恶性血液病降钙素基因高度甲基化的研究

目的 探讨降钙素（CT）基因高度甲基化在恶性血液病中的临床意义。方法 采用限制性内切酶（HPaⅡ）消化DNA和聚合酶链反应技术检测73例恶性血液病、6例正常人以及24例非恶性血液病的CT基因的基化程度。结果 12/14例（85.7%)急性淋巴细胞白血病、9/15例（60%）急性非淋巴细胞白血病、8/10例（80%）慢性粒细胞白血病、5/15（33.3%)淋巴瘤、2例（2/5）骨髓增生异常综合征、1例（1/2）恶性组织细胞病、1例（1/3）慢性淋巴细胞白轿病和1例（1/9）多发性骨髓瘤的病人出现CT基因高度甲基化阳性,而6例正常人和24例非恶性血液病无一例阳性。结论 CT基因高度甲基化可作为恶性血液病恶性克隆增殖的分子基因标志,从而为恶性血液病的诊断、微小残留病的监测及疾病的发展预测提供了一种有用手段。     

恶性血液病降钙素基因高度甲基化的研究

目的探讨降钙素（ＣＴ）基因高度基化在恶性血液病中的临床意义。方法，用限制性内切酶（ＨＰａⅡ）消化ＤＮＡ，应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了７３例恶性血液病和对照组６例正常人以及２４例非恶性血液病的ＣＴ基因的甲基化程度。结果８５．７％（１２／１４）急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）、６０％（９／１５）急性非淋巴细胞白病（ＡＮＬＬ）、８０％（８／１０）慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）、３３．３％（５／１５）淋巴     

血液系统疾病中LRP15基因启动子区甲基化状态的研究

目的:探讨LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化与血液系统疾病的关系和临床意义。方法:采用甲基化特异性PCR方法检测了9例正常人、73例急性白血病患者、8例慢性髓系白血病患者、2例慢性淋巴细胞白血病、12例血液系统良性病患者骨髓LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化状况;硫化修饰结合限制性内切酶分析及硫化测序验证了一例血液系统良性病患者LRP15基因启动子区及第一外显子区的甲基化。结果:AL患者LRP15基因甲基化阳性率(71.23%)高于正常供者及慢性白血病(10%),差异有统计学意义(P<0.05)。LRP15基因在非恶性血液病患者中甲基化阳性率(55.56%)高于正常供者,硫化修饰结合限制性内切酶分析及硫化测序进一步证实了上述结论。结论:LRP15基因启动子的甲基化与不成熟的白血病细胞有关,与血液系统良性疾病也有一定关系。     

血液肿瘤患者血清β_2-微球蛋白的临床观察

检测103例血液肿瘤患者血清β—微球蛋白(简称Sβ_2M)。其中急性粒细胞型白血病38例、急性淋巴细胞白血病16例,慢性淋巴细胞型白血病5例,慢性粒细胞白血病9例,慢粒急变7例,多发性骨髓瘤9例,恶性淋巴瘤13例,恶性组织细胞增生症2例,巨球蛋白血症1例,骨髓纤维化2例,淋巴肉瘤性白血病1例。同时也检测15例非恶性血液病及9例感染性疾病患者。并对所有病例Sβ_2M进行修正,求得R值。研究结果初步表明在淋巴增殖性疾病中Sβ_2M升高更有意义。此外对20例恶性血液病患者治疗前后Sβ_2M比较表明Sβ_2M是判断疗效,监测病情变化的一项可靠指标。     

恶性血液病患者CD54表达及其与临床特征、疗效的关系

【目的】探讨细胞间黏附分子 1(CD54)在恶性血液病的表达。【方法】用免疫荧光方法检测 19例急性髓系白血病 ,34例急性淋巴细胞白血病 ,10例慢性粒细胞白血病 ,15例多发性骨髓瘤 ,2 1例非霍奇金淋巴瘤和 16例正常人骨髓单个核细胞表达CD54。【结果】①除多发性骨髓瘤、慢性粒细胞性白血病外 ,急性髓性白血病细胞、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞表面CD54表达低于正常人。②CD54在急性早幼粒细胞白血病 (M3 )表达高于在其它类型急性髓系白血病细胞表达 ,在T 急性淋巴细胞白血病表达明显低于B 急性淋巴细胞白血病表达。③高白细胞数、中枢神经系统白血病、脾肿大者表达水平下降 (P <0 0 5 )。④CD54的表达在急性淋巴细胞白血病完全缓解组明显高于未缓解组 ,P <0 0 1。随着病情缓解CD54表达可升至正常范围。【结论】不同的恶性血液病 ,黏附分子CD54表达不同 ,并与细胞类型、临床特征及疗效有关     

