抗纤抑癌方对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶表达的影响

目的:研究抗纤抑癌方对肝纤维化大鼠肝组织MMP-1及TIMP-1表达的影响,探讨其抗纤维化的作用机制。方法:以复方鳖甲软肝片和秋水仙碱为对照药,观察抗纤抑癌方对二乙基亚硝胺诱发大鼠肝纤维化模型大鼠肝脏组织病理的影响,并通过免疫组化方法测定各组大鼠肝脏MMP-1、TIMP-1的表达。结果:与模型组相比,抗纤抑癌组MMP-1表达显著升高,TIMP-1表达明显降低;鳖甲软肝组和秋水仙碱组MMP-1表达均显著高于模型组。与各治疗组相比,抗纤抑癌组MMP-1表达高于鳖甲软肝组。结论:抗纤抑癌方具有明显的抗肝纤维化作用,其作用机制可能与增加MMP-1表达、降低TIMP-1表达、促进细胞外基质降解等有关。     

肝纤维化不同证型与基质金属蛋白酶及其抑制因子表达的关系

目的 观察肝纤维化不同证型与基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制因子的关系.方法 清洁级雄性SD大鼠140只,依随机数字表法分为4组:正常对照组20只、单纯肝纤维化组30只、肝纤维化肝郁脾虚证组、肝纤维化气虚血瘀证组各45只.各模型组先用四氯化碳注射法复制肝硬化疾病模型,然后肝郁脾虚证组附加夹尾和大黄灌胃法、气虚血瘀证组附加游泳疲劳法,并以相应药物干预.采用免疫组化法测定肝组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)水平.结果 各模型组肝组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2均较正常组明显升高(P<0.01或P<0.05),以气虚血瘀组最为明显.结论 基质金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化密切相关,在不同中医证型中表达有差异,可作为肝纤维化中医辨证分型及疗效评价的指标之一.     

清肝活血方对酒精性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶的调控作用

目的 通过观察清肝活血方及其拆方对酒精性纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2、9( MMP-2,9)和1型基质金属蛋白酶抑制物( TIMP-1)的调控作用,探讨清肝活血方及其拆方治疗酒精性肝纤维化的作用机制.方法 雄性SD大鼠随机分为空白对照组、CCl4组(各10只)和造模组(110只).造模组用白酒为主的复合因素进行干预.8周后造模组随机分为模型组(25只)、清肝活血方组、清肝方组及活血方组各15只,在实验第4、8、10周各取8只模型大鼠做病理分析以监测模型进展,余大鼠在造模中死亡.各治疗组分别加用相应药物灌胃,分别为4.75、1.50、3.25 g/kg.12周末处死大鼠,采用蛋白印迹法、荧光定量PCR、免疫荧光法检测MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白及mRNA表达.结果 与空白对照组比较,模型组MMP-2、MMP-9、TIMP-1表达明显升高(1.81±0.28vs.0.53 ±0.04,1.60 ±0.16vs.0.45±0.05,1.20±0.02vs.0.35±0.07,P＜0.01).与模型组比较,清肝活血方及其拆方组TIMP-1表达均降低(0.56±0.05、0.67±0.02、0.70±0.02vs.1.20±0.02),MMP-2、MMP-9表达提高(4.18±0.53、2.70±0.40、2.38±0.22vs.1.81±0.28;3.31 ±0.06、2.56±0.20、1.87±0.05vs.1.60±0.16,P＜0.05,P＜0.01),全方组调控优于各拆方组(P＜0.05,P＜0.01).结论 清肝活血方及其拆方治疗酒精性肝纤维化的作用机制可能与调控MMP-2、9有关.     

