肿瘤坏死因子-α对大鼠黄体细胞超氧化物歧化酶和丙二醛的影响

目的　细胞因子在黄体功能的调控中发挥重要作用。肿瘤坏死因子 -α (TNF -α)可抑制离体黄体细胞孕酮分泌并诱导细胞凋亡 ,但其具体机制尚不清楚。本研究探讨TNF -α在黄体退化中的可能机制。方法　采用大鼠离体黄体细胞培养体系 ,使用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸反应法分别研究了不同浓度的TNF-α对黄体细胞超氧化物歧化酶 (SOD)活性和丙二醛 (MDA)含量的影响。结果　本实验制备的黄体细胞存活率在 90 %以上。 1ng/mlTNF -α可使离体培养 4h的黄体细胞SOD活性由 4 0 1± 4 8降低到 30 4± 6 2NU/ml (P<0 0 5 ) ,同时使MDA含量由 6 7 2± 5 3增高到 79 3± 9 2nmol/ml (P <0 0 5 )。结论　TNF -α可能通过降低SOD活性并增加MDA含量 ,影响黄体细胞的功能 ,参与黄体退化     

国内近期有关文献题录

<正>基础理论04452 张丽敏 谷长任:谷氨酸对离体培养的卵巢颗粒细胞雌二醇生成的影响.哈尔滨医科大学学报32(2);87,199804453 王会平 程治平;苏氨酸对离体培养大鼠黄体细胞3β-羟-甾体脱氢酶活性的影响.哈尔滨医科大学学报32(2):84,199804454 周占祥 邓泽沛等:生殖周期中小鼠子宫巨噬细胞的分布.解剖学报29(2);207,199804455 覃业军 罗善云等:生殖周期中大鼠输卵管粘膜上皮纤毛细胞超微结构的变化.解剖学杂志     

一氧化氮与大鼠离体黄体细胞凋亡的关系及白细胞介素-1β对其影响

目的 :探讨一氧化氮在黄体退化中的作用及细胞因子对其影响。方法 :以孕马血清促性腺激素 -人绒毛膜促性腺激素处理的雌性 Wistar大鼠为模型 ,分离制备了黄体细胞。采用 3'-末端标记 (TUNEL)法分析了 NO供体硝普钠 (SNP)、白细胞介素 -1 β(IL-1 β)对离体黄体细胞凋亡的作用。应用比色法及高效液相色谱仪分别检测了 IL-1 β对大鼠离体黄体细胞 NO合酶 (NOS)活性和 NO释放量的影响。结果 :SNP可以剂量方式诱导黄体细胞凋亡 ,1 μmol/ L SNP即可显著增加大鼠离体孵育 1 2 h的黄体细胞凋亡率 (为对照组的 1 33±1 8% ,P<0 .0 5)。IL-1 β(1 0 ng/ ml)可增强 SNP的作用。此外 ,IL-1 β可显著增加离体孵育1 2 h黄体细胞的总 NOS活性 (由 0 .2 0 1± 0 .0 51 U/ mg protein增高到 0 .382± 0 .1 0 6 U/mg protein,P<0 .0 1 ) ,促进 NO生成。结论 :NO-NOS系统可能通过诱导黄体细胞凋亡的途径参与黄体退化过程 ,IL-1 β可增强 NO-NOS系统的活性     

干扰素－α对离体大鼠黄体细胞孕酮生成的影响及与Ca~（2＋）的关系

本工作采用离体培养大鼠黄体细胞的方法，观察了干扰素－α（ＩＦＮ－α）对黄体细胞孕酮生成的影响。１００～２０００ｕ／ｍｌ的ＩＦＮ－α能明显地刺激黄体细胞孕酮的生成，并呈剂量依赖式关系，其作用在２ｈ后达最大。实验进一步观察到，培养液中无Ｃａ２＋、加入ＥＧＴＡ或戊脉胺（Ｖｅｒａｐａｍｉｌ）可明显地抑制ＩＦＮ－α的促孕酮生成作用；相反，Ｃａ２＋载体Ａ２３１８７、培养液中高Ｃａ２＋、高Ｋ＋可增加ＩＦＮ－α的促孕酮生成作用。本实验结果表明，ＩＦＮ－α刺激大鼠离体黄体细胞孕酮生成的作用，依赖于细胞外的ｃａ２＋。     

