茶多酚对胰岛素抵抗及非胰岛素抵抗HepG_2细胞体外糖脂代谢的影响

目的:探讨茶多酚(TP)对胰岛素抵抗(IR)及非胰岛素抵抗(非IR)HepG2细胞糖脂代谢的改善作用。方法:采用高浓度胰岛素(INS)持续作用肝癌细胞株(HepG2)16h建立IR-HepG2细胞,以不含INS培养液孵育16h的HepG2细胞建立非IR-HepG2型细胞。结果:与非IR对照组比较,IR组细胞葡萄糖消耗量、甘油含量和糖原含量显著下降(P0.05);与IR组比较,浓度为1.56mg/L～25.0mg/L的TP可明显增加IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量和甘油含量以及胞内糖原合成量,并呈剂量依赖性。而细胞存活率无显著变化。结论:TP可增强IR-HepG2细胞对葡萄糖的利用和糖原合成,以及三酰甘油的分解,从而改善其IR。TP对非IR-HepG2的糖脂代谢也有一定作用,但作用轻微。TP对糖脂代谢的改善作用系其对糖脂代谢生化过程的直接作用所致。     

熊果酸通过PPARα/γ改善HepG2细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的机制

目的:观察熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型糖代谢的影响并探讨其机制。方法:通过高浓度葡萄糖诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,采用葡萄糖氧化酶法,氚标记-葡萄糖法和硫酸蒽酮比色法检测熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗、摄取和糖原合成量的影响;采用Real time-PCR和Western blot法检测熊果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗模型PPARα、PPARγ、PEPCK的mRNA转录水平以及蛋白表达的影响。结果:12.5μmol/L和25μmol/L熊果酸处理HepG2细胞胰岛素抵抗模型后,其葡萄糖消耗量、摄取量和糖原合成量明显高于模型对照组。与正常对照组相比,熊果酸可降低HepG2细胞胰岛素抵抗模型PEPCK的mRNA转录水平和蛋白表达量,提高PPARα的mRNA转录水平和蛋白表达量。结论:熊果酸可改善HepG2细胞胰岛素抵抗模型的糖代谢,其作用机制可能是通过激动PPARα/γ、抑制PEPCK的表达来实现。     

葫芦巴碱对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的:探讨葫芦巴碱对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响。方法:培养HepG2细胞,MTT法检测葫芦巴碱对HepG2细胞增殖的影响以确定可作用于HepG2细胞的葫芦巴碱的浓度;将HepG2细胞置于含胰岛素浓度为1×10~(-6)mol/L的培养液中,培养36 h成功建立胰岛素抵抗模型后,每孔加入100μL不同浓度的含药培养基,用葡萄糖检测试剂盒检测葫芦巴碱对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响。结果:葫芦巴碱浓度为3,000、2,500、2,000、1,500、1,000、500μmol/L时的细胞存活率分别为21.38%、39.23%、51.43%、73.36%、86.23%、91.88%,葫芦巴碱浓度1,000μmol/L时对细胞有明显的毒性,故选择终浓度为1,000、500、250、100、50、25μmol/L进行实验,各浓度葫芦巴碱对胰岛素抵抗的HepG2细胞的葡萄糖消耗分别为(4.679±0.04)、(3.994±0.062)、(3.683±0.094)、(3.633±0.120)、(3.619±0.119)、(3.503±0.128)μmol/L,其中,前两个浓度与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:葫芦巴碱对HepG2细胞胰岛素抵抗有改善作用。     

辅助降糖片对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的以HepG2细胞为实验对象,探讨辅助降糖片的体外降糖效果及胰岛素传导关键信号胰岛素受体(insulin receptor,InsR)、丙酮酸脱氢激酶-1(phosphoinositide-dependent protein kinase-1,PDK1)的影响。方法培养HepG2细胞,CCK-8法检测辅助降糖片对HepG2细胞增殖的影响以确定其可作用于HepG2细胞的的浓度,采用高浓度胰岛素刺激建立胰岛素抵抗模型,用葡萄糖检测试剂盒检测辅助降糖片对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响,Western Blot法探讨其可能的作用机制。结果辅助降糖片浓度高于300μg/mL时对HepG2细胞有较强的抑制作用,300、150与模型组相比葡萄糖消耗量具有极显著差异(P0.05)。Western Blot显示与正常组相比,模型组PDK1、InsR蛋白表达显著降低(P0.05),与模型组比较给药组,PDK1、InsR表达显著升高(P0.05)。结论辅助降糖片对HepG2细胞胰岛素抵抗有改善作用,其作用机制可能是通过PI3K/Akt通路来改善2型糖尿病的胰岛素抵抗。     