金钗石斛多糖对肝纤维化大鼠转化生长因子及基质金属蛋白酶的影响

目的:探讨金钗石斛多糖对肝纤维化大鼠转化生长因子β1(TGFβ1)、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)及基质金属蛋白酶(MMP13)的影响。方法:SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组,模型组,秋水仙碱组,扶正化瘀组,石斛多糖低、中、高剂量组,采用四氯化碳(CCL4)复合乙醇诱导大鼠肝纤维化模型,造模8周成功后,分别给予相应的干预药物,正常组、模型组给予生理盐水,每日1次,连续4周。采用荧光定量PCR技术检测大鼠肝脏TGFβ1、TIMP-1、MMP13 mRNA的表达差异。结果:与模型组相比,各治疗组肝组织内纤维化程度均有不同程度减轻;与正常对照组比较,模型组TGFβ1、TIMP-1 mRNA的表达上调(P<0.05),MMP13 mRNA的表达下调(P<0.05);与模型组比较,各药物干预组均能降低大鼠肝组织TGFβ1、TIMP-1 mRNA的表达,其中扶正化瘀组、石斛多糖中、大剂量表达有显著性差异(P<0.05);与模型组比较,各药物干预组提高MMP13 mRNA的表达,其中以扶正化瘀组、石斛多糖大剂量为甚(P<0.05)。结论:石斛多糖具有下调TGFβ1、TIMP-1 mRNA表达,上调MMP13 mRNA表达,可能是其抗肝纤维化的作用机理之一。     

扶正化淤方对四氯化碳肝纤维化大鼠基膜型基质金属蛋白酶活性的影响

目的 探讨扶正化淤方通过影响基膜型基质金属蛋白酶活性而抗肝纤维化的作用机制.方法 四氯化碳(CCl4)皮下注射与高脂低蛋白饲料复合建立大鼠肝纤维化模型.随机分为正常组、模型组与扶正化淤方药物干预组.药物组自造模之日起以扶正化淤方稀释液灌胃,共用药6周.HE染色观察肝组织炎性病理变化,天狼猩红染色观察肝组织胶原沉积,盐酸水解法测定肝组织羟脯氨酸含量,Western 印迹法分析肝组织α-SMA、Ⅳ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-2和MT-MMP1蛋白表达水平;明胶酶图法检测肝组织MMP-2/9活性.结果 与正常大鼠比较,模型大鼠血清肝功能异常、肝组织炎症明显、肝组织IV型胶原表达与沉积增加,α-SMA、Ⅳ型胶原、MMP-2、MMP-9、TIMP-2和MT-MMP1蛋白表达升高,而MMP-2/9活性水平明显上升.扶正化瘀方显著改善模型大鼠血清肝功能、减轻肝脏炎症和胶原沉积;减少肝星状细胞活化;抑制Ⅳ型胶原蛋白表达和沉积;降低MMP-2、TIMP-2和MT1-MMP蛋白表达;抑制MMP-2/9活性.结论 扶正化瘀方可通过抑制MMP-2的激活与活性水平,并减少Ⅳ型胶原沉积,而起到减轻肝组织的破坏与重构而发挥抗肝纤维化的作用.     

青蒿琥酯对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-2表达的影响

目的: 探讨青蒿琥酯(Art)影响基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的抗肝纤维化作用机制。 方法: 采用二甲基亚硝胺(DMN)ip 6周,制备大鼠肝纤维化模型。动物随机分为6组:正常对照组、模型对照组、Art(5,15,45 mg·kg^-1)组、阳性对照秋水仙碱(Col, 0.1 mg·kg^-1)。检测肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量、动物血清透明质酸(HA),层连蛋白(LN),Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)水平及肝组织MMP-2 mRNA和蛋白的表达。 结果: 与模型组相比,Art各组能降低肝组织Hyp含量(P<0.01),同时血清HA,LN,PⅢP,肝组织MMP-2-mRNA和蛋白的表达水平下降(P<0.05,P<0.01)。 结论: Art能有效抑制DMN诱导的大鼠肝纤维化及肝脏中MMP-2的表达。     

猪血清肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-9/13和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1/2表达的动态变化及下瘀血汤对其影响

目的:研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶9/13和基质金属蛋白酶组织抑制因子1/2表达的动态变化及下瘀血汤对其影响,探讨下瘀血汤抗肝纤维化的机制。方法:猪血清腹腔复制大鼠肝纤维化模型,造模8周后ig下瘀血汤的流浸膏,用药4周后和在造模过程中的1、24、、8周动态处死大鼠,获取标本,检测指标。结果:MMP-2/9的高活性和TIMP-1的高表达贯穿于本模型的始终。MMP-9/13蛋白表达在肝纤维化发生发展过程中有先抑制后升高,再次抑制而后升高的反复过程,并受TIMP-1/2表达影响;下瘀血汤可以提高MMP-9活性,促进MMP-9/13而抑制TIMP-1,2表达。结论:该模型有MMP-9/13和TIMP-1/2表达的失衡;下瘀血汤可通过调控MMp-9/13和TIMP-1/2的表达,降解过度沉积的细胞外基质而发挥抗肝纤维化的作用。     