妊娠期肝内胆汁淤积症患者母胎混合淋巴细胞培养的研究

目的　通过观察母胎间混合淋巴细胞反应 ,探讨母胎组织相容性与妊娠期肝内胆汁淤积症 (ICP)发病的关系。方法　采用淋巴细胞转化法对 2 2例ICP患者 [ICP组 ,其中 5例合并妊娠高血压综合征 (妊高征 ) ]和 2 1例正常孕妇 (对照组 )进行母胎淋巴细胞混合培养 ,计算淋巴细胞转化率 ;比较两组间淋巴细胞转化率的差异。通过检测ICP组孕妇的血清甘胆酸盐水平 ,分析淋巴细胞转化率与血清甘胆酸盐水平的相关性。结果　ICP组淋巴细胞转化率为 ( 2 4± 5 ) % ,对照组为 ( 3 6± 9) % ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 0 1)。ICP组合并与不合并妊高征者的淋巴细胞转化率无显著性差异 (P >0 0 5 )。ICP组淋巴细胞转化率与血清甘胆酸盐水平无显著相关性 [相关系数 (r) =0 40 3 ,P>0 0 5 ]。结论　ICP患者母胎混合淋巴细胞培养反应性降低 ,提示母胎间组织相容性增高、免疫识别与反应性降低。这一变化可能与ICP的发生有关     

用离心分选技术从大鼠垂体制备相对纯净的促性腺细胞

为研究大鼠垂体黄体生成素的α和β亚基的生物合成及分泌,首先需要得到高纯度的促性腺细胞。继往,人们曾使用密度梯度离心法来分离不同的垂体细胞,但其细胞存活率和回收率都比较低。我们使用离心分选技术来处理经酶解的完整大鼠垂体细胞,虽细胞成活率及回收率明显提高,但并不能将促性腺细胞与促甲状腺素分泌细胞适当分开。然而应用阉割30天的雄性大鼠的垂体进行实验,经离心分选后,可得到相对纯净的促性腺细胞群,并可使之与促甲状腺素分泌细胞相对分开,离体培养条件下,加入促性腺激素释放激素,可以刺激较纯净的促性腺细胞分泌LH增加。因此我们认为用离心分选技术所得之相对纯净的促性腺细胞可以作为研究大鼠LH亚基合成及分泌的离体模型。     

天花粉蛋白对小鼠胚胎早期发育的影响

本实验利用胚胎培养和动物试验测试天花粉蛋白对胎鼠早期器官形成有致畸作用；头、躯干和四肢可发生畸形，体节数目及轴长减少。母鼠在器官形成期给药，天花粉蛋白可降低胎鼠存活能力、活胎率下降、吸收点数目增加。存活胎鼠顶臀长度较对照组短。畸形胎鼠数目增加。畸形以露脑最为显著。此外有短肢、短尾和矮小。结果显示天花粉蛋白对离体和体内胚胎的发育皆有不良的影响。     

酪氨酸及其衍生物对大鼠离体黄体细胞HCG致孕酮生成作的影响

本实验室应用培养大鼠黄体细胞的方法,研究酪氨酸及其衍生物对hCG 致孕酮生成作用的影响,以分析酪氨酸的作用是否通过其衍生物而发挥的。用PMSG(65U/鼠)和hCG(35U/鼠)处理25～28天雌性大鼠造成超排卵并形成黄体,取hCG 处理后7天的黄体制备悬液,加入各种试剂共同孵育1.5小时后用放免法测定孕酮含量。结果表明,酪氨酸对大鼠离体黄体细胞具有明显的抗hCG 致孕酮生成作用,而酪氨酸的衍生物,多巴胺和去甲肾上腺素,3-碘-酪氨酸和3,5-二溴-酪氨酸则与酪氨酸作用相反,这说明,酪氨酸对黄体细胞孕酮生成的抑制作用是其本身的作用,而不是通过其衍生物而产生的。     

人蜕膜细胞的离体培养

本文采用临床人工流产的早孕蜕膜为材料,进行离体培养。这不仅为抗早孕药物的筛选提供了一个有用的离体模型,而且有助于蜕膜细胞功能的研究。     

肿瘤坏死因子—α抑制hCG诱导离体大鼠黄体细胞孕酮生成

本实验利用细胞培养法和放射免疫测定法研究了ＴＮＦ－α对ｈＣＧ诱导离体大鼠黄体细胞孕酮生成的影响及其作用机制。结果发现ＴＮＦ－α显著抑制ｈＣＧ诱导离体大鼠黄体细胞孕酮分泌和ｃＡＭＰ生成，具有显著的时间和剂量依赖关系。但ＴＮＦ－α不影响Ｆｏｒｓｋｏｌｉｎ诱导ｃＡＭＰ生成和孕酮分泌，亦不影响ＰＭＡ诱导孕酮释放。提示ＴＮＦ－α通过抑制ｈＣＧ的作用参与黄体机能的调节。     