齐墩果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的：采用高浓度胰岛素体外诱导培养HepG2细胞,建立胰岛素抵抗的细胞模型,观察齐墩果酸对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响。方法：用CCK-8法筛选齐墩果酸作用于HepG2细胞的实验浓度,然后用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞胰岛素抵抗,给予不同浓度的齐墩果酸（0.1、1、10、100μmol·L-1）、吡格列酮（10μmol·L-1）干预,以葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量。结果：1不同浓度齐墩果酸对HepG2细胞增殖无明显影响。2与对照组比较,高浓度胰岛素作用24 h后,模型组葡萄糖消耗量明显降低（P〈0.01）;与模型组比较,齐墩果酸组HepG2细胞葡萄糖消耗量随浓度增加而增加,成一定的量效关系,浓度为10μmol·L-1和100μmol·L-1时葡萄糖消耗量显著增加（P〈0.01或P〈0.05）。结论：齐墩果酸能改善高浓度胰岛素诱导的HepG2细胞胰岛素抵抗。     

壮药金花茶叶的降血糖活性筛选

目的考察金花茶叶不同极性提取物对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响及对Ⅱ型糖尿病小鼠的降血糖作用。方法利用胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,根据细胞对葡萄糖消耗情况,评价金花茶降糖活性。利用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素建立小鼠Ⅱ型糖尿病模型,连续灌胃28 d观察血糖变化及糖耐量水平,同时检测血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白含量。结果金花茶叶正丁醇和乙酸乙酯提取物均能显著增加胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量(P0.05)。并且在给药28 d后均能显著降低糖尿病小鼠血糖值和餐后血糖(P0.01),同时显著降低糖尿病小鼠的总胆固醇含量、甘油三酯含量及低密度脂蛋白含量(P0.05)。结论金花茶叶正丁醇和乙酸乙酯提取物能改善HepG2细胞的胰岛素抵抗现象,且能改善Ⅱ型糖尿病小鼠的高血糖高血脂症状。     

芒果苷对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的探讨芒果苷在体外的降糖效果及对胰岛素传导关键信号蛋白磷酸化蛋白激酶B[p-AKT(Thr308)]、磷酸化糖原合成激酶3β[p-GSK-3β(Ser9)]、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)表达的影响。方法培养HepG2细胞,用CCK-8法检测芒果苷对HepG2细胞增殖的影响;采用浓度为1×10^-6 mol/L的胰岛素刺激细胞36 h建立胰岛素抵抗模型;用葡萄糖检测试剂盒检测芒果苷对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响,用western blot法探讨其可能的作用机制。结果芒果苷浓度在>125μg/mL浓度后对HepG2细胞生长有抑制作用,故采用浓度为60、30、15μg/mL的芒果苷进行葡萄糖消耗实验,发现实验组与模型组比较,葡萄糖消耗量明显增加且具有显著性差异(P<0.01,P<0.05)。western blot结果表明,与正常组比较,模型组p-AKT(Thr308)、p-GSK-3β(Ser9)、AMPKα、GLUT2蛋白表达明显降低且存在显著性差异(P<0.05);与模型组比较,实验组蛋白表达均明显增加,且高剂量组均存在显著性差异(P<0.01,P<0.05),低剂量组除GLUT2蛋白表达具有显著性差异(P<0.05),其他蛋白虽有增加但无统计学意义。结论芒果苷对HepG2细胞胰岛素抵抗有改善作用,其作用机制可能是通过调控p-AKT(Thr308)、p-GSK-3β(Ser9)、AMPKα及GLUT2等蛋白的表达来改善2型糖尿病的胰岛素抵抗。     

