滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究

目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果　对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论　DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。     

人体囊尾蚴抗原在临床试验中应用价值的探讨

目前 ,在囊虫病的临床血清学诊断试验中所用的抗原均采自猪体囊尾蚴。为探讨人体囊尾蚴抗原在临床试验中的应用价值 ,我们进行了下列试验。材料和方法1　抗原的制备　在无菌条件下 ,切除已确诊的人体皮下囊虫结节 ,置生理盐水中 ,洗涤数次。用 1ml的皮试针吸取囊液放入离心管中 ,2 0 0 0 r/min离心 2 0 m in后收集上清液 ,放入透析囊内置 4℃ ,以生理盐水透析 48h。然后测其蛋白含量(4 0 2 μg/ml) ,放 - 2 0℃ ,保存备用。2　试验血清　囊虫病病人血清 10 1份 ,均经囊虫血凝和囊虫酶标反复筛选。正常人血清 145份 ,采自济宁师专学生。3　结…     

猪囊尾蚴液、固相多种抗原对囊虫病免疫诊断效果评价

目的　筛选适合多种寄生虫病流行区使用的特异性较高的囊虫病免疫诊断抗原。　方法　制备猪囊尾蚴各类型液相抗原和固相抗原 ,用ELISA或IEST检测囊虫病流行区患者阳性血清抗体 ,比较各种抗原的敏感性和特异性。　结果　猪囊尾蚴全囊及囊液尿素溶性抗原与水溶性纯化抗原ELISA检测囊虫抗体的特异性差异无显著性 (P >0 .0 5 )。固相抗原IEST有敏感性好、操作简易的特点。　结论　猪囊尾蚴全囊尿素溶性纯化抗原是较理想的囊虫病ELISA诊断抗原 ,有诊断应用价值。固相石腊切片抗原IEST较为适合流行区现场或基层应用。     

猪囊虫病金标诊断试剂盒的研制及应用

绦、囊虫病是人兽共患寄生虫病之一 ,该病流行范围广 ,危害性严重 ,在我国分布于 2 9个省、市 ,估计绦、囊虫病患者约 30 0万人。早期诊断是囊虫病防治工作的要点 ,是减少患者 ,减轻病痛 ,降低损失 ,提高人口素质 ,发展社会经济的关键。目前 ,国内外广为应用胶体金免疫反应进行疾病检测诊断且多为抗体检测。本实验侧重研究应用于临床诊断绦、囊虫病的胶体金试剂盒的制备。1　材料与方法1 1　材料1 1 1　试验动物　BALB/c小鼠。1 1 2　免疫材料　猪囊尾蚴囊液抗原。1 1 3　反应载体　乙酸纤维膜 ;进口硝酸纤维膜。1 1 4　包被载体胶体金微…     

金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫病循环抗原的研究

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针,以抗猪囊尾蚴抗原的McAb为联桥,建立了非常规Dot-IGS用于检测脑囊虫病患者CAg的方法,用4G_2McAb检测84例脑囊虫病人脑脊液(CSF),CAg阳性率为88.09％。检测63例其他疾病患者,出现2例假阳性。以1F_(11)McAb检测14例脑囊虫病人,13例检出CAg,阳性率为92.86％。检测其他疾病患者36例,均为阴性。用4G_2与1F_(11),株McAb可分别检出最小抗原量为1ng/ml和0.25ng/ml。本法敏感、特异、操作简单,可用于脑囊虫病的诊断。     

猪囊虫囊液游离氨基酸组分的研究

应用氨基酸自动分析仪测定猪囊虫囊液的游离氨基酸组分及含量。从14只猪的皮下肌肉囊虫及10只猪的脑囊虫的囊液进行测定。在两者囊虫囊液所测定的18种氨基酸中,均以内氨酸含量最高;在皮下肌肉囊虫囊液,其次为甘氨酸和脯氨酸,在脑囊虫囊液,则以苏氨酸为次。用配对T检验方法比较7只猪的皮下肌肉和脑囊虫囊液中各种氨基酸含量表明,在不同部位囊虫囊液所含的15种氨基酸中,有12种含量存在显著差异,特别是苏氨酸、丝氨酸、丙氨酸、锁氨酸和酪氨酸出现差异非常显著。本研究结果提示上述氨基酸代谢差异,可能与猪囊虫在宿主的寄生部位不同有关.     

