血清可溶性肿瘤坏死因子受体与2型糖尿病视网膜病变相关性研究

目的　研究血清可溶性肿瘤坏死因子受体（ｓｏｌｕｂｌｅｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｏｒ,ｓＴＮＦＲ）与２型糖尿病视网膜病变的相关性。方法　６６例２型糖尿病患者通过眼底检查和眼底荧光血管造影按照ＥＤＴＲＳ分期分为３组:无糖尿病视网膜病变（ｎｏｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＮＤＲ;ｎ＝２２）组、非增殖型糖尿病视网膜病变（ｎｏｎｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＮＰＤＲ;ｎ＝２４）组和增殖型糖尿病视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＰＤＲ;ｎ＝２０）组。２１名健康人作为对照组。检测４组研究对象血清中肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ）-α、ｓＴＮＦＲ-１、ｓＴＮＦＲ-２水平。组间统计分析采用非参数Ｍａｎｎ-ＷｈｉｔｎｅｙＵ检验。结果　血清中ＴＮＦ-α中位数分别为:对照组０ｐｇ·ｍＬ－１、ＮＤＲ组３．４５ｐｇ·ｍＬ－１、ＮＰＤＲ组３．９２ｐｇ·ｍＬ－１、ＰＤＲ组８．１２ｐｇ·ｍＬ－１。对照组与ＰＤＲ组（Ｐ＜０．００１）、ＮＤＲ组与ＰＤＲ组（Ｐ＝０．００８）比较差异均有统计学意义。血清中ｓＴＮＦＲ-１水平中位数:对照组１．５０ｎｇ·ｍＬ－１、ＮＤＲ组１．８８ｎｇ·ｍＬ－１、ＮＰＤＲ组２．５８ｎｇ·ｍＬ－１、ＰＤＲ组３．００ｎｇ·ｍＬ－１。对照组与ＮＰＤＲ组（Ｐ＜０．００１）、对照组与ＰＤＲ组（Ｐ＜０．００１）、ＮＤＲ组与ＮＰＤＲ组（Ｐ＝０．００７）、ＮＤＲ组与ＰＤＲ组（Ｐ＜０．００１）比较,差异均有统计学意义。血清中ｓＴ-ＮＦＲ-２中位数分别为:对照组３．８８ｎｇ·ｍＬ－１、ＮＤＲ组５．０１ｎｇ·ｍＬ－１、ＮＰＤＲ组５．２１ｎｇ·ｍＬ－１、ＰＤＲ组６．３３ｎｇ·ｍＬ－１。除了ＮＤＲ组与ＮＰＤＲ组（Ｐ＝０．０７０）间差异无统计学意义外,其他组间差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　血清中ｓＴＮＦＲ与２型糖尿病视网膜病变密切相关,表明ｓＴＮＦＲ在糖尿病视网膜病变的发生发展中起到了一定的作用。对ｓＴＮＦＲ进行进一步研究可以寻找治疗糖尿病视网膜病变新的靶点。     

趋化素、肿瘤坏死因子-α与2型糖尿病视网膜病变的相关性

目的　探讨２型糖尿病视网膜病变（ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,Ｔ２ＤＲ）患者血清中趋化素（ｃｈｅｍｅｒｉｎ）、肿瘤坏死因子-α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ-α,ＴＮＦ-α）水平及其临床意义。方法　将１６０例研究对象分为增殖性糖尿病视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａ-ｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＰＤＲ）组４０例,非增殖性糖尿病视网膜病变（ｎｏｎ-ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ,ＮＰＤＲ）组４０例,单纯糖尿病（ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ,ＤＭ）组患者４０例以及健康对照（ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｓ,ＮＣ）组４０例。观察４组研究对象的体检指标,并检测空腹胰岛素、血糖、血脂、糖化血红蛋白及血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ、ＴＮＦ-α等含量。计算稳态模型评估的胰岛素抵抗指数（ｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎ-ｄｅｘ,ＨＯＭＡ-ＩＲ）。结果　ＤＭ组［ｃｈｅｍｅｒｉｎ为（３．８３±０．４６）ｍｇ?Ｌ－１、ＴＮＦ-α为（３７．６９±５．０７）ｎｇ?Ｌ－１］、ＮＰＤＲ组［ｃｈｅｍｅｒｉｎ为（４．６８±０．７４）ｍｇ?Ｌ－１、ＴＮＦ-α为（４０．６９±５．９０）ｎｇ?Ｌ－１］、ＰＤＲ组［ｃｈｅｍｅｒｉｎ为（５．８６±１．２９）ｍｇ?Ｌ－１、ＴＮＦ-α为（４４．１７±６．６３）ｎｇ?Ｌ－１］血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ、ＴＮＦ-α水平均较ＮＣ组［ｃｈｅｍｅｒｉｎ为（２．０１±０．５４）ｍｇ?Ｌ－１、ＴＮＦ-α为（２２．６０±９．７８）ｎｇ?Ｌ－１］升高,且随着ＤＲ病情的进展逐渐升高,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。相关分析显示血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ水平与收缩压、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数均呈正相关（ｒ＝０．３３１、０．３６１、０．２５１、０．３４８、０．３０６、０．５２３、０．６４４,均为Ｐ＜０．０５）;血清中ＴＮＦ-α水平与收缩压、舒张压、空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数均呈正相关（ｒ＝０．２９９、０．１５９、０．６０５、０．２６２、０．４０７、０．２８２、０．６１９、０．８０９,均为Ｐ＜０．０５）;血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ与ＴＮＦ-α水平呈正相关（ｒ＝０．７３８,Ｐ＜０．０５）。结论　血清中ｃｈｅｍｅｒｉｎ和ＴＮＦ-α水平的升高是Ｔ２ＤＲ的危险因子,可能共同参与了Ｔ２ＤＲ的发生发展。     