尖叶假龙胆不同提取部位对HepG2细胞胰岛素抵抗改善作用研究

目的:研究尖叶假龙胆不同提取部位对正常HepG2细胞糖消耗及胰岛素抵抗HepG2细胞糖消耗的影响。方法:CCK-8法检测尖叶假龙胆不同提取部位对HepG2细胞增殖的影响;用葡萄糖氧化酶法检测尖叶假龙胆不同提取部位对HepG2细胞糖消耗的影响;用含有胰岛素的高糖培养基诱导HepG2细胞,建立胰岛素抵抗模型,并用葡萄糖氧化酶法检测尖叶假龙胆不同提取部位对胰岛素抵抗HepG2细胞糖消耗的影响。结果:浓度大于250μg/m L的各提取部位对细胞增殖均有明显抑制作用,除乙酸乙酯高浓度(250、200μg/m L)外其余提取部位对正常HepG2细胞的糖消耗均无显著影响。尖叶假龙胆乙酸乙酯部位、大孔树脂95%部位和大孔树脂70%部位均对胰岛素抵抗HepG2细胞糖消耗影响明显。结论:除乙酸乙酯高浓度(250、200μg/m L)外其余提取部位对正常HepG2细胞的糖消耗无显著影响。除大孔树脂30%部位外,其余各部位均能提高胰岛素抵抗的HepG2细胞的葡萄糖消耗,改善HepG2细胞的胰岛素抵抗。     

葛根素对HepG2细胞胰岛素抵抗状态的改善作用

目的探讨葛根素对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用。方法用MTT法检测葛根素对细胞增殖的影响;将HepG2细胞置于10μg/ml胰岛素培养液中24 h复制胰岛素抵抗模型,用葡萄糖氧化酶法检测葛根素对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响;采用蒽酮法检测细胞内糖原含量。结果葛根素对HepG2细胞增殖无显著影响,并可促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗,增加肝细胞糖元含量。结论葛根素可调节HepG2肝细胞糖代谢,明显改善肝细胞胰岛素抵抗。     

葛根芩连汤含药血清对IR-HepG2细胞糖代谢调控关系分析

目的:探索葛根芩连汤含药血清对胰岛素抵抗(IR)的HepG2(IR-HepG2)细胞糖代谢的调控关系。方法:将正常的HepG2细胞作为空白组,IR-HepG2细胞分为模型组,非诺贝特组,葛根芩连汤低、中、高剂量组,以葡萄糖消耗量为药效指标,采用色谱-质谱联用技术,对IR-HepG2细胞及给药后的IR-HepG2细胞内代谢产物进行分析,经过Mass Profiler Professional(MPP)软件对数据进行分析,得出生物标志物,验证之后,研究呈剂量依赖的生物标志物对糖耗量的关系。结果:发现葛根芩连汤含药血清能提高IR-HepG2细胞的糖耗量,其调节机制可能和文中6个生物标记物有关,已确定其中3个生物标志物是存在剂量依赖性且对糖代谢具有调控作用。结论:葛根芩连汤含药血清可能通过调节IR-HepG2细胞色氨酸,泛酸和腺嘌呤的量达到提高糖代谢的作用。     

桑叶降糖有效部位对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响

目的:初步探讨桑叶有效部位对胰岛素抵抗(IR)HepG2细胞模型的保护作用及机制。方法:测定HepG2细胞的生长曲线,成功复制HepG2细胞IR模型后,采用各降糖有效部位的提取液进行干预,并与常用的罗格列酮和参芪降糖胶囊进行对照,测定各组药液对HepG2细胞及IRHepG2细胞增殖的影响,观察比较各给药组细胞的葡萄糖消耗量。结果:筛选出2.5-10μg/L的罗格列酮、5-100mg/L的参芪降糖胶囊、2-12mg/L的桑叶生物碱、5-100mg/L的桑叶黄酮、5-100mg/L的桑叶多糖、5-100mg/L的桑叶水提物对HepG2细胞及IRHepG2细胞增殖无影响,每组给予不同浓度的药物干预后,高、中、低剂量的生物碱、水提物组和高剂量的黄酮、多糖组可显著增加其葡萄糖消耗量(P<0.01)。结论:桑叶生物碱具有显著的改善模型细胞IR的作用,可能与其增加HepG2细胞的葡萄糖消耗量和促进葡萄糖的吸收及摄取有关。     