三七总皂苷对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-13及其抑制因子-1表达的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶(MMP)-13、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP)-1表达的影响,探讨PNS抗肝纤维化作用的可能机制.方法:将大鼠随机分成正常组、模型组、PNS低、中、高剂量(50,100,200 mg·kg-1)组和秋水仙碱(Col,0.1mg·kg-1)组.除正常组外其余各组采用CCl4皮下注射的方法诱导肝纤维化大鼠模型,每周2次,连续18周.于造模第9周起,给药组分别灌胃相应的受试药物,正常组和模型组灌胃等容量的生理盐水,疗程10周.实验结束后,计算肝脏、脾脏指数;比色法测定血清中ALT,AST含量;同时取固定部位肝脏组织,HE染色观察肝组织病理学改变,免疫组化技术测定肝组织中MMP-13,TIMP-1蛋白的表达,RT-PCR技术测定MMP-13,TIMP-1mRNA的表达.结果:与模型组相比,三七总皂苷(100,200 mg·kg-1)不仅可减轻大鼠肝纤维化程度,降低肝脏、脾脏指数及血清ALT,AST的含量,还可显著升高肝纤维化大鼠肝脏MMP-13的表达,降低TIMP-1的表达.结论:三七总皂苷对大鼠肝纤维化具有一定的保护作用,其机制可能与上调MMP-13,抑制TIMP-1的表达,促进胶原降解有关.     

疏肝健脾汤对肝纤维化大鼠基质金属2、TIMP-2影响的研究

目的：通过对肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶及其抑制剂表达的影响,探讨疏肝健脾汤防治肝纤维化的机制。方法：雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、秋水仙碱预防组、秋水仙碱治疗组、疏肝健脾汤预防组、疏肝健脾汤治疗组,用猪血清诱导免疫损伤性肝纤维化模型,给予疏肝健脾汤进行防治,采用免疫组化方法,观测基质金属蛋白酶（MMP-2）及其抑制因子（TIMP-2）在各组大鼠肝脏组织中的表达。结果：模型组MMP-2较正常组有显著性差异（P〈0.05）,疏肝健脾汤各组MMP-2的表达较模型组有所降低（P〈0.05）,但高于正常组（P〈0.05）,低于秋水仙碱组（P〈0.05）;TIMP-2在模型组表达高于正常组（P〈0.05）,疏肝健脾汤各组表达低于模型组、秋水仙碱组,均有显著统计学意义（P〈0.05）。结论：疏肝健脾汤明显抑制MMP-2、TIMP-2的表达,提示疏肝健脾汤能够调节基质金属蛋白酶及其抑制因子的表达,促进细胞外基质的降解,从而实现对肝纤维化的防治作用。     

基质金属蛋白酶组织抑制剂与动脉粥样硬化

基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）在动脉粥样硬化（AS）形成过程中起着十分重要的作用，TIMPs通过抑制基质金属蛋白酶（MMPS）从而可延缓或阻止AS发生和发展。     

扶正化瘀方对大鼠肾间质纤维化肾组织基质金属蛋白酶活性调节的作用

目的:探讨扶正化瘀方影响肾间质纤维化大鼠肾组织基质金属蛋白酶(MMPs)活性调节的抗肾纤维化作用机制。方法:大鼠分为正常组、模型组与扶正化瘀方组,以氯化汞灌胃诱导大鼠肾间质纤维化模型,扶正化瘀方组以4g/kg扶正化瘀方灌胃。生化检测血清肾功能、肾组织羟脯氨酸(Hyp)含量;病理染色观察肾组织病理形态改变;蛋白印迹法分析肾组织MMP-13、MMP-2、膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)及金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1/2)蛋白表达;明胶酶谱法测定MMP-2活性;荧光底物反应法检测MMP-13活性。结果:与模型组比较,扶正化瘀方组明显改善大鼠血清肾功能指标,降低肾组织Hyp含量,减轻肾组织胶原沉积,降低大鼠肾组织的MMP-2、MT1-MMP、TIMP-1/2蛋白表达,降低MMP-2活性,但增加MMP-13活性。结论:扶正化瘀方抗肾间质纤维化的作用机制在于:抑制MMP-2活性,保护肾组织基底膜;抑制TIMP-1表达,提高MMP-13活性与促进病理沉积间质性胶原的降解。     

