补肾活血法与益气补血法对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠骨髓基质细胞生长及血清 IL -6 的影响

目的比较补肾活血法与益气补血法对环磷酰胺（CTX）所致骨髓抑制小鼠血清白介素-6（IL-6）表达水平及骨髓基质细胞（BMSC）生长的影响。方法选用SPF级ICR小鼠80只,随机分为对照组、模型组、补肾活血组、益气补血组、补肾活血加益气补血（中药联合）组,分别给予相应药物灌胃21d,给药第8天采用腹腔注射CTX100rag／（kg·d）,连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型。于造模后第3天、第7天检测血清中的IL-6,同时提取小鼠骨髓基质细胞分别培养14d后进行观察。结果造模后第3天,模型组及各中药组小鼠血清中的IL-6含量较对照组均明显增多（P均〈0．01）,但3个中药组明显低于模型组,尤以中药联合组明显（P〈0．05或0．01）,补肾活血组次之（P〈0．01）。造模后第7天,模型组与中药组IL-6下降,但模型组与补肾活血组仍显著高于对照组（P均〈0．01）,益气补血组和中药联合组IL-6水平与对照组比较无显著性差异,,造模后第3天骨髓细胞经培养14d后,模型组贴壁细胞数量减少,梭形成纤维细胞比例降低,细胞融合差;而各中药组骨髓基质细胞较模型组生长良好,胞体较大,突起丰富,且能形成少量集落,以中药联合组最佳。造模后第7天骨髓细胞经培养14d后,各中药组贴壁细胞数量及成纤维细胞集落与对照组比较无明显差异。结论补肾活血法与益气补血法对骨髓抑制后小鼠骨髓基质细胞的坏死具有较好的防治作用,对血清IL-6分泌水平具有较好的调节作用,使其水平维持在适当的范围内,既有利于造血微环境的稳定,又可促进造血的恢复,且益气补血法优于补肾活血法,两法联合效果更优。     

补肾活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血细胞作用的比较

目的比较补肾活血法与益气活血法对化疗后骨髓抑制模型小鼠造血细胞作用特点与差异。方法将SPF级ICR小鼠随机分为正常对照组、模型组、补肾活血组和益气补血组,灌胃1次/d,连续给药至实验结束,第8天采用腹腔注入环磷酰胺（100mg/（kg·d））,连续3d造模。造模后第1天和第7天各处死半数动物,检测骨髓有核细胞计数、骨髓CD₃₄⁺细胞及细胞周期。结果两中药组均可提高骨髓有核细胞数,增加骨髓细胞增殖指数;其中益气补血法对造血细胞动员能力更强,补肾活血法对维持骨髓造血细胞增殖效果更佳。结论补肾活血法与益气活血法均可以促进骨髓抑制小鼠造血功能恢复,其作用机制存在差异。     

补肾解毒活血方与益气补血方预防化疗后骨髓抑制的比较研究

目的:比较补肾解毒活血方与益气补血方预防环磷酰胺(CTX)引起骨髓抑制小鼠造血功能的效果及作用机制,为临床合理配伍提供依据.方法:清洁级昆明种小鼠80只,随机分为正常对照组、模型组、补肾解毒活血组和益气补血组,中药组分别给予25.55,17.47 g?kg-1 ?d-1中药灌胃,正常对照组和模型组给予等体积的生理盐水,每日灌胃1次,连续给药10d,第8天时采用腹腔注入环磷酰胺(100 mg?kg-1?d-1),连续造模3d.各组随机抽取10只,在第7天(造模前1d)及造模完成后的第1,3,5,7,10天做外周血象检测,剩余10只于造模后第1天进行骨髓有核细胞计数(BMNC)、粒系、红系造血祖细胞(CFU-GM,CFU-E和BFU-E)集落形成单位、细胞凋亡检测及血清粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及促红细胞生成素(EPO)检测.结果:各组小鼠白细胞和血小板数分别于造模后第1天和第5天降至最低,并分别于第5天和第10天基本恢复至正常,但益气补血组下降程度较模型组轻(P＜0.01),而补肾解毒活血组恢复明显早于模型组和益气补血组(P＜0.05);造模后模型组BMNC,CFU-GM及BFU-E显著下降(P＜0.01),且两中药组均明显高于模型组(P＜0.01),其中BFU-E以补肾解毒活血组为优(P＜0.05);造模后小鼠骨髓细胞凋亡率明显增加(P＜0.01),约是正常组的14.7倍,两中药组骨髓细胞凋亡率均明显低于模型组(P＜0.01);造模后GM-CSF较正常组显著降低(P＜0.01),但两中药组GM-CSF明显高于模型组(P＜0.05).各组血清EPO水平较正常组没有明显差异.结论:预防给予益气补血药或补肾活血解毒药均可以加快化疗后骨髓抑制白细胞的恢复,尤以益气补血方为优;益气补血方减轻血小板下降程度更好,补肾活血解毒方促使血小板恢复更佳.预防给予两组中药均可减轻小鼠环磷酰胺造成的BMNC和CFU-GM下降程度,从而有利于白细胞的恢复;两组中药不是通过提高血清促红细胞生成素的水平,而是通过减轻环磷酰胺造成的BFU-E的减少,达到保护红系造血的效果,以补肾解毒活血方为优.预防应用补肾解毒活血药与益气补血药可以明显降低环磷酰胺引起的骨髓细胞凋亡,似以益气补血组为佳.     

