2009-2011年上海市手足口病病原学检测及其临床特点分析

目的 了解上海市手足口病不同病原体的感染现状以及所致的手足口病的临床特点之间的差异,为制定观察、治疗方案,做好手足口病防控工作提供参考.方法 采集2009年3月至2011年12月在本院传染科门诊诊断为手足口病的357例病例的咽拭子、疱疹液、粪便共551份标本进行病原学检测.用RT-PCR法对肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)、肠道病毒通用型(PE)进行鉴别.结果 357例手足口病患儿共采集到551份标本,检测病毒总阳性率为79.7％,2009年手足口病以CoxA16流行为主,2011年以EV71流行为主,三年病毒流行株差异有统计学意义(P =0.005);疱疹液病毒检出率最高;EV71、CoxA16、PE病毒感染的手足口病患儿在发热、易惊的发生比例比较差异有统计学意义(P＜0.05);EV71感染的患儿外周血白细胞计数和中性粒细胞比例要高于CoxA16和PE感染的患儿,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 上海市手足口病在不同时期病原体呈现交替流行;对不同病原体临床特征的分析比较有助于EV71感染的防控、早期治疗、重症病例的筛查.     

2008-2009年肠道病毒71型贵州省分离株的基因特征分析

肠道病毒71型(EV71)感染主要引起手足口病,近年来,EV71病毒的流行在亚太地区呈上升趋势,其中最令人关注的就是EV71的流行引起患儿的神经症状甚至死亡.贵州省自该病纳入法定传染病管理以来发现2009年感染EV71的患儿及重症病例比2008年多,同时在2009年初实验室诊断因EV71感染引起了患儿死亡,疫情也比2008年开始的早,我们对2008-2009年的手足口病临床标本进行了实验室诊断,并进行了基因测序及特征分析,以期发现是否发生了抗原漂移,分析引起重症的EV71毒株是否与核苷酸序列有相关性,现将结果报告如下.     

河北省手足口病病例的病原构成及EV71病毒基因特征分析

目的了解河北省不同地区、不同严重程度手足口病病例的病原构成情况及EV71病毒的基因特征。方法采集河北省不同地区的HFMD患者粪便、疱疹液、咽拭子标本进行核酸检测和病毒分离,同时结合所收集的HFMD患病例的居住地、疾病严重程度信息加以分析。选取18株EV71阳性分离株进行VP1编码区基因扩增和核苷酸序列测定和分析,与其它38株各基因型和基因亚型的EV71代表株构建系统发生树。结果2009年河北省HFMD临床诊断病例的EV阳性率为65．13％,其中以EV71为主,占阳性病例的58．0％（752／1296）。秦皇岛、邯郸、保定、邢台地区手足口病例以EV71感染为主,而衡水、沧州等地区则以CA16为主。轻型病例中EV71阳性率为37．74％,重症病例中EV71阳性率为80．64％,死亡病例检测13例,均为EV71阳性。18株EV71分离株的VP114核苷酸同源性为94．9％～99．8％,与C4亚型代表株的VP1区核苷酸同源性最高,为91．9％～99．6％。进化树结果显示,河北省EV71分离株与c4亚型代表株处于同一分支,并在C4a进化分支的不同簇中。结论2009年引起河北省手足口病流行的病原体主要为EV71和CA16。秦皇岛、邯郸、保定、邢台地区手足口病例以EV7I感染为主,而衡水、廊坊、沧州等地区则以CA16为主。EV71是重症病例的主要致病病原体。河北省EV71分离株为c4亚型C4a进化分支。     