南苜蓿总皂苷对HepG2细胞及糖尿病大鼠外周组织胰岛素抵抗的作用及机制研究

目的考察南苜蓿总皂苷提取物对体内外降糖作用的特点。方法采用胰岛素持续作用于HepG2细胞复制细胞胰岛素抵抗模型。测定单位细胞葡萄糖的消耗量,检测细胞内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。将10只SD大鼠设为对照组、其余60只大鼠采用高糖高脂饮食和链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,成模后进行分组,随机分为模型组、二甲双胍组、南苜蓿总皂苷高、低剂量组(以提取物计分别为1.4、0.7 g/kg),每组10只。各给药组灌胃相应药物,连续给药30 d。末次给药后,取肝脏和骨骼肌组织检测MDA、SOD、GSH-Px、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;采用Western blot法检测骨骼肌组织磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、蛋白激酶B(AKT)、葡萄糖转运体4(GLUT4)蛋白的表达。结果与模型组比较,200、100μg/mL浓度组能增加胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量和SOD、GSH-Px含量,降低MDA含量(P0.05或P0.01);与模型组比较,高剂量组能使模型大鼠的肝脏和骨骼肌中IL-1β、TNF-α、MDA水平降低;升高SOD、GSH-Px水平(P0.05);骨骼肌组织中p-PI3K、PI3K、p-AKT、AKT、GLUT4的蛋白表达量升高(P0.05)。结论南苜蓿总皂苷体外促进胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗;体内通过减少对肝脏和骨骼肌细胞的氧化损伤和炎症反应,增强骨骼肌中胰岛素介导的信号传导,达到减轻胰岛素抵抗的作用,可能是其体内降糖机制。     

尖叶假龙胆乙酸乙酯部位对胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt的影响

目的：研究尖叶假龙胆乙酸乙酯部位对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素关键信号IRS-1、Akt的基因、蛋白的影响。方法：以CCK-8法检测HepG2细胞活性;采用人肝癌HepG2细胞,并用高浓度胰岛素（10 -6 mol·L -1 ）培养HepG2细胞36 h,建立胰岛素抵抗细胞模型。根据CCK-8法结果分为正常组（Control组）、模型组（IR组）、尖叶假龙胆乙酸乙酯部位IR+50 μg·mL -1 组、IR+500 μg·mL -1 组及二甲双胍组,以葡萄糖试剂盒检测葡萄糖消耗量。尖叶假龙胆乙酸乙酯部位给药6 h后RT-PCR检测胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt基因表达;尖叶假龙胆乙酸乙酯部位给药6 h后,利用Western blot法检测IRS-1、Akt的蛋白表达。结果：尖叶假龙胆乙酸乙酯部位浓度为500 μg·mL -1 时,存活率达到95%。浓度高于500 μg·mL -1 时,存活率下降;与IR组比较,IR+50 μg·mL -1组与IR+500 μg·mL -1 组促进胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖的消耗量,但其作用不及盐酸二甲双胍组。给药6 h后与IR组比较,IR+50 μg·mL -1 组与IR+500 μg·mL -1 组的RT-PCR检测胰岛素抵抗HepG2细胞IRS-1、Akt的基因表达显著升高,P<0.01。给药6 h后与IR组比较,IR+50 μg·mL -1 组与IR+500 μg·mL -1 组的Western blot法检测IRS-1、Akt的蛋白表达显著升高,P<0.01。结论：尖叶假龙胆乙酸乙酯部位上调HepG2细胞胰岛素信号通路关键靶点IRS-1、Akt基因表达,以及IRS-1、Akt蛋白表达从而可能是其改善胰岛素抵抗作用的机制。     

芪参龟散改善胰岛素抵抗细胞的实验研究

目的:体外建立人肝癌细胞(HepG2)胰岛素抵抗模型,并初步研究中药复方芪参龟散对胰岛素抵抗的改善作用。方法:HepG2模型建立后,应用不同浓度的芪参龟散及不同浓度的罗格列酮分别作用于胰岛素抵抗细胞24h后,运用葡萄糖氧化酶法分别监测不同浓度的上述药物成分对HepG2细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗的影响,运用MTT法对各组细胞活性进行评价。结果:人肝癌细胞(HepG2)在10-6mol/L浓度的胰岛素作用24h后,葡萄糖消耗量明显减少(P0.01),此结果表明实验成功地诱导出稳定人肝癌细胞胰岛素抵抗模型。10-5mol/L浓度的胰岛素组表现出了更为明显的IR(P0.01)。但是4个时间点的死亡细胞逐渐增多,成活率降低(P0.05)。罗格列酮高、中剂量组及芪参龟散低剂量组均有改善细胞胰岛素抵抗的作用,其中1.0mg/m L浓度的罗格列酮及0.0156mg/m L浓度的芪参龟散对改善细胞IR效果较好(P0.05)。结论:芪参龟散有改善胰岛素抵抗的作用。     