肿瘤坏死因子-α对RF/6A细胞自噬促进细胞增殖、迁移和管腔形成的影响

目的　本研究观察肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ-ａｌｐｈａ,ＴＮＦ-α）对体外培养的恒河猴脉络膜／视网膜内皮细胞（ＲＦ／６Ａ）表达自噬蛋白Ｂｅｃｌｉｎ-１及细胞增殖、迁移和管腔形成的影响,探讨ＴＮＦ-α参与新生血管生成的可能机制。方法　将生长良好的ＲＦ／６Ａ细胞随机分为空白对照组、ＴＮＦ-α组和ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组。培养２４ｈ、４８ｈ后采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测细胞Ｂｅｃ-ｌｉｎ-１蛋白的表达,ＭＴＴ法检测细胞增殖,细胞划痕法检测细胞迁移,Ｍａｔｒｉｇｅｌ法检测管腔形成。结果　培养２４ｈ和４８ｈ,各组Ｂｅｃｌｉｎ-１／β-ａｃｔｉｎ比值分别是ＴＮＦ-α组（２４ｈ）０．６７３±０．０１７、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（２４ｈ）０．４９１±０．０１７、ＴＮＦ-α组（４８ｈ）０．７９２±０．００６、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（４８ｈ）０．５０４±０．００７、空白对照组０．２６８±０．０１７。ＴＮＦ-α组ＲＦ／６Ａ细胞Ｂｅｃｌｉｎ-１的表达量均明显高于空白对照组（Ｐ＜０．０５）,ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组Ｂｅｃｌｉｎ-１的表达量较ＴＮＦ-α组明显减少（Ｐ＜０．０５）。各组细胞的相对增殖率分别是ＴＮＦ-α组（２４ｈ）１．４１０±０．０１０、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（２４ｈ）１．２９０±０．００４、ＴＮＦ-α组（４８ｈ）１．３２０±０．０１１、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（４８ｈ）０．１８０±０．０１５、对照组（２４ｈ）１．０００±０．０２０、对照组（４８ｈ）１．０００±０．０１１;ＴＮＦ-α组细胞的相对增殖率均较空白对照组升高（Ｐ＜０．０５）,３-ＭＡ预处理后,ＴＮＦ-α促进ＲＦ／６Ａ细胞增殖的能力在两个时间点均受到抑制（均为Ｐ＜０．０５）。各组细胞的相对迁移距离分别是ＴＮＦ-α组（２４ｈ）（３４５±２８）μｍ、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（２４ｈ）（２５９±７７）μｍ、ＴＮＦ-α组（４８ｈ）（７６２±５５）μｍ、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（４８ｈ）（６５９±４８）μｍ、空白对照组（２４ｈ）（１９５±６３）μｍ、空白对照组（４８ｈ）（４１２±９４）μｍ;ＴＮＦ-α处理组ＲＦ／６Ａ细胞２４ｈ的迁移明显强于对照组（Ｐ＜０．０５）,加入３-ＭＡ预处理后,这种增强作用有所下降,但仍然明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）;培养４８ｈ,更多细胞迁移入划痕区域,较２４ｈ明显增加;不同组之间的差异与２４ｈ时的结果类似,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;培养２４ｈ各组细胞管腔形成个数:ＴＮＦ-α组（１１．８０±０．８１）个、ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组（７．５０±０．７２）个、空白对照组（４．３０±１．１２）个,ＴＮＦ-α组及ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组管腔形成个数均高于对照组（均为Ｐ＜０．０５）,ＴＮＦ-α＋３-ＭＡ组较ＴＮＦ-α组明显减少（Ｐ＜０．０５）。结论　ＴＮＦ-α能够促进ＲＦ／６Ａ细胞的增殖、迁移和管腔样结构的形成,且ＴＮＦ-α促进内皮细胞自噬在血管新生中发挥重要的调控作用。     

敲除TLR2基因对同种异体小鼠角膜移植排斥反应的影响

目的　探讨敲除Ｔｏｌｌ样受体２（ｔｏｌｌ-ｌｉｋｅｒｅｃｅｐｔｏｒ２,ＴＬＲ２）基因后是否抑制同种异体小鼠角膜排斥反应的发生。方法　以ＢＡＬＢ／ｃ为供体,各取３０只Ｃ５７ＢＬ／６和同背景ＴＬＲ２基因敲除鼠为受体行右眼角膜移植术,设为野生组（ＷＴ）和基因敲除组（ＫＯ）;取１９只Ｃ５７ＢＬ／６行右眼自体角膜移植术,为自体组（ＩＳＯ）;各取９只Ｃ５７ＢＬ／６和ＴＬＲ２基因敲除鼠分别设为野生对照组（ＷＴｃｏｎｔｒｏｌ）和基因敲除对照组（ＫＯｃｏｎｔｒｏｌ）。术后每周两次观察植片并记录免疫排斥的发生时间;术后１４ｄ,收集术眼同侧颈部淋巴结,行流式细胞术分析ＣＤ４＋Ｔ细胞百分比;收集术眼角膜,行免疫组织化学染色和实时荧光定量ＰＣＲ检测角膜干扰素（ｉｎｔｅｒ-ｆｅｒｏｎ,ＩＦＮ）-γ、ＴＬＲ２和ＭｙＤ８８的表达。结果　ＷＴ组和ＫＯ组小鼠角膜移植术后中位生存时间ＫＯ组（３５．０±３．８）ｄ长于ＷＴ组（２１．０±１．５）ｄ（Ｐ＜０．０５）。流式细胞术分析显示,ＷＴ组同侧颈部淋巴结ＣＤ４＋Ｔ细胞百分比较ＷＴｃｏｎｔｒｏｌ组明显增高（Ｐ＜０．０５）,而ＩＳＯ和ＫＯ组相对于其对应的ｃｏｎｔｒｏｌ组（ＷＴ／ＫＯｃｏｎｔｒｏｌ）差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）;免疫组织化学结果显示,ＩＳＯ和ＫＯ组间角膜ＩＦＮ-γ和ＭｙＤ８８分子表达无差异,但两者均低于ＷＴ组。ＫＯ组角膜几乎不表达ＴＬＲ２分子,ＩＳＯ组有微量表达,ＷＴ组表达明显增高;ＰＣＲ检测显示,ＩＳＯ和ＫＯ组角膜ＩＦＮ-γ和ＴＬＲ２ｍＲＮＡ相对表达量差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,但两者均低于ＷＴ组（均为Ｐ＜０．０５）;ＫＯ组角膜ＭｙＤ８８ｍＲＮＡ相对表达量比ＩＳＯ组高（Ｐ＜０．０５）,但两者均低于ＷＴ组（均为Ｐ＜０．０５）。结论　敲除ＴＬＲ２基因可以一定程度抑制同种异体小鼠角膜排斥反应的发生。     

