胃癌淋巴管生成与淋巴管密度的相关性研究

胃癌的发病率日益增加,而淋巴转移是导致患者最终死亡的重要原因之一.血管内皮生长因子C(VEGF-C)、血管内皮生长因子D(VEGF-D)与其特异性的受体血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)结合能够促进淋巴管生成,并促进淋巴管转移,并且与肿瘤的淋巴管密度密切相关.近年来对于胃癌的淋巴管的研究正在开展,本文就胃癌淋巴管生成机制、淋巴管生成与淋巴管密度关系的最新研究进展以及此项研究的临床意义加以综述.     

胃癌淋巴管生成与淋巴结转移的关系

目的:研究胃癌淋巴管生成与淋巴结转移的关系。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)mRNA及其蛋白在5株胃癌细胞株和3对伴有淋巴结转移的胃癌组织及相应的正常黏膜中的表达。此外,还应用免疫组织化学方法检测86例胃癌标本的淋巴管密度(LVD)和VEGF-C蛋白的表达。结果:VEGF-C mRNA和蛋白高表达于3株胃癌细胞,而VEGFR-3 mRNA和蛋白在上述3个细胞株中均呈弱表达。VEGF-C和VEGFR-3 mRNA均表达于3对伴有淋巴结转移的胃癌和相应的正常黏膜组织中,但在正常组织中的表达水平低于肿瘤组织。VEGF-C蛋白在66.3%(57/86)的病例中呈阳性表达。在伴淋巴结转移的胃癌中,VEGF-C表达较无淋巴结转移者更显著(P<0.001),其表达与淋巴管浸润(P<0.001)和TNM分期(P<0.01)均密切相关,但与病人的年龄和性别、肿瘤大小、位置、组织学类型、浸润深度及远处转移均无明显相关。LVD则与VEGF-C蛋白表达(P<0.001)、淋巴结转移(P<0.01)、淋巴管浸润(P<0.01)、TNM分期(P<0.05)及组织学类型(P<0.05)密切相关,但与病人的年龄和性别、肿瘤大小、位置、浸润深度及远处转移无明显相关。结论:在胃癌中,VEGF-C可能通过VEGFR-3信号通道促进淋巴管生成,从而增加胃癌淋巴结转移率。因此,肿瘤淋巴管生成可能成为治疗胃癌的一个新靶点。     

血管内皮生长因子D促进胃癌淋巴管生长

目的研究血管内皮生长因子D（VEGF-D）与胃癌淋巴管转移之间的关系。方法采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）从人胃癌旁正常组织中扩增人VEGF-D全长cDNA，经T-A克隆酶切鉴定及测序得到完整的序列后，亚克隆并构建pEGFP／VEGF-D真核表达载体，转染低表达VEGF-D的胃癌细胞株SGC7901，通过体外G418抗生素筛选得到高表达VEGF-D的肿瘤细胞克隆，用这种高表达VEGF-D的胃癌细胞接种于裸鼠皮下，用淋巴管内皮细胞透明质酸盐受体（LYVE-1）行免疫组织化学染色观察肿瘤淋巴管密度和形态。结果对照组和转染pEGFP／VEGF-D组肿瘤的重量分别为（1．13±0．40）g和（2．24±0．82）g，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。肿瘤组织内的淋巴管密度分别为2．89±1．32和5．74±1．30，两组差异有统计学意义（P〈0．01）。周边肿瘤组织存在扩张的功能性淋巴管。结论VEGF-D在胃癌中可能通过主动促进淋巴管生长来促进肿瘤生长和远处转移。     

