粉防己碱、颅通定对兔窦房结动作电位及豚鼠心室肌单细胞钙电流的协同作用

采用标准微电极技术和膜片钳记录技术，分别研究了粉防己碱（Ｔｅｔ）和颅通定（ｒｏｔｕｎｄｉｎｅ）对家兔窦房结动作电位及豚鼠心室肌单细胞钙电流的影响。结果表明：Ｔｅｔ１～２００μｍｏｌ·Ｌ－１，ｒｏｔｕｎｄｉｎｅ３～３００μｍｏｌ·Ｌ－１能浓度依赖性地降低兔窦房结动作电位的ＡＰＡ，Ｖｍａｘ和ＳＰ４，延长ＳＣＬ。Ｔｅｔ０．３μｍｏｌ·Ｌ－１与ｒｏｔｕｎｄｉｎｅ１μｍｏｌ·Ｌ－１合用亦有作用。在膜片钳实验中Ｔｅｔ０．１μｍｏｌ·Ｌ－１和ｒｏｔｕｎｄｉｎｅ１μｍｏｌ·Ｌ－１合用能有效抑制豚鼠心室肌单细胞钙电流，抑制率为１９．２％。提示，两种植物源性抗钙剂有良好的协同效果。     

粉防己碱对分离的豚鼠心室肌单细胞动作电位及钙通道电流的影响

用自行研制的膜片钳实验系统，研究粉防己碱对分离的豚鼠心室肌单细胞动作电位及钙电流的影响。在电流钳制方式下，给予脉宽３ｍｓ，０．５Ｈｚ电流刺激，引出单细胞动作电位，粉防己碱３０μｍｏｌ·Ｌ－１可使ＡＰＤ５０缩短７２．２％，ＡＰＤ９０缩短４４．０％，而静息电住，动作电位幅值无明显改变，在电压钳方式下，保持电位－４０ｍＶ，给予脉宽１５０ｍ５、０．５Ｈｚ去极化刺激可记录到Ｌ型钙通道电流，０．３～３００μｍｏｌ·Ｌ－１粉防己碱浓度依赖性地阻滞钙电流，ＩＣ５０＝１３．３μｍｏｌ·Ｌ－１．粉防己碱对钙通道的电流－电压关系无明显影响。     

异紫堇啡碱对家兔窦房结及豚鼠心室肌动作电位的作用

用细胞内固定微电极技术观察了异紫堇啡碱(isocorydine)对家兔窦房结电活动、豚鼠心室肌动作电位及Ba²⁺诱发的豚鼠心室肌自发电活动的作用。结果表明,异紫堇啡碱能使窦房结细胞APA,SP₀,SP₄减小、APD₉₀延长、自律性降低。3 μM异紫堇啡碱能使心室肌细胞的APD₅₀,APD₉₀和ERP延长,300μM异紫堇啡碱则使心室肌细胞APD₅₀和APD₉₀缩短,但不缩短ERP,使ERP相对延长。300μM异紫茧啡碱亦能明显抑制Ba²⁺诱发的心室肌自发电活动。     

异紫堇啡碱对家兔窦房结及豚鼠心室肌动作电位的作用

用细胞内固定微电极技术观察了异紫堇啡碱(isocorydine)对家兔窦房结电活动、豚鼠心室肌动作电位及Ba~(2+)诱发的豚鼠心室肌自发电活动的作用。结果表明,异紫堇啡碱能使窦房结细胞APA,SP_0,SP_4减小、APD_(90)延长、自律性降低。3 μM异紫堇啡碱能使心室肌细胞的APD_(50),APD_(90)和ERP延长,300μM异紫堇啡碱则使心室肌细胞APD_(50)和APD_(90)缩短,但不缩短ERP,使ERP相对延长。300μM异紫茧啡碱亦能明显抑制Ba~(2+)诱发的心室肌自发电活动。     

青藤碱对豚鼠心室乳头状肌慢反应动作电位的效应

用细胞内微电极技术,观察青藤碱对几种慢反应活动的影响,发现青藤碱82 μmol降低高K⁺除极化慢反应动作电位幅度(APA)和(V)_max,同时延长APD₉₀。进一步的研究发现,青藤碱对V_max的抑制呈频率依赖性,频率愈高,抑制作用愈强。小剂量青藤碱抑制Ba²⁺诱发的乳头状肌自发电活动,大剂量可以取消此种自发电活动。对Mg²⁺引起的Mg²⁺/Ca²⁺混合电位,青藤碱有非选择性抑制作用。结果提示青藤碱对钙通道具有阻滞作用,其抗心律失常作用也可能与此有关。     

