水杨酸钠抑制大鼠螺旋神经节神经元电压门控钾通道的研究

目的研究水杨酸钠对大鼠螺旋神经节神经元电压门控钾通道电流(Ik)的影响。方法采用全细胞膜片钳技术分析水杨酸钠对急性分离大鼠SGN电压门控钾通道电流的影响。结果水杨酸钠抑制电压门控钾通道电流幅值,其抑制强度与水杨酸钠浓度呈正相关,1mmol/L水杨酸钠可导致Ik激活曲线向超级化方向移动10.5885mV。结论水杨酸钠对大鼠SGN电压门控钾通道电流具有抑制作用,使其电流峰值减低、激活曲线向超级化方向移动。     

拉莫三嗪对大鼠急性分离海马神经元钠电流的影响

摘要 目的 探讨拉莫三嗪对酶机械联合急性分离的大鼠海马神经元细胞的钠通道的作用。方法采用7～10 d大鼠,以链丝菌蛋白酶E加吸管吹打法制备海马神经元,应用全细胞膜片钳技术,观察拉莫三嗪对急性分离大鼠海马神经元电压依赖性钠通道的作用。结果拉莫三嗪使电压依赖性钠电流幅值减小,100 μmol·L－1 拉莫三嗪使钠电流幅值减少（15.35±3.01）%,这种作用具有浓度依赖性;使钠电流的激活曲线向去极化方向漂移（3.8±0.9） mV,稳态失活曲线超极化方向漂移（1.8±0.9） mV。结论拉莫三嗪对电压依赖性钠离子通道有阻断作用。     

水杨酸钠对大鼠颞皮层神经元延迟整流钾通道的抑制作用

目的了解延迟整流钾通道在水杨酸钠导致耳鸣的机制中所起的作用。方法利用全细胞膜片钳技术研究水杨酸钠对急性分离的大鼠颞皮层神经元延迟整流钾通道的影响。结果水杨酸钠能够抑制延迟整流钾通道电流(IK(DR))的幅度,而且此抑制作用具有浓度依赖性(0.1～10 mmol.L-1)。水杨酸钠抑制IK(DR)的半抑制浓度(IC50)值为2.13mmol.L-1。1 mmol.L-1水杨酸钠将IK(DR)的激活曲线向超极化方向移动14 mV,将失活曲线向超极化方向移动17mV,并将失活后恢复曲线的时间常数(τ)延长为加药前的171%。结论水杨酸钠以浓度依赖的方式抑制IK(DR),而且影响IK(DR)的激活和失活动力学特征。水杨酸钠对IK(DR)的影响可能与水杨酸钠导致耳鸣的机制有关。     

咪唑安定对交感神经元全细胞钠通道电流的抑制作用

目的研究咪唑安定对交感神经元全细胞钠通道电流的影响,探讨其循环抑制机制。方法酶消化法急性分离SD大鼠(8～12d)颈上交感神经节细胞 ,全细胞膜片钳技术记录咪唑安定对钠通道电流的影响。结果在钳制电压 -80mV,刺激电压0mV条件下 ,临床相关浓度的咪唑安定(0.3μmol·L -1)使钠通道电流峰值降低19.98 %(P<0.05) ,随浓度增加 ,抑制作用逐渐增强 ,50 %的钠通道电流峰值受抑制时的咪唑安定浓度 (IC50)约为18.35μmol·L-1;3μmol·L -1 的咪唑安定使钠电流稳态失活曲线产生明显的超极化方向移动(7.75mV ,P<0.05) ,用药前、后50 %的通道灭活时的条件脉冲电压 (V1/2)分别为 :-40.39mV、-48.14mV ;3μmol·L -1 的咪唑安定对钠电流的激活曲线几乎无影响。结论临床相关浓度的咪唑安定对交感神经节全细胞钠通道电流有明显的抑制作用,且主要与钠通道的失活有关。提示咪唑安定的循环抑制作用可能与其直接抑制交感神经有关。     

