PML-RARα反义核酸增强NB4细胞对硒化壳聚糖诱导分化作用敏感性的探讨

[目的]研究PML-RARα反义核酸(antisense oligodexynucleotide,ASODN)对硒化壳聚糖诱导的NB4细胞分化敏感性的影响. [方法]人工合成PML-RARαASODN经阳离子脂质体包裹后瞬时转染NB4细胞,采用RT-PCR检测转染后PML-RARα基因表达情况,通过镜下观察细胞形态改变,NBT法观察细胞功能变化及流式法检测细胞膜CD11抗原表达来观测细胞分化. [结果]经PML-RARαASODN处理的NB4细胞PML-RARα基因表达明显下调,PML-RARα基因的反义核酸和硒化壳聚槠均能提高细胞NBT还原率,升高CD11b抗原,二者合用,则NBT还原率和CD11b抗原表达进一步增强.[结论]阳离子脂质体转染PML-RARαASODN具有促进硒化壳聚糖诱导NB4细胞分化作用的敏感性.     

As2O3对NB4细胞增殖及凋亡的影响

目的研究不同浓度的三氧化二砷（As2O3）对急性粒细胞白血病细胞株NB4（APLM3）凋亡及细胞周期的影响。方法采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法测As2O3对NB4的细胞毒活性，流式细胞仪AnnexinVFITC-PI检测细胞凋亡率，溴化丙碇（PI）染色法检测细胞周期。结果1～8μmol／LAs2O3能显著抑制NB4细胞增殖，且这些变化呈明显的时间和浓度依赖关系（时间一剂量效应）。2～8μmol／LAs2O3能显著诱导NIM细胞凋亡，处理时间为12h，其早期凋亡率和总凋亡率均与剂量呈线性正相关；处理时间为24h，其早期凋亡率、中晚期凋亡率和总凋亡率与剂量呈线性正相关；As2O3处理时间为36h和48hNB4细胞以中晚期调亡为主。流式细胞检测表明，不同浓度的As2O3均使NB4细胞周期阻滞在G2／M期。结论As2O3能抑制人白血病NB4细胞增殖，其作用机制可能是通过诱导细胞凋亡和抑制细胞增殖使细胞受阻于G2／M期。其诱导凋亡作用具有时间和浓度依赖关系。     

碘过量对仔鼠脑α-微管蛋白表达的影响及硒的干预作用

目的研究碘过量摄入对小鼠仔鼠脑α-tubulin基因表达的影响及硒的干预作用。方法将60只BALB/c小鼠随机分为四组正常对照组(饮用自来水,NC)、碘过量组(饮水含碘3000μg/L,EI+)、补硒组(饮水含Se200μg/L,Se+)、碘过量加硒(饮水含碘3000μg/L+Se200μg/L,EI+Se+)组。以纯系鼠饲料饲养。4个月后,雌雄交配。测定D14和D28仔鼠血清总T4和总T3水平,分别用实时荧光定量PCR和Western Blot测定D0、D14和D28仔鼠大脑组织α-微管蛋白和α-微管蛋白mRNA表达。结果D14仔鼠血清T4水平碘过量组显著低于对照组和碘过量加硒组(P<0.05)。D0仔鼠脑组织α-微管蛋白mRNA水平碘过量组显著低于对照组、单独补硒组和碘过量补硒组(P<0.05)。14d仔鼠脑组织α-微管蛋白mRNA和蛋白表达水平碘过量组显著高于其它组(P<0.05)。碘过量和补硒对D28仔鼠血清T4水平和脑组织α-微管蛋白表达水平无明显影响。结论碘过量引起仔脑α-微管蛋白的发育迟滞,补硒具有缓解作用。     

硒对镉诱导的雄性SD大鼠肝细胞c-myc和p53蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的 探讨不同剂量亚硒酸钠对氯化镉诱导的雄性SD大鼠肝细胞的凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达的影响.方法 将65只健康SPF级SD雄性大鼠随机分为13组,分别设对照(生理盐水)组、氯化镉(5.0、10.0、20.0 μmol/kg)组及亚硒酸钠(2.5、5.0、10.0 μmol/kg)+氯化镉(5.0、10.0、20.0 μmol/kg)联合作用组,每组5只.氯化镉采用一次性腹腔注射染毒,亚硒酸钠采用一次性灌胃染毒.染毒后48 h,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化法测定c-Myc和P53蛋白的表达量.结果 与相同剂量氯化镉组相比,亚硒酸钠剂量为2.5 μmol/kg时,全部联合作用组的大鼠肝细胞凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达均降低(P＜0.05或P＜0.01);而亚硒酸钠剂量为5.0、10.0 μmol/kg时,部分联合作用组的大鼠肝细胞凋亡率、c-Myc和P53蛋白表达降低(P＜0.05或P＜0.01).大鼠细胞凋亡率与c-Myc、P53蛋白表达量均呈正相关(P＜0.01).结论 2.5 μmol/kg的亚硒酸钠对氯化镉所诱导的大鼠肝细胞的凋亡及c-Myc和P53蛋白表达的升高具有一定的拮抗作用.     