补肾解毒活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血功能影响的比较研究

目的:比较补肾解毒活血法与益气补血法对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠造血功能的影响及其作用机制的不同特点.方法:昆明种小鼠80只,随机分为4组,正常对照组、模型组、补肾解毒活血组(20.55 g·kg -1·d-1)和益气补血组(17.47 g·kg-1·d-1).采用CTX 100 mg·kg-1 ip,连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型.各组于造模完成后次日开始ig连续10d.分别于造模前及造模后1,3,5,7,10,14 d动态检测外周血象;于末次给药次日后进行骨髓有核细胞计数(BMNC)及粒-单核系集落形成单位( CFU-GM)、红系集落形成单位(CFU-E)、和红系爆式集落形成单位(BFU-E)集落计数.结果:补肾解毒活血方和益气补血方均可明显升高模型小鼠的WBC,PLT,BMNC,可促进造血祖细胞(HPC)增殖,CFU-GM,CFU-E,BFU-E集落数均显著高于模型组(P＜0.01);补肾解毒活血方对血小板的恢复优于益气补血方.结论:补肾解毒活血方和益气补血方均可促进骨髓造血祖细胞集落生成,具有减轻和改善化疗后骨髓抑制的效果,而前者尤可减轻血小板减少、促进其恢复;其作用机制可能在骨髓细胞分化过程或造血微环境等途径上有不同.     

补肾解毒活血法对骨髓抑制小鼠造血功能的影响

目的探讨补肾解毒活血法对骨髓抑制小鼠造血功能的影响。方法取昆明小鼠60只,随机分成空白对照组、模型组和中药治疗组,每组各20只,模型组和中药治疗组腹腔注射环磷酰胺100mg/(kg·d),连续3天;造模完成后次日起,中药治疗组给予补肾解毒活血中药浓煎液灌胃,0.36g/(kg·d),空白对照组与模型组灌服等量生理盐水,连续10天。各组随机抽取10只,于造模前1天及造模后第1、3、5、7、10、14天检测小鼠外周血象;其余10只于造模后第11天,颈椎脱臼处死,检测骨髓造血祖细胞集落形成和骨髓有核细胞(Bone Marrow Nucleated Cell,BMNC)的情况。结果外周血白细胞,模型组和中药治疗组均在造模后第1天降到最低点,与空白对照组相比差异均有显著性意义(P<0.01);模型组和中药治疗组均在第3天开始回升,中药治疗组在第5天恢复正常且保持稳定,而模型组在第7天出现异常性增高后又逐渐下降至正常。外周血血小板,模型组在模后第5天降到最低然后回升至第10天恢复正常,而中药治疗组自第3天即开始回升,第7天时即与空白对照组持平,其最低值明显高于模型组(P<0.01)。造模后第11天检测粒细胞-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)、定向体外红系集落形成单位(CFU-E)、红细胞爆裂型集落生成单位(BFU-E)和小鼠骨髓有核细胞数(BMNC),模型组和中药治疗组均低于空白对照组(P<0.05),而中药治疗组高于模型组(P<0.01)。结论补肾解毒活血法治疗骨髓抑制可通过增加骨髓造血祖细胞数量,从而促进环磷酰胺致骨髓抑制小鼠外周血白细胞、血小板的稳定恢复。     