双苯氟嗪对豚鼠心室肌细胞L-钙电流的影响

目的:观察双苯氟嗪(Dip)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(I_(Ca-L))的影响。方法:酶解法制备单个心室肌细胞。应用全细胞膜片箝技术记录豚鼠单个心室肌细胞钙电流。结果:在0.3-30μmol/L范围内,Dip可浓度依赖性地降低电压依赖性激活I_(Ca-L)峰值,被Dip 3μmol/L所抑制的I_(Ca-L)在冲洗5min后可得到部份恢复。但Dip对I_(Ca-L)的电压依赖特征,最大激活电压,以及I_(Ca-L)稳态激活无明显影响。在Dip3μmol/L存在下,半数激活电压(V_(0.5))和斜率参数(к)与对照组相比,差异均无显著性。V_(0.5)分别为(-12.8±1.7)mV和(-13.2±2.4)mV,к分别为(7.1±0.4)mV和(7.5±0.5)mV(P>0.05)。Dip3μmol/L可明显使钙电流稳态失活曲线左移,加速钙通道电压依赖性稳态失活。V_(0.5)分别为(-19.7±2.4)mV和(-31±6)mV,к分别为(3.6±0.3)mV和(1.8±0.2)mV(P<0.05).Dip 3μmol/L还使I_(Ca-L)从失活状态下的恢复明显减慢。结论:Dip主要作用于L-型钙通道的失活状态,加速钙通道失活,并使其从失活状态下恢复减慢,从而抑制I_(Ca-L)。     

花生四烯酸乙醇胺对大鼠心肌细胞L型钙电流的影响

目的研究anandamide(花生四烯酸乙醇胺)对单个大鼠心肌细胞L型钙电流(I Ca-L)的影响。方法应用全细胞膜片钳技术记录I Ca-L,并观察anandamide对该电流的作用。结果 (1)anandamide浓度依赖性地减小I Ca-L,其IC50值为(1.3±0.3)μmol·L-1。(2)1μmol·L-1anandamide可明显使稳态失活曲线左移,失活中点电压(V1/2)由(-34.4±0.2)mV变为(-42.2±0.6)mV,K值由(5.7±0.2)变为(6.4±0.4),表明anandamide改变了钙通道失活的电压依赖性。anandamide 1μmol·L-1对稳态激活曲线无明显影响。结论 anandamide可使稳态失活曲线左移而剂量依赖性地减小I Ca-L。     

水杨酸钠对大鼠海马神经元电压门控性钙离子通道的影响

目的研究水杨酸钠对大鼠海马神经元上电压门控性钙离子通道的作用,为海马参与耳鸣引起的情绪变化提供电生理学的依据。方法利用脑片膜片钳技术观察水杨酸钠对大鼠海马神经元电压门控性钙离子通道电生理学特性的影响。结果水杨酸钠对电压门控性钙离子通道电流(ICa)有抑制作用,而且具有浓度依赖性(0.1¹0 mmol·L-1)。水杨酸钠对海马神经元ICa的半抑制浓度(IC50)为1.64。1mmol·L-1水杨酸钠对ICa的稳态激活动力学有明显影响,使ICa的稳态激活曲线向超极化方向移动大约9 mV左右,但是对其稳态失活动力学没有明显影响。结论水杨酸钠以浓度依赖的方式抑制ICa,对其稳态激活动力学有明显影响。水杨酸钠对大鼠海马神经元上ICa的影响可能与海马参与耳鸣引起的情绪变化相关。     

神经病理性疼痛小鼠背根神经节河豚毒素敏感型钠电流的变化特征

目的 在小鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型上,观察背根神经节(DRG)细胞河豚毒素敏感型(TTX-S)钠电流的变化特征。方法 采用全细胞膜片钳技术分别记录CCI模型及正常小鼠DRG细胞TTX-S钠电流,比较其电流变化特征。结果 CCI 模型小鼠热疼痛阈值较正常小鼠下降约50%。在CCI小鼠DRG细胞上,TTX-S钠电流较正常组明显增加,最大激活电压由-10 mV左移为-20 mV,最大激活电流也由正常组的-(96.3±7.7)pA/pF增加至-(146.6±12.7)pA/pF,其稳态激活和失活曲线分别向较负和较正电压方向偏移14.9和5.1 mV,但通道失活后恢复动力学特征不变。结论 CCI小鼠增加TTX-S钠电流。     

原儿茶酸对碱性成纤维细胞生长因子诱导PC12细胞分化的影响

目的:探究原儿茶酸(PCA)对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导PC12细胞分化的影响。方法:体外培养PC12细胞,采用PCA低、中和高剂量组(16.0、32.0和64.0μmol/L)增强bFGF诱导PC12细胞分化,并通过其细胞形态学的观察、细胞活力的检测,分析突起细胞数目及平均突起长度值,考察不同剂量的PCA对bFGF诱导PC12细胞分化的影响。结果:与对照组相比,低、中和高剂量(16.0、32.0和64.0μmol/L)PCA组能增强bFGF诱导PC12细胞分化。结论:PCA能增强bFGF诱导PC12细胞分化的能力。     