用β-escin穿孔膜片技术研究粉防己碱对豚鼠心室肌钙电流的作用

目的用β-escin穿孔膜片(PPR)技术研究粉防己碱(tetrandrine,Tet)对I_Ca,L和I_Ca,T的作用。方法用PPR和全细胞记录(WCR)模式记录心室肌细胞I_Ca,L和I_Ca,T。结果25 μmol·L^-1 β-escin可在心室肌细胞形成稳定的PPR模式,用此模式记录的I_Ca,L衰减明显减慢。在PPR模式下1～300 μmol·L^-1 Tet浓度依赖性地减小I_Ca,L幅值。3,30和300 μmol·L^-1 Tet对I_Ca,T的抑制率分别为(16±5)%,(40±7)%和(75±11)%。结论用25 μmol·L^-1 β-escin在豚鼠心室肌细胞能得到较稳定的PPR模式,在此模式下Tet浓度依赖性地抑制I_Ca,L和I_Ca,T。     

藻酸双酯钠对豚鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的　研究藻酸双酯钠 (PSS)对豚鼠心室肌细胞动作电位和L 型钙电流的影响。方法　采用全细胞膜片钳记录技术。结果　PSS明显缩短动作电位时程 (APD) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使APD90 缩短 2 4 9% (P <0 0 5 ,n=6 )、37 7%和 4 7 7% (P <0 0 1,n =6 ) ,使APD50 缩短2 1 1% (P <0 0 5 ,n =6 )、4 5 0 %和 6 3 2 % (P <0 0 1,n =6 ) ,呈明显的剂量依赖关系。PSS浓度依赖性减小L 型钙电流 (Ica L) ,5 0、10 0和 2 0 0mg·L-1浓度 ,分别使其峰值降低34 3% (P <0 0 5 ,n =6 )、5 8 4 %和 74 9% (P <0 0 1,n =6 )。随着PSS浓度的增加 ,L 型钙电流的I U曲线逐渐上移 ,但其最大激活电压保持为 0mV不变。结论　PSS明显缩短APD ,抑制Ica L,且呈浓度依赖关系     

粉防己碱对吗啡在离体豚鼠回肠中依赖性的作用

AIM: To evaluate the effects of tetrandrine (Tet) and nimodipine (Nim) on the morphine (Mor) withdrawal response in the isolated guinea pig ileum. METHODS: The withdrawal contracture was elicited by addition of naloxone (Nal) (1 mumol.L-1) to the isolated naive ileum incubated with Mor (3 mumol.L-1) at 37.5 degrees C for 4 h or to the ileum obtained from Mor-dependent guinea pig. RESULTS: When Nim (0.01, 0.05, and 0.1 mumol.L-1) or Tet (1, 10, and 50 mumol.L-1) was added 1 min before Nal in the naive ilea bathed in Krebs solution containing Mor, or when the ilea from Mor-dependent guinea pigs were incubated with Nim (0.01, 0.05, and 0.1 mumol.L-1) or Tet (1, 10, and 50 mumol.L-1) for 15 min, or when Nim (5 and 10 mg.kg-1, i.p.) or Tet (15 and 30 mg.kg-1, i.p.) was administered in vivo to Mor-dependent guinea pigs, the Nal-precipitated withdrawal contracture was significantly decreased in a dose-dependent manner. CONCLUSION: Tet and Nim, Ca2+ channel blockers, could inhibit the Nal-precipitated Mor withdrawal response in the isolated guinea pig ileum.     