新生儿持续肺动脉高压血清正五聚蛋白3、硒蛋白P的表达及其与短期预后的关系

目的探讨不同病情严重程度新生儿持续肺动脉高压(PPHN)血清正五聚蛋白3(PTX-3)、硒蛋白P(SeP)的表达及其与短期预后的关系。方法选择2019年5月至2021年7月河北省邯郸市中心医院收治的173例PPHN患儿为研究组,根据患儿病情严重程度分为轻度组58例、中度组60例与重度组55例,另选择本院同时间段39例足月分娩正常新生儿为对照组,检测并比较各组血清PTX-3、SeP水平。随访28天后根据患儿的预后分为生存组151例与死亡组19例,多因素Logistic回归分析影响PPHN患儿治疗后28天内死亡的因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线及计算曲线下面积(AUC)判定PTX-3、SeP水平对其的预测价值。结果重度组、中度组、轻度组及对照组血清PTX-3、SeP水平均依次降低,差异有统计学意义(F值分别为91.456、278.351,P<0.05);多因素Logistic回归结果显示,新生儿低血压、新生儿酸中毒、血清PTX-3高水平、血清SeP高水平为PPHN患儿治疗后28天内死亡的危险因素(OR值介于1.136~2.823之间,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清PTX-3、SeP水平及二者联合预测PPHN患儿治疗后28天内死亡的AUC(95%CI)分别为0.761(0.563~0.958)、0.749(0.570~0.923)、0.836(0.725~0.946)。结论PPHN患儿血清PTX-3、SeP水平随着病情的加重而升高,合并新生儿低血压、新生儿酸中毒及治疗前高水平血清PTX-3、SeP的PPHN患儿,短期死亡风险较高。治疗前血清PTX-3、SeP水平对PPHN患儿短期预后预测具有一定的价值,且联合检测的预测价值更高。     

脂氧素A_4对人滋养细胞分泌TNF-α和hCG的影响

目的研究脂氧素A_4对脂多糖(LPS)诱导的人滋养细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和人绒毛膜促性腺激素(h CG)的影响,为临床病理妊娠的治疗提供理论依据。方法取正常早孕(6～10周)妇女胚胎绒毛,分离并培养人滋养细胞,分为对照组、脂氧素A_4组、LPS组和LPS+脂氧素A_4组,各组细胞培养24 h后,采用酶联免疫法检测各组细胞上清液中TNF-α和h CG的分泌水平。结果 LPS组TNF-α水平明显高于对照组和脂氧素A_4组(P0. 05);与LPS组相比,LPS+脂氧素A_4组TNF-α水平显著下降(P0. 05),但仍高于脂氧素A_4组和对照组(P0. 05);脂氧素A_4组TNF-α浓度与对照组比较,差异无统计意义(P=0. 517); LPS组h CG水平明显低于对照组和脂氧素A_4组(P0. 05),LPS+脂氧素A_4组h CG水平高于LPS组(P0. 05),但低于脂氧素A_4组和对照组(P0. 05),脂氧素A_4组和对照组比较,差异无统计学意义(P=0. 061)。结论LPS促进滋养细胞分泌TNF-α,抑制滋养细胞分泌h CG,而脂氧素A_4能下调TNF-α水平,上调滋养细胞h CG的分泌。     