克隆的人神经母细胞瘤细胞株(鱼屯)毒素抵抗型钠通道的功能分析

目的作者已经克隆了人神经母细胞瘤(NB-1)细胞株(鱼屯)毒素抵抗型(TTX-R)钠通道α亚单位及其选择性剪切体,分别命名为hNbR1和hNbR1-2,本实验观察这两个钠通道同型异构体的电生理特性.方法使用全细胞膜片钳技术在转染了hNbR1和hNbR1-2的人胚肾细胞(HEK-293)上记录这两个钠通道的钠电流.结果这两个变构体在稳态激活和失活方面略微不同,hNbR1和hNbR1-2的半数激活电压分别为-(37.8±1.3)和-(43.5±1.7)mV,半数失活电压分别为-(74.4±1.1)和-(81.5±1.1)mV,hNbR1-2的稳态激活和稳态失活曲线较hNbR1分别负向移位5.7 mV和 7.1 mV.TTX阻断hNbR1和hNbR1-2的IC50分别为(7.9±2.3)和(8.3±2.5)μmol*L-1,二者对TTX的敏感性无显著性差异.结论两个钠通道变构体hNbR1和hNbR1-2均可在HEK-293细胞上表达并产生钠电流,二者在稳态激活和失活方面略微不同,对TTX的敏感性无显著性差异.     

双苯氟嗪对豚鼠心室肌细胞膜钠电流的影响(英文)

目的观察双苯氟嗪对豚鼠心室肌细胞膜钠电流的影响。方法用酶解方法分离豚鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录钠电流。结果将细胞钳制在-80mV,给(-80～+50)mV,50ms和步阶10mV的去极化脉冲,记录到的电流被河豚毒素10μmol·L-1完全抑制。在该刺激条件下,该电流最大激活电压在-20mV左右,翻转电压在+30mV左右,提示该电流为钠电流。双苯氟嗪可以浓度依赖性地抑制钠电流。双苯氟嗪对钠电流的抑制作用在冲洗后可部分恢复,表明其对钠通道的抑制作用具有可逆性。双苯氟嗪可使钠电流I-V曲线上移,但对钠电流的电压依赖性特征、最大激活电压和翻转电压无明显影响。在双苯氟嗪40μmol·L-1存在下,最大激活电压下的峰值电流下降约46%;双苯氟嗪可明显使钠电流稳态失活曲线左移,但不影响曲线的斜率因子。双苯氟嗪40μmol·L-1可使钠电流半数失活电压从(-73.0±4.6)mV减少到(-82.8±7.2)mV。但双苯氟嗪对钠电流稳态激活无明显影响,在双苯氟嗪40μmol·L-1存在下,半数激活电压(-33.7±3.6)mV和斜率因子(5.6±2.4)mV与对照组激活电压(-34.9±5.1)mV和斜率因子(6.0±4.8)mV相比无显著性差异。双苯氟嗪可以使钠电流从失活状态下恢复明显减慢,双苯氟嗪40μmo·lL-1可使恢复时间常数延长(79±28)vs(36±11)ms。结论双苯氟嗪可以浓度依赖性、使用依赖性和频率依赖性地抑制心肌钠电流,并且主要作用于钠电流的失活状态。     

Rivastigmine blocks voltage-activated K+ currents in dissociated rat hippocampal neurons

Rivastigmine is an acetylcholinesterase inhibitor used in Alzheimer's disease therapy. In the present study, we investigated the effects of rivastigmine on the transient outward K+ current (IK(A)) and the delayed rectifier K+ current (IK(DR)) in acutely dissociated rat hippocampal pyramidal neurons using the whole-cell patch-clamp technique. Rivastigmine inhibited the amplitudes of IK(A) and IK(DR) in a reversible and concentration-dependent manner. At a concentration of 100 mum, rivastigmine inhibited IK(A) and IK(DR), recorded when the cells were depolarized from -50 to +40 mV, by 65.9 (P<0.01) and 67.3% (P<0.01), respectively. The IC50 values for IK(A) and IK(DR) were 3.8 and 1.7 microM, respectively. The decay time constant of IK(A), recorded following a test pulse to +40 mV, was prolonged reversibly by rivastigmine at concentrations of 10 and 100 microM (both P<0.05). Rivastigmine affected the voltage dependence of IK(A) and IK(DR). At a concentration of 10 mum, it shifted the steady-state inactivation curve of IK(A) towards more negative potentials by -11 mV (P<0.05), but had no effect on the steady-state activation curve or the recovery from inactivation. Regarding the kinetic properties of IK(DR), 10 microM rivastigmine shifted the steady-state activation and inactivation curves towards more negative potentials by -10 (P<0.05) and -27 mV (P<0.01), respectively. Our findings that rivastigmine inhibits IK(A) and IK(DR) in rat hippocampal pyramidal neurons suggest that this agent has other pharmacological actions besides its antiacetylcholinesterase activity.     