中药肝力克对肝纤维化大鼠肝组织TIMP-2 mRNA表达的影响

目的:探讨中药复方肝力克对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶抑制物-2(TMP-2)Mrna表达的影响.方法:用40?l4皮下注射建立SD大鼠肝纤维化模型.造模结束后,给予不同剂量的肝力克和秋水仙碱灌胃治疗9周.采用原位杂交法观察大鼠肝组织中TIMP-2mRNA的表达情况.结果:肝纤维化模型组大鼠肝组织TIMP-2 Mrna阳性表达较正常对照组明显升高(P<0.01);应用肝力克大、中、小剂量治疗后,大鼠肝组织TIMP-2 Mrna表达明显降低(P<0.05),而秋水仙碱组则无显著变化(P>0.05).结论:TIMP-2是影响肝纤维化形成的重要因素,肝力克下调肝纤维化大鼠肝组织TIMp-2 Mrna表达,可能是其抗肝纤维化作用机理之一.     

基质金属蛋白酶-9与动脉粥样硬化及中医药防治

基质金属蛋白酶-9（MMP-9）是MMPs家族中的一种明胶酶,MMP-9可降解Ⅳ型胶原等多种胶原及明胶,参与动脉粥样硬化（AS）过程,增加斑块不稳定性,导致心血管不良事件。对MMP-9的结构与活性调节、与AS的关系及中医药防治进行综述。     

TIMP-1在肝纤维化形成发展过程中的影响研究

肝纤维化是对慢性肝损伤的一种修复反应,其实质是Ⅰ、Ⅲ型胶原为主的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成与降解失衡,在肝内过度沉积而形成的病理性疾病。而基质金属蛋白酶(matrix metallo proteinas-es,MMPs)及其抑制因子(tissue inhibitor ofmetallo proteinases,TIMPs)是调节ECM降解的主要酶系。TIMP-1是肝脏中仅有的两种基质金属蛋白酶组织抑制因子之一,被认为是肝纤维化发生过程中的重要因素。     

基质金属蛋白酶及其与细菌感染性疾病的关系

基质金属蛋白酶（MMPs）是一个包含多个成员的大家族,其酶的活性中心含有金属离子,参与体内许多正常生理和异常病理的功能,在炎症、多发性硬化病、心脑血管疾病、自体免疫性疾病、新生血管形成以及肿瘤浸润和转移中起重要作用。近期的研究表明,基质金属蛋白酶与细菌感染有关,许多革兰氏阴性细菌感染会导致MMPs表达增高,这些细菌包括鼠伤寒沙门氏菌、小肠结肠炎耶尔森菌、大肠杆菌、幽门螺杆菌、绿脓杆菌、泌尿生殖道衣原体和结核杆菌等。     

基质金属蛋白酶与冠心病及中医药应用

基质金属蛋白酶(MMPs)是一组锌离子和钙离子依赖的内源性蛋白水解酶,其主要功能是降解细胞外基质成分,在组织塑形中起着重要作用,广泛参与体内血管及心肌重构、炎症损伤修复、器官发育等病理生理过程.诸多研究显示基质金属蛋白酶的表达或活性异常与冠心病的发生发展密切相关.本文就其研究进展进行综述.     