颈内动脉血流动力学改变与前部缺血性视神经病变球后血流相关性研究

目的　通过彩色多普勒血流成像技术分别观察颈内动脉的血流动力学改变及前部缺血性视神经病变（ａｎｔｅｒｉｏｒｉｓｃｈｅ-ｍｉｃｏｐｔｉｃｎｅｕｒｏｐａｔｙ,ＡＩＯＮ）患者球后血流动力学改变,分析两者的相关性。方法　选取ＡＩＯＮ患者４２例,设为ＡＩＯＮ组,同时设立空白对照组４２例,分别检查两组人群的颈内动脉及球后主要血管睫状后短动脉的血流动力学指标,包括收缩期峰值血流速度（ｐｅａｋｓｙｓｔｏｌｉｃｖｅｌｏｃｉｔｙ,ＰＳＶ）、舒张末期血流速度（ｅｎｄｄｉａｓｔｏｌｉｃｖｅｌｏｃｉｔｙ,ＥＤＶ）、阻力指数（ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｄｅｘ,ＲＩ）,并对２组以上结果进行统计分析。结果　ＡＩＯＮ组与空白对照组球后主要血管睫状后短动脉的ＰＳＶ分别为（１０．２６±０．７３）ｃｍ?ｓ－１和（１１．６６±０.１９）ｃｍ?ｓ－１,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;ＥＤＶ分别为（３．６８±０．３８）ｃｍ?ｓ－１和（５．１２±０．５２）ｃｍ?ｓ－１,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;ＲＩ分别为０．７７±０．２７和０．６８±０．２２,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。颈内动脉血流动力学指标,ＡＩＯＮ组的ＰＳＶ为（９．１７±０．４２）ｃｍ?ｓ－１,明显低于空白对照组的（１０．６８±０．１８）ｃｍ?ｓ－１,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;ＡＩＯＮ组的ＥＤＶ为（２．１５±０．３１）ｃｍ?ｓ－１,明显低于空白对照组的（３．４７±０．５５）ｃｍ?ｓ－１,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;ＡＩＯＮ组的ＲＩ为０.６７±０.１２,明显高于空白对照组的０．５９±０．０７,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。ＡＩＯＮ组颈内动脉与球后主要血管睫状后短动脉的血流动力学指标高度相关,差异具有统计学意义（ｒ＝０．８２,Ｐ＝０．０００）。结论　ＡＩＯＮ患者的颈内动脉血流动力学已发生明显改变,并与球后血管睫状后短动脉的血流动力学改变高度相关,颈内动脉血流动力学改变可能是发生ＡＩＯＮ的因素之一。     

BAMBI过表达抑制缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞增殖和迁移

目的　探讨过表达激活素膜结合抑制剂（ｂｍｐａｎｄａｃｔｉｖｉｎｍｅｍｂｒａｎｅ-ｂｏｕｎｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒ,ＢＡＭＢＩ）对缺氧诱导的恒河猴视网膜血管内皮细胞（ＲＦ／６Ａ）增殖和迁移的影响。方法　将ＲＦ／６Ａ细胞分为四组:正常对照组、缺氧组、缺氧＋ｐＦＬＡＧ组和缺氧＋ＢＡＭＢＩ组。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测各组细胞中ＢＡＭＢＩ的表达,倒置显微镜观察各组细胞形态和密度,ＣＣＫ-８法和流式细胞仪分别检测各组细胞的增殖和周期情况,Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ检测细胞的迁移,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测转化生长因子β１（ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ-β１,ＴＧＦ-β１）和血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的表达。结果　与对照组相比,缺氧组细胞数目明显增多,增殖增加,培养１２０ｈ后,对照组细胞增殖倍数为５．００±０．２８,缺氧组为７．６４±０．３２（Ｐ＜０．００１）;缺氧组Ｓ期进程显著加快,占（１０．４４±２．６１）％,对照组Ｓ期占（２０．７９±２．２３）％（Ｐ＜０．０５）;细胞迁移增加,缺氧组细胞数目为３３．８０±４．２０,对照组为８．３５±２．５０（Ｐ＜０．０５）,ＴＧＦ-β１和ＶＥＧＦ的表达明显增加（Ｐ＜０．０５）。缺氧＋ＢＡＭＢＩ组:缺氧处理的细胞转染ｐＦＬＡＧ-ＢＡＭ-ＢＩ后,与缺氧组相比,ＢＡＭＢＩ蛋白表达显著上调,细胞数目明显减少,增殖显著降低,培养１２０ｈ后,增殖倍数为５．５３±０．２７（Ｐ＜０．００１）,细胞Ｓ期受到阻滞,占（１８．７５±２．９２）％,迁移显著下降,数目为１３．００±２．８０（Ｐ＜０．０５）,ＴＧＦ-β１和ＶＥＧＦ的表达明显下调（Ｐ＜０．０５）。结论　过表达ＢＡＭＢＩ可抑制缺氧诱导的ＲＦ／６Ａ细胞的增殖和迁移,进而有望抑制视网膜血管新生。     

核转录因子-κB在氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠中的表达

目的　探讨氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠视网膜中核转录因子（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒ,ＮＦ）-κＢ蛋白的表达变化及意义。方法　７２只出生后７ｄ的Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠随机分为实验组（３６只）和对照组（３６只）,实验组与母鼠一起放入氧气含量为体积分数７５％的饲养箱中饲养,出生后１２ｄ回到正常大气环境中;对照组小鼠始终在正常大气环境中饲养。分别于出生后１２ｄ、１４ｄ、１７ｄ时处死小鼠,荧光素灌注后行视网膜铺片观察血管分布及形态,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测视网膜中血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）的蛋白表达变化,免疫组织化学染色检测眼球中ＮＦ-κＢ的表达变化。结果　视网膜铺片检查结果可见,实验组小鼠出生后１４ｄ开始出现视网膜新生血管,面积为每眼（０. ０６±０．１２）ｍｍ２;生后１７ｄ达到高峰,面积为每眼（１．７９±０．０２）ｍｍ２（χ２＝２０．１１２,Ｐ＜０．０１）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测结果显示,实验组ＶＥＧＦ表达不断增强,在生后１７ｄ时表达达到高峰,为０．８３±０．０５。免疫组织化学染色结果显示,实验组生后１２ｄＮＦ-κＢ阳性细胞计数为（１２．３２±１. ０４）个?ｍｍ－２,１４ｄ时为（１９．１６±１．０２）个?ｍｍ－２,生后１７ｄ阳性表达较１２ｄ和１４ｄ时均高,为（２８. ６０±０．５２）个?ｍｍ－２（χ２ ＝１３. １０２,Ｐ＜０．０５;χ２＝２０．１３２,Ｐ＜０．０１）。结论　ＮＦ-κＢ在氧诱导血管增殖性视网膜病变小鼠视网膜中表达明显升高,其趋势与ＶＥＧＦ的变化相同,ＮＦ-κＢ参与了缺氧状态下视网膜新生血管形成的调控过程。     