孤啡肽对大鼠顶叶皮层神经元延迟整流钾电流的抑制作用

目的研究孤啡肽(orphanin FQ/nociceptin,OFQ/N)对大鼠顶叶皮层神经元延迟整流钾电流(IK)的影响,初步探讨其干扰学习记忆过程的离子机制。方法采用全细胞膜片钳技术,观察OFQ/N对急性分离的大鼠顶叶皮层神经元IK的作用。结果①OFQ/N明显抑制IK,并呈剂量依赖性(P<0.05)。②0.1μmol.L-1OFQ/N使IK的电流-电压(I-V)曲线降低(n=8,P<0.01)。③0.1μmol.L-1OFQ/N使IK激活曲线的半数激活电压(V1/2)和斜率因子(k)分别由给药前的(-43.4±6.1)mV和(11.5±1.1)mV变为给药后的(-19.1±4.6)mV和(17.3±3.2)mV(n=8,P<0.01)。④0.1μmol.L-1OFQ/N使IK失活曲线的半数失活电压(V1/2)和斜率因子(k)分别由给药前的(-68.8±2.6)mV和(16.5±1.7)mV变为给药后的(-76.8±2.8)mV(n=5,P<0.01)和(15.7±3.1)mV(n=5,P>0.05)。结论OFQ/N可抑制大鼠顶叶皮层神经元IK,使IK激活曲线右移,失活曲线左移。     

Mefenamic acid as a novel activator of L-type voltage-dependent Ca2+ channels in smooth muscle cells from pig proximal urethra

The effects of mefenamic acid and Bay K 8644 on voltage-dependent nifedipine-sensitive inward Ba2+ currents in pig urethral myocytes were investigated by use of conventional whole-cell configuration patch clamp. Mefenamic acid increased the peak amplitude of voltage-dependent nifedipine-sensitive inward Ba2+ current without shifting the position of the current-voltage relationship. Mefenamic acid (300 microM) caused little shift in the activation curve although the voltage dependence of the steady-state inactivation was shifted to more positive potentials by 11 mV in the presence of mefenamic acid. Bay K 8644 (> or = 100 nM) enhanced voltage-dependent nifedipine-sensitive inward Ba2+ currents in a concentration- and voltage-dependent manner, shifting the maximum of the current-voltage relationship by 10 mV in the hyperpolarizing direction. Bay K 8644 (1 microM) significantly shifted the voltage dependence of the activation curve to more negative potentials by approximately 9 mV although Bay K 8644 caused little shift in the steady-state inactivation curve. These results indicate that mefenamic acid increased voltage-dependent nifedipine-sensitive inward Ba2+ currents through the activation of L-type Ca2+ channels with different kinetics from those of Bay K 8644 in pig urethral myocytes.     

牛磺酸镁配合物对缺氧复氧致大鼠心肌细胞瞬时外向钾离子通道异常的影响

目的研究牛磺酸镁配合物(TMCC)对缺氧复氧损伤所致大鼠心肌细胞异常瞬时外向钾电流(Ito)的影响。方法采用Langendoff逆行主动脉灌注酶消化法急性分离大鼠单个心室肌细胞,分为空白对照组、模型组、100μmol.L-1 TMCC组、200μmol.L-1 TMCC组、400μmol.L-1 TMCC组和24.24μmol.L-1胺碘酮组,均n=6。缺氧钾外液模拟缺氧15 min后用有氧钾外液复氧5 min制缺氧复氧模型。应用全细胞膜片钳技术记录Ito。结果与空白对照组相比,模型组大鼠心室肌细胞Ito峰值显著增大(13.50±0.41 pA.pF-1 vs.8.40±0.66 pA.pF-1,P<0.01),I-V曲线上移,Ito激活曲线左移;200、400μmol.L-1 TMCC组和胺碘酮组均可使因缺氧复氧损伤增大的Ito减小(均P<0.01),使I-V曲线下移并纠正左移的激活曲线。各组对稳态失活曲线均无显著影响,曲线无移动(均P>0.05)。结论 TMCC可通过抑制钾通道的激活过程对抗缺氧复氧引起的Ito增大,提示该作用可能是TMCC抗缺氧复氧诱发心律失常的作用机制之一。     