胰岛素和地塞米松联合诱导建立肝胰岛素抵抗细胞模型

目的 :探索胰岛素和地塞米松诱导肝胰岛素抵抗细胞模型,确定肝胰岛素抵抗细胞模型建立的最佳给药浓度和时间。方法 :采用含不同浓度地塞米松单独诱导及与胰岛素联合诱导HepG2细胞。采用CCK-8检测细胞活力,葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)检测细胞上清液的葡萄糖含量,GPO-PAO法和蒽酮法分别检测细胞甘油三酯含量和糖原含量,油红O染色检测细胞形态的变化,结果 :HepG2细胞产生胰岛素抵抗的最佳给药浓度是1×10-9mol/L胰岛素加3.75×10~(-6)mol/L地塞米松,最佳给药时间为48h,此时Hep G2细胞葡萄糖消耗量明显减小(P0.01),糖原含量明显降低(P0.01),甘油三酯含量增加(P0.01),脂粒明显增加。结论 :1×10~(-9)mol/L胰岛素加3.75×10~(-6)mol/L地塞米松联合诱导HepG2细胞48h可建立稳定可靠的肝胰岛素抵抗细胞模型。     

半枝莲提取物抑制HepG2肝癌细胞的作用研究

目的 考察半枝莲提取物对HepG2肝癌细胞的抑制作用及作用机制。方法 体外培养HepG2肝癌细胞,MTT法考察半枝莲提取物对HepG2肝癌细胞增殖的影响;TRANSWELL法考察察半枝莲提取物对HepG2肝癌细胞侵袭和迁移的影响;透射电镜观察半枝莲提取物对HepG2肝癌细胞自噬的影响;Western-Blot法考察半枝莲提取物对HepG2肝癌细胞Raf/MEK/ERK信号通路蛋白的影响。结果 0、1.6、3.2、6.25、25、50、100μg/mL和200μg/mL半枝莲提取物孵育后,HepG2肝癌细胞生存率分别为(100.3±3.2)%、(97.8±11.9)%、(88.2±11.1)%、(65.3±8.7)%、(40.9±5.8)%、(27.3±4.0)%、(17.3±1.0)%、(8.3±0.5)%;半枝莲提取物可诱发HepG2肝癌细胞的自噬;20μg/mL半枝莲提取物组迁移率显著高于0μg/mL半枝莲提取物组(t=10.255,P=0.000);20μg/mL半枝莲提取物组侵袭率显著高于0μm半枝莲提取物组(t=8.260,P=0.001);半枝莲提取物可剂量依赖性地抑制p-...     

HepG2细胞胰岛素抵抗模型的建立及在筛选两色金鸡菊活性化合物中的应用

目的:体外建立人肝癌细胞(HepG2)胰岛素抵抗模型,并初步筛选两色金鸡菊中可有效改善胰岛素抵抗的萃取部位及活性化合物。方法:用不同浓度的胰岛素、棕榈酸或葡萄糖分别对HepG2细胞进行不同时间的诱导,通过MTT法对细胞活性进行评价及葡萄糖氧化酶法对HepG2细胞葡萄糖消耗量测定,明确建立稳定的HepG2胰岛素抵抗模型的试剂诱导浓度及诱导时间。模型建立后,应用不同浓度的两色金鸡菊粗提物、各萃取部位及七个单体化合物奥卡宁(Okanin,2)、3',4',8-三羟基黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3',4',8-trihydroxyflavone-7-O-β-D-glucopyranoside,3)、槲皮素(Quercetin,4)、黄诺马苷(Flavanomarein,5)、马里苷(Marein,6)、豆甾醇(Stigmasterol,13)、紫铆花素(Butein,16)预处理细胞24 h,再用55 mmol·L-1葡萄糖刺激24h,用葡萄糖氧化酶法或2-NBDG荧光标记葡萄糖法分别观察不同浓度的上述成分对胰岛素抵抗模型HepG2细胞糖消耗或糖吸收的影响。MTT法对各组细胞活性进行评价。结果:HepG2细胞在10-7mol·L-1浓度的胰岛素中作用24 h,或在55 mmol·L-1的葡萄糖中刺激24 h,细胞葡萄糖消耗量明显减少(P0.01)且稳定性良好,并且对细胞存活率未造成影响,可作为胰岛素抵抗模型;而棕榈酸组虽然糖消耗显著下降但细胞存活率也显著降低。两色金鸡菊总提物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位及2号、3号、5号和16号化合物均有改善细胞胰岛素抵抗作用,其中5号黄诺马苷和6号马里苷效果较好。结论:黄诺马苷和马里苷可能是两色金鸡菊中改善胰岛素抵抗的主要活性成分。     

