HPLC法测定五味子炮制品中3种木脂素类成分的含量

目的 比较五味子生品、炮制品的木脂素类成分含量差别,探讨五味子炮制机理。方法利用高效液相色谱法对五味子生品、酒制、醋制、蜜制的木脂素类成分：五味子醇甲、五味子甲素、五味子乙素的含量进行比较。结果 与生品相比,五味子各炮制品中3种木脂素及总木脂素的含量均有所增加,只是各成分含量增加程度不同。酒制、醋制增加幅度较蜜制明显,其中炮制品五味子醇甲升高的比较明显,而五味子甲素升高的幅度不是很大,五味子乙素的升幅居中。结论 高效液相色谱（HPLC）法准确、可靠,为五味子不同炮制品的质量评价提供了科学依据。     

五味子的药理作用及临床应用

五味子为木兰科植物北五味子Schisandra chinensis(Turcz．)Baill或华中五味子S．sphenanthera Rehd．et Wils．的干燥成熟果实。为常用中药，在《神农本草经》中列为上品。主要成分为联苯环辛烯型木质素，含量达18．1-19．2％，其中包括五味子素(schizandrin，五味子醇甲)，去氧五味子素(deoxyschizandrin，五味子甲素)，γ-五味子素(γ-schizandrin，五味子乙素)，     

黄药子炮制前后4个主要指标变化的研究

目的:比较不同炮制方法对黄药子4个有效指标的影响.方法:用热浸法测水溶性浸出物含量和醇溶性浸出物含量,用硫酸-苯酚法测多糖含量.结果:水溶性浸出物、醇溶性浸出物、多糖重量、多糖含量大小次序均为:当归水提液煮的黄药子>与当归同煮的黄药子>生黄药子>单独水煮的黄药子;结论:用当归炮制后的黄药子中有效指标的含量明显高于生黄药子和单独水煮的黄药子中有效指标的含量.其中当归水提液炮制黄药子其4种有效指标含量最高.     

五味子乙素对小鼠肿瘤模型多药耐药基因表达的影响

目的 观察五味子乙素对以低剂量多柔比星诱导建立的多药耐药的S180细胞的克服作用,探讨五味子乙素克服肿瘤耐药患者可能性.方法 对接种腹水型S180细胞的小鼠反复低剂量应用多柔比星,应用流式细胞术动态检测MDR表达情况,比较五味子乙素使用与否MDR表达的差异.结果 五味子乙素降低肿瘤细胞耐药基因表达产物P-gp的过度表达,增加耐药S180细胞的凋亡.结论 五味子乙素具克服肿瘤化疗后多药耐药的效应.     

五味子乙素和五味子醇甲对PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的:观察五味子乙素和五味子醇甲对过氧化氢(H2O2)PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法:实验于2005-08/2006-07在首都医科大学附属北京中医医院中心实验室完成。①PC12细胞培养在RPMI1640培养液中,加入2.5,5,10,20μmol/L等不同浓度的五味子乙素和五味子醇甲,与细胞培养24h,然后加入0.1,0.2,0.3,0.5mmol/L不同浓度过氧化氢(H2O2)溶液,37℃作用30min。模型组细胞只加入H2O2;正常对照组只加入等量的培养基。②采用倒置显微镜观察PC12细胞形态学变化,四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞生存率,用自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶的活性,按试剂盒说明书用慧星法测定细胞内DNA损伤。结果:①五味子乙素及五味子醇甲对PC12细胞形态学的影响:倒置相差显微镜观察到PC12细胞被H2O2损伤后,细胞形态学发生变化,表现为胞体肿胀、突起断裂、细胞膜溶解等。经五味子乙素及五味子醇甲处理后细胞,状态明显改善,细胞数目较多,而且细胞形态较完整。②五味子乙素及五味子醇甲对细胞生存率的影响:PC12细胞经0.1,0.2,0.3,0.5mmol/L不同浓度H2O2处理30min后,与正常对照组相比,四甲基偶氮唑盐法测定其生存率,分别降低了4%,13%,40%,57%,(P<0.05或P<0.01)。不同浓度的五味子乙素及五味子醇甲(2.5～20μmol/L)均能提高细胞的生存率,并呈浓度依赖关系,浓度为5,10,20μmol/L时,与模型组比较,具有明显的差异(P<0.05或P<0.01),特别是10μmol/L五味子乙素及五味子醇甲的作用较强。③五味子乙素及五味子醇甲对细胞内乳酸脱氢酶和DNA损伤的影响:用0.3mmol/LH2O2处理细胞后细胞内乳酸脱氢酶漏出率高于正常对照组(P<0.01)。大量的DNA被损伤,与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。细胞与10.0μmol/L五味子乙素及五味子醇甲作用后发现细胞内乳酸脱氢酶漏出率低于模型组(P均<0.01)。DNA损伤明显抑制,与模型组比较,差异有显著性(P均<0.01)。结论:五味子乙素及五味子醇甲均能有效地减轻H2O2对神经细胞的氧化损伤作用。推测保护作用机制是通过清除氧自由基,减轻其对DNA的损伤等方面实现的。     