PPARγ辅激活因子1α在胃癌中的表达及临床意义

目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC1α)在胃癌组织中的表达情况及其临床意义。方法选取随访资料完整的99例胃癌组织标本,利用免疫组化技术检测胃癌组织中PGC1α的表达情况,并分析PGC1α表达与临床病理特征之间的关系及对生存预后的影响。结果 PGC1α在胃癌患者中的表达水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移、pTNM分期、组织分化程度及Borrmann分型密切相关(P0.05),而与复发、肿瘤大小、远处转移、性别及年龄无关(P0.05)。COX回归分析结果显示PGC1α的表达水平与总生存预后(OS)及无复发生存预后(RFS)密切相关,差异具有统计学意义(P=0.024),是胃癌患者预后的独立预测因素。结论PGC1α的表达水平与胃癌患者OS和RFS明显相关,其高表达是胃癌患者预后的独立保护因素。     

淋巴管透明质酸受体1和血管内皮生长因子受体3在胃癌组织中的表达

目的以淋巴管透明质酸受体1（LYVE-1）和血管内皮生长因子受体3（VEGFR-3）作为淋巴管特异性标志物,研究胃癌组织和癌周组织中淋巴管的生成表达情况。方法应用免疫组织化学和Real—time聚合酶链反应的方法检测62例胃癌、癌周组织中的LYVE-1和VEGFR－3蛋白及其mRNA表达情况,计算淋巴管的密度（LVD）,检测淋巴管mRNA的相对含量。结果胃癌组织周边区淋巴管的密度高于胃癌组织中心区,而癌旁正常组织中很少见LYvE-1和VEGFR-3染色阳性的微淋巴管;胃癌组织周边区LVD和胃癌组织中LYVE-1和VEGFR-3 mRNA含量与胃癌组织浸润深度、淋巴结转移、肿瘤分期及术后复发有关（P〈0．05）。结论LYVE-1是一种特异性高于VEGFR-3的淋巴管内皮特异性标志物,淋巴管生成促进胃癌发展及淋巴结转移。     

血管内皮生长因子-C、D对大肠癌的预后判断价值

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)-C和VEGF-D在大肠癌中的表达,探讨其在大肠癌预后判断中的价值。方法抽取1996年1月至1998年1月于我院行大肠癌根治术且接受正规随访的大肠癌病例69例;采用EnVision免疫组织化学技术检测VEGF-C和VEGF-D在69例大肠癌及20例正常大肠组织的表达;采用抗CD34免疫组织化学技术评价大肠癌微血管密度(MVD);采用Axioplan 2 imaging显微图像分析系统对免疫组织化学染色结果进行定量分析。结果69例患者平均随访(68.96±32.79)个月,中位随访87个月,108个月无病生存率与总生存率分别为51.44%和60.07%。大肠癌VEGF-C和VEGF-D表达显著高于相应正常大肠组织(P<0.01);VEGF-C表达与大肠癌淋巴结转移及临床分期显著相关(P<0.05);VEGF-D表达与大肠癌患者年龄(≤68;>68岁)、淋巴结转移及肿瘤浸润深度显著相关(P<0.05)。VEGF-C和VEGF-D表达与大肠癌MVD显著相关(P<0.05);VEGF-C和/或VEGF-D高表达的大肠癌患者组总生存期和无病生存期均显著低于VEGF-C和/或VEGF-D低表达患者组(P<0.05)。结论VEGF-C和VEGF-D在大肠癌中异常高表达,且与大肠癌淋巴结转移、临床分期、无病生存与总生存率显著相关,可作为临床大肠癌预后判断标志物。     

VEGF-C、VEGF-D信号通路与肿瘤的淋巴管生成

肿瘤的区域(前哨)淋巴结转移是肿瘤远处播散的第一步,并且可以看做是肿瘤预后的一个重要标志.新近的研究表明,肿瘤的淋巴管生成和淋巴结转移密切相关.肿瘤细胞转移至前哨淋巴结后,可以继续促进淋巴管的生成,从而进一步促进肿瘤细胞的远处转移.血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子-D(VEGF-D)是首先发现的特异性淋巴管生成因子,许多临床试验表明,VEGF-C和VEGF-D的表达与肿瘤的淋巴转移密切相关.目前又发现了与淋巴管生成有关的其他细胞因子,如VEGF-A.最为重要的是,采用特异性抗体、可溶性受体结构或小的膜激酶抑制剂阻断细胞因子作用的信号途径,可以有效地阻止肿瘤淋巴管的生成,这也为肿瘤的治疗提供了一个新的途径.     

