大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及催产素的共存

应用NADPH－d组织化学方法观察了大鼠第三脑室一氧化氮合酶阳性触液神经元的分布及其形态，并结合免疫组织化学技术研究了一氧化氮合酶与催产素在第三脑室触液神经元内的共存。结果显示：在视前区至室间核后大细胞亚核平面的第三脑室室壁均有一氧化氮合酶阳性触液神经元分布，呈自前向后，由腹侧部渐向背侧部过渡迁移的特征。一氧化氮合酶阳性触液神经元绝大部分为大细胞型标记神经元，胞体呈卵圆形、梭形、多角形与倒置梨形。它们位于脑室管膜内、室管膜下，或距室管膜有一定距离处，但有突起伸至第三脑室。第三脑室催产素免疫阳性触液神经元的形态及分布与一氧化氮合酶阳性触液神经元基本相似，两者高度共存。催产素／一氧化氮合酶双标神经元，约占阳性细胞总数的90.9%。上述三种阳性触液神经元与邻近核团关系密切，尤其与室旁核之间有很多的阳性纤维互相交错。本研究结果表明，第三脑室有大量的一氧化氮合酶与催产素免疫阳性神经元分布，并且高度共存，从而建立了催产素的下丘脑－脑脊液－垂体神经体液调节环路的结构基础，对生殖与性行为起着重要的调控作用。     

大鼠下丘脑大细胞分泌系统内一氧化氮合酶与催产素的共存

目的　为进一步阐明一氧化氮 (NO)与催产素 (OT)在下丘脑神经内分泌调节中的作用提供形态学资料。方法　用NADPH d组织化学方法 ,并结合免疫组织化学相结合技术 ,观察大鼠下丘脑大细胞分泌系统内一氧化氮合酶 (NOS)与OT免疫阳性神经元的分布与共存关系。结果　NOS与OT在下丘脑室旁核、视上核等下丘脑各大神经分泌核区内的分布基本类似 ,并呈部分共存关系。并且初次在第三脑室室周区内观察到NOS/OT双重反应阳性触液神经元。结论　研究结果提示NO与OT在有关下丘脑生殖与性行为的神经内分泌调节活动中起着重要的介质作用。     

自发性高血压大鼠第三脑室触液神经元内一氧化氮合酶与加压素的共表达

目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)与SD大鼠第三脑室触液神经元(CSFCN)内一氧化氮合酶(NOS)与加压素(VP)的分布和共存。方法:应用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学方法,结合ABC免疫组织化学技术。结果:在SHR视前区至室间核后大细胞亚核平面的第三脑室室壁均有NOS阳性CSFCN的分布;在SHR第三脑室室壁的CSFCN内NOS与VP具有共存性,且SHR组第三脑室的CSFCN内NOS与VP共存率较SD组高。结论:一氧化氮(NO)与VP在下丘脑的血压神经内分泌活动调节中起着重要的介导作用,也可能对高血压的发生发展有影响。     

大鼠脑室触液神经元的分布及其在中缝核团与NADPH-d的共存

目的系统研究脑内接触脑脊液神经元的分布,并对远位触液神经元与一氧化氮合酶的共存进行研究。方法将霍乱毒素B(CTB)注入侧脑室,5d后将动物进行灌注,留取全脑切片,进行CTB免疫组化染色和NADPH鄄d组化染色,镜下观察免疫阳性细胞和纤维的分布。结果CTB标记的触液神经元的分布分为3个区:脑室壁周围、蛛网膜下及大脑皮质表层以及脑实质内。在中缝背核、中缝正中核和线形核等部位还可见NADPH鄄d阳性细胞以及CTB/NADPH鄄d双标细胞。结论侧脑室内触液神经元分布广泛;在中缝系统部分NADPH鄄d阳性细胞与远位触液神经元的共存,提示一氧化氮在脑鄄脑脊液之间的信息传递中有一定作用。     

加压素、催产素神经元在大鼠丘脑下部的分布——免疫组化PAP技术

本文应用免疫组化 PAP 技术观察了正常与经秋水仙素处理的大鼠丘脑下部及其附近区域加压素、催产素神经元的分布及形态特征。加压素、催产素神经元分布在丘脑下部的前连合核,室旁核,视上核,视前区、室周区,副视上核,环状核,穹窿周围区域,和丘脑下部外侧区。另外在丘脑下部以外的区域如终纹床核,丘脑靠近内囊膝处,苍白球腹内侧区,室间孔前壁腹侧份,也有少数这两种神经元的分布。经秋水仙素处理的大鼠,在前连合核和视前区出现较多淡染的加压素神经元。分布在室旁核、室周区的加压素、催产素神经元的突起多伸向第三脑室室管膜下神经毡,有的伸入室管膜上皮内,甚至伸达第三脑室,少数催产素、加压素神经元似居于室管膜上皮细胞之间。     