五味子乙素对过氧化氢损伤心肌细胞的保护作用

目的 探讨五味子乙素对氧化损伤心肌细胞的保护作用.方法 体外培养乳鼠心肌细胞,待细胞生长至接近汇合状态分为空白对照组、氧化损伤组、溶剂对照组、槲皮素对照组、五味子乙素低、中、高浓度组.将500 μmol/L过氧化氢(H2O2)作用于加入槲皮素及不同浓度五味子乙素(5、25、50 μmol/L)预培养6h的心肌细胞,继续培养18 h,测定乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)含量,用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定心肌细胞抑制率,用流式细胞仪测定心肌细胞凋亡率.结果 与空白对照组比较,氧化损伤组MDA、LDH含量明显升高,GSH-Px活性明显下降,细胞抑制率和凋亡率明显增加.五味子乙素呈剂量依赖性降低H2O2对心肌细胞活性的影响,降低MDA (nmol/L)、LDH (U/L)含量,提高GSH-Px (U/mg)活性,并能显著降低细胞抑制率和细胞凋亡率,且以高浓度组最为明显[MDA:6.01±0.36比13.78±0.21,LDH:61.0±5.7比168.0±6.9,GSH-Px:532.90±9.70比59.50±7.41,细胞抑制率:(22.4±5.2)％比(59.7±7.9)％,细胞凋亡率:(17.6±3.8)％比(41.6±5.1)％,均P＜0.01].结论 五味子乙素可保护和修复H2O2诱导的心肌细胞损伤,其作用可能与抗氧化、提高细胞GSH-Px活性、抑制细胞凋亡有关.     

建昌帮姜天麻水分和浸出物测定

目的: 测定建昌帮姜天麻水分和醇溶性浸出物的含量,为建昌帮姜天麻特色炮制工艺提供科学性评价依据。方 法: 对建昌帮姜天麻进行水分和醇溶性浸出物测定,水分按照《中国药典》2020（通则0832）项下烘干法测定;醇溶性浸出物按照《中国药典》2020年版天麻浸出物—照醇溶性浸出物测定法（通则2201)项下的热浸法测定。结果: 4批建昌帮姜天麻中乙醇浸出物含量分别为15.69%;24.0%;24.6%;24.0%。水分分别为11.0%;11.0%;11.3%;10.1%。结论: 4批建昌帮姜天麻水分和醇浸出物含量均符合2020年版《中国药典》标准要求。     