VEGF-C、VEGF-D信号通路与肿瘤的淋巴管生成

肿瘤的区域(前哨)淋巴结转移是肿瘤远处播散的第一步,并且可以看做是肿瘤预后的一个重要标志.新近的研究表明,肿瘤的淋巴管生成和淋巴结转移密切相关.肿瘤细胞转移至前哨淋巴结后,可以继续促进淋巴管的生成,从而进一步促进肿瘤细胞的远处转移.血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子-D(VEGF-D)是首先发现的特异性淋巴管生成因子,许多临床试验表明,VEGF-C和VEGF-D的表达与肿瘤的淋巴转移密切相关.目前又发现了与淋巴管生成有关的其他细胞因子,如VEGF-A.最为重要的是,采用特异性抗体、可溶性受体结构或小的膜激酶抑制剂阻断细胞因子作用的信号途径,可以有效地阻止肿瘤淋巴管的生成,这也为肿瘤的治疗提供了一个新的途径.     

VEGF-C、VEGF-D信号通路与肿瘤的淋巴管生成

肿瘤的区域(前哨)淋巴结转移是肿瘤远处播散的第一步,并且可以看做是肿瘤预后的一个重要标志.新近的研究表明,肿瘤的淋巴管生成和淋巴结转移密切相关.肿瘤细胞转移至前哨淋巴结后,可以继续促进淋巴管的生成,从而进一步促进肿瘤细胞的远处转移.血管内皮生长因子-C(VEGF-C)和血管内皮生长因子-D(VEGF-D)是首先发现的特异性淋巴管生成因子,许多临床试验表明,VEGF-C和VEGF-D的表达与肿瘤的淋巴转移密切相关.目前又发现了与淋巴管生成有关的其他细胞因子,如VEGF-A.最为重要的是,采用特异性抗体、可溶性受体结构或小的膜激酶抑制剂阻断细胞因子作用的信号途径,可以有效地阻止肿瘤淋巴管的生成,这也为肿瘤的治疗提供了一个新的途径.     

Prognostic Significance of VEGF Expression in Correlation With COX-2, Microvessel Density,and Clinicopathological Characteristics in Human Gastric Carcinoma

Background Many studies have shown that angiogenesis plays an important role in the process of cancer development and progression. Vascular endothelial growth factor (VEGF) has a potent angiogenic activity, and cyclooxygenase-2 (COX-2) supports angiogenesis by regulated production of angiogenic factors, including VEGF. The purpose of this study was to examine the expression of VEGF in combination with COX-2 and CD34, their correlation with various clinicopathological factors, and their prognostic significance in human gastric carcinoma. Methods Specimens from 169 patients with different grade and stage gastric carcinoma were investigated by immunohistochemistry for COX-2 and VEGF expression. Tumor microvessel density was assessed with CD34 immunostaining. Correlations between the expression of VEGF, COX-2, CD34, and various clinicopathological factors were studied. The effect of these proteins on patient survival was determined. Results COX-2 and VEGF were positively expressed in 36.7% and 50.3% of the patients, respectively. Positive correlation was found between VEGF and COX-2 and between VEGF and CD34. VEGF expression was correlated with depth of invasion; metastatic lymph nodes; lymphatic and venous invasion; and tumor, node, metastasis system stage. Patients with positive staining for VEGF showed far lower disease-free (64.9% vs. 81.3%) and overall (58.3% vs. 76.9%) survival rates than VEGF-negative patients. In multivariate analysis, only tumor location, depth of invasion, and lymph node metastasis were shown to be independent prognostic factors. Conclusions VEGF expression correlates with angiogenesis and tumor progression and is a valuable prognostic factor in patients with gastric carcinoma.     