人脐血淋巴细胞的机能

人胎儿合成免疫球蛋白及细胞免疫功能在胚胎早期已开始出现,虽不成熟,但已俱有免疫功能的胎儿,不被母体排斥而在免疫学上共存,涉及很多复杂的免疫机制,其中之一就是认为胎儿淋巴细胞有抑制母体淋巴细胞的杀伤作用。有关脐血淋巴细胞的免疫作用已有很多报道,作者仅就其中一部分综述如下: 将男胎脐血淋巴细胞与母血淋巴细胞在加有PHA-P中混合培养,以Y染色体为标记,检查发现全部分裂细胞中有98%来自胎儿。母、胎两者的淋     

干拢素—a对离体大鼠黄体细胞孕酮生成的影响及与Ca^2＋的关系

本工作采用离体培养大鼠黄体细胞的方法，观察了干拢素－ａ对黄体细胞孕酮生成的影响。１００－２０００ｕ／ｍｌ的ＩＦＮ－ａ能明显地刺激黄体细胞孕酮的生成，并呈剂量依赖式关系。其作用在２ｈ后达最大，实验进一步观察到，培养液中无Ｃａ＾２＋，加入ＥＧＴＡ或戊胺可明显地抑制ＩＦＮ－ａ的促孕酮生成作用；相反，Ｃａ＾２＋载体Ａ２３１８７，培养液中高Ｃａ＾２＋，高Ｋ＾可增加ＩＦＮ－ａ的促孕酮生成作用。本实验结果表明，     

12种小分子肽对大鼠离体黄体细胞孕酮生成的影响

用放射免疫分析法测定大鼠离体黄体细胞孕酮含量,观察了人工合成的12种小分子肽对大鼠黄体细胞的影响。结果表明,Gly-Tyr-NH_2和Gly-Ser-Lys 有抑制黄体细胞基础孕酮分泌作用,还抑制hCG 诱导的孕酮分泌;Lys-Tyr-NH_2,Thr-Ser-Lys,Gly-Tyr-Lys 抑制hCG 诱导的孕酮分泌;(Gly-Tyr)_2=Lys 则增强基础及hCG 诱导的孕酮分泌;其余6种小分子肽(Gly-Gly,Gly-D—Tyr,Tyr-D—Tyr,Thr-Ser-Tyr,Thr-Asn-Tyr-Thr-NH_2,Tyr-Tyr-His-Lys-Ser),对大鼠黄体细胞孕酮分泌没有影响。同时讨论了其构效关系及可能的作用机制。     

经阴道途径与经腹部途径体外受精-胚胎移植多胎妊娠减胎术后妊娠结局的分析

目的比较体外受精-胚胎移植(IVF-ET)多胎妊娠在早孕早期(6~8孕周)经阴道减胎与早孕晚期(11~13+6孕周)经腹部减胎术后的妊娠结局,探讨多胎妊娠合适的减胎时机。方法 2014年1月—2016年12月期间于本院经超声波诊断的多胎妊娠拟行减胎手术患者,6~8孕周经阴道减胎组110例,11~13孕周经腹部减胎组78例,比较两组间早产率、流产率、低出生体质量率、胎儿体质量、孕周等。结果比较流产率、低出生体质量率、流产孕周、分娩孕周、平均胎儿体质量组间均无统计学差异。与经腹减胎组(5.13%,6.12%)比较,经阴道减胎组34~37孕周早产率明显升高(17.27%)、减胎个数分层显示6~8孕周双胎减一胎后早产率升高(19.40%)。结论与11~13+6孕周经腹部减胎比较,6~8孕周经阴道减胎组34~37孕周的早产率升高、双胎减一胎后的总体早产率升高。     