宫颈癌组织中Prdx4蛋白表达变化及其对肿瘤细胞增殖凋亡的影响

目的探讨宫颈癌组织中过氧化物还原酶4(Prdx4)蛋白表达变化及其对肿瘤增殖凋亡的影响。方法收集2013年6月-2016年9月长治医学院附属和济医院收治的宫颈癌患者90例作为观察组,另取同期在该院进行化验的宫颈炎患者58例作为对照组。检测入组患者宫颈标本组织中Prdx4蛋白表达量,根据观察组Prdx4蛋白表达量中位数进一步分为高Prdx4蛋白表达组、低Prdx4蛋白表达组各45例。采用RT-PCR法检测各组患者宫颈组织中的增殖、凋亡及自噬基因mRNA表达量。结果观察组患者宫颈Prdx4蛋白表达量显著高于对照组(P0.05);高Prdx4蛋白表达组、低Prdx4蛋白表达组患者宫颈组织增殖基因内皮细胞特异性生长因子B2(ephrin B2)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、肿瘤抗原2(Piwil2)mRNA表达量高于对照组,鸟苷酸结合蛋白1(GBP1)mRNA表达量低于对照组,Prdx4蛋白表达增加,增殖基因ephrin B2、HIT-1α、Piwil2 mRNA表达量上升,GBP1 mRNA表达量下降(P0.05);高Prdx4蛋白表达组、低Prdx4蛋白表达组患者宫颈组织凋亡基因表皮脂肪酸结合蛋白-5(FABP-5)、肿瘤坏死因子α诱导的蛋白8(TNFAIP8)、存活蛋白(Survivin)、肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)mRNA表达量高于对照组,神经元衍生的孤核受体1(NOR1)mRNA表达量低于对照组,Prdx4蛋白表达量增加,凋亡基因FABP-5、TNFAIP8、Survivin、Pin1 mRNA表达量上升,NOR1 mRNA表达量下降(P0.05);高Prdx4蛋白表达组、低Prdx4蛋白表达组患者宫颈组织自噬基因ARHI、Beclin1 mRNA表达量低于对照组,Cathepsin-D mRNA表达量高于对照组,Prdx4蛋白表达量增加,自噬基因ARHI、Beclin1 mRNA表达量降低,Cathepsin-D mRNA表达量上升(P0.05)。结论 Prdx4蛋白表达增加可促使宫颈癌细胞增殖、抑制正常凋亡,是宫颈癌发生、发展的重要原因。     

子痫前期胎盘组织中LAMA4蛋白表达量及其与滋养细胞侵袭、胎盘缺氧的相关性

目的探讨子痫前期胎盘组织中层粘连蛋白α4链(LAMA4)蛋白表达量及其与滋养细胞侵袭、胎盘缺氧的相关性。方法收集2012年5月-2016年5月在该院接受治疗及分娩的子痫前期患者56例作为观察组;另选取同期进行产检及分娩的正常产妇50例作为正常对照组。根据胎盘组织中LAMA4蛋白表达中位数,观察组患者被分为高LAMA4蛋白组和低LAMA4蛋白组,每组各28例。采用Western-Blot法检测胎盘组织中LAMA4蛋白表达量;采用荧光定量PCR法检测胎盘组织中滋养细胞侵袭相关基因mRNA表达量;采用化学发光法检测脐血中胎盘缺氧相关指标含量。结果观察组胎盘组织LAMA4蛋白表达量低于正常对照组(P0.05);高LAMA4蛋白组、低LAMA4蛋白组胎盘组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PLGF)mRNA表达量低于正常对照组,可溶性fms-样酪氨酸激酶受体-1(sFlt1)mRNA表达量高于正常对照组,脐血胎盘缺氧指标,缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、缺氧诱导因子脯氨酸羟化酶-1(HPH-1)、瘦素含量均高于正常对照组(P0.05);高LAMA4蛋白组胎盘组织中MMP-9、VEGF、PLGFmRNA表达量高于低LAMA4蛋白组,sFlt1mRNA表达量低于低LAMA4蛋白组,脐血胎盘缺氧指标HIF-1α、HPH-1、瘦素含量低于低LAMA4蛋白组(P0.05)。结论子痫前期胎盘组织中LAMA4蛋白表达量减少,具体LAMA4蛋白表达水平与滋养细胞侵袭呈正相关,与胎盘缺氧程度呈负相关。     

SLC4A11通过JAK信号通路对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的：探讨溶质转运家族4成员11蛋白(SLC4A11)在卵巢癌增殖、迁移和侵袭中的生物学作用机制。方法：RT-qPCR检测卵巢癌细胞中SLC4A11表达。将SKOV3细胞分为对照组(转染siRNA-NC序列)、SLC4A11-siRNA组(干扰SLC4A11表达)和SLC4A11-siRNA+JAK组(干扰SLC4A11表达+激活JAK信号通路)。采用CCK-8、伤口愈合实验和Transwell实验检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。RT-qPCR和Western blot检测Janus激酶2(JAK2)和信号传导及转录激活因子3(STAT3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)表达。结果：SLC4A11在卵巢癌组织中高表达(P<0.05)。SLC4A11-siRNA组SKOV3细胞中p-JAK2/JAK2(0.286±0.048)、p-STAT3/STAT3(0.571±0.042)、Bcl-2(0.335±0.040)均低于对照组(1.001±0.093、1.004±0.089、1.005±0.142),也低于SLC4A11-siRNA+JAK组[p-JAK2/JAK2(1.001±0...     

