肾上腺嗜铬细胞瘤VEGF和iNOS表达与临床特征的关系及相关性分析

目的探讨肾上腺嗜铬细胞瘤血管内皮生长因子(VEGF)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达与临床特征的关系及相关性。方法采用免疫组织化学染色法检测46例肾上腺嗜铬细胞瘤组织标本(良性28例、恶性18例)和21例正常肾上腺组织标本中VEGF、iNOS的表达情况,并分析其与临床特征的关系及二者相关性。结果 VEGF、iNOS阳性表达率恶性肾上腺嗜铬细胞瘤组织良性肾上腺嗜铬细胞瘤组织正常肾上腺组织(P0.01)。直径≥5 cm的肾上腺嗜铬细胞瘤组织VEGF、iNOS阳性表达率明显高于直径5 cm的瘤组织阳性表达率,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。肾上腺嗜铬细胞瘤组织中VEGF和iNOS的表达呈正相关(r=0.452,P0.001)。结论 VEGF和iNOS在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中的表达明显高于正常肾上腺组织,二者的表达随着肿瘤增大而增强,恶性瘤组织中的阳性表达率高于良性瘤组织中的阳性表达率,且二者表达呈正相关,共同影响肾上腺嗜铬细胞瘤的发生发展。     

选择性iNOS抑制剂1400W对缺氧培养人肝癌SMMC-7721细胞株iNOS和VEGF表达的影响

目的探讨选择性诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）抑制剂1400W对缺氧条件培养的人肝癌SMMC-7721细胞株iNOS和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响。方法实验组分别加入选择性iNOS抑制剂1400W 50（50μmol/L组）、100（100μmol/L组）、200（200μmol/L组）μmol/L的培养液培养;对照组不加选择性iNOS抑制剂1400W培养液培养,缺氧条件下培养24 h后,采用硝酸还原酶法检测细胞培养上清液NO含量;RT-PCR检测iNOSmRNA和VEGFmRNA水平。结果50μmol/L组、100μmol/L组、200μmol/L组NO含量分别为（28.77±2.1）、（21.63±3.0）、（17.23±2.4）μmol/L,均明显低于对照组[（43.68±4.3）μmol/L]（P均〈0.01）;50μmol/L组、100μmol/L组、200μmol/L iNOSmRNA水平分别为0.212±0.009、0.169±0.012、0.136±0.006,均明显低于对照组0.246±0.009（P〈0.05或P〈0.01）;50μmol/L组、100μmol/L组、200μmol/L VEGFmRNA水平分别为0.429±0.038、0.309±0.022、0.249±0.014,均明显低于对照组0.598±0.040（P〈0.05或P〈0.01）。结论选择性iNOS抑制剂1400W可抑制缺氧条件下培养的人肝癌SMMC-7721细胞株iNOS和VEGF表达。提示选择性iNOS抑制剂1400W对肝癌新生血管的形成具有预防和潜在的治疗价值。     

慢性髓细胞性白血病患者肿瘤细胞表达VEGF受体的研究

目的:了解慢性髓细胞性白血病患者肿瘤细胞VEGF、b-FGF、KDR、Flt-1基因表达,探讨血管生成因子与肿瘤细胞间的相互作用。方法:用RT-PCR方法检测16例慢性髓细胞性白血病患者骨髓粒系细胞VEGF、b-FGF、KDR、Flt-1基因表达,以5例原发性血小板减少性紫癜患者作对照组进行比较。结果:VEGF和b-FGF基因高表达,与对照组比较有显著差异(P<0.05)。KDR基因基本不表达,Flt-1明显表达但与对照组无明显差异。结论:虽然KDR和Flt-1的表达意义不大,但VEGF和b-FGF基因高表达。证实了肿瘤细胞分泌血管生成因子增加,可能存在自分泌途径。     

早期自然流产患者蜕膜组织中iNOS的表达及意义

目的通过测定早期自然流产患者蜕膜组织中诱导型一氧化氮合酶的表达,探讨其与自然流产发病的关系。方法应用免疫组织化学法,对41例妇女蜕膜组织中诱导型一氧化氮合酶的表达进行检测,其中20例为早期自然流产患者（流产组）,21例为要求终止妊娠的正常早孕妇女（对照组）。结果在早期妊娠的蜕膜组织细胞浆内,间质细胞浆内和腺上皮及腔上皮细胞浆内均有iNOS的表达;早期自然流产组蜕膜组织中iNOS的表达（2例呈阴性,2例呈弱阳性,10例呈阳性,6例呈强阳性）明显强于对照组（2例阴性,10例弱阳性,7例阳性,2例强阳性）,两者比较,差异有统计学意义（P=0．026）。结论早期自然流产患者蜕膜组织中诱导型一氧化氮合酶呈高表达,iNOS可能与自然流产有密切的相关性。     