益气补血方对环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠外周血象的影响

目的:观察益气补血方对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠外周血象的影响。方法:昆明种小鼠随机分为3组:正常对照组,模型组,益气补血组(17.47 g.kg-1.d-1),采用ip CTX 100 mg.kg-1.d-1,连续3 d,制成骨髓抑制小鼠模型。益气补血组在造模前提前给药7 d,直至实验结束。于造模后的0,1,3,5,7,10 d检测小鼠外周血白细胞、红细胞和血小板计数。结果:造模后模型组第1 d,3 d白细胞分别为(1.19±0.55),(3.17±1.20)109/L,而益气补血组为(2.05±1.13),(7.99±5.70)109/L(P<0.01)。造模后模型组第3 d,5 d血小板分别为(406.60±137.51),(290.10±104.58)109/L,而益气补血组为(644.20±159.75),(355.30±72.06)109/L(P<0.05或P<0.01)。红细胞未出现明显变化。结论:益气补血方可以减轻环磷酰胺所致的小鼠骨髓抑制,促进其外周血白细胞和血小板的恢复。     

补肾化痰活血法促进再生障碍性贫血小鼠骨髓基质细胞黏附分子表达的影响

目的:观察和比较补肾化痰活血中药对再生障碍性贫血小鼠骨髓基质细胞黏附分子VCAM-1(CD106)、HCAM(CD44)、PECAM-1(CD31)表达的影响.方法:建立再障小鼠模型,各组小鼠分别胃饲生理盐水、补肾化痰活血中药、康力龙和再障生血片,连续喂养14d后,采集骨髓进行骨髓基质细胞培养,应用流式细胞仪检测骨髓基质细胞黏附分子表达水平.结果:模型组小鼠骨髓基质细胞黏附分子CD106、CD44、CD31表达水平均低于正常对照组,治疗后各组小鼠骨髓基质细胞黏附分子CD106、CD44、CD31表达水平均明显提高,差异均有显著性,补肾化痰活血疗效最优.结论:补肾化痰活血中药可能通过提高再障小鼠骨髓基质细胞黏附分子CD106、CD31、CD44表达水平,从而增强造血细胞黏附定位于发育的骨髓微环境,改善骨髓造血功能.     

健脾补肾法与活血补肾法对环磷酰胺致小鼠精子活力下降的影响

目的:观察健脾补肾法与活血补肾法对环磷酰胺致小鼠精子活力下降的影响。方法:40只小鼠随机分成4组:正常对照组、模型组、健脾补肾组、活血补肾组,每组10只。除正常对照组外,其余各组以环磷酰胺腹腔注射造模,50mg/kg,1次/d,连续5d,造模结束后,将模型组脱颈处死,以了解造模质量。从第6d起,分别予以健脾补肾组、活血补肾组相应的中药水煎液,10ml/kg,1次/d,连续灌胃14d,各组均予以正常饮食。给药结束后,取附睾精液涂片,光镜下观察。结果:模型组小鼠精子的数量、活动度较正常对照组显著降低(P0.01)。与模型组相比,健脾补肾组和活血补肾组小鼠精子数量和活动度均显著升高(P0.01)。结论:健脾补肾法与活血补肾法对环磷酰胺致小鼠精子活力下降模型能显著提高其精子数量和活动度。     

补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附分子的影响

目的:观察补肾活血法对再障小鼠骨髓基质黏附能力及黏附分子CD106/CD49d的影响。方法:用免疫介导法复制小鼠再障模型,并给予补肾活血方药(参芪益肾饮),体外培养再障小鼠骨髓基质细胞,碘化丙啶染色检测其细胞周期,用流式细胞仪测定骨髓基质黏附分子表达水平。结果:再障小鼠骨髓基质细胞绝大部分处于G0/G1期,处于S期及G2+M期的细胞比例明显降低,中药组小鼠骨髓基质细胞处于S期及G2+M期的比例较模型组小鼠明显增加;模型组骨髓基质细胞黏附能力下降,中药组基质细胞黏附能力回升,与正常组无区别;模型组骨髓基质细胞CD106、CD49d表达均降低,中药组CD106、CD49d水平有所升高。结论:补肾活血法提高再障小鼠骨髓基质黏附分子表达水平,可能是其治疗再障的机制之一。     