新生血管性青光眼患者房水中信号素3A表达水平的研究

目的　检测新生血管性青光眼（ｎｏｎｖａｓｃｕｌａｒｇｌａｕｃｏｍａ,ＮＶＧ）患者房水中信号素３Ａ（Ｓｅｍａｐｈｏｒｉｎ３Ａ,Ｓｅｍａ３Ａ）的水平,探讨Ｓｅｍａ３Ａ在ＮＶＧ发生发展中的作用。方法　选取在我院眼科２０１４年１月至２０１５年２月诊断为ＮＶＧ行抗青光眼手术患者４２例（４３眼）作为ＮＶＧ组,并根据病因分为糖尿病组１１眼、静脉阻塞组１１眼、青光眼组８眼及原因不明组１３眼;选取同期收治行单纯白内障手术患者１６例（１６眼）作为对照组。分别于术前抽取房水样本,利用双抗体夹心酶联免疫吸附试验测定房水中Ｓｅｍａ３Ａ含量,对比分析ＮＶＧ组和对照组在Ｓｅｍａ３Ａ浓度上的统计学差异。分析检测ＮＶＧ组房水中Ｓｅｍａ３Ａ水平与眼压水平的相关性。结果　ＮＶＧ组患者的眼压为（３２．６３±１１．１６）ｍｍＨｇ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）,较对照组（１５．５６±１．９３）ｍｍＨｇ明显升高（ｔ＝２３．９６,Ｐ＜０．０００１）。ＮＶＧ组患者房水中Ｓｅｍａ３Ａ浓度为（２．１３±１．９４）ｎｇ?ｍＬ－１,明显高于对照组（０．６６±０．５８）ｎｇ?ｍＬ－１,差异有显著统计学意义（ｔ＝２．９８５,Ｐ＜０．０００１）。但ＮＶＧ组房水中Ｓｅｍａ３Ａ与眼压水平无明显相关性（ｒ＝－０．２１６４,Ｐ＝０．１１８５）。根据引起ＮＶＧ的原发病进行分组比较,糖尿病组Ｓｅｍａ３Ａ浓度为（２．１４±１．４４）ｎｇ? ｍＬ－１、静脉阻塞组Ｓｅｍａ３Ａ浓度为（１．６７±０．９８）ｎｇ?ｍＬ－１及青光眼组Ｓｅｍａ３Ａ浓度为（１．８７±１．８０）ｎｇ?ｍＬ－１,与对照组房水中Ｓｅｍａ３Ａ浓度相比均明显升高,差异均有统计学意义（Ｐ＝０．００１、０．００２、０．０２１）。结论　Ｓｅｍａ３Ａ在ＮＶＧ患者房水中明显升高,推测其表达增加可能参与了ＮＶＧ患者虹膜新生血管形成及眼部损伤性改变。     

小切口基质内透镜取出术及飞秒激光LASIK治疗高度近视的临床对比研究

目的　对比研究小切口基质内透镜取出术（ｓｍａｌｌｉｎｃｉｓｉｏｎｌｅｎｔｉｃｕｌｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ,ＳＭＩＬＥ）及飞秒激光ＬＡＳＩＫ（ｆｅｍｔｏｓｅｃｏｎｄｌａｓｅｒｉｎｓｉｔｕｋｅｒａｔｏｍｉｌｅｕｓｉｓ,ＦＳ-ＬＡＳＩＫ）治疗高度近视患者的手术疗效。方法　４０例８０眼高度近视患者（等效球镜度数为－７．００～－１０．５０Ｄ）根据手术方式不同分为２组,其中ＳＭＩＬＥ组２０例４０眼行ＳＭＩＬＥ,ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组２０例４０眼行ＶｉｓｕＭａｘＦＳ-ＬＡＳＩＫ,观察时间点为术后１ｄ、１周、１个月、３个月、６个月。分别观察两组术后裸眼视力、等效球镜度数、最佳矫正视力、角膜地形图形态等。结果　安全性:术后３个月ＳＭＩＬＥ组和ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组最佳矫正视力达到术前最佳矫正视力的比例分别为９７．５％（３９／４０）、９５．０％（３８／４０）（Ｐ＞０．０５）,术后最佳矫正视力／术前最佳矫正视力分别为１．１５±０．１２、１．０９±０．１４（Ｐ＞０．０５）。有效性:术后３个月ＳＭＩＬＥ组和ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组裸眼视力达到术前最佳矫正视力的比例分别为９５．０％（３８／４０）、８０．０％（３２／４０）（Ｐ＜０．０５）,术后裸眼视力／术前最佳矫正视力分别为１．１１±０．１３、０．９８±０．１４（Ｐ＜０．０５）。可预测性（精确性）:术后３个月ＳＭＩＬＥ组和ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组等效球镜在±０．５０Ｄ的比例分别为９５．０％（３８／４０）、７０．０％（２８／４０）（Ｐ＜０．０５）;等效球镜在±０．７５Ｄ的比例分别为９７．５％（３９／４０）、８２．５％（３３／４０）（Ｐ＜０．０５）。稳定性:与术后１周相比,术后１个月、３个月及６个月各时间点ＳＭＩＬＥ组和ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组等效球镜度数的差异均无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。角膜地形图形态:ＳＭＩＬＥ组和ＦＳ-ＬＡＳＩＫ组角膜地形图都以平滑型最多,分别占８２．５％（３３／４０）、６０．０％（２４／４０）,两组比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　ＳＭＩＬＥ及ＦＳ-ＬＡＳＩＫ治疗高度近视均安全、稳定,而ＳＭＩＬＥ有效性、可预测性、精确性、术后角膜形态均稍好于ＦＳ-ＬＡＳＩＫ,矫正高度近视更值得临床应用。     

视网膜色素变性与血管内皮──血小板功能变化

对６５例视网膜色素变性（ＲＰ）患者和３３例正常人进行血浆血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮前列腺素Ｆ（１α）（６－Ｋｅｔｏ－ＰＧＦ＿（１α））、血浆丙二醛（ＭＤＡ）、红细胞超氧化物歧化酶（ＳｏＤ），全血谷脱甘肽过氧化物酶活性（ＧＳＨ－ｐＸ）等指标的测定，发现ＲＰ患者血浆ＴＸＢ２以及ＴＸＢ＿２和６－Ｋ－ＰＧＦ１α比值Ｔ／Ｋ均较正常人升高（Ｐ＜０．０５）．６－Ｋ－ＰＧＦ１α和ＳＯＤ较正常人降低（Ｐ＜０．０１）。而ＭＤＡ、ＧＳＨ－ＰＸ无明显改变，表明ＲＰ患者病理过程中存在血管内皮──血小板功能改变以及自由基的损伤。但对ＳＯＤ与ＴＸＢ２、Ｔ／Ｋ比值、６－Ｋ－ＰＧＦ１α的相关分析表明，它们之间无相关性（Ｐ＞０．０５），表明ＲＰ患者虽有血管内皮──血小板功能紊乱，但非自由基损伤所致。     