五味子乙素和五味子醇甲对PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的：观察五味子乙素和五味子醇甲对过氧化氢（H2O2）PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法：实验于2005—08／2006—07在首都医科大学附属北京中医医院中心实验室完成。①PC12细胞培养在RPMI1640培养液中，加入2．5，5，10，20μmoL／L等不同浓度的五味子乙素和五味子醇甲，与细胞培养24h，然后加入0．1，0．2，0．3，0．5mmol/L不同浓度过氧化氢（H2O2）溶液，37℃作用30min。模型组细胞只加入H2O2；正常对照组只加入等量的培养基。②采用倒置显微镜观察PC12细胞形态学变化，四甲基偶氮唑盐比色法测定细胞生存率，用自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶的活性，按试剂盒说明书用慧星法测定细胞内DNA损伤。结果：①五味子乙素及五味子醇甲对PC12细胞形态学的影响：倒置相差显微镜观察到PC12细胞被H2O2损伤后，细胞形态学发生变化，表现为胞体肿胀、突起断裂、细胞膜溶解等。经五味子乙素及五味子醇甲处理后细胞，状态明显改善，细胞数目较多，而且细胞形态较完整。②五味子乙素及五味子醇甲对细胞生存率的影响：PC12细胞经0．1，0．2，0．3，0．5mmol／L不同浓度H2O2处理30min后，与正常对照组相比，四甲基偶氮唑盐法测定其生存率，分别降低了4％，13％，40％，57％，（P〈0．05或P〈0．01）。不同浓度的五味子乙素及五味子醇甲（25～20mnoL／L）均能提高细胞的生存率，并呈浓度依赖关系．浓度为5，10，20μmol／L时，与模型组比较，具有明显的差异（P〈0．05或P〈0．01），特别是10μmol／L五味子乙素及五味子醇甲的作用较强。②五味子乙素及五味子醇甲对细胞内乳酸脱氢酶和DNA损伤的影响：用0．3mmol／LH2O2处理细胞后细胞内乳酸脱氢酶漏出率高于正常对照组（P〈0．01）。大量的DNA被损伤，与正常对照组比较，差异有显著性（P〈0．01）。细胞与10．0μmol／L五味子乙素及五味子醇甲作用后发现细胞内乳酸脱氢酶漏出率低于模型组（P均〈0．01）。DNA损伤明显抑制，与模型组比较，差异有显著性（P均〈0．01）。结论：五味子乙素及五味子醇甲均能有效地减轻H2O2对神经细胞的氧化损伤作用。推测保护作用机制是通过清除氧自由基．减轻其对DNA的损伤等方面实现的。     

正交试验法优选黄地安消胶囊的醇提和水提工艺研究

目的:优选黄地安消胶囊处方最优醇提和水提工艺。方法:采用正交试验法,在醇提工艺中考察乙醇浓度、加醇量、回流时间和提取次数对葛根中葛根素的含量和醇溶性浸出物的影响,在水提工艺中考察浸泡时间、加水量、提取时间和提取次数对黄连中盐酸小檗碱的含量和水溶性浸出物的影响。采用综合加权评分法进行数据分析,优选黄地安消胶囊的醇提和水取工艺。结果:最佳醇提工艺为:称取地黄、葛根两味药材,加6倍量75%乙醇回流提取3次,每次2h;最佳水提工艺为:醇提后药渣与黄连、麦冬、枇杷叶三味药材加8倍量水,浸泡0.5h,提取3次,每次2.0h。结论:所确定的提取工艺对醇提和水提的提取率高、工艺稳定可行,为黄地安消胶囊的新药开发提供了实验依据。     

五味子乙素增强乳腺癌小鼠对紫杉醇敏感性的实验研究

目的:探讨五味子乙素能否增强乳腺癌小鼠对紫杉醇(PTX)的敏感性.方法:将BALB/c小鼠50只随机分为5组:正常(NC)组、模型对照(MC)组、紫杉醇(PTX)组、五味子乙素(Sch B)组、五味子乙素+紫杉醇(Sch B+PTX)组.Sch B 10 mg/kg,腹腔注射,每日1次;PTX 10 mg/kg,腹腔注射,隔日1次.给药22 d,以体重、肿瘤体积、肿瘤生长抑制率及脏器指数为观察指标.结果:PTX组、Sch B+PTX组的体重,与MC组比较,均从给药第7天开始下降且均具有统计学差异;Sch B+PTX组与PTX组比较,体重略有增长,但无统计学差异.PTX组的肿瘤生长抑制率为15.7％,Sch B+PTX组为25.9％.PTX组和Sch B+PTX组,与MC组比较,脾脏指数均降低(P=0.008;0.000);Sch B+PTX组与PTX组比较,脾脏指数有降低趋势,但无统计学差异.Sch B+PTX组与PTX组比较,胸腺指数和肾上腺指数均较大(P=0.000;0.011).结论:Sch B和PTX联用,可增强PTX抗肿瘤作用,并减轻PTX对小鼠的副作用.     