血府逐瘀汤影响慢性粒细胞白血病VEGF表达的体外研究

目的:体外研究血府逐瘀汤含药血清对慢性粒细胞白血病细胞VEGF表达的影响。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测20例初治CML患者、20例正常人骨髓细胞以及人慢性粒红白血病急性变K562细胞上清液的VEGF含量,并测定CML原代细胞和K562细胞加入不同浓度血府逐瘀汤含药血清共同培养后上清液的VEGF含量。结果:CML原代细胞上清液VEGF浓度为(389.27±65.77)pg/mL、K562细胞VEGF浓度为(461.24±137.57)pg/mL,均比正常人(125.45±28.24)pg/mL显著增高(P<0.05),加入不同浓度的含药血清,在中、高浓度范围,CML原代细胞、K562细胞VEGF表达均明显下降,分别为(152.43±26.29)pg/mL、(80.31±19.73)pg/mL和(188.86±32.77)pg/mL、(114.81±14.16)pg/mL(P<0.05)。结论:异常血管新生可能参与CML发病,血府逐瘀汤含药血清在体外能显著抑制CML原代细胞和K562白血病细胞表达VEGF,该方有参与抑制CML异常血管形成的作用。     

诱导型一氧化氮合酶与血管内皮生长因子C在宫颈癌中表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)与血管内皮生长因子(vascularendothelial growth factor,VEGF)-C在宫颈癌组织中的表达及其与淋巴结转移之间的关系。方法 55例宫颈癌组织(宫颈癌组)与10例正常宫颈组织(对照组),采用免疫组织化学SP法检测2组iNOS和VEGF-C的表达情况。结果宫颈癌组iNOS与VEGF-C阳性率分别为69.09%和63.64%,对照组分别为20.00%和10.00%,差异有统计学意义(P<0.05);iNOS表达与VEGF-C呈正相关(r=0.78,P<0.01);宫颈癌组iNOS(+)VEGF-C(+)者淋巴转移的发生率(54.55%)明显高于iNOS(-)VEGF-C(-)者(27.27%)(P<0.05)。结论 iNOS、VEGF-C与宫颈癌的淋巴转移关系密切;针对iNOS、VEGF-C的靶向治疗可能成为宫颈癌治疗的新靶点。     

诱导型一氧化氮合酶与血管内皮生长因子C在宫颈癌中表达及其与淋巴结转移的相关性研究

目的探讨诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）与血管内皮生长因子（vascularendothelial growth factor,VEGF）-C在宫颈癌组织中的表达及其与淋巴结转移之间的关系。方法 55例宫颈癌组织（宫颈癌组）与10例正常宫颈组织（对照组）,采用免疫组织化学SP法检测2组iNOS和VEGF-C的表达情况。结果宫颈癌组iNOS与VEGF-C阳性率分别为69.09%和63.64%,对照组分别为20.00%和10.00%,差异有统计学意义（P〈0.05）;iNOS表达与VEGF-C呈正相关（r=0.78,P〈0.01）;宫颈癌组iNOS（＋）VEGF-C（＋）者淋巴转移的发生率（54.55%）明显高于iNOS（-）VEGF-C（-）者（27.27%）（P〈0.05）。结论 iNOS、VEGF-C与宫颈癌的淋巴转移关系密切;针对iNOS、VEGF-C的靶向治疗可能成为宫颈癌治疗的新靶点。     

灯盏花素对内皮祖细胞数量、功能及iNOS的影响

目的:观察灯盏花素对外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)数量、功能及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的影响。方法:采用密度梯度离心法从外周血获得单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板上,培养7d后收集贴壁细胞,加入不同浓度灯盏花素(分别为5、10、20、40mg/L)培养24h,同时,对照组与灯盏花素20mg/L组分别培养6、12、24、48h。激光共聚焦显微镜鉴定FITC-UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs,将其在倒置荧光显微镜下计数。然后分别采用MTT比色法、改良的Boyden小室、黏附能力测定实验和体外血管生成试剂盒来观察EPCs的增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,免疫印迹杂交法半定量测定iNOS含量。结果:灯盏花素能增加外周血EPCs数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,并且其数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力随灯盏花素浓度和作用时间的增加而增加,灯盏花素还能增加EPCs中iNOS含量。结论:灯盏花素增加EPCs的数量、增殖能力、迁移能力、黏附能力和体外血管形成能力,与其增加iNOS含量有关。     