补肾活血中药激活MMP-9信号通路动员大鼠骨髓EPCs的分子机制研究

目的探讨补肾活血中药对心肌梗死（myocardial infarction,MI）模型大鼠骨髓、外周血内皮祖细胞（endothelial progenitor cells,EPCs）数量及骨髓基质金属蛋白酶9（matrix metalloproteinase 9,MMP-9）信号通路的影响。方法结扎法建立大鼠MI模型,30只造模成功大鼠随机分为补肾活血中药高剂量组、补肾活血中药低剂量组和模型组,每组10只,另取10只正常大鼠为空白组。补肾活血中药高、低剂量组分别用补肾活血中药按3 g/kg、1.5 g/kg加生理盐水4 mL灌胃,每天1次。空白组及模型组每天单用生理盐水4 mL灌胃1次。4周后骨髓、外周血EPC培养,7天后收集贴壁细胞运用流式细胞仪鉴定CD34/CD133表型,Western blot法检测MMP-9和水溶性Kit配体（solouble Kit ligand,sKitL）,ELISA法检测血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和基质细胞衍生因子-1α（stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α）。结果补肾活血中药高、低剂量组骨髓和外周血表达CD34/CD133阳性率、EPC数量均高于模型组（P<0.05,P<0.01）;且两组骨髓和外周血VEGF、SDF-1α、MMP-9和sKitL表达均高于模型组（P<0.05,P<0.01）。结论补肾活血中药能够激活MMP-9信号通路,增加其上游和下游信号表达水平,动员骨髓EPC进入血液循环。     

喘平方及其拆方的平喘作用

目的 阐明喘平方组方的合理性,为临床使用该方提供实验依据。方法 采用乙酰胆碱-组胺喷雾致喘法,观察喘平方及其拆方对豚鼠哮喘潜伏期的影响;体外实验观察喘平方及其拆方对组胺致豚鼠离体气管平滑肌收缩松弛作用的影响。结果 喘平方及其拆方对组胺-乙酰胆碱诱发的喘息有保护作用,对组胺致豚鼠气管平滑肌痉挛有松弛作用。与方中各药材分别单提后再按处方配比混合组成的复方比较,喘平复方合煎组平喘作用无明显差别,但较方中各主药分别单提作用强;同时比相当于单个给药剂量喘平方提取液中所含已知主要活性成分麻黄碱、东莨菪碱的量的单体混合后给药平喘作用强。结论 喘平方有较强的平喘作用,其组方具有合理性与优越性;中药复方作用并非仅仅由方中几个已知主要活性成分提供。     

民间四神方治疗小儿厌食症

四神方是流传于闽南泉州地区的民间验方,由淮山药、茯苓、芡实、莲子肉等四味药物组成,用于治疗小儿厌食症.笔者近几年来应用本方与西药常规治疗小儿厌食症的方法进行对照研究,报告如下.     

滋阴毓宫方联合助阳暖宫方治疗早发性卵巢功能不全的临床研究

目的 研究滋阴毓宫方联合助阳暖宫方治疗早发性卵巢功能不全(POI)的临床疗效.方法 选择2018年12月至2020年12月就诊于陕西中医药大学附属医院妇科门诊符合标准的100例POI患者,随机分成实验组和对照组,每组各50例.实验组给予滋阴毓宫方联合助阳暖宫方治疗,对照组给予左、右归丸序贯治疗,三个疗程后观察两组患者的...     

调心方对β淀粉样蛋白所致原代培养海马神经元细胞毒模型的影响

目的建立β淀粉样蛋白(Aβ)所致的神经细胞毒模型,探讨调心方的药效及作用机理。方法原代培养大鼠海马神经元,用25μmol/L聚集状态的Aβ1-42建立神经细胞毒模型。采用乳酸脱氢酶(LDH)释放量来检测神经元存活率,通过透射电镜、流式细胞仪检测判断神经元凋亡,应用免疫细胞化学法研究凋亡相关基因的表达蛋白(Bcl-2、Bax、c-Jun)。结果神经元经Aβ1-42处理后,LDH释放增加;电镜显示细胞体积缩小、染色质固缩、或浓聚成块状位于核周边、滑面内质网扩张;流式细胞仪检测可见亚二倍体峰;Bcl-2减少,而Bax与c-Jun增加。调心方使LDH释放减少,电镜下具有凋亡形态特征的细胞减少,流式细胞仪检测显示凋亡率下降,Bcl-2增加,Bax减少,而c-Jun变化不明显。四氢氨基吖啶(THA)组神经元存活率增加,但其他指标的变化不明显。结论调心方对Aβ1-42神经细胞毒有保护作用,可提高细胞存活率,抑制凋亡,其抑制凋亡作用的机制可能是通过提高bcl-2、降低bax基因的蛋白表达而实现。THA对神经元存活率有提高作用,但抑制神经元凋亡的作用似不明显。调心方对抑制Aβ所致神经元凋亡明显优于THA。     

苗医便方歌谣选(妇孺门)(三)