东莞市一起CoxA16病毒引起的幼儿园手足口病爆发疫情调查

目的分析一起由CoxA16病毒引起的幼儿园手足口病爆发疫情的流行病学调查与处理结果,为有效预防控制幼儿园手足口病提供科学依据。方法对幼儿园发病儿童进行流行病学和临床特征的调查;并采集住院病例咽拭子、粪便标本。进行肠道病毒核酸RT-PCR检测。结果本次疫情发病8例,涉及3个班,罹患率为1．49％。所有患儿均小于5岁。与首发病例同楼层班级和其它楼层班级之间学童罹患率的差别有统计学意义（P〈0．05）。患儿主要的临床症状是口腔、手、足部的疱疹,其中2名患儿有发热。检测了3例住院患儿的粪便、咽拭子标本,COXA16核酸均为阳性,EV71核酸均为阴性。通过采取隔离传染源、切断传播途径和保护易感人群的控制措施21d后,确认疫情终止。结论CoxA16肠道病毒是导致本次幼儿园手足口病爆发的病原。年龄小于5岁、在同教室内与患儿密切接触可能是本次手足口病发病的危险因素。提高对手足口病的认识,严格执行晨午检筛查制度、消毒隔离制度及疫情报告制度可有效预防幼儿园手足口病。     

EV71病毒感染者的排毒研究

目的 阐明EV71感染者病毒的排泄特点.方法 采集重症手足口患者、轻症手足口患者及其密切接触者(简称密接)的咽拭子和粪便标本,利用荧光定量PCR检测EV71核酸.将研究对象分为重症组、轻症组及密接组,Kruskal-Wallis检验分析三组的排毒差异有无统计学意义.结果 本研究从27位儿童和3位成人共采集136份咽拭子和粪便标本,其中包括7例密接、9例轻症患者和14例重症患者.研究结果显示:密接、轻症病例及重症病例的排毒差异有统计学意义(P＜0.01).EV71感染者咽拭子最长排毒时间为30天,粪便标本最长排毒时间为54天.结论 排毒时间较长是EV71感染者的典型特征.EV71感染者排毒时间与疾病严重程度相关.持续排毒是手足口病流行的一个潜在危险因素.     

2009年徐州地区疑似肠道病毒感染病例病原学研究

目的了解2009年徐州地区肠道病毒感染引起手足口病情况,为手足口病防控工作提供科学依据。方法采用荧光RT-PCR方法对240例临床诊断为肠道病毒感染的手足口病例中的222例肛拭子和咽拭子标本同时进行EV和EV71、CAl6特异性RNA检测,用ELA方法对其中的114例急性期血清标本进行EV71．IgM抗体检测。同时检测健康儿童254份咽拭子和258份血清标本以及密切接触者咽拭子54份标本。结果240例疑似肠道病毒感染者,总EV感染率为72．50％（174／240）,其中EV71感染率为57．92％（139／240）,CoxAl6感染率为9．17％（22／240）,其他EV感染率为5．42％（13／240）。240例疑似肠道病毒感染者中的222份肛拭子标本EV7l-RNA阳性率为45．94％（102／222）、咽拭子EV71-RNA阳性率为25．68％（57／222）,114份急性期血清中EV71．IgM抗体阳性率为86．84％（99／114）。254份健康儿童咽拭子EV7l-RNA阳性率为1．57％（4／254）,未检出CoxAl6-RNA;258份健康儿童血清标本EV71-IgM抗体阳性率是2．71％（7／258）。密接（医护人员）咽拭子54份,EV-RNA检测均为阴性。结论徐州地区手足口病流行主要由EV71型引起。3岁以下儿童流行期间存在被EV71型隐性感染,并产生IgM抗体。成人即使密切接触传染源也不易被感染EV71。疑似病例急性期血清中EV71-IgM抗体检测阳性率最高（86．84％）,其次为肛拭子EV71（45．94％）和咽拭子EV71（25．68％）的RNA检测阳性率。ELA试剂盒用于EV71型感染的早期诊断,具有操作简单快速经济,值得在基层推广。     