JNK细胞通路在高压氧和过氧化氢诱导人晶状体上皮细胞凋亡中的作用

目的　研究ＪＮＫ细胞信号通路在高压氧（ｈｙｐｅｒｂａｒｉｃｏｘｙｇｅｎ,ＨＢＯ）和过氧化氢（ｈｙｄｒｏｇｅｎｐｅｒｏｘｉｄｅ,Ｈ２Ｏ２）影响晶状体上皮细胞活力和凋亡中的作用。方法　培养人晶状体上皮细胞系ＳＲＡ０１／０４,实验分为对照组、ＳＰ６００１２５组（２０μｍｏｌ?Ｌ－１）、ＨＢＯ组（体积分数９５％ Ｏ２＋体积分数５％ＣＯ２,６００Ｐａ）、ＨＢＯ＋ＳＰ６００１２５组、Ｈ２Ｏ２组（２００μｍｏｌ?Ｌ－１）和Ｈ２Ｏ２＋ＳＰ６００１２５组,处理６ｈ后收集细胞,应用ＭＴＴ法检测各组细胞活力,ＡｎｎｅｘｉｎＶ-ＦＩＴＣ凋亡试剂盒处理细胞后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,通过Ｗｅｓｔｅｒｎ-ｂｌｏｔ法检测各组细胞ＪＮＫ、ｐ-ＪＮＫ、ｃ-Ｊｕｎ、ｐ-ｃ-Ｊｕｎ、ｃａｓｐａｓｅ３、ｃａｓｐａｓｅ９的表达情况。结果　作用６ｈ后,ＨＢＯ和Ｈ２Ｏ２处理的晶状体上皮细胞Ａ５７０分别为０．４２３±０．０４７和０．４０６±０．０６９,较对照组的０．８２４±０．０６５明显下降（Ｐ＜０．０５）,细胞凋亡率为（１９．７７３±１．１４７）％和（２９．２０６±１．６７８）％,较对照组的（２．１８４±１．０１５）％明显上升（Ｐ＜０．０５）,ＳＰ６００１２５可部分抑制ＨＢＯ和Ｈ２Ｏ２对晶状体上皮细胞活力和凋亡的影响,ＨＢＯ和Ｈ２Ｏ２处理的晶状体上皮细胞ｐ-ＪＮＫ、ｐ-ｃ-Ｊｕｎ蛋白表达量及ｃａｓｐａｓｅ３、ｃａｓｐａｓｅ９蛋白表达量升高,Ｓｐ６００１２５可部分抑制高压氧和Ｈ２Ｏ２ 诱导的晶状体上皮细胞ｐ-ＪＮＫ、ｐ-ｃ-Ｊｕｎ、ｃａｓｐａｓｅ３、ｃａｓｐａｓｅ９蛋白高表达。结论　ＨＢＯ和Ｈ２Ｏ２可激活晶状体上皮细胞中ＪＮＫ细胞信号通路,促使细胞凋亡,提示ＪＮＫ细胞信号通路在ＨＢＯ和Ｈ２Ｏ２诱导晶状体上皮细胞凋亡的发生发展中起重要作用。     

重组γ-干扰素作用人Tenons囊成纤维细胞体外研究

目的体外研究人重组γ－干扰素对人Ｔｅｎｏｎｓ囊成纤维细胞作用。方法以人Ｔｅｎｏｎｓ囊成纤维细胞作为实验对象,分别加入０．１～１０~６Ｕ／ｍｌ人重组γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）、０．００１～１０ｍｇ／Ｌ丝裂霉素（ＭＭＣ）、０．１～１０３ｍｇ／Ｌ ５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）孵育４８ｈ,然后以ＭＴＴ法进行检测。结果高浓度和低浓度ＩＦＮ－γ实验组ＯＤ值较对照组升高（Ｐ＜０．０５）,中间浓度 ＩＦＮ－γ实验组 ＯＤ值较对照组低（Ｐ＜０． ０５）。 ＩＦＮ－γ的抑制率较 ＭＭＣ及５－Ｆｕ低（Ｐ＜０． ００５）。结论 ＩＦＮ－γ对体外培养的人Ｔｅｎｏｎｓ囊成纤维细胞具有促增殖及抑制增殖双向调控作用,其抗增殖作用较ＭＭＣ及５－Ｆｕ弱。     

Keratograph 5M眼表综合分析仪观察飞秒激光制瓣LASIK手术对泪膜和睑板腺的影响

目的　使用Ｋｅｒａｔｏｇｒａｐｈ５Ｍ眼表综合分析仪观察准分子激光原位角膜磨镶术（ｌａｓｅｒｉｎｓｉｔｕｋｅｒａｔｏｍｉｌｅｕｓｉｓ,ＬＡＳＩＫ）对泪膜和睑板腺的影响。方法　选取近视眼患者６５例（１３０眼）,均行飞秒激光制瓣ＬＡＳＩＫ手术。于ＬＡＳＩＫ术前及术后１周、１个月、６个月检查患者,检查项目包括:干眼症状评分、泪膜破裂时间（ｔｅａｒｂｒｅａｋｕｐｔｉｍｅ,ＴＢＵＴ）、角膜荧光素钠染色,采用Ｋｅｒａｔｏ-ｇｒａｐｈ５Ｍ眼表综合分析仪检查非侵入性泪膜破裂时间（ｎｏｎ-ｉｎｖａｓｉｖｅｂｒｅａｋｕｐｔｉｍｅ,ＮＩＴＢＵＴ）、非侵入性泪河高度（ｎｏｎ-ｉｎｖａｓｉｖｅｔｅａｒｍｅｎｉｓｃｕｓｈｅｉｇｈｔ,ＮＩＴＭＨ）。睑板腺检查项目有睑缘评分,采用Ｋｅｒａｔｏｇｒａｐｈ５Ｍ眼表综合分析仪检查脂质层厚度分级,睑板腺现存面积比。分析ＴＢＵＴ、ＮＩＴＢＵＴ（ｆ）（首次）和ＮＩＴＢＵＴ（ａｖ）（平均）之间的相关性。结果　与术前相比,术后１周、１个月干眼症状评分均升高（均为Ｐ＜０．０５）;术后１周、１个月ＴＢＵＴ分别为（７．００±２．１７）ｓ、（７．２１±２．１５）ｓ,与术前（１５．００±５．０１）ｓ相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;术后１周、１个月ＮＩＴＢＵＴ（ｆ）分别为（５．４８±２．０８）ｓ、（５．６３±１．９２）ｓ,与术前（１１．４４±５．００）ｓ相比,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;术后１周、１个月ＮＩＴＢＵＴ（ａｖ）分别为（９．０４±２．８０）ｓ、（８．９４±２．４６）ｓ,较术前（１３．７９±４．００）ｓ缩短（均为Ｐ＜０．０５）;角膜荧光素钠染色评分和ＮＩＴＭＨ结果与术前比较,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）;术后１周、１个月睑板腺脂质层厚度较术前变薄,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;睑缘评分及睑板腺现存面积比与术前比较,差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。术后６个月各项检查结果与术前相比差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。术后各时间所测ＮＩＴＢＵＴ（ｆ）比ＮＩＴＢＵＴ（ａｖ）短。ＮＩＴＢＵＴ（ｆ）与ＮＩＴＢＵＴ（ａｖ）、ＮＩＴＢＵＴ（ｆ）与ＴＢＵＴ、ＮＩＴＢＵＴ（ａｖ）与ＴＢＵＴ均呈正相关性（ｒ＝０．６５,Ｐ＜０．００１;ｒ＝０．３６,Ｐ＝０．０２５;ｒ＝０．３８,Ｐ＝０．０２８）。结论　Ｋｅｒａｔｏｇｒａｐｈ５Ｍ眼表综合分析仪作为非侵入性检测仪器可以快速、客观地评估泪膜的功能和睑板腺的状态,为干眼的诊断以及睑板腺功能的评估提供了参考依据。ＬＡＳＩＫ术后患者短期内会发生干眼或原有干眼不同程度加重,但术后０．５ａ大部分患者的ＴＢＵＴ和泪河高度可恢复到术前水平,且未观察到ＬＡＳＩＫ手术对睑板腺的不良影响。     