五味子成分的高效液相图谱（HPLC）研究

五味子为木兰科植物schisandra chinesis（Turcz．）Baill．的干燥成熟果实，为常用收涩药，具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功效。五味子是制备中成药常用的原药材，将五味子在甲醇中超声可提取醇溶性成分，也可通过对五味子水浴回流，提取其水溶性成分。本文将五味子提取成份进行高效液相图谱（HPLC）研究，以确立不同产地的五味子药材是否具有相似的图谱特性。     

五味子甲素逆转多药耐药相关蛋白1多药耐药机制的研究

目的:探讨五味子甲素对表达多药耐药相关蛋白1的肿瘤耐药细胞株的逆转耐药作用及相关机制。方法:FCM测定不同浓度五味子甲素对柔红霉素抑制HL60/ADR生长及同一浓度五味子甲素对不同化疗药物抑制HL60/ADR和HL60/MRP细胞生长的影响;五味子甲素作用前后,HL60/ADR和HL60/MRP细胞内化疗药物柔红霉素和MRP1特异性底物二醋酸羧基荧光素积聚的变化。结果:25μmol/L五味子甲素可有效降低HL60/ADR、HL60/MRP对柔红霉素、长春新碱和依托泊甙的半数抑制浓度,逆转倍数分别是5,11,16和3,3,13倍;五味子甲素能够增加柔红霉素和MRP1特异性底物二醋酸羧基荧光素在细胞内的积聚。结论:五味子甲素可以逆转不同化疗药物对MRP1介导的耐药,其逆转机制与增加化疗药物的积聚能力有关。     

五味子乙素对巨噬细胞炎症相关介质表达的影响

目的 探讨五味子乙素（Schisandrin B）的抗炎作用及其机制,为指导治疗妇科炎症提供理论依据.方法 分离和培养小鼠腹腔内的巨噬细胞,随机分为Normal组（DMSO）、DEX组（地塞米松1×10-7mmol/ L）、LPS组（1.1×10-2 mmol/L）和Schisandrin＋LPS组,Schisandrin＋LPS组根据给剂量分为4个亚组（4×10-5mmol/L、4×10-6mmol/L、4×10-7mmol/L、4×10-8mmol/L）.利用ELISA法检测培基上清中IL-6、TNF-α、NO的含量,RT-PCR法检测巨噬细胞炎症模型中IL-1β的表达.结果 Schisandrin＋LPS组和DEX组的巨噬细胞IL-1β的表达量明显低于Normal组（P〈0.05）,且Schisandrin＋LPS组的巨噬细胞IL-1β的表达低于DEX组（P〈0.05）;Schisandrin＋LPS组的上清液中TNF-α、IL-6及NO含量低于Normal组且呈剂量依赖性.结论 Schisandrin B可通过对TNF-α、IL-1β、IL-6、NO表达的抑制来实现抗炎作用.     

五酯胶囊治疗慢性乙型肝炎60例临床疗效观察

乙型肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的、以肝脏炎性病为主并可引起多器官损害的一种传染病。全世界乙型肝炎病毒（HBV）携带者约3．5亿人，其中亚太地区占一半以上。我国是HBV感染的高发地区，流行病学调查显示我国无症状的HBV携带者可能超过1．2亿，在某些地区感染率达到35％以上，是当前危害人民健康最严重的传染病，HBV感染已经成为我国严重的公共卫生问题之一。我县在90年代才基本脱贫，特别是山区经济发展缓慢。还有很多患者因病致贫，因病返贫，如何即有效又节省费用防治乙型肝炎，成为我们医生和社会关注的问题。目前尚未研制出特效药、主要的治疗方法是通过保护肝细胞。降低肝炎患者的谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）值。本临床研究采用的五酯胶囊是从五味子中提取的木酯素衍生物精致而成，不仅五味子甲素的含量较高，而且含有一定量的五味子乙素，具有更强的保肝作用。     

HPLC法测定尿路通片中延胡索乙素的含量

目的:建立HPLC法测尿路通片中延胡索乙素的含量.方法:岛津Shim-packC18色谱柱(150mm×4.6mm);流动相:甲醇-磷酸盐溶液(磷酸二氢钾0.1g和磷酸氢二钾4.8g混合溶解于500ml水中)(70:30);检测波长:280nm.结果:在本法条件下,延胡索乙素与杂质达基线分离,在1.256～15.07mg/L范围内峰面积与浓度成良好的线性关系,方法回收率99.83%,RSD%=1.41%(n=5).结论:HPLC法方法简便,结果准确,可作为尿路通片的质量控制方法.     

灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片对大鼠实验性脑缺血防治作用的比较研究

目的 比较灯盏乙素、灯盏乙素PEG衍生物和灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片对大鼠实验性脑缺血的防治作用.方法 采用大鼠大脑中动脉线栓（MCAO）法制备局灶性脑缺血/复灌损伤模型（I/R）, 随机分为假手术组,模型组,灯盏乙素PEG衍生物组和灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片组,均以等剂量灯盏乙素注射给药,观察各组对脑缺血大鼠神经功能、脑梗死体积的影响.结果 模型组大鼠神经功能缺损严重,而给药组神经功能得到有效的保护;在所有给药组中,灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片组对实验性脑缺血组织的保护作用最优,其脑梗死体积为10.28%.结论 灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片对大鼠实验性脑缺血的防治作用优于灯盏乙素及灯盏乙素PEG衍生物.     

五味子在神经内科疾病用药体会

五味子为木兰科五味子属和南五味子属植物的泛称。现代科学研究证明,五味子中含有挥发油、有机酸、维生素、木脂素、三萜、倍半萜及多糖等多种化学成分[1],是中医的常用药物之一,具有收敛固涩、益气生津、补肾宁心的功能。笔者应用五味子为主组方治疗神经内科疾病,取得一定疗效,现结合典型病例报道如下:     

RP-HPLC法测定消痛灵中延胡索乙素含量的方法研究

目的:建立消痛灵中延胡索乙素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:C18(250 mm×4.6 mm,5μm)(大连依利特);流动相:甲醇-0.01%磷酸溶液(三乙胺调p H=6.0,34∶66);柱温:25℃;检测波长:280 nm;流速:1.0 m L/min。结果 :本实验研究最终建立了消痛灵中延胡索乙素的含量测定方法。结论:高效液相色谱法简单、准确、重现性好,可做为消痛灵质量控制方法之一。     

灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片对大鼠实验性脑缺血防治作用的比较研究

目的比较灯盏乙素、灯盏乙素PEG衍生物和灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片对大鼠实验性脑缺血的防治作用。方法采用大鼠大脑中动脉线栓(MCAO)法制备局灶性脑缺血/复灌损伤模型(I/R),随机分为假手术组,模型组,灯盏乙素PEG衍生物组和灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片组,均以等剂量灯盏乙素注射给药,观察各组对脑缺血大鼠神经功能、脑梗死体积的影响。结果模型组大鼠神经功能缺损严重,而给药组神经功能得到有效的保护;在所有给药组中,灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片组对实验性脑缺血组织的保护作用最优,其脑梗死体积为10.28%。结论灯盏乙素PEG衍生物配伍冰片对大鼠实验性脑缺血的防治作用优于灯盏乙素及灯盏乙素PEG衍生物。     

冬凌草乙素对U937细胞的生长抑制作用及β-catenin表达水平的影响

目的:探讨冬凌草乙素对U937细胞的生长抑制作用及其作用机制.方法:以不同浓度的冬凌草乙素作用于体外培养的U937细胞,MTF法检测细胞生长抑制率,应用hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡;采用RT-PCR对细胞凋亡前后β-catenin的表达水平进行检测.结果:冬凌草乙素可显著抑制细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,呈现出明显的量-效与时-效关系.在冬凌草乙素抑制细胞增殖过程中β-catenin的表达水平显著下降.结论:冬凌草乙素能抑制U937细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,降低β-catenin的表达水平可能是其重要作用机制之一.这为冬凌草乙素抗白血病的进一步研究提供了有力的实验依据.