ELISA法间接检测囊虫患者血清特异抗原的探讨

目的 探讨简便的检测囊虫抗原的方法。方法 囊液抗原包被酶标板，ELISA法检测待检血清与含ELISA法1：8( )的囊虫抗体兔血清的混合液的抗体，滴度低于1：2(#)为阳性。结果 囊虫患者阳性率在82．69％-85．37％之间。讨论囊液抗原间接检测囊虫患者血清特异抗原结果稳定，方法简便，临床符合率较高。     

间接血凝试验在囊虫病诊断中的应用

囊虫病是人畜共患疾病,严重损害人民健康。本文报道用间接血凝试验检测人血清中囊虫抗体,具有较高的特异性和敏感性。 1 囊虫抗原致敏血球的制备 1·1 囊虫抗原的制备,选取新鲜的含猪囊蚴的猪肉,用消毒空针抽取囊液,经3000rpm/分离心10min,上清即为囊液抗原。用分光光度计测量蛋白     

应用酶联免疫吸附试验检测猪囊虫病特异抗体的研究

用猪囊虫粗抗原、B 抗原、等电聚焦技术分离的抗原组份和特异单克隆抗体亲和层析抗原,以ELSA间接法检测猪囊虫病血清抗体,结果特异性均不理想。应用单克隆抗体分析查明,在某些囊虫抗原分子上既有特异性抗原位点,又有非特异性位点。用特异单克隆抗体以ELISA抑制法检测猪囊虫病血清抗体,结果完全消除了假阳性反应,病猪血清检出率为86.41％(89/103)。     

组合抗原在人类包虫病与囊虫病快速鉴别诊断中的应用

为研究包虫病与囊虫病之间的鉴别方法,通过纯化羊肝细粒棘球蚴囊液抗原（EgB)、泡球蚴组织抗原（Em2)、猪囊虫囊液抗原（Tsc2)后,分别检测包虫病、囊虫病,其它寄生虫病及正常对照观察组的血清,结果发现它们对相应寄生虫病的敏感性都在91%以上,对除绦虫病以外寄生虫病患及正常健康对照组都有较好的特异性,但它们各自对细粒棘球蚴病,泡状棘球蚴病和囊虫病的诊断都有程度不同的交叉反应,然而将上述抗原进行组合后再对同一标本进行检测,表明EgB单项阳性可以诊断细粒棘球蚴病,Em2单项阳性及Em2 EgB阳性可以基本诊断泡状棘球蚴病,Tsc2单项阳性可以诊断囊虫病患,Em2 EgB Tsc2同时阳性则考虑囊虫病可能性为大,乘下极少数的患Tsc2 Em2同时阳性则需根据临床表现考虑对囊虫病和泡状棘球蚴病进行临床鉴别诊断。     

包虫和猪囊虫抗原免疫化学性质及酶联免疫印斑技术临床应用研究

用 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶联免疫印斑技术分别对人源细粒棘球蚴囊液、棘球蚴砂、猪囊尾蚴囊液抗原组分进行分析研究,并对两种病血清学交叉反应进行了试验。结果显示包虫囊液抗原有29条蛋白区带,有两条糖蛋白带。猪囊虫囊液抗原显示36条蛋白带谱,两条糖蛋白带。棘球蚴砂显示23条蛋白带谱。包虫病人血清与印有包虫囊液抗原的硝酸纤维膜反应显示23条反应带,其中特异带为6条。包虫病人、猪囊虫病人血清与此膜反应显示4条共同反应带。包虫病人血清与棘球蚴砂抗原膜反应显示4条主要特异反应带,包虫病人血清、猪囊虫病人血清与此膜反应显示1条共同反应带。猪囊虫病人血清与猪囊虫囊液抗原膜反应显示22条反应带,其中有5条特异反应带;包虫病人和囊虫病人血清与此膜反应显示3条共同反应带。     