靶向G蛋白偶联受体91的小发夹RNA慢病毒载体的构建及功能初步检测

目的　构建靶向大鼠Ｇ蛋白偶联受体９１（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ-ｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ９１,ＧＰＲ９１）基因的小发夹ＲＮＡ（ｓｍａｌｌｈａｉｒｐｉｎＲＮＡ,ｓｈＲＮＡ）慢病毒载体,探讨ＧＰＲ９１受体对高糖诱导下血管内皮生长因子（ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＶＥＧＦ）释放的调节作用。方法　设计合成４对针对大鼠ＧＰＲ９１（ＮＭ＿００１００１５１８）的特异性单链寡核苷酸链,两端分别引入ＡｇｅＩ和ＥｃｏＲＩ酶切位点,退火后得到小片段带黏性末端的双链ＤＮＡ,克隆入慢病毒载体ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ,行聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ,ＰＣＲ）和ＤＮＡ测序鉴定重组体。将各慢病毒ｓｈＲＮＡ干扰载体和辅助包装载体共转染２９３Ｔ细胞,收集病毒颗粒并行浓缩滴度检测。将各慢病毒载体转染ＲＧＣ-５细胞后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法筛选有效的慢病毒ｓｈＲＮＡ干扰载体。使用４５ｍｍｏｌ?Ｌ－１的高糖刺激ＲＧＣ-５细胞２４ｈ,用ＥＬＩＳＡ法观察干扰ＧＰＲ９１后ＶＥＧＦ的表达情况。结果　ＰＣＲ及ＤＮＡ测序结果均显示慢病毒载体ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ-ｓｈＧＰＲ９１构建正确;包装病毒颗粒后,ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ-ｓｈＧＰＲ９１-１、２、３、４组病毒浓缩液的滴度依次为１．５×１０９ ＴＵ?ｍＬ－１、１．５×１０９ＴＵ?ｍＬ－１、３．０×１０９ＴＵ?ｍＬ－１、３．０×１０９ＴＵ?ｍＬ－１。将慢病毒颗粒感染ＲＧＣ-５细胞后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测显示ＮＣ组ＧＰＲ９１蛋白（０．６０±０．０８）空白组（０．６２±０．０７）的表达无明显差异（Ｆ＝４９．０３,Ｐ＞０．０５）。而与空白组相比,４个慢病毒载体组（０．４８±０．０５、０．３４±０．０６、０．３０±０．０４和０．１１±０．０６）均能不同程度沉默ＧＰＲ９１的表达,差异有统计学意义（Ｆ＝４９．０３,Ｐ＜００１）,其中ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ-ｓｈＧＰＲ９１-３干扰效率最高。ＥＬＩＳＡ结果显示空白组、高糖组、高糖＋ＮＣ组、高糖＋ｐＧＣＳＩＬ-ＧＦＰ-ｓｈＧ-ＰＲ９１-３组ＶＥＧＦ蛋白表达分别为（２５．６３±４．５２）ｐｇ?ｍＬ－１、（７２．７４±８．２４）ｐｇ?ｍＬ－１、（７１．６８±８．３１）ｐｇ?ｍＬ－１和（４６．７７±６２１）ｐｇ?ｍＬ－１,表明ＧＰＲ９１病毒干扰载体可显著降低高糖引起的ＶＥＧＦ分泌,差异有统计学意义（Ｆ＝３０．８５２,Ｐ＜０．０１）。结论　本实验成功构建了靶向大鼠ＧＰＲ９１的ｓｈＲＮＡ慢病毒载体并进行病毒颗粒包装。所构建的慢病毒载体能够降低高糖作用下的ＶＥＧＦ表达,为进一步研究ＧＰＲ９１基因在糖尿病视网膜病变中的作用机制和动物基因治疗奠定基础。     