慢性肺源性心脏病中医证候的研究进展

慢性肺源性心脏病(简称肺心病)是呼吸系统的一种常见病。我国肺心病的患病率约为4％,占住院心脏病的38． 5％～46％,多数地区占第3位、第4位,东北、西南已由第2 位上升到首位。中医学在该疾病的认识诊疗方面积累了丰富的经验,在急性加重期的呼吸系统感染控制方面、呼吸功能改善方面、心衰纠正方面、缓解期治疗以及活血化瘀药     

生长激素对脂多糖刺激大鼠腹腔巨噬细胞NO产生及iNOS mRNA表达的影响及意义

目的：研究重组人生长激素对脂多糖（LPS）刺激大鼠腹腔巨噬细胞活性的改变,TNF—α、iNOS mRNA的表达情况及对NO的产生的影响。方法：分离提取大鼠腹腔巨噬细胞,用12S刺激2h后加入不同浓度重组人生长激素,6h后观察巨噬细胞活性RT—PCR检测巨噬细胞内TNF—α、iNOS mRNA的表达情况,上清液测NO浓度。结果：巨噬细胞用12S刺激后,活性明显增强,TNF—α、iNOS mRNA表达上调,NO产生增加,使用不同剂量的生长激素后能均够抑制巨噬细胞的活性,iNOS mRNA表达下调,NO产生减少,而对TNF—α mRNA的表达无明显影响。结论：低剂量的生长激素可以抑制12S对巨噬细胞的活化作用,其部分机制是下调了iNOS mRNA表达,使NO产生减少,但其抑制作用不随浓度的增加而上升。在体外rhGH并不直接抑制TNF—αmRNA的表达。     

急性和慢性髓系白血病患者VEGF表达的研究

目的：探究急性髓系白血病（AML）与慢性髓系白血病（CML）血清及CML骨髓细胞VEGF含量的变化。方法：采用酶联免疫吸附法（ELISA）对49例AML和17例CML患者血清及20例CML患者骨髓细胞VEGF浓度进行检测。结果：AML患者血清平均VEGF浓度为201．17pg/ml,与正常对照组（133．37pg/ml)比较,有明显的统计差异（P＜0．05）;而CML患者血清VEGF水平可达517．79pg/ml,显著高于正常对照组（P＜0．001）,AML患者各亚型中VEGF水平无明显差异,但以M3型最高（299．31pg/ml),CML患者骨髓细胞培养上清液ＶＥＧＦ的浓度（649．16pg/ml)也显著高于正常骨髓细胞对照组（P＜0．01）,结论：AML和CML患者存在VEGF的异常高表达,提示血管生成和血管内皮生长因子可能在急性与慢性髓系白血病的发病中发挥重要作用。     

三氧化二砷下调慢性髓系白血病骨髓细胞VEGF的表达

为了研究三氧化二砷 (As2 O3 )对慢性髓系白血病 (CML)各期患者血管内皮生长因子 (VEGF)表达水平的影响 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)检测正常人和CML慢性期、加速期和急变期患者骨髓细胞经As2 O3 作用前、后培养上清液VEGF水平的变化。结果发现 ,2 0例慢性期、8例加速期和 7例急变期患者骨髓细胞培养上清液VEGF水平分别为 6 4 9.16± 382 .2 0 pg/ml,5 6 0 .2 7± 4 0 9.14 pg/ml和 5 87.18± 4 15 .2 8pg/ml,明显高于对照组的15 2 .16± 15 0 .0 9pg/ml(P <0 .0 1) ,但不同病程阶段的CML患者间VEGF水平的差别无统计学意义。慢性期、加速期及急变期CML患者骨髓细胞经浓度为 5× 10 -6mol/L的As2 O3 处理 72小时后 ,VEGF表达水平均出现明显下调 ,分别为 396 .6 6± 2 5 7.4 7pg/ml,36 3.4 2± 2 39.85pg/ml和 4 0 7.4 7± 2 19.38pg/ml,与未加As2 O3 组比较差别显著 (P <0 0 5 )。结论 :VEGF异常增高可能在CML整个发病过程中都发挥一定作用 ,As2 O3 下调白血病细胞VEGF表达可能是其抗肿瘤作用的机制之一     