RT-PCR检测WT1基因在白血病患者中的表达及临床意义

目的:研究WT1基因在白血病患者中的表达及其临床意义.方法:运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,检测WT1基因在50例白血病患者及8例正常人、3例血液系统非恶性肿瘤患者中的表达.分析WT1基因在白血病患者中的表达规律及其与白血病转归、预后等的关系.结果:RT-PCR检测WT1基因的灵敏性为10-4.急性非淋巴细胞白血病(ANLL)22例,17例WT1表达阳性(77·3%);急性淋巴细胞性白血病(ALL)11例,6例WT1表达阳性(54·5%);急性混合细胞性白血病(AMLL)1例WT1表达阳性;提示FAB分型中各型急性白血病均可呈阳性表达.慢性粒细胞白血病(CML)15…     

造血干细胞移植预处理后出血性膀胱炎的预防

我院自 1989年 11月——— 2 0 0 0年 1月 ,行造血干细胞移植 (ＨＳＣＴ)治疗恶性血液病 5 8例 ,实体瘤 2例。出血性膀胱炎 (ＨＣ)是ＨＳＣＴ预处理后常见的并发症。我们在预处理的过程中 ,采取了一定的预防措施 ,有效地预防了ＨＣ的发生 ,使ＨＳＣＴ的成功率明显提高。现将其预防措施总结如下。1　临床资料1 1　病例选择　 6 0例ＨＳＣＴ中 ,选择恶性血液病 5 8例 :男性2 8例 ,女性 30例。年龄 5 - 49岁 ,平均年龄 2 7岁。其中 ,急性淋巴细胞白血病 18例 ;急性非淋巴细胞白血病 2 9例 ;慢性粒细胞白血病 4例 ;骨髓增生异常综合征 2例 ;淋巴…     

109例恶性血液病患者血清铁蛋白测定

采用放射免疫法检测109例恶性血液病确诊患者的血清铁蛋白(SF)浓度,其中急性白血病58例,急性粒细胞白血病(简称急粒)24例,急性淋巴细胞白血病(简称急淋)25例,急性单核细胞白血病(简称急单)9例,慢性粒细胞白血病(简称慢粒)11例,慢粒急变11例,多发性骨髓瘤分泌型10例,无分泌型1例,何杰金病6例,非何杰金淋巴病11例,毛细胞白血病1例。以本院职工及学生无血液病病史,体检无异常发现,肝肾功能及外周血正常者,220例为对照。SF测定值结果如下:急性白血病治疗前及复发时为815.1±452.4μg/L(其中急粒为780.3±338.2μg/L急淋为802.7±421.3μg/L,急单为942.5±709.9μg/L)。慢粒慢性期为314.     

异基因造血干细胞移植治疗白血病12例临床观察

目的 探讨异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)治疗白血病的疗效.方法 选择2007年4月至2009年4月进行异基因造血干细胞移植的患者12例,其中急性淋巴细胞白血病(ALL)2例,急性髓系白血病(AML)4例,慢性粒细胞白血病6例.预处理方案均为BU/CY,采用以CsA、MMF、ATG加短程MTX常规预防移植物抗宿主病,非亲缘移植加用抗胸腺细胞球蛋白(ATG).结果 12例患者移植后均造血重建,发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)1例,慢性移植物抗宿主病(cGVHD)2例.移植后100d内移植相关死亡率(TRM)8.3%(1/12),死于aGVHD、感染;移植后100d至2年内TRM为16.7%(2/12),分别死于cGVHD、感染及白血病复发.其余9例无病生存1～24个月,DFS为75%(9/12).结论 异基因外周血干细胞移植是目前惟一可能治愈白血病的方法,值得推广和进一步总结.     

法多琳治疗恶性血液病化疗后粒细胞缺乏并发感染36例分析

1 对象和方法 1.1 对象 2006-01/2007-12收治的恶性血液病36(男21,女15)例,中位年龄42(19～73)岁.其中急性非淋巴细胞白血病14例,急性淋巴细胞白血病10例,非霍奇金淋巴瘤12例.住院期间上述患者均接受联合化疗,中性粒细胞绝对值＜0.5×109/L者26例.     