复方鳖甲软肝方防治特发性肺间质纤维化的MMPs表达

目的 研究复方鳖甲软肝方对特发性肺间质纤维化防治的MMPs表达,探讨其机理和疗效.方法 选sD雄性大鼠180只.随机分为假手术组、模型组、阳性药物时照组及复方鳖甲软肝方高、中、低剂量组,共6组,每组30只.各组分别于7,14,28 d随机抽取10只大鼠,麻醉后取肺组织,MMP-2采用原位杂交及RT-PCR的方法测定.MMP-1和MMP-9采用免疫组化的方法.结果 复方鳖甲软肝方组在早期抑制MMP-9在细胞内表达上调,在中晚期抑制MMP-1在细胞内表达上调,说明两者均有抑制纤维合成的作用.MMP-2的原位杂交和RT-PCR结果一致,在模型组过度表达,在药物组表达被抑制,表明药物对IPF的形成有抑制作用,以中、小剂量组为好.结论 复方鳖甲软肝方在早期抑制MMP-9在细胞内表达上调,在中晚期抑制MMP-1在细胞内表达上调,达到抗纤维化作用;复方鳖甲软肝方通过抑制MMP-2表达发挥抗纤维化的作用.     

肝力克对肝纤维化大鼠肝组织基质金属蛋白酶-2及其抑制物的影响

目的:观察中药肝力克对实验性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2及其抑制物的影响.方法:40?l4皮下注射,建立大鼠肝纤维化模型;将肝纤维化大鼠随机分为肝纤维化模型组、肝力克大剂量组、肝力克中剂量组和肝力克小剂量组,分别给药.取肝组织常规HE染色,观察大鼠肝组织炎症活动度和肝纤维化程度,用原位杂交法检测大鼠肝组织中MMP-2及TIMP-2mRNA表达.结果:模型组大鼠肝组织炎症活动度计分及肝纤维化程度计分均较正对照组明显升高(P＜0.01);经肝力克大、中、小剂量组治疗后,大鼠肝组织炎症活动度计分及肝纤维化程度计分均较肝纤维化模型组大鼠明显降低(P＜0.05,P＜0.01);模型组大鼠肝组织MMP-2、TIMP-2mRNA表达均较正常对照明显升高(P＜0.01),经肝力克治疗后,大、中、小剂量组大鼠肝组织TIMP-2mRNA表达较肝纤维化模型组明显降低(P＜0.05);但MMP-2mRNA表达与肝纤维化模型组大鼠相比差异无显著性意义(P＞0.05).结论:肝力克有明显减轻实验性肝纤维化大鼠肝组织炎症活动度及纤维化程度的作用;下调肝纤维化大鼠肝组织TIMP-2mRNA表达,可能是其抗纤维化作用机理之一.     

脑出血患者治疗前后谷氨酸、基质金属蛋白酶-2及基质金属蛋白酶-9表达分析

目的探讨脑出血患者治疗前后谷氨酸、基质金属蛋白酶(MMP)-2及MMP-9表达变化及其意义。方法对住院脑出血患者60例采用颅内血肿微创清除术治疗。2组在治疗前后进行谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达测定,同时进行预后CSS评分与疗效评价。结果本组患者痊愈35例,显著进步15例,进步7例,无变化3例,无死亡患者,有效率为95%。同时治疗后CSS评分有明显下降(P<0.05)。脑出血患者治疗后的谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达量明显高于入院时,有显著性差异(P<0.05)。入院时与治疗后患者的谷氨酸、MMP-2及MMP-9含量与NDS评分都有明显正相关性(P均<0.05)。结论脑出血患者治疗前后谷氨酸、MMP-2及MMP-9表达变化可反应预后情况,可作为评价治疗效果的生物学指标。     

悦肝胶囊对肝纤维化大鼠防治作用的实验研究

目的:观察悦肝胶囊对二甲基亚硝胺(DMN)模型大鼠肝纤维化形成的影响,探讨悦肝胶囊抗肝纤维化的作用机制。方法:模型制备采用DMN4周12天腹腔注射,实验组分别用大、中、小剂量悦肝胶囊干预,干扰素对照。生化测定肝组织羟脯氨酸含量(HYP);免疫组织化学方法观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)的表达情况;通过天狼猩红染色和HE染色观察肝组织胶原沉积情况及病理变化。结果:与模型对照组相比,悦肝胶囊可有效改善肝组织胶原沉积,降低肝组织HYP含量,抑制肝组织α-SMA和TIMP-1表达,对MMP-1表达影响微弱,无差异。结论:提示悦肝胶囊具有保肝和抗肝纤维化作用,作用机制可能与其抑制肝星状细胞(HSC)活化,减少胶原合成,同时促进胶原分解有关。