两种缺氧模型对小鼠骨髓间充质干细胞中基质金属蛋白酶表达及其对促血管形成能力的影响

目的　观察物理和化学缺氧模型中小鼠骨髓间充质干细胞（ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗ-ｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＢＭＳＣｓ）中基质金属蛋白酶１３（ｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ-１３,ＭＭＰ-１３）的表达及其对猴脉络膜-视网膜内皮细胞ＲＦ／６Ａ管腔形成能力的影响。方法　取Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠骨髓,培养鉴定ＢＭＳＣｓ。采用三气培养箱模拟物理缺氧及氯化钴（ＣｏＣｌ２）诱导化学缺氧。物理缺氧６ｈ、１２ｈ、２４ｈ和４８ｈ后检测ＭＭＰ-１３表达。选表达最高的处理时间,检测不同浓度ＣｏＣｌ２（０μｍｏｌ·Ｌ－１、１００μｍｏｌ·Ｌ－１、２００μｍｏｌ·Ｌ－１、３００μｍｏｌ·Ｌ－１及４００μｍｏｌ·Ｌ－１）处理后ＭＭＰ-１３表达。检测缺氧后ＢＭＳＣｓ中缺氧诱导因子-１α（ｈｙｐｏｘｉａ-ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｆａｃｔｏｒ-１α,ＨＩＦ-１α）表达及ＢＭＳＣｓ增殖能力,观察其条件培养基诱导的ＲＦ／６Ａ管腔形成情况。结果　细胞经鉴定符合ＢＭＳＣｓ特征。物理缺氧２４ｈ后,ＭＭＰ-１３蛋白表达量达高峰（３．１６±０．２４）,较常氧组（１．００±０．１２）增加３倍（Ｐ＜０．０１）。１００μｍｏｌ·Ｌ－１和２００μｍｏｌ·Ｌ－１ＣｏＣｌ２组（１．６０±０．０９、１．６４±０．２４）中ＭＭＰ-１３表达较常氧组（１．００±０．２０）均增加（均为Ｐ＜０．０５）,而３００μｍｏｌ·Ｌ－１和４００μｍｏｌ·Ｌ－１ＣｏＣｌ２组中ＭＭＰ-１３表达与常氧组相同或稍低。三气培养箱构建的和ＣｏＣｌ２诱导的缺氧环境下培养２４ｈ后,ＢＭＳＣｓ中ＨＩＦ-１α蛋白表达较常氧组（１．００±０．２３）明显增加,相对表达量分别为３．４０±０．２６和３．１２±０．１３（均为Ｐ＜０．０１）,而两种缺氧模型间无明显差异。在培养２４ｈ时,物理缺氧组（１．５３±０．０４）和化学缺氧组（１．３１±０．１４）均较常氧组（１．０４±０．１０）细胞增殖能力增强（均为Ｐ＜０．０５）,且物理缺氧促增殖效果更明显。三气培养箱模拟的物理缺氧组、ＣｏＣｌ２诱导的化学缺氧组和常氧组ＲＦ／６Ａ管腔形成总长度分别为（５５０６±３８０）μｍ、（５１０９±５５８）μｍ和（３１２０±３００）μｍ,三气培养箱模拟的物理缺氧组和ＣｏＣｌ２诱导的化学缺氧组较常氧组均明显增加（均为Ｐ＜０．０１）,而两种缺氧模型之间差异则无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ＣｏＣｌ２和三气培养箱均可建立缺氧模型,促进ＢＭＳＣｓ表达ＭＭＰ-１３,提高其促血管形成能力,提示缺氧可能调控ＢＭＳＣｓ表达ＭＭＰｓ进而影响新生血管发生发展。     

枸杞多糖对高压诱导凋亡的视网膜神经节细胞延迟整流钾电流的影响

目的　观察枸杞多糖（ｌｙｃｉｕｍｂａｒａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ,ＬＢＰ）对体外高压诱导调亡的视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌｓ,ＲＧＣｓ）钾电流的影响。方法　生后２～３ｄ的ＳＤ乳大鼠ＲＧＣｓ原代培养,分为对照组、加压组和ＬＢＰ组,对照组为常规培养６ｄ;加压组为常规培养６ｄ后用自行设计的加压装置加压１ｈ８０ｍｍＨｇ（１ｋＰａ＝７．５ｍｍＨｇ）;ＬＢＰ组为常规培养５ｄ后,加入ＬＢＰ共培养２４ｈ后,再加压８０ｍｍＨｇ１ｈ。通过全细胞膜片钳技术观察各组钾电流、半数最大激活电压（Ｖ１／２）、斜率（Ｋ）、最大电导（Ｇｍａｘ）的变化。结果　加压能使电流幅度显著增加,ＬＢＰ能抑制加压引起的电流增加。在刺激电位为－１０～６０ｍＶ时,加压组的电流密度明显大于对照组,差异有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１,ｎ＝５／６）;ＬＢＰ组电流密度明显小于加压组,差异有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１,ｎ＝６／８）。三组钾电流Ｖ１／２总体差异有统计学意义（Ｆ＝５５．６０,Ｐ＜０．０１）,加压组Ｖ１／２（１１．６５±１．３０）ｍＶ与对照组（２１．４２±１．３３）ｍＶ、ＬＢＰ组（１９．３３±１３．７５）ｍＶ比较,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０１）;ＬＢＰ组Ｖ１／２与对照组Ｖ１／２比较,差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。三组Ｋ值分别是１７．０９±１．２４、１６．５８±１．１８、１８．１３±１．２９,总体差异无统计学意义（Ｆ＝１．３９,Ｐ＞０．０５）。三组Ｇｍａｘ总体差异有统计学意义（Ｆ＝３．７７,Ｐ＜０．０５）,加压组Ｇｍａｘ（０．５９±０．１３）与对照组Ｇｍａｘ（０．４６±０．０６）、ＬＢＰ组Ｇｍａｘ（０．４６±０．０７）比较,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;ＬＢＰ组Ｇｍａｘ与对照组Ｇｍａｘ比较,差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ＬＢＰ能抑制加压引起的ＲＧＣｓ钾电流增加,对ＲＧＣｓ具有保护作用。     

曲安奈德对年龄相关性白内障术后前葡萄膜炎的疗效及其对炎症因子的影响

目的　观察曲安奈德对年龄相关性白内障术后前葡萄膜炎的临床疗效及其对相关炎症因子的影响。方法　选择２０１０年２月至２０１２年６月间我科收治的年龄相关性白内障患者１６８例（１６８眼）为研究对象,按照治疗方式的不同分为对照组和曲安奈德组,每组各８４例（８４眼）。对照组予以术后结膜下注射地塞米松,而曲安奈德组给予前房注射２ｍｇ曲安奈德,对比两组患者术后第１天、第３天和第５天的最佳矫正视力、眼压、前房细胞数、房水闪辉情况,并于术后第５天测肿瘤坏死因子-α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ-α,ＴＮＦ-α）、干扰素-γ（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ-γ,ＩＦＮ-γ）和白细胞介素-１０（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ-１０,ＩＬ-１０）的含量变化。结果　曲安奈德组患者的最佳矫正视力在术后第３天已有明显改善,显著优于对照组（Ｐ＜０．０５）。且两组间前房细胞数及房水闪辉比较发现,术后第３天和第５天,两组差异均具有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。术后第５天曲安奈德组的ＴＮＦ-α和ＩＦＮ-γ的表达水平分别为（１９．６±８．９）ｐｇ?Ｌ－１、（１４．４±７．８）ｐｇ?Ｌ－１,显著低于对照组（２９．５±１４．２）ｐｇ?Ｌ－１、（３９．８±１０．３）ｐｇ?Ｌ－１,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）,而ＩＬ-１０含量两组间比较差异却无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　年龄相关性白内障手术中前房注射曲安奈德可有效抑制术后前葡萄膜炎,减少前房反应,且抗炎效果良好。     

