2型糖尿病合并高血压与血管肾张素转化酶Ⅰ基因多态性的相关性及其脂质代谢的研究

目的：探讨广西汉族2型糖尿病（DM）合并高血压ACE基因I／D多态性的相关情况及其与血脂代谢的关系。方法：采用多聚酶链反应（PCR）技术，对81例广西地区汉族2型DM无合并高血压患者和39例2型DM合并高血压患者及100名汉族正常对照的ACE基因插入／缺失（I／D）多态性及血脂进行检测。结果：2型DM合并高血压组ACE基因各等位基因及其型频率与正常对照组及无合并高血压组比较无统计学意义（P＞0．05）。2型DM合并高血压DD基因型组ID基因型组甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）高于正常组，高密度脂蛋白胆固醇－HDL－C）低于正常组（P＜0．05），Ⅱ基因组型TG、TC及LDL－C低于DD基因型组及ID基因型组（P＜0．05），与正常组对照组比较无统计学意义，HDL－C高于DD型组及ID基因型（P＜0．05）；ID基因型组TG高于正常组，DD基因型组Ⅱ基因型组（P＜0．05）。结论：广西地区汉族2型DM合并高血压与ACE基因I／D多态性无关联。2型DM合并高血压DD基因型及ID基因型者与正常人比较更易患高甘油三酯血症，高总胆固因症及高低密度脂蛋白胆固醇血症，Ⅱ基因型者不易患高脂血症，ID基因型者更易患列高甘油三酯血症。     

2型糖尿病合并冠心病与血管紧张素转化酶Ⅰ基因多态性的相关性及脂质代谢的研究

目的：探讨2型糖尿病（DM）合并冠心病（CHD）与血管紧张素转化酶Ⅰ（ACE）基因插入／缺失（I／D）多态性的相关性及其各基因型脂代谢情况，方法：采用多聚酶链反应（PCR）技术，对32例广西地区汉族2型DM合并CHD患者，88例2型DM无合并CHD患者及100名汉族正常对照的ACE基因I／D多态性及血脂进行检测。结果：2型DM合并CHD组ACE基因D等位基因及ID基因型发生频率高于正常对照组及无合并CHD组（P＜0．05），Ⅰ等位基因及Ⅱ基因型频率低于正常对照组及无合并CHD（P＜0．05）。2型DM合并CHD组ID基因型组甘油三酯（TG）及总胆固醇（TC）高于正常对照组、DD基因型组及Ⅱ基因型组，高密度脂蛋白胆固醇（HDL－C）低于正常对照组，低密度脂蛋白胆固醇（LDL－C）高于正常对照组（P＜0．05）。2型DM合并CHD DD基因型组LG、LDL－C及TC高于正常对照组（P＜0．05）。结论：（1）广西地区汉族2型DM合并CHD与ACE基因I／D多态性有关。（2）D等位基因及ID基因型可能为2型DM合并CHD的易感基因，Ⅰ等位基因及Ⅱ基因型可能为2型DM合并CHD的保护基因，（3）广西地区汉族2型DM合并CHD的ID基因型者及DD基因型者易合并高甘油三酯血症及高胆固醇血症。     

血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态和2型糖尿病视网膜病变相关性研究

目的：研究血管紧张素Ⅰ转化酶（ACE）基因插入／缺失（I／D）多态和中国汉族2型糖尿病患者视网膜病变（DR）的相关性。方法：用PCR技术检测102例2型糖尿病患者ACE基因I／D多态基因型。结果：DR组与无DR组,病程＜5年合并DR者（n=10)与病程＞5年无DR者（n=19)相比,D型等位基因和DD基因型的频率均无显著增高（P＞0．05）。但增生DR组（n=17)较单纯DR组（n=20)D型等位基因和DD基因型的频率增高（x^2分别为6．15、4．38,P＜0．05）。结论：ACE基因I／D多态与2型糖尿病视网膜病变无相关性,与某些患者早期发展为DR无关,与增生性视网膜病变有关。     

血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性在宁夏农村回汉族人群中的分布及其与原发性高血压的关系

目的研究血管紧张素转换酶(ACE)基因插入／缺失多态性在宁夏农村地区回汉族人群中的分布,探讨其与农村回汉族高血压的关系。方法利用PCR技术对37例农村地区回族高血压患者,42例回族正常人,81例同一地区的汉族高血压患者以及34例汉族正常人进行ACEI／D基因型的分析比较。结果宁夏农村地区回族高血压患者的ACE基因I／D多态性基因型分布是：Ⅱ型27．0％、ID型27．1％、DD型45．9％,回族正常对照的基因型分布是Ⅱ型31．0％、ID型26．1％、DD型42．9％,同一地区汉族高血压患者的基因型分布是Ⅱ型37．0％、ID型23．5％、DD型39．5％,汉族对照组的基因型分布是Ⅱ型57．6％、ID型21．2％、DD型21．2％。结论宁夏农村地区回族人群的ACE基因I／D多态性的基因型分布与同一地区相应汉族人群的分布无显著差异,D等位基因正常汉族高于相应回族人群和汉族高血压组。     