不同气腹压力对妇科患者TNF-α与缺血修饰蛋白水平的影响研究

目的探讨不同气腹压力对妇科患者TNF-α与缺血修饰蛋白(IMA)水平的影响。方法选择我院2013年2月至2016年2月行妇科腹腔镜手术的患者56例,随机分为高压组、中压组、低压组三组,术中分别予以15 mm Hg、12 mm Hg及10mm Hg气腹压力,对三组术前、术中30 min、术后12 h的IMA及TNF-α进行检测。结果高压组的恶心呕吐、胃胀气发生率均明显高于中压组和低压组(P<0.05)。三组术前的IMA水平和TNF-α水平无显著差异(P>0.05);术中30 min和术后12 h,三组患者的IMA水平和TNF-α水平均较术前明显升高,高压组的IMA水平和TNF-α水平均显著高于其余两组(P<0.05);术后24 h,三组患者的IMA水平和TNF-α水平无统计学差异(P>0.05)。结论妇科腹腔镜手术中应当考虑不同气腹压力对机体可能产生的影响。低气腹压力对机体的创伤较小,机体应激反应较轻,应首先考虑选择低气腹压力,以避免对机体的损伤。     

窖蛋白对粘附斑激酶信号通路的影响

目的 研究窖蛋白对粘附斑激酶活性的影响，探讨窖蛋白对粘附斑激酶信号通路的作用。方法 采用体外培养第3代到第6代人脐静脉内皮细胞，以腺病毒介导其高表达窖蛋白，免疫印迹法检测粘附斑激酶活性，以抗粘附斑激酶397酪氨酸残基磷酸化抗体检测粘附斑激酶磷酸化水平。结果 窖蛋白与粘附斑激酶形成免疫沉淀复合体，两者可以相互识别结合。与对照组相比，高表达窖蛋白抑制粘附斑激酶397酪氨酸残基磷酸化水平在纤粘连蛋白刺激前和刺激后分别降低了33％和35％。结论 窖蛋白通过抑制粘附斑激酶的起始活性来抑制粘附斑激酶信号通路。     

肝干细胞增殖分化相关信号通路研究进展

重症肝炎或终末期肝病时肝脏组织严重损伤,肝移植不能满足众多患者的需求。目前,应用肝干细胞诱导分化技术可作为肝脏组织严重损伤时细胞替代治疗的重要途径,调控肝干细胞增殖与分化的信号通道涉及Wnt、Notch、Hedgehog、BMP/TGF-β、PI3K/AKT等,本文对近十年来调控肝干细胞向成熟肝细胞分化的信号通路进行综述。     

大鼠骨髓间充质干细胞对淋巴细胞增殖的负调节作用

[目的]探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)的免疫负调节作用.[方法]分离和鉴定大鼠MSCs,用MTS法观察该细胞对淋巴细胞增殖活性的影响,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测MSCs与淋巴母细胞混合培养液24h后上清中LDH活性.[结果]大鼠MSCs表型为CD29 、CD44 、CD45-、CD54 、CD95 和SH-2 ,具有诱导分化成脂肪和成骨的潜能力,对ConA刺激的淋巴细胞增殖有显著的抑制作用,能够诱导淋巴母细胞裂解,释放LDH.[结论]MSCs能够抑制淋巴细胞的活化增殖,这种负向免疫调节功能有可能在免疫耐受诱中发挥作用.     

mTOR/p70S6K信号通路与NIH3T3成纤维细胞增殖

[目的]探讨mTOR/p70S6K信号通路激活在成纤维细胞增殖中的作用. [方法]以mTOR基因转染小鼠NIH3T3成纤维细胞,用MTT法检测其是否增殖,用RT-PCR和Western印迹分析测定细胞mTOR、p70S6K mRNA与蛋白的表达. [结果]MTT法检测转染组细胞增殖能力增强;RT-PCR与Western印迹分析转染组中mTOR和p70S6K的mRNA与蛋白表达水平明显增加(P<0.01). [结论]mTOR/p70S6K信号通路激活可能介导成纤维细胞增殖.     