苦参碱、青蒿素和粉防己碱对豚鼠心室肌细胞胞浆钙的影响

目的:比较苦参碱、青蒿素和粉防己碱对分离的豚鼠心室肌细胞胞浆钙的影响。方法:用酶解法急性分离的豚鼠心室肌细胞先用Fluo 3-AM负载,然后用激光扫描共聚焦法检测单个豚鼠心室肌细胞胞浆钙的荧光强度。结果:(1)KCl 60mmol·L~(-1)可升高心室肌细胞胞浆钙荧光强度,其荧光强度从299±19升高到1389±325(P<0.01)。(2)苦参碱和青蒿素在浓度为100μmol·L~(-1)可使KCl 60mmol·L~(-1)引起的外钙内流增多,其荧光强度分别从301±14和299±16升高到1495±320和1646±308(P<0.05)。(3)粉防己碱1、10及100μmol·L~(-1)和维拉帕米10μmol·L~(-1)可抑制KCl引起的外钙内流。(4)在正常细胞外液中,苦参碱1、10和100μmol·L~(-1)可使细胞内荧光强度增强,其荧光强度分别从303±27,300±32,296±19上升到441±96,504±112,643±126(P<0.05)。(5)在无钙细胞外液中,粉防己碱1和10μmol·L~(-1)可明显抑制咖啡因20mmol·L~(-1)引起的胞浆钙升高(P<0.05)。结论:苦参碱、青蒿素和粉防己碱对豚鼠心室肌细胞胞浆钙的影响不同。青蒿素和苦参碱可加强电压依赖性钙内流,而粉防己碱与维拉帕米作用相似,抑制这种钙内流。苦参碱本身可以促进外钙内流。     

妥卡尼对豚鼠心室肌细胞钙电流和钾电流的抑制作用

利用酶分散的成年豚鼠心室肌细胞和全细胞电压钳技术,研究了妥卡尼(tocainide)对心室肌细胞钙电流(I_ca)、延迟整流钾电流(I_k)和ATP敏感性钾电流(Ik,ATP)的作用。结果表明,妥卡尼对I_ca和I_k均显示浓度相关的抑制作用,妥卡尼50umol·L^-1对I_ca和I_k的抑制率分别为16%和3%。这可能是妥卡尼有效抑制室上性心动过速和缩短心肌动作电位平台期的重要机制。     

SELECTIVITY OF DIFFERENT CALCIUM ANTAGONISTS ON T- AND L-TYPE CALCIUM CURRENTS IN GUINEA-PIG VENTRICULAR MYOCYTES

Both L- and T-type calcium channels are present in the heart. In cardiac myocytes L-type calcium channels are blocked by the classical calcium channel blockers, while T-type calcium channels are thought to be insensitive to these drugs and to be selectively blocked by mibefradil. We aimed to compare the T/L calcium channel blocking selectivity of several calcium channel blockers by evaluating their effects on both components evoked in the same cell from a holding potential corresponding to the normal physiological value (−90 mV). Currents were recorded in single patch-clamped guinea-pig ventricular myocytes, superfused with a Na⁺- and K⁺-free solution to abolish overlapping currents. Two dihydropyridines (amlodipine and lacidipine), verapamil diltiazem and mibefradil were tested; for each compound concentrations equieffective on L-type Ca²⁺ current were used. All calcium channel blockers, at concentrations blocking less than 30% of L-type Ca²⁺ current, inhibited a significant amount of T-type Ca²⁺ current, varying from 0.8% (diltiazem) to 28% (mibefradil). We calculated for each compound the T/L ratio. As expected, mibefradil showed the highest T selectivity; lacidipine and diltiazem resulted to be L selective. Verapamil and amlodipine were not selective. Thus, the calcium channel blockers can be differentiated on the basis of their T/L selectivity.     

4-氨基吡啶对豚鼠心室肌钙和钠电流的影响

目的研究4-氨基吡啶(4-AP)对心肌细胞L型钙通道和钠通道的影响。方法用全细胞膜片钳技术考察4-AP对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和钠电流的作用。结果4-AP0.1,0.5,1.0mmol·L^-1浓度依赖性地抑制L型钙电流(I_Ca,L)和钠电流(I_Na),抑制率分别为(11.6±1.7)%,(37.5±8.3)%和(54.5±6.9)%以及(22.1±14.3)%,(39.4±8.8)%和(62.3±6.8)%。0.5mmol·L^-14-AP使I_Ca,L和I_NaI-V曲线均上移。结论4-AP可浓度依赖性地阻滞豚鼠心室肌细胞L型钙通道和钠通道。     