芍药苷对大鼠心肌细胞L钙通道的阻断作用

目的　在单个大鼠心肌细胞上 ,研究芍药苷对L型钙通道的阻断作用。方法　采用全细胞膜片钳技术。结果　芍药苷浓度依赖性阻断ICa ,L,其IC50 为 387μmol·L- 1 。应用 40 0 μmol·L- 1 芍药苷后 ,ICa,L最大电流幅度下降 51 % ,但I U曲线的形态和反转电位没有变化 ,激活曲线也没有明显的改变 ;失活曲线向较负电压的方向偏移约 8 3mV ,通道从失活中恢复的时间明显延长 ,由给药前的 (96± 1 7)ms增至 (1 85± 2 8)ms ;芍药苷的阻断作用没有显示出频率依赖性。结论　芍药苷对心肌细胞ICa ,L有阻断作用     

Bis(7)-tacrine/tacrine对大鼠DRG神经元延时整流钾通道电流的调制作用

目的研究乙酰胆碱酯酶抑制剂bis(7)-tacrine/tac-rine[bis(7)-tetrahydroaminacrine]对大鼠DRG神经元的延时整流钾通道电流的调制作用。方法在急性分离的DRG神经元标本上,采用全细胞膜片钳技术记录钾通道电流,研究bis(7)-tacrine/tacrine对DRG神经元延时整流钾通道电流的影响和作用。结果 bis(7)-tacrine对延迟整流钾通道电流IDR具有浓度依赖性的抑制作用,其半量效浓度为(IC50)(0.72±0.05)μmol.L-1,而tacrine抑制的半量效浓度(IC50)(58.3±3.7)μmol.L-1。结论两种药物对DRG延时整流钾通道电流有浓度依赖性的抑制作用,bis(7)-tacrine的抑制强度高一个数量级,有利于抑制神经元的钾通道过于激活和兴奋,预防胞内钾离子过度丢失而引起的神经元凋亡,起到神经保护的作用。     

雌激素对Kv2.1钾电流及大鼠海马神经元延迟整流钾电流的影响

目的研究17β-雌二醇对Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流的作用。方法采用HEK293-Kv2.1细胞培养、大鼠海马神经元原代培养和膜片钳全细胞记录技术。结果17β-雌二醇浓度依赖地抑制Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流(I_K)。17β-雌二醇抑制Kv2.1钾电流和原代培养大鼠海马神经元延迟整流钾电流的IC₅₀分别为2.4和4.0 μmol·L^-1。通道动力学研究发现，17β-雌二醇(3 μmol·L^-1)显著左移Kv2.1钾电流的稳态激活和失活曲线，但只显著左移海马神经元延迟整流钾电流稳态激活曲线，而不影响该电流的稳态失活曲线。结论17β-雌二醇抑制Kv2.1钾电流与抑制I_K的程度相近，17β-雌二醇抑制I_K的作用可能部分通过阻断Kv2.1钾电流而实现。     

染料木黄酮对豚鼠结肠平滑肌细胞L型钙通道的影响(英文)

目的研究酪氨酸激酶抑制剂染料木黄酮(GST)对豚鼠结肠平滑肌细胞L型钙通道电流的作用。方法木瓜蛋白酶法分离单个豚鼠结肠平滑肌细胞,应用全细胞式膜片钳技术记录L型钙通道电流。结果 GST(10 ~100μmo·lL-1)浓度依赖性地阻断L型钙通道电流,其作用可被洗脱,半数有效抑制浓度为(39.9±3.6)μmol·L-1。GST可使L型钙通道的稳态失活曲线向超极化方向左移约10 mV(P<0.01),对其斜率没有影响。GST的无活性拟似物大豆异黄酮对L型钙通道电流的作用明显小于GST。酪氨酸磷酸酶抑制剂原钒酸钠可阻断GST对钙通道电流的抑制作用。结论 GST可通过酪氨酸激酶途径抑制豚鼠结肠平滑肌L型钙通道。