葡多酚对乳腺癌细胞P38MAPK信号传导通路的影响

目的:探讨葡多酚(grape proanthocyanidins,GPC)对P38MAPK(P38 mitogen-activated protein kinase,P38 MAPK)信号转导通路的影响。方法:将接种EMT-6乳腺癌细胞的BALB/C小鼠分别经口灌胃给予10、100、200mg/kg bw GPC,连续2w。用Western blot方法检测肿瘤组织磷酸化P38MAPK蛋白和MMP-2蛋白的表达水平。结果:肿瘤对照组和200mg/kgGPC组的磷酸化P38MAPK蛋白表达水平(相对灰度值)分别为1.16±0.18和0.58±0.12,MMP-2蛋白表达水平分别为0.98±0.04和0.69±0.04,差别均有显著性意义(P<0.05)。结论:GPC对乳腺癌P38MAPK信号转导通路的活化和MMP-2蛋白的表达均有一定抑制作用。     

硒对酱油诱发小鼠骨髓细胞SCE的抑制作用

本实验结果表明，喂酱油能诱发小鼠骨髓细胞姊妹染色单体交换率的增高，差异极其显著；自由饮用４ｐｐｍ的亚硒酸钠可抑制酱油诱发ＳＣＥ的增高，差异差异极其显著；提示硒作为一种潜在的食品在抗突变和抗癌添加剂的可能性。     

花色苷对ApoE基因缺陷小鼠炎症信号转导的影响

目的:探讨黑米皮(BRF)花色苷(ANTH)对ApoE基因(ApoE-/-)缺陷小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块形成及炎症信号转导的影响。方法:将45只雄性ApoE-/-小鼠随机分为三组:阳性对照组(A组)、花色苷提取后黑米皮组(B组)和黑米皮花色苷组(C组);15只正常小鼠为阴性对照组(D组)。B组和C组分别加入黑米皮花色苷提取物及5%花色苷提取后的黑米皮,饲养20w,取血后处死动物,测定主动脉脂质斑块大小和血液各型NOS水平及NO水平,Western-blot法检测血管壁内ICAM-1及NF-κB表达。结果:C组的主动脉脂质斑块面积大小明显低于A组和B组;C组总一氧化氮合酶(tNOS)水平明显高于A组和B组;C组血清中iNOS水平略有降低,但差异不显著;C组血清cNOS和NO水平显著升高;C组COX-2mRNA、ICAM-1及NF-κB蛋白质表达下降。结论:黑米皮花色苷是黑米皮抗AS的活性成分,其作用机制与抑制NF-κB介导的炎性因子iNOS、COX-2表达及促进血管舒张因子NO生成有关。     

玉米紫色植株色素体外诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的初步研究

[目的]研究玉米紫色植株色素(PMPP)对人肺腺癌A549细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响。[方法]MTT法比较不同浓度的PMPP对体外培养的肺癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期,同时应用倒置显微镜观察凋亡细胞的形态学特征。[结果]不同浓度PMPP溶液对A549细胞的增殖均有抑制作用,浓度为50mg/ml时的抑制率最大,约为85.35%。形态学表现为单位视野内细胞数量明显减少,细胞间隙增大,细胞体积明显缩小,细胞失去原有的形态,胞体皱缩变圆,出现膜发泡现象。流式细胞术结果表明,当PMPP浓度为40mg/ml时,处于S期的肿瘤细胞增多,凋亡率为41.52%。[结论]玉米紫色植株色素可通过诱导部分细胞凋亡抑制人肺腺癌A549细胞增殖。     

微小RNA-152介导叶酸对体外血管平滑肌细胞增殖迁移的抑制作用

目的探究叶酸对(folic acid,FA)血小板源生长因子(PDGF-BB)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖迁移的影响及其机制。方法体外用PDGF-BB诱导大鼠血管平滑肌细胞系A7r5增殖迁移,分为对照组、PDGF组、PDGF+FA组、PDGF+FA+miRNA-152 inhibitor组、PDGF+FA+miRNA-152 NC组。采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组VSMCs内miR-152的表达水平。采用CCK-8试剂盒检测各组VSMCs增殖水平。采用划痕实验检测各组VSMCs迁移水平。采用蛋白印迹法检测细胞增殖核抗原(PCNA)蛋白、基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平。结果 RT-PCR结果显示PDGF干预降低VSMCs miR-152表达水平,而PDGF+FA组VSMCs miR-152表达水平显著高于PDGF组(P0.05)。PDGF干预VSMCs的增殖迁移能力显著增强相对于对照组(P0.05),而PDGF+FA组的VSMCs增殖迁移能力低于PDGF组(P0.05),PDGF+FA+miR-152 inhibitor组的VSMCs增殖迁移能力强于PDGF+FA组(P0.05)。结论 miR-152参与介导FA抑制PDGF-BB诱导的VSMCs增殖迁移作用。[营养学报,2017,39(5):484-488]