慢性乙型肝炎中医证候与实验室指标的相关性研究

目的：探讨慢性乙型肝炎中医证候与实验室指标的相关性。方法将145例慢性乙型肝炎患者按中医辨证分为湿热中阻证、肝郁脾虚证、肝肾阴虚证、瘀血阻络证和脾肾阳虚证5种证候,观察各证候与实验室指标的相关性。结果研究发现湿热中阻证与肝郁脾虚证在5种证候中所占比例最高,分别为53．8％和31．7％;湿热中阻证的总胆红素（TBiL）、间接胆红素（IBiL）阳性率分别为69．4％和68．8％,明显高于其他3组,差异有统计学意义（P＜0．05）;而肝肾阴虚证患者的总胆汁酸（TBA）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）及乙肝e抗原（HBeAg）的阳性率明显高于其他3组。湿热中阻证患者 HBV-DNA病毒载量明显高于其他3组（HBV-DNA＞105 copies/mL）,病毒复制最为活跃。结论慢性乙型肝炎的中医证候与实验室指标有一定的相关性,实验室指标对慢性乙型肝炎的辨证论治有着较为重要的临床意义。     

iNOS在压疮大鼠骨骼肌中的表达及意义

目的研究iNOS在压疮大鼠骨骼肌中表达情况,探讨iNOS参与压疮发生的机制。方法54只Wistar大鼠随机分为9组：对照组、缺血再灌注组（IR组）：IROh组、IR4h组、IR12h组、IR24h组、IR3d组、IR1周组、IR2周组、IR4周组,每组6只。免疫组化法观察大鼠骨骼肌iNOS阳性纤维数量及形态学变化;免疫印迹法检测骨骼肌iNOS蛋白表达情况。结果实验组大鼠骨骼肌的结构发生进行性损伤,出现肌纤维溶解、断裂、空泡变、水肿、横纹消失、血管扩张充血、间质水肿等病理改变。以IR24h最为严重,此后逐渐缓解,至IR4周组织损伤仍未完全修复。在IR4h组、IR12h组、IR24h组、IR3d组中可见大量iNOS阳性表达的骨骼肌纤维,和对照组相比iNOS蛋白表达水平显著增高（P〈0．05）。IRl2h组、IR24h组iNOS表达水平最高。结论iNOS参与压疮的形成,其活化是压疮缺血再灌注损伤过程中自由基氧化损伤的重要环节。     

iNOS、NF-κB在胃癌组织中的表达及意义

目的 :研究iNOS与NF κB在胃癌中的表达 ,探讨两者与胃癌发生、发展之间的关系及意义。方法 :采用免疫组化法对5 3例胃癌组织和 2 0例正常胃黏膜组织标本进行检测 ,观察iNOS和NF κB的表达情况。结果 :iNOS及NF κB在胃癌组织中均呈高表达状态 (71 70 %、83 0 2 % ) ,其阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。同时 ,iNOS和NF κB在胃癌中的高表达与组织学分型无关 (P >0 0 5 ) ,而与浸润深度和有无淋巴结转移有关 (P <0 0 5 ) ,且两者之间存在显著相关性 (r =0 .60 8,P <0 0 1)。结论 :iNOS及NF κB参与了肿瘤的形成 ,且与胃癌的侵袭、转移及预后也有一定关系     

内皮型一氧化氮合酶与血管结构及功能的相关性

目的:应用内部核糖体进入位点构建携带内皮型一氧化氮合酶和血管内皮生长因子的双基因表达载体,研究外源性基因内皮型一氧化氮合酶和血管内皮生长因子在人脐静脉内皮细胞ECV304中的转染表达,探讨内皮型一氧化氮合酶与血管结构及功能的相关性。方法:实验于2003-12/2004-12在南京鼓楼医院科研部完成。将Phcmvsp1a-enos中内皮型一氧化氮合酶基因和PcDNA-vegf中血管内皮生长因子基因定向克隆到真核表达载体PcDNA-ires中,构建重组质粒PcDNA-enos-ires-vegf,经酶切,聚合酶链反应扩增和部分DNA测序分析证实后,转染人脐静脉内皮细胞,硝酸还原酶法检测转染后细胞中一氧化氮和一氧化氮合酶活性,免疫组化和荧光双标记及westernblotting检测转染后细胞蛋白水平的表达,Trizol提取总RNA,反转录-聚合酶链反应测定转染后细胞mRNA水平的表达。结果:成功构建携带内皮型一氧化氮合酶和血管内皮生长因子的双基因表达载体PcDNA-enos-ires-vegf,双基因内皮型一氧化氮合酶和血管内皮生长因子在人脐静脉内皮细胞基因组中获得整合及表达。重组基因PcDNA-enos-ires-vegf组与对照组PcDNA-enos在一氧化氮含量和一氧化氮合成酶活性的表达差异无显著性意义。PcDNA-enos-ires-vegf转染细胞后转染效率为30%～40%。结论:双基因表达载体PcD     