一、阴道炎方………………………………………1(一)乌柏枝叶饮……………………………1(二)仙鹤草汤………………………………1(三)九灵光汤………………………………1(四)三百根汤………………………………1二、阳门疮方………………………………………1(一)硫黄烟…………………………………1(二)大蒜小蓟汤……………………………2(三)扛板归汤………………………………2(四)明矾黄连汤……………………………2     

乳泉颗粒处方考证及研究进展

产后缺乳是产后常见的一种病证,从中医辨证施治的角度具体可分为虚、实两种。乳泉颗粒主治产后肝郁气滞型缺乳症,隶属于中成药类妇科用药。通过对乳泉颗粒处方解析,考证了乳泉颗粒的处方来源;从质量控制、药理药效作用及临床应用等方面探究乳泉颗粒的研究进展,为乳泉颗粒的应用研究提供参考。     

调脾护心方的化学信息学研究

目的 运用计算机虚拟筛选对调脾护心方所含化学成分的数据库进行了化学信息学分析,为调脾护心方的进一步研究提供导向。方法 对调脾护心方所含化学成分分子特征描述符的分布进行了描述,采用主成分分析方法将多维化学空间映射到二维空间以得到更直观的图像,同时运用分子对接方法研究调脾护心方所含化学成分与心血管系统重要靶酶之间的相互作用。结果 调脾护心方所含化学成分有良好的多样性,具有类药性质。采用Ligandfit作为采样工具,筛选出调脾护心方中的与心血管系统重要靶酶相互作用强的配体,对进一步的研究工作有重要意义。结论 计算机虚拟筛选是中医药研究的一个有力工具。     

补肾方对β淀粉样蛋白所致大鼠海马神经元细胞毒作用的影响

目的:建市Aβ所致的神经细胞毒模型,探讨补肾方的药效及作用机理。方法:原代培养大鼠海马神经元,用25μmol/L聚集状态的Aβ1-42建立神经细胞毒模型。采用LDH释放量来检测神经元存活率,通过透射电镜、流式细胞计判断神经元凋亡,应用免疫细胞化学法研究凋亡相关基因(Bcl-2、Bax、c-Jun)的蛋白表达。结果:神经元经Aβ1-42处理后,LDH释放增加;电镜显示细胞体积缩小、染色质固缩、或浓聚成块状位于核周边、滑面内质网扩张;流式细胞计可见亚二倍体峰;Bcl-2的蛋白表达减少,而Bax与C-Jun表达增加。补肾方使LDH释放减少,电镜下具有凋亡形态特征的细胞减少,流式细胞计显示凋亡率下降,Bcl-2蛋白表达增加,c-Jun表达减少,而Bax表达变化不明显。Tacrine组神经元存活率增加,但其它指标的变化不明显。结论:①补肾方对Aβ1-42神经细胞毒有保护作用,可提高细胞存活率,抑制凋亡。②其作用机制可能是通过提高bcl-2、降低c-Jun基因的蛋白表达而实现。③Tacrine对神经元存活率有提高作用,但抑制神经元凋亡的作用似不明显。补肾方对抑制Aβ所致神经元凋亡明显优于Tacrine。     

产科验方三则

笔者近几年来应用验方治疗产科疾病,疗效较好,现介绍如下. 　　固肾安胎汤治疗习惯性流产……     

补肾与健脾复方调节皮质酮鼠T细胞凋亡的对比研究

目的：补肾复方与健脾复方调节皮质酮鼠T细胞凋亡的对比研究。方法：采用透射电镜、TUNEL标记的流式细胞仪分析技术对激活诱导的T淋巴细胞凋亡进行定性及定量分析。结果：模型组T细胞凋亡（％）为45．87±7．22，正常对照组34．25±6．47，两组比较差异有显著性（P＜0．01）；右归饮组T细胞凋亡（％）为35．90±7．39，与模型组比较，差异有显著性（P＜0．01），补肾益寿胶囊组为36．20±9．14，与模型组比较差异有显著性（P＜0．05）；四君子汤组T细胞凋亡（％）为36．92±11．82，与皮质酮模型组比较差异无显著性（P＞0．05）。结论：皮质酮鼠激活诱导的T细胞凋亡敏感性显著增高，两个补肾复方均可显著降低皮质酮鼠激活诱导的T细胞凋亡，而四君子汤对皮质酮鼠激活诱导的T细胞凋亡无显著的下凋作用，提示下凋激活诱导的T细胞凋亡可能是补肾法改善皮质酮鼠T淋巴细胞功能的重要机制之一。