METHYLATION PATTERN OF LRP15 GENE IN LEUKEMIA

Objective To investigate the methylation status of LRP15 gene in acute leukemia (AL) patients and its role in the tumorigenesis. Methods The methylation of LRP15 promoter and first exon of bone marrow mononuclear cells in 73 patients with AL, 10 with chronic leukemia (CL), 9 with hematological benign diseases, and 20 healthy transplantation donors was analyzed by using methylation specific polymerase chain reaction. The methylation of LRP15 gene promoter and first exon in COS7, K562, and HL60 cell lines was also assayed. Results No LRP15 gene promoter methylation was detected in COS7 cell line. LRP15 gene promoter was methylated in K562 and HL60 cell lines. No deletion of LRP15 gene was detected in all samples. In nearly all French-American-British leukemia subtypes, we found that frequency of LRP15 methylation in adult patients with AL was 71.23% (52/73). There was no detectable methylation in any of the 20 healthy donors and 8 chronic myeloid leukemia patients. The difference in frequency of LRP15 methylation between AL patients and healthy donors or CL patients (10.00%, 1/10) was significant (P<0.01). Hypermethylation of LRP15 gene was found in 57.14% (16/28) of newly diagnosed AL patients, 83.33% of relapsed AL patients respectively, which was significantly different (P<0.05). We also demonstrated LRP15 methylation in 55.56% (5/9) adults with benign hematological diseases. Conclusions LRP15 methylation changes are common abnormalities in leukemia. LRP15 is postulated to be a tumor suppressor gene.     

Hypermethylation of the p15INK4Bgene in acute leukemia and myelodysplastic syndromes

目的：探讨p15^INK4B基因甲基化在急性白血病（AL）的发病及骨髓增生异常综合征（MDS）向白血病转化中的模式及意义。方法：甲基化特异性聚合酶链反应法（MSP）检测49例AL和22例MDS患p15^INK4B基因CpG高甲基化模式。结果：90％（26/29）初发AL中检出p15^INK4B基因的高甲基化,其中46％为完全甲基化,54％为部分甲基化;3例MDS转化的AL和9例复发AL全部检出p15INK4B基因甲基化,且完全甲基化的比例分别占67％和56％;11例缓解期AL患中仅5例（2例完全缓解,3例部分缓解）检出部分甲基化（45％）。初/复发组p15^INK4B基因甲基化发生率明显高于缓解组（P=0.002）。13例低危MDS(RA/RAS)患中5例（38％）检出p15^INK4B基因甲基化,且80％为部分甲基化;而高危组（RAEB/RAEB-T）9例全部检出p15^INK4B甲基化,且完全甲基化占56％,与低危MDS组有显性差异（P=0.002）。结论：p15^INK4B基因高甲基化频发于白血病和高危MDS,可能与白血病及MDS的发病和发展有关,并可能作为检测微小残留病、预测AL复发及MDS向白血病转化的分子标志。     

B淋系/髓系混合表型急性白血病伴TEL-ABL1融合基因表达1例

 混合表型急性白血病（mixed phenotype acute leukemia,MPAL）临床罕见,约占急性白血病的2%~5%。TEL-ABL1融合基因阳性主要见于急性髓细胞白血病（acute myeloid leukemia,AML）、急性淋巴细胞白血病（acute lymphocytic leukemia,ALL）、骨髓增殖性肿瘤（myeloproliferative neoplasm,MPN）等恶性血液系统肿瘤,目前以病例报道为主,均提示预后不良。本例患者B淋系/髓系MPAL伴TEL-ABL1融合基因阳性为首次报道,我们给予针对淋系、髓系白血病化学治疗及酪氨酸激酶抑制剂靶向治疗后,达到完全缓解,经巩固化疗后进行人类白细胞抗原（human leucocyte antigen,HLA）相合同胞间异基因外周血造血干细胞移植,患者后因肠道排异反应死亡。     

粒细胞集落刺激因子动员的异基因骨髓与外周血干细胞混合移植治疗血液系统恶性疾病

目的　探讨粒细胞集落刺激因子 (G CSF)动员的异基因骨髓与外周血干细胞混合移植治疗血液系统疾病的可行性与疗效。方法　供者给予G CSF连续 4～ 6天皮下注射 ,注射后第 3天从髂后上嵴抽取G CSF动员的骨髓血 ,第 4天开始取外周血干细胞。并立即输给受者——— 14例血液系统恶性疾病患者 (恶性肿瘤 10例 ,重症再生障碍性贫血 4例 )接受了G CSF动员的异基因骨髓与外周血干细胞混合移植 ,分析其植活率、植活速度以及急性、慢性移植物抗宿主病 (aGVHD ,cGVHD)的发生率。结果　 14例患者均获得异体植活 ,白细胞数恢复至≥ 1× 10 9/L ,血小板≥ 2 0× 10 9/L的中位时间分别为移植后的 14d(12～ 18d)和 13d (11～ 6 5d)。有 4例发生了Ⅰ度aGVHD ,3例发生了Ⅱ度aGVHD ,但无一例重度aGVHD发生。在可评估的 9例患者中有 3例出现了广泛的cGVHD。有 2例患者因白血病复发而死亡 ,另 1例因植活不良 ,再次输注供者外周血干细胞 (PBSC)后出现IV度aGVHD死亡 ,其余 11例中位随访时间 4 5 5d(84～ 715d) ,均无病生存。结论　G CSF动员的异基因骨髓与外周血干细胞混合移植可以用于血液系统恶性疾病的治疗 ,能保证持久、稳定的植活 ,植活速度快 ,急、慢性GVHD的发生率与异基因骨髓移植相比并没有增加。     