大鼠投射到垂体后叶的加压素样免疫反应神经元与第三脑室室管膜及软脑膜的关系

本文运用WGA-HRP逆行标记与加压素免疫组织化学相结合的双标记方法,观察了大鼠投射到垂体后叶的加压素神经元在第三脑室周围的分布及其形态特点。发现双标记神经元主要分布在视前区平面、室旁核后大细胞亚核平面处第三脑室的背侧份、交叉上核平面处第三脑室的腹侧份。细胞为圆形、梭形、多角形和梨形。它们嵌入室管膜细胞之间,或紧贴室管膜下层,部分突起伸向第三脑室。在视上核主部和交叉后部,均见到较多的双标记细胞,主部细胞发出许多突起形成丛,伸向脑腹侧面,与蛛网膜下腔的脑脊液非常接近。作者认为,位于第三脑室周围和软脑膜下投射到垂体后叶的加压素神经元,与脑脊液非常接近,提示它们自脑脊液获得信息,调节垂体后叶加压素的释放,还可能向脑脊液中分泌加压素。     

一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠视上核及室旁核的分布

目的：探讨自发性高血压大鼠视上核及室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的改变。方法：用ＮＡＤＰＨ－ｄｉ－ａｐｈｏｒａｅ组织化学方法,观察和比较了一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠和正常对照大鼠视上核和室旁核的分布间下观察下捕脑视上核及室旁核的一氧化氮合酶阳性细胞形态、分布并进行计数。用图像分析仪测其灰度显差异。视上核及室旁核内的一氧化氮合酶阳性细胞灰度值在高血压组均明显高于对照组。提示这两上核内一氧化氮合酶     

大鼠丘脑下部室管膜上皮细胞间加压素和催产素神经元的免疫组织化学观察

本文应用免疫组化PAP技术观察了位于大鼠丘脑下部第三脑室室管膜上皮细胞之间的加压素(VP)和催产素(OXT)神经元。在视前区第三脑室空周,见有较多的OXT神经元和较少的VP神经元紧贴室管膜分布,其突伸至室管膜下神经毡,有的穿行于室管膜上皮细胞之间并多与室管膜上皮细胞接触。在室旁核平面,比较远离脑室的VP、OXT神经元发出长突起行向第三脑室,有的穿过室管膜上皮伸至第三脑室腔(图3)。在上述二区域也发现个别OXT及VP神经元的胞体位于第三脑室侧壁及底壁的宝管膜上皮细胞之间。此外,在视上核前部及结节部,VP神经元的树突,大多伸向脑的腹侧面,有的树突似乎伸入了蛛网膜下腔。上述这两种肽能神经元与室管膜上皮的密切位置关系,可作为VP、OXT神经元具有感受脑脊液的变化或直接向脑脊液释放其分泌产物等设想的形态学基础。     

一氧化氮合酶和5-羟色胺在体外培养的胚鼠脑干神经元内的共存研究

采用 NADPH-d组织化学和 5 -羟色胺免疫组织化学双重反应技术 ,探讨在体外培养条件下 E14 d SD胚鼠脑干神经元中5 -羟色胺与一氧化氮合酶阳性神经元的体外生长发育过程以及 5 -羟色胺与一氧化氮合酶的共存。将 E14 d SD胚鼠脑干细胞悬液接种于 2 4孔培养板 ,实验按培养龄分 4组分别在接种后 5 d、10 d、15 d和 2 1d终止培养 ,先进行 NADPH-d组织化学反应 ,再行 5 -羟色胺免疫组织化学反应。结果显示 :各实验组均可观察到三种神经元 ,即 5 -羟色胺免疫阳性神经元、一氧化氮合酶阳性神经元和两者的双重阳性神经元 ,其中双重阳性神经元占多数 ,并以梭形神经元为主 ,胞体呈三角形、多角形、梭形或卵圆形。 10 d组的双重阳性神经元突起最长可达 60 0μm以上 ,末端可见明显的生长锥 ,轴突终末分支上分布有大量的膨体 ,并与其它神经元的胞体或突起之间形成接触。本研究结果证明一氧化氮合酶和 5 -羟色胺可以在体外培养的胚鼠脑干神经元内共存 ,提示一氧化氮合酶可能与 5 -羟色胺共同参与胚脑的发育。     

大鼠下丘脑内的一氧化氮合酶与雌激素受体双标神经元

目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)和雌激素受体(ER)在下丘脑诸核团的分布及共存,为揭示雌激素与一氧化氮之间的内在联系提供形态学依据。方法:采用NADPH-d组织化学法并结合免疫组织化学技术,观察雌性大鼠下丘脑内NOS阳性神经元、ER阳性神经元以及NOS/ER双染神经元的形态及分布。结果:NOS阳性神经元主要分布在下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区和室周核;ER阳性神经元在下丘脑诸核团的表达不及NOS阳性神经元广泛;NOS与ER双染神经元主要分布在下丘脑的室旁核、视上核、下丘脑外侧区及室周核;其他区域可见散在分布的双染神经元。结论:NOS与ER双染神经元主要集中分布在视上核的背内侧和背外侧部及室旁核小细胞部腹内侧区,在下丘脑外侧区分布较广但比较分散,室周核呈散在分布。     