福建省绦、囊虫病流行现状调查

目的 了解福建省猪带绦虫病、囊虫病流行现状。方法 随机选择5个县（市、区）16个村（点）。检测受检者血清猪带绦、囊虫抗体，阳性者询问病史。结果共查16371人，人群抗体阳性率为2．28%（89／3899）；人体猪带绦虫感染率为0．02％（3／16371）。结论 福建省流行猪带绦、囊虫病，应引起重视。     

囊虫病快速免疫色谱测试法的建立和初步应用

目的：建立一种敏感，特异，简便快速的囊虫病免疫诊断方法。方法：以胶体金标记抗猪囊尾蚴抗原单克隆抗体，将另一抗猪囊尾蚴抗原单克隆抗体在硝酸醋酸混合纤维素膜上固定成一条线，制成免疫测试条，待测抗原与金标单克隆抗体结合后沿着硝酸醋酸混合纤维素膜移动，与膜上的特异性单克隆抗体结合形成肉眼可见的褐红色线，结果：当猪囊尾蚴囊液抗原量为5ng时，测试条仍呈阳性反应，检测脑囊虫病患者脑脊液（CSF）的阳性率为82．60％，检测健康人CSF的阴性符合率为100％，将本法检测CSF结果与ELISA比较，两方法的敏感性和特异性相似，结论：本方法敏感，特异，操作简便快速，试剂稳定，重复性好，在囊虫病的诊断中具有很好的应用前景。     

人—猪囊虫、猪带绦虫动物模型替代性研究进展

猪囊虫病又称猪囊尾蚴病 (Ｃｙｓｔｉｃｅｒｃｏｓｉｓｃｅｌｌｕ ｏｓｅ)是一种危害畜牧业和人体健康的重要人兽共患寄生虫病 (ＰａｒａｓｉｔｉｃＺｏｏｎｓｉｓ)。该病主要分布于美洲、非洲及亚洲部分不发达地区 ,我国已有 2 7个省、市、自治区发现本病 ,猪囊虫病的感染率在全国平均为 5.32 % ,有的地区高达 30 %～ 50 % ,近有 2 2 0 0多万头猪患囊虫病。另外人囊虫病对人的危害也十分严重 ,可导致患者致残 ,甚至死亡。人是猪囊虫成虫 -猪带绦虫 (Ｔａｅｎｉａｓｏｌｉｕｍ )的唯一终末宿主 ,人的猪带绦虫病既可污染环境造成更多猪只患囊…     

金标免疫渗滤法在脑囊虫病诊断中的应用

为寻找简便可和的脑囊虫病诊断方法。将2株抗猪囊尾蚴囊液抗原McAb, 一个滴于硝酸纤维素膜上,另一与胶体金结合,建立了检测脑囊虫病患脑脊液（CSF）中循环抗原（CA）的金标免疫渗滤法（DIGFA）,本法中抗原=、抗体通过渗滤在膜上进行反应,10分钟内即可用肉眼观察结果,以该法检测48例脑囊虫病患CSF、26份健康人CSF及23例非囊虫病患CSF,对检测样本作了沸浴处理,处理前后的48例脑囊虫病患CSF阳性检出率分别是77.08%和93.75%,处理前后的对照CSF阴性符合率均未改变,26例健康人CSF,阴性符合率为96.15%;23例非囊虫病患CSF,1例出现阳性反应,交叉反应率为4.35%,该方法可检出最小抗原量为0.5ug/L沸浴处理可提高脑囊虫病人CSFR的CA阳性检出率,DIGFA敏感、特异重复性好,操作简便,无需特殊设备,可用于囊虫病的诊断。     