Evaluation of febrile neutropenic patients hospitalized in a hematology clinic

Objective:To evaluate the febrile neutropenic patients with hematological malignancies hospitalized in hematology clinic with poor hygiene standards.Methods:A total of 124 patients with hematological malignancies(69 male,55 female)hospitalized in hematology clinic with poor hygiene conditions depending on hospital conditions,between January 2007 and December 2010,were evaluated,retrospectively.Results:In this study,250 febrile neutropenia episodes developing in 124 hospitalized patients were evaluated.Of the patients,69 were men(56%)and 55 women(44%).A total of 40 patients(32%)had acute myeloid leukemia,25(20%)acute lymphoblastic leukemia,19(15%)non-Hodgkin's lymphoma,10(8%)multiple myeloma,and 8(8%)chronic myeloid leukemia.In our study,56 patients(22%)were diagnosed as pneumonia,38(15%)invasive aspergillosis,38(15%)sepsis,16(6%)typhlitis,9(4%)mucormycosis,and 4(2%)urinary tract infection.Gram-positive cocci were isolated from 52%(n=20),while Gram-negative bacilli 42%(n=16)and yeasts from 6%(n=2)of the sepsis patients,respectively.The most frequently isolated Gram-positive bacteria were methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci(n=18),while the most frequently isolated Gram-negative bacteria was Escherichia coli(n=10).Conclusions:Febrile neutropenia is still a problem in patients with hematological malignancies.The documentation of the flora and detection of causative agents of infections in each unit would help to decide appropriate empirical therapy.Infection control procedures should be applied for preventing infections and transmissions.     

恶性血液病患者血清红细胞生成素的水平及其临床意义

目的 探讨恶性血液病患者血清红细胞生成素(Epo)的含量及其意义。方法 采用夹心酶联免疫法测定40例恶性血液病患者及18例健康人血清Epo，同时检测其血红蛋白及红细胞数。结果 恶性血液病中，急性白血病及多发性骨髓瘤的Epo较正常人明显增高(P＜0．001)，其血红蛋白值则明显低于正常人(P＜0．001)，慢性白血病及淋巴瘤的Epo也比正常人高(P分别为＜0．002及＜0．05)，但其血红蛋白值则与正常人无显著差异(P＞0．05)。各组病人血清Epo水平均与血红蛋白及红细胞数呈负相关。结论 恶性血液病血清Epo水平较对照组明显升高，并与血红蛋白及红细胞数呈负相关。除贫血、缺氧，导致体内Epo活性反馈，使患者Epo水平增高外，可能还和红系祖细胞利用Epo减少有关。rhEpo对Epo基础值不太高的某些恶性血液病伴发的贫血是一种有效的治疗措施。     

自体造血干细胞移植治疗恶性血液病

目的　评价自体造血干细胞移植 (AHSCT)治疗恶性血液病的疗效。　方法　用 AHSCT治疗白血病及恶性淋巴瘤患者共 5 8例 ,年龄 31.9± 10 .5 (14～ 5 8)岁。其中急性非淋巴细胞白血病 (ANL L ) 30例 (CR1 2 4例 ,CR2 5例 ,CR31例 ) ,急性淋巴细胞白血病 (AL L ) 18例 (CR1 13例 ,CR2 3例 ,CR32例 ) ,慢性粒细胞白血病 (CML ) 3例 (均获血液学缓解 ) ,恶性淋巴瘤 7例 (CR4例 ,PR3例 )。预处理化疗方案选用以下药物中任意两种或三种联合 :阿糖胞苷 3～ 4g/ m2 ,环磷酰胺 4～ 6 g/ m2 ,鬼臼乙叉苷 (VP- 16 ) 0 .5～ 1.0 g/ m2 。除 5例联合全身骨髓照射 (剂量为7～ 8Gy) ,其余均单用化疗。　结果　所有患者移植后均重建造血 ,移植相关死亡 1例 (1.72 % )。ANL L、AL L CR1期移植者 3年无病生存率分别为 5 2 .4%± 4.2 %和 46 .1%± 3.5 % ,复发率分别为 37.7%± 4.5 %和 40 .5 %±6 .7%。 10例 CML 和恶性淋巴瘤患者中 ,除 1例 期恶性淋巴瘤患者复发 ,余均获持续完全缓解。　结论　为降低白血病和恶性淋巴瘤的复发率 ,提高患者的无病生存期 ,无造血干细胞供者的 CR1 期白血病及恶性淋巴瘤患者应积极行 AHSCT。     

