可增加10倍，可能是机体最大的专职天然免疫的器官，对抵御病理、寄生菌、恶性转化细胞等的侵害具有十分重要的意义。本文就肝脏NK/NKT细胞的功能特点和生物学特性、当前的研究进展及热点问题以及进一步研究的思路和切入点作一述评。     

牙周膜干细胞对脐血单个核细胞分化为破骨样细胞的影响

目的研究牙周组织改建过程中,牙周膜干细胞对破骨细胞形成的影响,初步探讨静压力和诱导因子对牙周膜干细胞调控破骨细胞形成的作用机制。方法有限稀释法克隆化培养牙周膜干细胞,密度梯度离心法分离脐血,收集单个核细胞。建立直接共培养和Transwell间接共培养体系。实验分组:A组,对照组(单纯共培养);B组,静压力组,共培养后第2天即对共培养细胞施加120 KPa压力,持续作用1 h后继续培养;C组,诱导因子组,培养液中加入诱导因子1,25二羟基维生素D3(1×10-8mol/L)和前列腺素E2(1×10-6mol/L)。采用倒置相差显微镜及TRAP染色,骨磨片染色等方法检测破骨样细胞(osteoclast-like cells,OLC)的形成及功能。结果各组第3、7天OLC计数比较结果显示,施加静压力后,直接共培养组OLC数量明显多于间接共培养组(P<0.01);而诱导因子组,直接共培养组OLC少于间接共培养组(P<0.01)。结论牙周膜干细胞能够促进脐血单个核细胞分化为破骨样细胞,且在静压力作用下,两种细胞直接接触时,这种调控作用更为明显。     

Periodontal ligament stem cells improve peripheral blood mononuclear cells differentiation into osteoclast-like cells

目的 研究牙周组织改建过程中,牙周膜干细胞对破骨细胞形成的影响,初步探讨静压力和诱导因子对牙周膜干细胞调控破骨细胞形成的作用机制.方法 有限稀释法克隆化培养牙周膜干细胞,密度梯度离心法分离脐血,收集单个核细胞.建立直接共培养和Transwell间接共培养体系.实验分组:A组,对照组(单纯共培养);B组,静压力组,共培养后第2天即对共培养细胞施加120 KPa压力,持续作用1h后继续培养;C组,诱导因子组,培养液中加入诱导因子1,25二羟基维生素D3(1 ×10-8 mol/L)和前列腺素E2(1×10-6 mol/L).采用倒置相差显微镜及TRAP染色,骨磨片染色等方法检测破骨样细胞( osteoclast-like cells,OLC)的形成及功能.结果 各组第3、7天OLC计数比较结果显示,施加静压力后,直接共培养组OLC数量明显多于间接共培养组(P＜0.01);而诱导因子组,直接共培养组OLC少于间接共培养组(P＜0-01).结论 牙周膜干细胞能够促进脐血单个核细胞分化为破骨样细胞,且在静压力作用下,两种细胞直接接触时,这种调控作用更为明显.     

肝干细胞－卵圆细胞的研究进展

卵圆细胞是肝脏干细胞的代表细胞,主要存在于幼肝及成人受损的肝脏中,是一种双潜能的肝脏干细胞,多种因素调节其分化,在此过程中动态表达一系列表面标志物。卵圆细胞的分化异常与肝癌的发生关系密切。在体外大量扩增卵圆细胞并使之分化为成熟的 有功能的肝细胞,为终末期肝病、肝脏的组织工程研究及基因治疗开辟了新的途径。 