烟酰胺对家兔窦房结细胞动作电位的影响及其机制探讨

在离体家兔窦房结标本上,应用微电极技术,观察到NIC(4000 mg/L)使窦房结细胞动作电位的SP_4平均增加62%(P<0.01);SCL平均减少27%(P<0.01);APD_(90)平均减少12%(P<0.05);APA,SP_0无显著变化。VER(0.1 mg/L)可完全阻断NIC的作用,但对ISO(0.03mg/L)的作用无明显影响;PRO(0.25 mg/L)可完全阻断ISO的作用,但NIC的作用不受影响。实验结果提示,NIC可能是一个钙通道激活剂,通过促进i_(?)而增加窦性频率。     

烟酰胺对家兔窦房结细胞动作电位的影响及其机制探讨

在离体家兔窦房结标本上,应用微电极技术,观察到NIC(4000 mg/L)使窦房结细胞动作电位的SP₄平均增加62%(P<0.01);SCL平均减少27%(P<0.01);APD₉₀平均减少12%(P<0.05);APA,SP₀无显著变化。VER(0.1 mg/L)可完全阻断NIC的作用,但对ISO(0.03mg/L)的作用无明显影响;PRO(0.25 mg/L)可完全阻断ISO的作用,但NIC的作用不受影响。实验结果提示,NIC可能是一个钙通道激活剂,通过促进i_si而增加窦性频率。     

3,6-[二甲氨基]-二苯骈碘因甲酸盐对豚鼠单—心室肌细胞动作电位和慢内向钙电流的影响

采用全细胞电压钳技术,观察了3,6-[二甲氨基]-二苯骈碘因甲酸盐(IHC-64)对豚鼠单一心室肌细胞动作电位和慢内向钙电流(I_si)的影响。结果表明,IHC-64 20和200 μmol/L可明显缩短APD₂₀和APD₉₀。予先给予钙通道阻滞剂尼索地平可取消IHC-64缩短APD₂₀的作用。在电压钳条件下,上述浓度的IHC-64对I_si有明显的抑制作用,I_si由给药前的1.92±0.41 nA分别降低至给药后1.73±0.50 nA(P<0.05)和0.62±0.38 nA(P<0.01).提示IHC-64可能对心肌细胞钙通道有阻滞作用。     

3,6-[二甲氨基]-二苯骈碘因甲酸盐对豚鼠单—心室肌细胞动作电位和慢内向钙电流的影响

采用全细胞电压钳技术,观察了3,6-[二甲氨基]-二苯骈碘因甲酸盐(IHC-64)对豚鼠单一心室肌细胞动作电位和慢内向钙电流(I_(si))的影响。结果表明,IHC-64 20和200 μmol/L可明显缩短APD_(20)和APD_(90)。予先给予钙通道阻滞剂尼索地平可取消IHC-64缩短APD_(20)的作用。在电压钳条件下,上述浓度的IHC-64对I_(si)有明显的抑制作用,I_(si)由给药前的1.92±0.41 nA分别降低至给药后1.73±0.50 nA(P<0.05)和0.62±0.38 nA(P<0.01).提示IHC-64可能对心肌细胞钙通道有阻滞作用。     

多粘菌素B对小白鼠右心室肌动作电位的影响

The effects of polymyxin B (PXB) on action potential of the mice right ventricular myocardial cell were studied by means of intracellular capillary glass electrode. The action potential amplitude (APA) and maximal depolarization rate of phase O (V_max) of action potential were lowered after administering PXB for 5 min. APA was lowered from 104.0±4.2 mV to 100.7±5.1mV, decreasing 3.2% (P<0.01); V_max was lowered from 691.5±114.1 v/s to 515.15±71.5 v/s, decreasing 25.5% (P<0.001). Practically, the resting potential remained unchanged. With the continued administration of PXB, the functional refractory period was significantly prolonged. APA₉₀ was temporarily shortened and then prolonged. The results suggest that PXB inactivate or block the fast sodium channel in myocardial cell membrane, which may relate to the antiarrhythmic effect in animal experiment.     

多粘菌素B对小白鼠右心室肌动作电位的影响

多粘菌素B(polymyxin B简称PXB)属多肽类抗生素。临床上主要用于抗革兰氏阴性细菌感染。它尚能阻滞骨骼肌神经肌肉接头和神经节冲动的传递,大剂量有抑制心脏等作用。本实验室曾在动物实验中发现PXB有显著的抗心律失常作用。对结扎冠状动脉左旋支,乌头碱所致心律失常的抑制作用,显著大于利多卡因。本文研究PXB对心室肌动作电位的影响,以探讨其抗心律失常机制。