Molecular genetic evidence of Y chromosome loss in male patients with hematological disorders

Background There has been continuous debate as to whether Y chromosome loss is an age related phenomenon or a cytogenetic marker indicating a malignant change. This study aimed to investigate the frequency of Y chromosome loss in the specific patients in order to determine whether it is an age related phenomena or a cytogenetic marker indicating a malignant change. Methods Five hundred and ninety-two male patients with a median age of 59 years old (22–95 years) were included in this study. These patients were divided into two groups: the study group, including 237 patients who had hematological disorders included myeloproliferative disorder (MPD), myelodysplastic syndrome (MDS), acute myeloid leukemia (AML), chronic myeloid leukemia (CML), multiple myeloma (MM), and lymphoma and the control group including 355 patients with no evidence of hematological disease. Both conventional cytogenetics and fluorescence in situ hybridization using DNA probes specific for the centromere of chromosomes X or Y were performed according to our standard laboratory protocols.Results Twenty-four out of 237 patients with hematological disorders (10.1%) had Y chromosome loss. Of these 24 patients, 2 patients had AML (5.0% of all AML patients), 2 patients had CML (5.7% of all CML patients), 2 patients had MPD (8.0% of all MPD patients), 3 patients had MM (10.0% of all MM patients), 5 patients had lymphoma (10.6% of all lymphoma patients) and 10 patients had MDS (16.7% of all MDS patients). Twenty-one out of these 24 patients had a loss of Y chromosome as the sole anomaly and the remaining three had a loss of Y chromosome accompanied with other structural changes detected by conventional cytogenetic analysis. Fluorescence in situ hybridization (FISH) analysis confirmed the routine cytogenetic results. All 24 patients had a loss of Y chromosome with a range of 17.5%–98.5% of cells. Two of the patients, one with AML and another with CML, had karyotype and FISH testing done both at the initial diagnosis and during remission. The results showed a loss of Y chromosome at initial diagnosis but a normal 46,XY karyotype during remission. Only 9 out of 355 patients (2.5%) without evidence of hematological disease had Y chromosome loss, among them 7 patients had cardiovascular diseases and 2 patients had kidney diseases. Comparison of the incidence of Y chromosome loss in patients with hematological disorders or without evidence of hematological disease using statistical analysis showed a statistically significance difference (P&lt;0.05).Conclusions The present study demonstrated that the frequency of Y chromosome loss is significantly higher in patients with hematological disorders than in patients without hematological disorders, which indicates that the loss of Y chromosome is associated with a neoplastic change.     

异基因外周血干细胞移植治疗高危白血病

目的　探讨异基因外周血干细胞移植(allo-PBSCT)治疗高危白血病的疗效。方法　25例高危白血病患者,中位年龄34（5.5～52）岁,接受了HLA配型相合同胞供者外周血干细胞移植,其中急性白血病（AL）15例,（第一次完全缓解1例,为Ph染色体阳性,第二次及以上完全缓解期7例,复发7例,包括2例异基因骨髓移植(BMT)后复发;慢性粒细胞性白血病（CML）4例;（第2次慢性期、加速期、急变期、BMT后复发各1例）;骨髓增生异常综合征(MDS)6例,移植物抗宿主病（GVHD）预防方案采用经典环孢霉素（CsA）加氨甲蝶呤（MTX）。结果　所有患者均植活,中性粒细胞数恢复至≥0.5×109/L和血小板数≥20×109/L的中位时间分别为移植后14(10～18) d和11（7～45） d。发生II度及以上急性GVHD13例,包括1例III度GVHD,未发生IV度急性GVHD。23例可评估患者中16例(70%)诊断慢性GVHD。移植相关死亡率为16%,复发6例,4例经回输供者淋巴细胞获得再次缓解。19例患者无病存活,中位随访时间为304（94～1 963） d。2年总生存率、无病生存率及复发率分别为64%、58%及25%。结论　allo-PBSCT可治疗高危白血病患者,降低移植后复发率,延长无病生存。对有高危因素的血液系统恶性肿瘤患者,选择PBSCT替代骨髓移植更有优势。