血管紧张素Ⅰ转化酶基因多态和2型糖尿病视网膜病变相关性研究

目的 :研究血管紧张素Ⅰ转化酶 (ACE)基因插入 /缺失 (I/D)多态和中国汉族 2型糖尿病患者视网膜病变 (DR)的相关性。方法 :用PCR技术检测 10 2例 2型糖尿病患者ACE基因I/D多态基因型。结果 :DR组与无DR组、病程 <5年合并DR者 (n =10 )与病程 >5年无DR者 (n =19)相比 ,D型等位基因和DD基因型的频率均无显著增高 (P >0 .0 5)。但增生DR组 (n =17)较单纯DR组 (n =2 0 )D型等位基因和DD基因型的频率增高 (χ2 分别为 6 15、4 38,P <0 .0 5)。结论 :ACE基因I/D多态与 2型糖尿病视网膜病变无相关性 ,与某些患者早期发展为DR无关 ,与增生性视网膜病变有关。     

ACE基因I/D多态性与郴州地区汉族2型糖尿病患者CIMT的关系

目的 探讨血管紧张素转化酶(angiotensin- converting enzyme,ACE)基因插入/缺失(insertion/deletion,L/D)多态性在郴州地区汉族2型糖尿病患者中的分布及其与糖尿病血管病变的关系.方法 病程大于2年的郴州地区汉族2型糖尿病患者168例,依据是否合并高血压(hypertension,HT)、糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)和糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)等归类.采用PCR法确定其ACE基因多态性,高分辨彩超测量了其颈动脉内中膜厚度(carotid intima- media thickness,CIMT),分析了I/D多态性与HT、DN、DR和CIMT的关系.用Logistic回归分析探讨了CIMT增厚的危险因素.结果 ACE基因型在本组患者中分布为:DD型21.4％,ID型38.1％,Ⅱ型40.5％.3个基因型之间CIMT(P=0.001)、并发DN的比例(P=0.001)和合并HT的比例(P=0.005)有统计学差异.CIMT增厚的危险因素包括女性性别,DD基因型,并发DN和高龄.结论 郴州地区汉族2型糖尿病患者ACE基因的D等位基因与HT、CIMT增厚及DN等血管病变正相关.CIMT增厚的危险因素包括女性,DD基因型,并发DN和高龄.     

中国心肌梗死患者血管紧张素Ⅰ转换酶基因插入/缺失多态性Meta分析

目的对中国人血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)基因内含子16插入(I)/缺失(D)多态性与心肌梗死的关联性进行Meta分析.方法以心肌梗死组和健康对照组基因型分布的比值比(OR)为统计量.全面检索到相关文献,剔除不符合要求的文献,排除发表偏倚的影响,应用REVMAN3.1软件对各研究结果进行一致性检验和采用相应的数学模型进行数据合并.结果相关文献未发现显著发表偏倚,数据合并结果心肌梗死组和健康对照组DD/(ID+II)OR 2.33,95%可信区间(CI)1.65～3.29,(P＜0.01),II/(ID+DD)OR 0.59,95%CI 0.47～0.73,(P＜0.01).结论中国人ACE I/D多态性与心肌梗死有关联,心肌梗死组DD基因型增多,II基因型减少.     

血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性与中国汉族人脑梗死关系的Meta分析

目的：系统评价中国汉族人血管紧张素转换酶(ACE)基因插入／缺失(D／I)多态性与脑梗死的关联性。方法：联合运用3种有效文献检索途径，全面检索ACE基因插入／缺失多态性与脑梗死病例对照研究的相关文献，剔除不符合要求文献，9个相关研究校用于Meta分析。各研究间存在异质性，故采用随机效应模型进行数据合并，以脑梗死组和对照组基因型分布的比数比(0R)为统计量。结果：共2066例脑梗死和对照者被用于Meta分析，数据合并后ACE DD基因型与ID Ⅱ基因型的OR为1.58，95％可信区间为1．0—2．41。结论:中国汉族人ACE基因缺失型是脑梗死的危险因素。     