后叶加压素在下丘脑的分布和释放途径及失水对正中隆起中后叶加压素的影响

我们用免疫细胞化学方法(ICC)对大白鼠下丘脑中加压素(VP)免疫反应阳性的神经元作了较详细研究。观察到VP阳性神经元存在于下丘脑室旁核(PVN)各亚核、视上核(SON)、交叉上核(SCN)、室周核(PN)及一些附属核团,包括环状核(CN)、交叉后核(RCN)、下丘脑外侧核(HLN)、穹窿周围核(PFN)。且发现一特殊的VP阳性胞体聚集区—很可能是多巴胺神经元聚集区A_(14)中的细胞,位于第三脑室侧壁中1/3段两侧,腹内侧核背侧。本文首次观察到在PVN和SON之间有VP阳性的神经纤维相联系。ICC和免疫电镜研究进一步证明在正中隆起外带存在VP阳性纤维,含大颗粒囊泡的VP末梢紧邻门脉毛细血管。将HRP注入第四脑室用HRP逆行追踪与ICC方法相结合,在PVN中观察到双标细胞,与直接用ICC法所见VP阳性轴突伸入第三脑室腔的结果一致。说明PVN中存在接触脑脊液神经元。干渴动物正中隆起的内、外带中的VP免疫反应明显减弱。     

大鼠垂体后叶中神经降压素阳性神经纤维的起源

向垂体后叶注射WGA-HRP,进行逆行追踪并与免疫组织化学相结合研究了大鼠垂体后叶中神经降压素(NT)能神经纤维的起源。投射到垂体后叶的NT免疫阳性神经元胞体主要位于下丘脑室旁核小细胞部、室周区,环状核、室旁核大细胞亚核内侧部、视上核背侧部、穹窿后核及下丘脑前区、外侧区。弓状核内未见任何双标记神经元,从而否定了Goedert等用损毁的方法得出的大鼠垂体后叶中NT阳性神经纤维起源于弓状核的结论。一些室周双标记神经元位于室管膜内,距第三脑室腔很近,常挤在室管膜细胞之间。提示这些神元在监测脑脊液的化学变化,调节垂体后叶分泌方面起一定的作用。     

大鼠下丘脑一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的分布

观察大鼠下丘脑各核团NOS阳性神经元的分布。采用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（NADPH－d）法，结果显示，大量NOS阳性神经元见于下丘脑外侧区、视上核（SO）和室旁核（Pa）；出现较多NOS阳性神经元的部位是视前大细胞核，见到少量NOS阳性神经元的部位是室周核、视前内侧区、视前外侧区和下丘脑前区。结论：NOS阳性神经元分布于下丘脑的许多核团。     

大白鼠下丘脑促肾上腺皮质激素(ACTH)样免疫反应神经元的分布及功能意义

本文应用免疫细胞化学技术观察大白鼠下丘脑促肾上腺皮质激素样神经元胞体,纤维及串珠样膨体的分布。胞体位于弓状核、下丘脑前核的腹侧、视上背侧连合、室周层的腹侧区及乳头体核腹侧。纤维及串珠样膨体广泛地分布于下丘脑,串珠样膨体在室旁核和室周层密集。串珠样膨体贴室管膜分布,伸至室管膜下神经毯,有的穿行室管膜上皮细胞之间并多与室管膜上皮细胞接触或穿过室管膜上皮细胞之间至第三脑室腔。在第三脑室侧壁的室管膜上皮细胞之间偶见促肾上腺皮质激素反应细胞。室旁核区促肾上腺皮质激素免疫反应串珠样膨体可能作用于催产素和后叶加压素神经元,控制催产素和后叶加压素的分泌和释放。室周层的串珠样膨体直接与脑脊液接触可认为是促肾上腺皮质激素神经元释放分泌产物的另一途径。     

大鼠室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的构筑

利用黄递酶组织化学染色 ,观察鼠脑室旁核各亚核内 NOS阳性神经元的构筑。结果显示室旁核内 NOS阳性神经元主要分为两种类型 :大型 NOS阳性神经元 ,占大部分 ,相对密集、成群分布于室旁核四个大细胞亚核即 :前连合核、内侧室旁核、外侧室旁核、室旁核后亚核 ;小型 NOS阳性神经元 ,占小部分 ,散在分布于大细胞亚核内或小细胞部 ,如室旁核前小细胞部、背外侧帽。结果提示 ,室旁核各亚核内 NOS阳性神经元的形态与分布存在着差别 ,意味着具有多种相应的生理功能