辛伐他汀纳米粒对脓毒症致急性肺损伤小鼠肺组织iNOS/eNOS平衡的调节及对预后的影响

目的分析辛伐他汀纳米粒对脓毒症致急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶(i NOS)/内皮型一氧化氮合酶(e NOS)平衡及预后的影响。方法取45只健康雄性C57/BL6小鼠,随机分为假手术组(开腹,但不结扎穿孔)、模型组(经盲肠结扎穿孔术制备脓毒症小鼠模型)和干预组(脓毒症小鼠模型+尾静脉注射辛伐他汀纳米粒制剂),每组各15只。造模后24 h,通过苏木精-伊红染色观察三组小鼠病理形态学改变,采用免疫组织化学法测定三组小鼠肺组织中i NOS和e NOS表达水平,记录小鼠造模1周时的生存状况。结果经苏木精-伊红染色结果发现,假手术组小鼠肺组织无明显病理改变;模型组小鼠肺组织细胞排卵紊乱、局部肺组织完整性受破坏、肺泡间中隔增厚、肺泡腔缩小、肺间质弥漫性水肿、弥漫性中性粒细胞浸润;相比模型组,干预组小鼠肺组织中性粒细胞渗出明显减少、肺组织损伤程度较轻、肺泡完整性较好。模型组肺组织中i NOS表达水平明显高于假手术组,干预组i NOS表达水平明显低于模型组(P<0.01);模型组肺组织中e NOS表达水平明显低于假手术组,干预组e NOS表达水平明显高于模型组(P<0.01)。模型组造模1周时的生存率(6.67%)低于假手术组(93.33%),干预组生存率(66.67%)高于模型组,差异均有显著性(P<0.05)。结论辛伐他汀纳米粒可保护脓毒症致ALI小鼠肺组织损伤,调节i NOS/e NOS平衡,可能是脓毒症致ALI具有保护效应的潜在处理位点。     

成人慢性髓性白血病骨髓细胞血管内皮生长因子的表达

血管生成出现于实体瘤生长的早期,抗血管生成可能成为治疗实体瘤的一个新的策略。血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）是人类实体瘤中主要的促血管生成细胞因子之一,其在慢性髓性白血病（chronic myelogenous leukemia,CML）病程进展中是否呈现过度表达尚不清楚。为此,本研究采用RT-PCR和ELISA方法对CML病人骨髓细胞及血浆VEGF的表达进行了研究。结果表明,多数CML细胞、白血病细胞系及正常人骨髓细胞均表达VEGF,CML病人VEGF mRNA检测阳性率（93.1%)高于骨髓移植后的CML病人（50%）及正常人（60%）;未治CML病人血浆VEGF浓度（380.6pg/ml）比CML骨髓移植后病人血浆的VEGF浓度（38.0%pg/ml)高9倍;未治CML骨髓细胞分泌的VEGF（499.8pg/ml)比正常人骨髓细胞分泌的（141.3pg/ml)多2.5倍,两之间有显性差异（P＜0.05)。研究结果说明VEGF在CML病人中确实存在过度表达,其在CML发病机制中的作用值得进一步深入研究。     

血清髓过氧化物酶及内皮型一氧化氮合酶水平与慢性脑缺血的相关性研究

目的：探讨血清髓过氧化物酶（MPO）、血清内皮型一氧化氮合酶（eNOS）水平与慢性脑缺血（CCH）的相关性。方法：纳入2022年2~7月在我院门诊就诊的CCH患者50例（CCH组）,同期健康体检者30例为对照组,比较两组血清MPO和eNOS的表达量以及其他临床特征,同时采用多因素Logistic回归分析CCH的危险因素。结果：CCH组eNOS表达量低于对照组,总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇（ HDL-C）、non-HDL-C及MPO表达量显著高于对照组（P<0.01）。Logistic回归分析显示,eNOS低表达与MPO高表达是CCH的发生独立危险因素（P<0.01）。结论：血清MPO在CCH患者中明显升高,eNOS在CCH患者中明显下降。血清MPO、eNOS可能作为CCH的一个有效的生物标志物。