p53、c-erbB-2和组织蛋白酶D与腋窝淋巴结阴性乳腺癌患者预后的关系

目的：探讨p53,c-erbB-2和组织蛋白酶D（cathepsinD)在评估腋窝淋巴结阴性乳腺癌（NNBC）患者预后中的价值,方法：用免疫组织化方法,检测110例T1－2N0M0期乳腺癌患者原发灶癌组织中p53,c-erbB-2和cathepsinD水平,并用单因素和多因素统计方法对其结果与肿瘤的临床特征有患者预后之间的关系进行了分析,结果：本组肿瘤直径＞3cm的患者比＜3cm 患者的远处转移率高,无瘤生存率和总生存率下降,差异有显著性意义（分别P＜0．03,P＜0．01,P＜0．05）,cathepsin阴性患者的肿瘤远处转移率,无瘤生存率,分别为8．25％,82．61％,阳性患者为33．06%,57．41％,差异均有极显著性意义（P＜0．01）,c-erbB-2 阴性患者及p53表达状态与患者的肿瘤远处转移率,无瘤生存率和总生存率无关,62例未作全身治疗的患者,cathepsin阴性患者的肿瘤远处转移率,无瘤生存率、分别为8．92％,77．04％,阳性患者为44．61％,43．46％,差异均有极显著性意义（P＜0．01）,c-erbB-2阴性患者的肿瘤远处转移率,无瘤生存率,和总生存率分别为16．70％,70．11％,88．30％,阳性患者为41．26％,44．44％,68．65％,差异均有显著性意义（P＜0．05）,53表达状态与患者的肿瘤远处转移率,无瘤生存率和总生存率无关,多因素分析表明肿瘤大小和cethepsinD表达水平与患者的远处转移率,无瘤生存率和总生存率无关,多因素分析表明肿瘤大小和cathepsinD表达水平与患者的远处转移率,无瘤生存率无关（P＜0．05）,48例接受全身治疗的患者p53,c-erbB-2及cathepsinD的表达状态与患者预后无关,结论：肿瘤大小和cathepsinD 水平可作为评估腋窝淋巴结阴性乳腺癌患者预后的独立指标,对患者治疗方案的选择具有一定的指导意义。     

胃癌局部神经侵犯的临床研究

目的：探讨胃癌局部神经侵犯（PNI）的临床意义。方法：对110例胃癌根治手术的病理组织行苏木素-伊红染色,肿瘤细胞侵犯神经束或神经束膜为PNI阳性。结果：110例中PNI阳性49例,PNI与肿瘤大小、浸润深度、区域淋巴结转移、TNM分期、脉管癌栓、断端阳性有显著相关性,与性别、年龄、肿瘤部位及远处转移无相关性。结论：胃癌周围神经侵犯与肿瘤的进展密切相关,但不是影响预后的独立因素。     

人类快速延迟整流性钾通道蛋白与血管内皮生长因子在胃癌组织中的表达及其目互关系

目的 观察人类快速延迟整流性钾通道基因表达的钾离子通道蛋白( HERG1)和血管内皮生长因子(VEGF)在胃癌组织中的表达,探讨两者与胃癌预后的关系.方法 应用免疫组织化学方法(SP法)、逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)技术方法对80例胃癌组织标本及对应正常胃黏膜组织中的HERG1蛋白和VEGF的表达进行检测,并进行回顾性随访.结果 免疫组织化学、RT-PCR检测胃癌组织中HERG1的阳性表达率分别为60％、90％,VEGF的阳性表达率分别为55％、85％;HERG1蛋白表达与淋巴结转移,远处转移关系密切;VEGF的表达与胃癌的浸润程度、TNM分期、分化程度、淋巴结转移明显相关(P＜0.05),而与性别、肿瘤大小、部位无明显相关.结论 HERG1蛋白和VEGF的过度表达与胃癌的发生发展有关,在肿瘤侵袭、转移过程中起重要作用,其共位表达有助于判断胃癌预后.     