2009年徐州地区疑似肠道病毒感染病例病原学研究

目的 了解2009年徐州地区肠道病毒感染引起手足口病情况,为手足口病防控工作提供科学依据.方法 采用荧光RT-PCR方法对240例临床诊断为肠道病毒感染的手足口病例中的222例肛拭子和咽拭子标本同时进行EV和EV71、CA16特异性RNA检测,用ELA方法对其中的114例急性期血清标本进行EV71-IgM抗体检测.同时检测健康儿童254份咽拭子和258份血清标本以及密切接触者咽拭子54份标本.结果 240例疑似肠道病毒感染者,总EV感染率为72.50%(174/240),其中EV71感染率为57.92%(139/240),CoxA16感染率为9.17%(22/240),其他EV感染率为5.42%(13/240).240例疑似肠道病毒感染者中的222份肛拭子标本EV71-RNA阳性率为45.94%(102/222)、咽拭子EV71-RNA阳性率为25.68%(57/222),114份急性期血清中EV71-IgM抗体阳性率为86.84%(99/114).254份健康儿童咽拭子EV71-RNA阳性率为1.57%(4/254),未检出CoxA16-RNA;258份健康儿童血清标本EV71-IgM抗体阳性率是2.71%(7/258).密接(医护人员)咽拭子54份,EV-RNA检测均为阴性.结论 徐州地区手足口病流行主要由EV71型引起.3岁以下儿童流行期间存在被EV71型隐性感染,并产生IgM抗体.成人即使密切接触传染源也不易被感染EV71.疑似病例急性期血清中EV71-IgM抗体检测阳性率最高(86.84%),其次为肛拭子EV71(45.94%)和咽拭子EV71(25.68%)的RNA检测阳性率.ELA试剂盒用于EV71型感染的早期诊断,具有操作简单快速经济,值得在基层推广.     

2009年徐州地区疑似肠道病毒感染病例病原学研究

目的 了解2009年徐州地区肠道病毒感染引起手足口病情况,为手足口病防控工作提供科学依据.方法 采用荧光RT-PCR方法对240例临床诊断为肠道病毒感染的手足口病例中的222例肛拭子和咽拭子标本同时进行EV和EV71、CA16特异性RNA检测,用ELA方法对其中的114例急性期血清标本进行EV71-IgM抗体检测.同时检测健康儿童254份咽拭子和258份血清标本以及密切接触者咽拭子54份标本.结果 240例疑似肠道病毒感染者,总EV感染率为72.50%(174/240),其中EV71感染率为57.92%(139/240),CoxA16感染率为9.17%(22/240),其他EV感染率为5.42%(13/240).240例疑似肠道病毒感染者中的222份肛拭子标本EV71-RNA阳性率为45.94%(102/222)、咽拭子EV71-RNA阳性率为25.68%(57/222),114份急性期血清中EV71-IgM抗体阳性率为86.84%(99/114).254份健康儿童咽拭子EV71-RNA阳性率为1.57%(4/254),未检出CoxA16-RNA;258份健康儿童血清标本EV71-IgM抗体阳性率是2.71%(7/258).密接(医护人员)咽拭子54份,EV-RNA检测均为阴性.结论 徐州地区手足口病流行主要由EV71型引起.3岁以下儿童流行期间存在被EV71型隐性感染,并产生IgM抗体.成人即使密切接触传染源也不易被感染EV71.疑似病例急性期血清中EV71-IgM抗体检测阳性率最高(86.84%),其次为肛拭子EV71(45.94%)和咽拭子EV71(25.68%)的RNA检测阳性率.ELA试剂盒用于EV71型感染的早期诊断,具有操作简单快速经济,值得在基层推广.     

东莞市2009-2010年手足口病疫情分析及防治对策探讨

目的了解东莞市2009-2010年手足口病疫情的流行病学特点,为今后的防控工作提出对策。方法对东莞市2009-2010年手足口病疫情资料采用描述流行病学方法进行分析,对患者的咽拭子或粪便标本采用RT-PCR法进行肠道病毒核酸检测和病毒分型。结果东莞市2009年和2010年分别报告手足口病9263例和22721例,发病率分别为127.34/10万和373.28/10万。5岁以下婴幼儿分别占当年报告病例的91.68%和92.15%;散居儿童分别占当年报告病例的78.26%和73.58%;男性分别占当年报告病例的65.29%和65.27%;每年的4月份和10月份有2个发病高峰,前者为全年的发病高峰;暴发疫情均发生在托幼机构;分别有49.30%和53.65%的病例由EV71引起,所有死亡病例均由EV71引起。健康人群肠道病毒隐性感染率为11.67%,感染的主要病原体为其他肠道病毒（95.24%）。结论东莞市2010年手足口病流行强度大于2009年;应重点做好手足口病的病原学监测及5岁以下散居儿童和托幼机构的手足口病防治工作。     