依托咪酯通过PKC/NF-κB信号通路增加成年大鼠视神经损伤后RGC存活

目的　探讨依托咪酯对成年大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｌ,ＲＧＣ）的保护作用及其机制。方法　应用大鼠视神经眶内段切断模型,荧光金逆行标记存活ＲＧＣ;腹腔注射依托咪酯或玻璃体内注射蛋白激酶Ｃ（ｐｒｏｔｅｉｎｋｉ-ｎａｓｅＣ,ＰＫＣ）抑制剂Ｇ６９７６干预,应用ＰｅｐＴａｇ非同位素ＰＫＣ检测试剂盒检测视网膜ＰＫＣ活性,应用免疫印迹法分析视网膜核转录因子-κＢ（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｋａｐｐａＢ,ＮＦ-κＢ）水平。结果　依托咪酯显著增加大鼠视神经损伤后７ｄＲＧＣ存活数量（Ｐ＜０．０５）,而且显著降低视网膜ＰＫＣ活性和ＮＦ-κＢ水平（均为Ｐ＜０．０５）。Ｇ６９７６同样显著增加大鼠视神经损伤后７ｄＲＧＣ存活数量（Ｐ＜０．０５）,联合应用依托咪酯和Ｇ６９７６,其存活ＲＧＣ数量与单纯应用依托咪酯差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）;Ｇ６９７６显著降低视网膜ＮＦ-κＢ水平（Ｐ＜０．０５）。结论　依托咪酯可显著增加大鼠视神经损伤后ＲＧＣ存活数量,其机制可能与抑制ＰＫＣ／ＮＦ-κＢ信号通路有关。     

丝裂霉素C对阻塞性泪道MEK/ERK信号通路的影响

目的　探讨丝裂霉素Ｃ（ｍｉｔｏｍｙｃｉｎＣ,ＭＭＣ）对阻塞性泪道ＭＥＫ／ＥＲＫ信号转导通路及其相关蛋白表达水平的影响,旨在为临床阻塞性泪道疾病的诊治提供实验依据。方法　３０只健康家兔,分为正常对照组（ＮＣ组）、模型组、Ｎｄ-ＹＡＧ激光组（Ｙ组）、ＭＭＣ组及Ｎｄ-ＹＡＧ激光＋ＭＭＣ组（Ｙ＋Ｍ组）,每组各６只。通过球囊导管摩擦泪道建立阻塞性泪道模型,Ｙ组、ＭＭＣ组、Ｙ＋Ｍ组家兔分别给予Ｎｄ-ＹＡＧ激光、ＭＭＣ、Ｎｄ-ＹＡＧ激光联合ＭＭＣ治疗,治疗３个月后处死,光镜观察泪道上皮组织形态学变化,免疫组织化学法测定各组ＰＣＮＡ、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＭＭＰ-３、ＭＭＰ-９阳性细胞面积。分离阻塞性泪道细胞,随机分为空白组、阴性对照组（加入ＤＭＳＯ）及阳性荧光组（加入ＭＥＫ抑制剂ＰＤ９８０５９）,采用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测各组细胞ＥＲＫ１、ＥＲＫ２表达情况。结果　模型组ＰＣＮＡ、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＭＭＰ-３、ＭＭＰ-９阳性细胞面积均大于ＮＣ组,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）;Ｙ组、ＭＭＣ组、Ｙ＋Ｍ组ＰＣＮＡ、ＥＲＫ１、ＥＲＫ２、ＭＭＰ-３、ＭＭＰ-９阳性细胞面积均显著小于模型组,其中Ｙ＋Ｍ组小于Ｙ组及ＭＭＣ组,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。空白组、阴性对照组、阳性荧光组ＥＲＫ１的相对表达量分别为１５２．３２±７．４５、１４９．３６±７．９６、６４．３２±５．２３,ＥＲＫ２的相对表达量分别为１５４．９８±６．７８、１５１．２２±８．２３、６５．４５±３．４５,阳性荧光组中ＥＲＫ１、ＥＲＫ２蛋白表达水平显著低于空白组及阴性对照组,差异均有统计学意义（均为Ｐ＜０．０５）。结论　Ｎｄ-ＹＡＧ激光与ＭＭＣ联合应用可增加激光泪道成形术治疗效果,其作用机制可能与ＭＭＣ阻断ＭＥＫ／ＥＲＫ信号转导通路有关。     

飞秒激光小切口透镜切除术与飞秒LASIK术后角膜后表面高度变化

目的　应用Ｏｒｂｓｃａｎ-Ⅱ眼前节分析系统探讨飞秒激光辅助的准分子激光原位角膜磨镶术（ｆｅｍｔｏｓｅｃｏｎｄｌａｓｅｒｉｎｓｉｔｕｋｅｒ-ａｔｏｍｉｌｅｕｓｉｓ,Ｆｓ-ＬＡＳＩＫ）和飞秒激光小切口透镜切除术（ｓｍａｌｌｉｎｃｉｓｉｏｎｌｅｎｔｉｃｕｌｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ,ＳＭＩＬＥ）术后角膜后表面高度的变化。方法　前瞻性随机对照研究。选择２０１４年５月至１１月于我院行激光角膜屈光手术的近视患者（等效球镜度数≤ －６．００Ｄ）６０例（１１９眼）,随机分成Ａ、Ｂ两组,每组３０例（Ａ组５９眼,Ｂ组６０眼）。Ａ组施行ＳＭＩＬＥ,Ｂ组施行Ｆｓ-ＬＡＳＩＫ,观察术后视力、屈光度等的变化。采用Ｏｒｂｓｃａｎ-Ⅱ眼前节分析仪,分别于术前、术后１个月对术眼进行眼前节图像采集,记录角膜后表面Ｄｉｆｆ值变化并进行对比。结果　术后１个月两组患者裸眼视力均比术前提高,但两组间相比差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。术前最佳矫正视力与术后１个月相比差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）,术后最佳矫正视力两组间相比差异亦无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。术前及术后１个月Ａ、Ｂ两组屈光度相比差异均无统计学意义（均为Ｐ＞０．０５）。两组后表面Ｄｉｆｆ值均较术前显著增加,其中Ａ组术前、术后分别为（０．０２７±０．００１）ｍｍ和（０．０５９±０．００１）ｍｍ（Ｐ＜０．０５）;Ｂ组术前、术后分别为（０．０２９±０．００１）ｍｍ和（０．０５４±０．００２）ｍｍ（Ｐ＜０．０５）,但Ａ、Ｂ两组术后角膜后表面Ｄｉｆｆ值增加量相比差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论　ＳＭＩＬＥ和Ｆｓ-ＬＡＳＩＫ矫正近视均安全有效,术后１个月角膜后表面高度均部分前移,其远期变化有待进一步探索。