猪肉和人皮下猪囊虫囊液抗原的免疫印迹分析

应用SPA-ELISA、SDS-PAGE和IB(免疫印迹)技术对猪肉及人皮下结节内猪囊虫囊液的抗原成份进行了分析比较。结果表明,凝胶中考马氏亮蓝和氨基黑染色所示的蛋白条带以及血清抗体所识别的特异性抗原成份中,取自猪肉中的囊虫囊液较取自人体的囊液含量高,免疫反应性强。两种抗原用于SPA-ELISA诊断未见有明显差异。     

检测血清、脑脊液中循环抗原用于脑囊虫病诊断及疗效评估的研究

以猪囊尾蚴囊液抗原免疫家兔制备抗体,用常规ELISA法和斑点ELISA法(Dot-ELISA分别检测脑囊虫病人血清和脑脊液(CSF)中循环抗原(CAg),结果两法用于检测的敏感性与特异性相近。以Dot-ELISA法检测,脑囊虫病人血清和(CSF中CAg检出率分别为72.2％和77.7％,特异性为93.7％。吡喹酮治疗后,CSF中循环抗原消失较血清中明显缓慢,2疗程治疗后CSF中CAg检出率仍达74％,而血清中CAg检出率为40.7％,说明常规吡喹酮治疗后脑囊虫较外周组织中囊虫死亡缓慢,因此治疗后检测CSF中CAg更能判定疗效。     

斑点金免疫渗滤法在检测囊虫抗体中的应用

目的　将斑点金免疫渗滤法用于检测囊虫抗体 ,以制备囊虫病诊断试剂盒。方法　经透析的猪囊尾蚴囊液作为检验抗原 ,对 71份囊虫病患者、90份正常人和 2 0份其他病患者血清进行了斑点金免疫渗滤法检测并与酶联免疫吸附法比较。结果　斑点金免疫渗滤法的敏感性为 90 .1% (6 4 / 71) ,特异性为 95 .6 % (86 / 90 ) ,其他病患者血清反应中仅 1例脑肿瘤患者血清阳性 ,其余为阴性。斑点金免疫渗滤法和酶联免疫吸附法的符合率为94 .4 % (15 2 / 16 1)。结论　斑点金免疫渗滤法有较好的应用于临床检测囊虫病的潜力     

囊泡型脑囊虫病的诊断与治疗分析

目的　探讨囊泡型脑囊虫病的诊断和最佳治疗方法。　方法　收集所确诊的 2 0 5例脑囊虫病中 17例囊泡型囊虫病病人的资料 ,采用回顾性研究方法 ,分析其影像学检查、诊断和治疗方法的成功与失误。　结果　 13例行全切或部分切除 ,其中 1例死亡 ,其余取得较好疗效。 4例行肠虫清抗囊治疗 ,3例取得较好效果 ,1例未能随访。　结论　囊泡型囊虫绝大部分为多发 ,主要症状是囊泡的占位效应。应与脑包虫、蛛网膜囊肿等鉴别。可以应用常规开颅或神经内镜技术摘除主要的囊泡 ,缓解颅内高压。药物治疗是根本的方法。药物治疗脑实质内的囊虫囊泡效果好于脑池内的囊虫囊泡。     

猪囊虫体表抗原用于 ELISA 诊断囊虫病的研究

应用猪囊尾蚴体表抗原对66例临床确诊的囊虫病人用 ELISA 进行检测,同时以囊液粗抗原作比较观察。阳性率分别为95.5%和68.2%,两者差异非常显著(P<0.005)。两种抗原对同批血清的反应强度也呈现明显差异(P<0.05)。用囊虫体表抗原和囊液粗抗原同时检测50名健康人血清,假阳性率分别为2%与12%;两种抗原与10例包虫病人血清分别有8例和4例出现交叉反应。