Lymphatic vessel density, microvessel density and lymphangiogenic growth factor expression in colorectal cancer

OBJECTIVE: Microvessel density (MVD) has been studied as a prognostic marker in human cancers. Quantification of lymphatic vessel density (LVD) is now possible by using new antibodies. Expression of the lymphangiogenic growth factors, VEGF-C and VEGF-D, is associated with poorer clinicopathological outcomes in various tumours. The aim of this study was to quantify LVD and MVD in colorectal cancer, determine the relationship between LVD, MVD and clinicopathological variables and examine the relationship between LVD and tumour expression of VEGF-C and VEGF-D. METHOD: Thirty primary colorectal cancers were immunostained for CD34, lymph vessel endothelial hyaluronan receptor-1 (LYVE-1), VEGF-A and VEGF-D using standard techniques. LVD and MVD were determined by Chalkley grid counting. Tumours were assessed for the presence or absence of LYVE-1 positive lymphatics at different areas within the tumour and the tumour was scored for VEGF-C and VEGF-D immunostaining intensity at the invading tumour edge. Non-parametric tests were used for statistical analysis and a P-value of <0.05 was taken as significant. RESULTS: Lymph vessel endothelial hyaluronan receptor-1 was an excellent lymphatic vessel marker. Within normal bowel wall, lymphatic vessels were found rarely in the superficial colonic mucosa, but were numerous in the submucosa and muscularis propria. In the majority of tumours, lymphatic vessels were located in the peri-tumoural area, intra-tumoural vessels were sparse and tended to be narrow with closed lumina. At the invading tumour edge, VEGF-C expression was higher (P = 0.028) and VEGF-D expression lower (P = 0.011), in tumours in which lymphatic vessels were present. No significant differences between LVD and any clinicopathological variable or route of metastasis were identified. CONCLUSION: Lymphatic vessel density and MVD can be quantified in colorectal carcinoma using immunohistochemical techniques. The balance between expression of VEGF-C and VEGF-D at the invading tumour edge may enhance lymphatic metastasis, by promoting tumour lymphangiogenesis or by activation of pre-existing lymphatic vessels. No relationship was identified between LVD and clinicopathological variables.     

VEGF-C和MMP-7的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的 探讨胃癌中血管内皮生长因子C（VEGF-C）和基质金属蛋白酶7（MMP-7）的表达及两者与胃癌侵袭和淋巴结转移的关系。方法 采用SP免疫组化技术，分别检测60例胃癌组织、癌旁组织及30例癌周区域淋巴结中VEGF-C及MMP-7的表达水平。结果 VEGF-C和MMP-7在胃癌组织中的阳性表达率明显高于正常胃黏膜及癌旁组织；在区域淋巴结癌转移组中的阳性表达率明显高于无癌转移组（P〈0．01）；伴有淋巴结转移的胃癌组织中VEGF-C，MMP-7的阳性表达率明显高于无淋巴结转移组（P〈0．05）；VEGF-C，MMP-7表达与淋巴结转移、淋巴管侵犯、浸润深度、TNM分期有密切关系（P〈0．05）。结论 VEGF-C和MMP-7在胃癌中的高表达与胃癌浸润侵袭程度、淋巴结转移有密切关系。     