手足口病病原体实时荧光RT-PCR反应体系的建立与临床应用

目的 建立一种快速、准确、特异件高的方法 检测手足口病病原体.方法 根据引起手足口病常见致病原肠道病毒71(EV71)、柯萨奇病毒A16(CA16)及肠道病毒(EV),设计相应的引物、探针对35例临床诊断的手足口病患儿及20例正常健康婴儿的粪便进行EV、EV71、CA16三种病原体实时荧光RT-PCR检测,同时对55分标本进行EV71病毒培养分离.结果 35例临床诊断手足口病患儿粪便中EV全部阳性,EV71阳性25例,CA16阳性8例,其中3例为EV71、CA16同时阳性,与临床诊断符合率为85.71%,20例健康体检婴儿粪便中EV病毒5例阳性,EV71、CA16均阴性.结论 荧光RT-PCR对手足口病病原体检测准确性高、特异性强,具有快速、廉价等特点,适合于手足口病的早期诊断.     

实时RT-PCR检测159例手足口病患儿样本中肠道病毒的结果分析

目的 了解2009年4-8月首都儿科研究所附属儿童医院手足口病患儿肠道病毒的感染状况,为临床诊治提供参考.方法 采集首诊手足口病159例患儿的咽拭子和疱疹液标本,以肠道病毒(EV)通用型、柯萨奇病毒A16(CA16)型、肠道病毒71(EV71)型核酸检测试剂盒,应用实时RT-PCR法检测标本中的肠道病毒.选取阳性标本扩增VP1区,产物进行序列测定和分析.结果 (1)EV、CA16、EV71的阳性病例数分别为152、102、43;阳性率为95.6%、64.2%、27.0%.(2)CA16占EV阳性的67.3%,EV71占EV阳性的28.3%,非CA16和EV71的EV病例7例,占EV阳性的4.6%.CA16:EV71为2.37:1.(3)部分阳性标本经测序验证与此法结果一致.结论 2009年我院手足口病患儿以EV71和CA16感染为主,EV71感染的手足口病比例较2007年出现明显上升.     

Relationship between serologic response and clinical symptoms in children with enterovirus 71-infected hand-foot-mouth disease

This study aimed to explore the correlation between clinical symptoms, including rash and fever, and serum antibody reaction to enterovirus 71 (EV71) infection in children hospitalized due to hand-foot-mouth disease (HFMD). From May 2014 to July 2014, a total of 547 children hospitalized due to HFMD in Children’s Hospital of Fudan University were enrolled retrospectively. RNA levels of EV71 and CA16 in fecal, serum, and cerebrospinal fluid specimens were measured using quantitative real-time RT-PCR, and EV71-IgM antibody in the serum was detected using immune colloidal gold assays. Of the 547 fecal specimens, 296 were EV71 RNA positive, 109 were CA16 RNA positive, and 8 were positive for both EV71 RNA and CA16 RNA. The total positive rate for either EV71 or CA16 in feces was 72.58% (397/547). Additionally, 544 serum specimens were collected, and 409 were EV71-IgM positive (75.18%). The duration of rash and fever was found to be correlated to the positive rate of serum EV71-IgM, and the positive rate of serum EV71-IgM plus EV71 RNA in feces. The positive rates of serum EV71-IgM and serum EV71-IgM plus EV71 RNA in fecal collected at day 3 of fever were 79.7% and 52.8%, respectively. In conclusion, EV71 and CA16 were found to be the major pathogens responsible for the epidemics of HFMD in children during May to July 2014 in Shanghai, China. There is a close relationship between the positive rate of serum EV71-IgM and the duration of fever and rash.     