2型糖尿病合并高血压与血管紧张素转化酶I基因多态性的相关性及其脂质代谢的研究

目的:探讨广西汉族2型糖尿病(DM)合并高血压与ACE基因I/D多态性的相关情况及其与血脂代谢的关系.方法:采用多聚酶链反应(PCR)技术,对81例广西地区汉族2型DM无合并高血压患者和39例2型DM合并高血压患者及100名汉族正常对照的ACE基因插入/缺失(I/D)多态性及血脂进行检测.结果:2型DM合并高血压组ACE基因各等位基因及基因型频率与正常对照组及无合并高血压组比较均无统计学意义(P＞0.05).2型DM合并高血压DD基因型组及ID基因型组甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)高于正常组,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于正常组(P<0.05);II基因型组TG、TC及LDL-C低于DD基因型组及ID基因型组(P<0.05),与正常组对照组比较无统计学意义,HDL-C高于DD基因型组及ID基因型(P<0.05);ID基因型组TG高于正常组、DD基因型组及II基因型组(P<0.05).结论:广西地区汉族2型DM合并高血压与ACE基因I/D多态性无关联.2型DM合并高血压DD基因型及ID基因型者与正常人比较更易患高甘油三酯血症、高总胆固醇血症及高低密度脂蛋白胆固醇血症, II基因型者不易患高脂血症; ID基因型者更易患更高甘油三酯血症.     

2型糖尿病视网膜病与血小板粘合素α_2β_1基因多态性的相关性

目的 :探讨血小板粘合素α2 β1 分子α亚单位第 7内含子BglⅡ限制性片段长度多态性与 2型糖尿病视网膜病 (DR)的关系。方法 :运用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性技术 (PCR RFLP)检测 12 5例 2型糖尿病 (DM)患者 [DR(+)组 5 6例 ,DR(- )组 6 9例 ]及 4 5例正常对照组的基因型。结果 :①DR +组BglⅡ (+ +)基因型频率及BglⅡ (+)等位基因频率明显高于DR -组 (P <0 .0 5 )及正常对照组 (P <0 .0 1) ,BglⅡ (+)等位基因与DR明显相关(OR =1.88,95 %CI,1.14～ 3.10 ) ;②DR -组与正常对照组BglⅡ (+ +)基因型频率及BglⅡ (+)等位基因频率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,单纯型DR与增殖型DR基因型及等位基因频率分布差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :α2 β1 分子α亚单位BglⅡ限制性片段长度多态性与DR相关 ,与DM无关。BglⅡ (+)等位基因可能是 2型DM合并视网膜病的危险因子。     

PON2基因遗传多态性与月经周期过长的关系

目的 研究月经失调遗传易感性。方法 对某纺织厂４９９名新婚女工进行健康调查;用ＰＣＲ－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）检测ＰＯＮ２基因型,采用Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析评价ＰＯＮ２基因遗传多态性与月经周期过长的关系。结果 在未调整环境因素条件下,ＰＯＮ２ Ａ１４８Ｇ杂合子基因型有增加月经周期过长危险度的趋势,但差异无显著性,而Ａ１４８Ａ纯合子基因型可明显增加月经周期过长危险度（Ａ１４８Ｇ：Ｏ     

汉族成人牙周炎患者白细胞介素-1基因多态性分析

[目的]分析汉族成人牙周炎患者的白细胞介素-1(IL-1)基因家族多态性特征.[方法]将109名汉族成人牙周炎患者分为轻、中、重度三组,用PCR和限制性酶切方法,对其与20名正常人的IL-1A-889基因位点,IL-1B+3953基因位点、IL-1RN内含子2进行多态性分析.[结果]重度成人牙周炎患者的IL-1B等位基因2携带率(35.9%)较正常人(15.0%)和轻(6.8%)、中度(18.8%)牙周炎患者的高,其同时携带IL-1A等位基因2、IL-1B等位基因2的发生率亦比其他各组患者的高(P＜0.05).而IL-1A、IL-1RN的多态性分布在各组中无明显差异.[结论]汉族重度成人牙周炎患者与轻度、中度患者的IL-1B(+3953)基因多态性差异可能是他们临床表现差异的内在原因,这有助于提高对成人牙周炎疾病本质的认识.     

肿瘤坏死因子和白细胞介素-1基因多态性与急性呼吸窘迫综合征的相关性研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子 (TNF)α、TNFβ、白细胞介素 (IL) 1β和白细胞介素受体拮抗剂 (IL 1ra)基因多态性与急性呼吸窘迫综合征 (ARDS)易感性及预后的相关性。方法 :以 2 0 0 1～ 2 0 0 2年本院ICU收治的 2 7例ARDS患者为研究对象 ,以正常献血者为对照。提取全血基因组DNA ,应用聚合酶链反应 (PCR )和限制性长度片段多态性 (RFLP)方法检测细胞因子TNFα、TNFβ和IL 1β基因多态性 ,PCR法检测IL 1ra基因内含子 2区多态性区域含有 86bp的同向重复结构可变数 (VN TR)。结果 :与对照组比较 ,ARDS患者TNFα、TNFβ和IL 1β基因型和等位基因频率分布无显著性差异。对照组IL 1ra等位基因A2 的检出率为 7.5 % ,ARDS患者的检出率为 16.7% ,有增高趋势 ,但无显著性差异 (P =0 .0 84)。ARDS存活患者TNFβ等位基因 1的检出率为 47.1% ,显著低于ARDS病死组 ( 80 .0 % ) ,等位基因 1携带者病死的相对危险度为 4.5。但TNFα、TNFβ和IL 1β和IL 1ra的基因型频率在ARDS存活和病死患者之间无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 结论 :TNFα、IL 1β和IL 1ra基因多态性可能不是决定ARDS发病及预后的主要遗传信息 ,但TNFβ等位基因 1和 2对ARDS预后有影响     