Notch1/DLL4信号通路与VEGF在胃癌浸润和转移中的作用及其相关性

目的：探讨Notch1和其配体DLL4蛋白在胃癌组织中的表达及其与肿瘤血管转移之间的关系。
方法：采用免疫组织化学SP法检测45例胃癌及25例癌旁正常组织中Notch1,DLL4,VEGF的表达情况,并分析它们与各临床病理参数的关系。
结果：Notch1,DLL4,VEGF蛋白在胃癌中表达的阳性率均明显高于正常胃黏膜组织,差异均有统计学意义（P＜0.01）。Notch1蛋白在胃癌中表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移（P＜0.01）及远处转移（P＜0.05）有关;DLL4蛋白在胃癌中表达与肿瘤浸润深度（P＜0.01）,淋巴结转移及临床分期（P＜0.05）有关;VEGF蛋白在胃癌中表达与浸润深度（P＜0.01）、淋巴结转移、远处转移及TNM分期（P＜0.05）有关,上述各因素分组间差异有统计学意义。Notch1,DLL4,VEGF蛋白的表达三者两两间均呈正相关关系（rs=0.355,rs=0.367,rs=0.334;均P＜0.05）。
结论：Notch1/DLL4受体通路在胃癌组织中的表达上调与血管内皮生长因子有关,它们可能共同调控肿瘤新生血管形成,参与胃癌的侵袭和转移。     

Lymphodynamic factors governing lymphatic spread of carcinoma cells]

Carcinoma frequently spreads and grows through the lymphatic system, whereas malignant tumors of mesenchymal origin more frequently spread via the hematogenous route. This paper reviews cancer spread with special reference to tumor microcirculation, vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR)-3-mediated lymphangiogenesis, regeneration of collecting lymph vessels, and the role of nitric oxide in lymphatic metastasis. Oxygen and pH are key microenvironmental factors in the development and growth of tumors and their response to treatment. Thus the physiological and pathophysiological roles of hypoxia and acidic pH in the tumor microenvironment in lymphatic metastasis are demonstrated. Lymph angiogenesis in tumor tissues and regeneration of collecting lymph vessels with special reference to VEGFR-3 and its agonists VEGF-C/VEGF-D are discussed. The occurrence and biological significance of intratumoral lymph angiogenesis in breast cancer have been established. VEGF-C as a molecular link between tumor lymph angiogenesis and metastasis is identified. Finally, the role of nitric oxide (NO) in tumor microcirculation and lymphatic metastasis of carcinoma cells is evaluated.     

检测不同生物学行为肾癌内LVD和MVD的临床意义

目的探讨淋巴管和微血管在不同生物学行为肾细胞癌（RCC）组织内的密度及其临床应用价值。方法40例肾细胞癌按其不同的生物学行为特点分为长期生存组和肿瘤转移组。肿瘤组织切片分别以针对血管内皮生长因子受体-3（VEGFR-3）和淋巴内皮透明质酸受-体1（LYVE-1）的单克隆抗体实施免疫组化染色,并对瘤组织内微血管和淋巴管进行计数。结果VEGFR-3非特异地表达于微血管和淋巴管内皮细胞浆,而LYVE-1仅特异地表达于淋巴管内皮细胞浆中。转移组瘤内MVD显著高于长期生存组（P〈0.05）。LYVE-1在转移组中仅有3例瘤内显示阳性。结论MVD可作为判断RCC患者预后的可靠指标。RCC缺乏瘤内淋巴管形成。     

血管内皮生长因子-C和生存素在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）-C和生存素（sunrivin）蛋白表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学SP法检测97例原发性胃癌组织、癌旁组织及20例正常胃黏膜组织中VEGF-C和survivin蛋白的表达，并分析其与临床病理特征和预后的关系。结果 胃癌组织VEGF-C和survivin蛋白表达阳性率分别为66．0％和57．2％，显著高于癌旁组织和正常胃组织（P〈0．05）；VEGF-C蛋白表达与肿瘤分化程度、肿瘤部位、肿瘤直径、静脉侵犯及远处转移等无关，但与淋巴结转移、淋巴管侵犯、浆膜面受累和肿瘤TNM分期等密切相关；survivin蛋白表达与肿瘤分化程度、肿瘤部位、肿瘤直径、静脉侵犯等无关，但与浆膜面受累、淋巴管侵犯、淋巴结转移、远处转移和肿瘤TNM分期等密切相关；VEGF-C和survivin阳性表达组术后生存率明显低于阴性组；VEGF-C和survivin在胃癌组织中阳性表达呈正相关。结论 VEGF-C及survivin蛋白的阳性表达可作为胃癌预后不良的参考指标。