加味桂枝人参汤对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响

目的:探讨加味桂枝人参汤(MGD)溶液对胰岛素抵抗(IR)HpeG-2细胞模型的保护作用及机理。方法:成功复制HepG2细胞IR模型后,采用MGD溶液进行干预,并与罗格列酮进行对照,观察细胞形态学变化、各孔细胞的葡萄糖消耗量、细胞的数目与活力。结果:MGD对模型细胞的增殖并无明显影响(P0.05),但可以增加其葡萄糖消耗量(P0.01),与西药组比较无显著性差异(P0.05)。结论:中药MGD与罗格列酮具有同等的改善模型细胞IR的作用,可能与其增加HepG2细胞的葡萄糖消耗量,促进葡萄糖的摄取有关。     

七种滇产植物改善胰岛素抵抗作用研究

目的:研究乌墨、望江南等7种滇产植物对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞糖摄取的影响,以及乌墨根提取物对胰岛素抵抗小鼠的改善作用。方法:采用地塞米松诱导形成胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞模型,观察乌墨、望江南等7种滇产植物对该细胞模型葡萄糖消耗的影响;采用高脂诱导形成胰岛素抵抗小鼠模型,观察乌墨根的乙醇提取物对其葡萄糖耐量和胰岛素耐量的影响。结果:乌墨根的乙醇提取物(10mg/L)和望江南叶的乙醇提取物(10mg/L)明显增加胰岛素抵抗细胞葡萄糖的消耗量,并有一定的浓度依赖性;乌墨根乙醇提取物可明显改善胰岛素抵抗小鼠的葡萄糖耐量和胰岛素耐量。结论:乌墨根的乙醇提取物和望江南叶的乙醇提取物能促进胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞对葡萄糖的摄取,改善胰岛素抵抗状态;此外,乌墨根的乙醇提取物还能改善胰岛素抵抗小鼠的胰岛素抵抗状态。     

双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌及HepG2细胞胰岛素抵抗的影响

目的:研究双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型葡萄糖消耗量及人肝癌HepG2细胞糖原合成,己糖激酶(hexokinase,HK),丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)活性的影响,初步探讨其作用机制,为其临床应用奠定基础。方法:采用高胰岛素方法建立骨骼肌细胞的胰岛素抵抗(IR)模型,观察双益方低、中、高剂量组、组方中药(黄芪、山茱萸、黄连、桑白皮、葛根、佩兰),有效成分(黄芪甲苷,毛蕊异黄酮葡萄糖苷,熊果酸,马钱苷,小檗碱,1-脱氧野尻霉素,葛根素)组(30,120,480μg·L-1)对骨骼肌细胞胰岛素抵抗模型的葡萄糖消耗量的影响,蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定骨骼肌细胞蛋白酪氨酸磷酸酶-1B(protein tyrosine phosphatase-1B,PTP-1B),葡萄糖转运蛋白4(glucosetransporters 4,GLUT4)表达;建立HepG2细胞的胰岛素抵抗模型,研究双益方、组方中药及其有效成分对HepG2细胞糖原合成及己糖激酶、丙酮酸激酶活性的影响。结果:双益方,黄芪,山茱萸,黄芪甲苷,1-脱氧野尻霉素,葛根素可降低骨骼肌细胞细胞上清液葡萄糖浓度(P0.05),以480μg·L-1双益方,黄芪甲苷组及葛根素组效果较好;与模型组比较,双益方、黄芪及有效成分组方可降低PTP-1B,提高GLUT-4的表达(P0.05,P0.01)。与正常组比较,模型组糖原合成量及HK,PK活性显著降低(P0.01);与模型组比较,各浓度组单味中药及有效成分均能一定程度的增加糖原合成量及HK,PK活性(P0.05,P0.01),其中黄芪甲苷、黄芪提取液增加糖原合成及提高HK活性作用较好;双益方提取液及葛根素增加PK活性作用较好。结论:双益方、组方中药及有效成分对骨骼肌,HepG2细胞胰岛素抵抗具有一定缓解作用,降低PTP-1B表达、提高GLUT4表达、增加糖原合成、提高HK,PK活性可能是其作用机制。