hTERT核心启动子驱动的条件复制型腺病毒载体的构建及鉴定

目的构建并鉴定一种新型人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子驱动的条件复制型腺病毒载体。方法采用PCR的方法克隆腺病毒E1区基因(E1A,E1B55K)、E1B的启动子(E1Bp)以及人端粒酶逆转录酶亚基启动子(hTERTp),以及2个目的基因:人GM-CSF和GFP(GreenFluorescenceProtein,GFP)。采用一系列分子生物学方法构建pShuttle-GFPSV55K穿梭质粒,应用此穿梭质粒与AdEasy-1腺病毒DNA在BJ5183细菌内重组得到重组腺病毒质粒,将其转染293细胞获得Ad-GFPSV55K重组腺病毒。PCR法鉴定重组腺病毒,噬斑形成实验测病毒滴度。结果经过酶切鉴定成功地构建了分别携带GM-CSF基因和GFP报告基因的腺病毒载体,病毒滴度为7×1010pfu/ml。结论成功获得由hTERT启动子驱动的条件复制型腺病毒载体,为肿瘤的基因治疗打下良好的基础。     

噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库的构建

目的构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,研究IgA结合分子结构与功能的关系。方法基因合成IgA亲和体ZA1、ZA2片段。片段两端引入Kpn I酶切位点,3′端引入随机连接肽序列,Kpn I酶切,随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S的Kpn I克隆位点上,转化大肠杆菌TGI,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示随机组合文库。结果基因合成IgA亲和体;构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,容量为3·4×107,滴度为1·6×1012TU/L;文库中含79%以上的阳性克隆;序列分析显示组合文库由ZA1、ZA2随机组合而成,连接方式符合随机连接的特点,各亲和体之间连接肽序列也呈随机分布。结论合成IgA亲和体,构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,该文库库容量、多样性和随机性可满足体外分子进化研究的要求。     

高血压血瘀证血管紧张素转换酶基因插入或缺失的多态性分析

【目的】探讨血管紧张素转换酶(ACE)基因插入或缺失(I/D)的多态性与原发性高血压血瘀证的关系。【方法】选择原发性高血压(EH)血瘀证组100例、非血瘀证组120例和正常对照组100例,采用聚合酶链反应(PCR)方法检测ACE基因I/D多态性。【结果】高血压血瘀证组的DD基因型及D等位基因频率(分别为0.410和0.590)高于高血压非血瘀证组(分别为0.250和0.467)和正常对照组(分别为0.220和0.455)(P<0.05或P<0.01),高血压非血瘀证组与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05)。【结论】ACE基因插入或缺失(I/D)多态性与血瘀证具有相关性,D等位基因可能是血瘀证的易感基因之一。     

Tau基因A0多态性与中国人散发性帕金森病的相关性

[目的]为了探讨tau基因多态性与帕金森病的关系.[方法]本实验用PCR-片段长度多态性分析法检测了123例中国散发性帕金森病病人和114个正常对照的微管相关蛋白(tau)基因A0等位基因多态性.[结果]我们发现tau基因A0等位基因和A0/A0基因型在帕金森病组的出现率略高于对照组,分别为77.6%:74.1%和61%:57%,但无统计学意义.[结论]A0多态性与我国散发性帕金森病发病无关.     

两个家系血管母细胞瘤病调查报告

报告两个家系血管母细胞瘤病的发病特点,结合相关文献,阐述了血管母细胞瘤病的诊断与治疗,指出扩大“楔形”手术切除应作为首选治疗方式。     

HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析

目的研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位。方法用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物。采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析。结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml。间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128000、1:32000、1:64000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合。结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性最强。     

单纯型大疱性表皮松解症的角蛋白基因突变分析

目的检测单纯型大疱性表皮松解症(EBS)致病基因角蛋白5(K5)和角蛋白14(K14)基因突变,分析基因型和表型之间的相关性。方法采用PCR和直接测序法对中国汉族人3个EBS家系进行K5基因和K14基因的突变检测,以100例健康人作为正常对照。结果K5基因发现2个突变,一个为移码突变c.1649delG,另一个为错义突变c.508G>A;K14基因发现一个错义突变,为c.1237G>A;在正常对照中未发现上述突变。结论K5或K14基因突变导致该3个家系中患者发病。