157例手足口病病例密切接触者病原学监测结果分析

目的 分析2010年北京市西城区手足口病密切接触者病原学监测结果.方法 收集2010年北京市西城区手足口病暴发、聚集性疫情相关手足口病例密切接触者流行病学信息及病原学检测结果,采用Epi Info3.5.1进行统计分析.结果 157例密切接触者便标本、咽拭子标本手足口病毒核酸检测总阳性率21.0％,其中以7月份最高(...     

An outbreak of enterovirus 71 infection in Taiwan, 1998. II. Laboratory diagnosis and genetic analysis.

BACKGROUND: An epidemic of enterovirus 71 (EV71) occurred in Taiwan from April to December of 1998, with two peaks, one in June and the other in October. Many enteroviruses were isolated in our laboratory from 258 cases during this outbreak. Approximately half of the enteroviruses isolated were EV71 and one fifth were coxsackievirus A16. OBJECTIVES: To analyze laboratory findings in the EV71 epidemic of 1998 in Taiwan, various EV71 specimens in different cell lines were examined. In addition, genetic analysis of 5' non-coding region (NCR) was performed to analyze the strain variation in this outbreak. RESULTS: The cytopathic effect induced by EV71 was observed 2-13 (mean of 4.5) days post-inoculation in Vero cells and 4-15 (mean of 6.6) days in green monkey kidney (GMK) cells inoculated with throat swabs. Of the total positive EV71 cases, virus was most frequently obtained from throat swabs (91.7%), less from stools (64.8%), and none from cerebral spinal fluid (CSF). Molecular analyses of EV71 by sequencing the 5' NCR of 34 strains obtained from different clinical categories and various geographic areas showed that their sequences differed (0-13 bp in 681 bp sequenced) by approximately 0-2%. The sequences of these isolates differed from EV71 prototype BrCr or MS strain by 17.5-19%, with the exception of two samples which exhibited nucleotide variation by only 8.9 and 8.2%, when compared to the MS strain. CONCLUSION: EV71 was most frequently isolated from throat swab specimens in Vero cells. The molecular analyses of the 5' NCR of EV71 revealed that most isolates from this epidemic belonged to a group of closely related clones and only two were in a different group which was clustered with the EV71 MS strain.     

肠道病毒71型IgM抗体检测在手足口病早期诊断中的价值

目的评估人肠道病毒7l型（EV71）IgM抗体在手足口病早期诊断中的价值。方法自发病后连续每日采集2010年我院收治的38例手足口病患儿血清及咽拭子标本,分别检测EV 71 IgM抗体、肠道病毒核酸、EV71特异核酸。结果38例手足口病患儿IgM抗体,按发病天数累加阳性率分别为：第1天60．5％、第2天71．1％、第3～4天81．5％、第5天92．1％、第6天92．1％;肠道病毒核酸阳性率为73．6％;EV71特异核酸阳性率为60．5％。结论EV 7l IgM抗体在手足口病发病的第1天即可出现,至第5天阳性率达到峰值,可作为手足口病早期诊断指标之一。     

肠道病毒71型IgM抗体检测在手足口病早期诊断中的价值

目的 评估人肠道病毒71型(EV 71)IgM抗体在手足口病早期诊断中的价值.方法 自发病后连续每日采集2010年我院收治的38例手足口病患儿血清及咽拭子标本,分别检测EV 71IgM抗体、肠道病毒核酸、EV 71特异核酸.结果 38例手足口病患儿IgM抗体,按发病天数累加阳性率分别为:第1天60.5%、第2天71.1%、第3～4天81.5%、第5天92.1%、第6天92.1%;肠道病毒核酸阳性率为73.6%;EV 71特异核酸阳性率为60.5%.结论 EV 71 IgM抗体在手足口病发病的第1天即可出现,至第5天阳性率达到峰值,可作为手足口病早期诊断指标之一.