醋酸棉酚对人体淋巴细胞SCE的离体效应

<正> 棉酚在动物体内诱发染色体损伤的研究已有许多报道,但对离体系统中应用人体淋巴细胞和中国仓鼠卵巢(CHO)细胞检测棉酚的诱变性,各家结论不一。为了进一步评价棉酚的遗传安全性,我们作了棉酚对人体淋巴细胞SCE 的离体诱变试验。材料与方法用二甲亚砜(DMSO)溶解醋酸棉酚(无锡轻工业学院生产),将待测棉酚溶液分为三个浓度,使每毫升培养液内分别为0.2、1和2微克;分别用DMSO、0.1N NaOH 和注射用水作对照(每毫升培养液内分别加0.5微升)。     

国内近期有关文献题录

<正> 基础理论03269 童国遐赵白鸽等:阿黑皮素原相关肽对大鼠离体黄体细胞孕酮生成的影响。生殖医学杂志1:27,199203270 曾国庆蒋广泰:绒毛膜促性腺激素和前列腺素F_(2α)抗血清对小鼠胚胎着床效应的研究。动物学报38:323,1992     

荧光原位杂交快速检测胎血和绒毛中染色体非整倍体

79例中45例在孕10～14周时超声波提示胎儿项部存在半透明性从而经腹绒毛取样;另外34例因超声波提示胎儿有大范围的畸形、生长迟缓或两者兼有,在孕16～39周通过脐带穿刺取得胎儿血样。应用传统细胞遗传学技术进行绒毛分析和血淋巴细胞培养分析。另外样品经处理后进行荧光原位杂交。用X和18染色体α卫星重复探针和13/21联合探针及Y常染色质探针杂交,并用荧光显微镜检查。 结果表明47例胎儿核型正常,32例异常。在绒毛和胎血之间无论用哪一种探针杂交效率均无显著性差异。用13/21探针比用其它探针杂交效率明显低。     

离体培养人蜕膜细胞的放射自显影术

<正> 蜕膜细胞是子宫内膜的间质细胞,在着床过程中由子宫的基质细胞分化而来并一直维持到妊娠终止。人蜕膜细胞离体培养容易生长,用离体培养的蜕膜细胞可以直接观察药物对人体子宫内膜的影响,是研究避孕药、具作用机理和宫内节育器引起子宫内膜出血机制的理想模型。用放射自显术观察离体培养的人蜕膜细胞,不仅可以避免整体实验时同位素对细胞的损害,而且可以在严格控制的条件下观察细胞的机能,有利于作单因素的分析。近年来,我们建立了离体培养人蜕膜细胞的放射自显影术,现简介如下。一、材料: 选从末次月经计算40～70天的人工流产的蜕膜组     

未产妇妊娠41周以上胎头未固定者其剖宫产的危险性

为确定未产妇妊娠≥41周胎头未固定者其剖宫产的危险性是否增加,回顾性研究未产妇妊娠≥41周的剖宫产率。研究对象为1999年1月～2002年5月妊娠≥41周单胎未先露的未产妇,妊娠16～18周常规超声波检查确定停经时间,产妇自然临产或引产临产,观察其预后,如宫颈Bishop评分不良,用催产素引产,常用米索前列醇使宫颈容受,计算机记录产前、产时过程,观察入院至分娩胎头的下降位置,记录产妇年龄、体质量、妊娠期所增体质量,婴儿体质量,麻醉的应用,引产方法或增加何种药物,及临产与分娩时的并发症。剖宫是产适应证为胎儿宫内窘迫或进展失败。若两种同…     

人子宫内膜基质细胞的体外蜕膜化及其与腺体细胞的关系

体外分离、培养人子宫内膜基质细胞和腺体细胞,待基质细胞生长融合后,加入孕酮刺激,使其蜕膜化。结果显示,孕酮（ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ,Ｐ）组基质细胞胞体变大、变圆,尤以含胎牛血清（ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ,ＦＢＳ）组显著。用酶免疫分析法检测培养液中催乳素（ｐｒｏ－ｌａｃｔｉｎ,ＰＲＬ）含量发现,培养ｄ１７～２０ＰＲＬ分泌量达到高峰;免疫细胞化学染色可见基质细胞ＰＲＬ免疫反应阳性。在此基础上,将同期培养的腺细胞匀浆液加入到已蜕膜化的基质细胞中,结果发现,在加入腺体匀浆液３ｄ后蜕膜细胞胞体变小,ＰＲＬ分泌量减少,而对照组的ＰＲＬ产量则递增。结果提示,子宫内膜腺细胞对蜕膜反应有一定的抑制作用,其作用方式和机制有待于进一步探讨。