miR409-3-p通过靶向CACNB2调控糖尿病视网膜病变作用机制研究

目的 探讨微小RNA-409-3p(miR-409-3p)对人视网膜血管内皮细胞(HRCEC)氧化应激、凋亡、炎症的影响及作用机制。方法 将对数期的HRCEC细胞分为对照组、高渗葡萄糖(HG)组、HG+miR-con组、HG+miR-409-3p组、HG+si-con组、HG+si-CACNB2组、HG+miR-409-3p+pcDNA和HG+miR-409-3p+pcDNA-CACNB2组。采用荧光定量PCR(qPCR)法检测miR-409-3p的相对表达量,Western blotting(WB)法检测L-型电压依赖型钙通道β(CACNB2)、裂解的半胱天冬酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达量,流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子水平,酶标仪及试剂盒检测氧化应激相关指标,双荧光素酶检测(LRA)验证miR-409-3p与CACNB2调控关系。结果 HG组miR-409-3p相对表达量低于对照组,CACNB2 mRNA和蛋白表达量高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-409-3p可靶向结合CACNB2,...     

硫氧还蛋白还原酶与循环系统疾病

硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase,TrxR)是一种包含黄素腺嘌呤二核苷酸(flavin adeninedinucleotide,FAD)结构域的二聚体硒蛋白,是唯一能够催化形成还原型硫氧还蛋白的硒酶。由于其广泛的底物特异性,能参与到各种氧化还原、炎症、细胞凋亡等生理过程中。由TrxR、硫氧还蛋白(Trx)和还原型辅酶(nicotinamide adenine dinucleotidephosphate,NADPH)组成了硫氧还蛋白系统。硫氧还蛋白系统是细胞内最重要的抗氧化系统之一,同     

老年期痴呆患者脑脊液tau蛋白与各临床指标的相关性研究

目的探讨老年期痴呆患者脑脊液中微管相关蛋白tau(以下简称tau蛋白)与临床各项指标之间的相关性。方法采用双抗体夹心ELISA法检测老年性痴呆患者(AD)38例、血管性痴呆患者(VD)31例和对照组(NC)31例的tau蛋白浓度,分析各组间tau蛋白浓度与各临床指标年龄、病程、文化程度、简易智能量表(MMSE)、日常生活活动能力(ADL)等的相关性。结果3组tau蛋白浓度分别为(304.59±166.82),(194.69±56.11),(148.26±39.83)ng/L,组间F=18.665,P<0.001;tau蛋白浓度与病程呈正相关、与MMSE呈负相关。结论(1)AD、VD及NC3组间tau蛋白浓度存在显著差异;(2)老年期痴呆患者tau蛋白浓度受病程影响,并与智能损害相平行;(3)tau蛋白浓度与性别、年龄、文化程度、ADL均无关。     

MiR-199a对缺氧/复氧诱导的大鼠脑皮层神经元细胞活力及凋亡的影响

目的:探讨miR-199a对缺氧/复氧诱导的大鼠脑皮层神经元细胞活力及凋亡的影响。方法:在体外培养大鼠脑皮层神经元细胞,采用缺氧/复氧的方式处理细胞建立细胞损伤模型并记作Model组;将正常培养的细胞作为对照(Con)组。分别将空载体、miR-199a mimic转染至大鼠脑皮层神经元细胞,建立缺氧/复氧细胞损伤模型,分别记作Model+NC组或Model+miR-199a mimic组。将miR199a mimic转染至大鼠脑皮层神经元细胞后加入PI3K-AKT信号通路抑制剂LY294002处理,随后建立缺氧/复氧细胞损伤模型,记作Model+miR-199a mimic+LY294002组。采用反转录PCR法检测miR-199a的表达量,应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率,采用MTT法检测细胞活力,采用蛋白质印迹法检测cleaved-caspase3、pro-caspase3、p-PI3K、p-AKT蛋白表达量。结果:与Con组比较,Model组miR-199a的表达水平、细胞活力、S期细胞比例及pro-caspase3、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平均显著降低,G_(0)~G_(1)期细胞比例、细胞凋亡率及cleaved-caspase3蛋白表达水平均显著提高,差异均有统计学意义(均P<0.001)。与Model+NC组比较,Model+miR-199a mimic组细胞活力、S期细胞比例及pro-caspase3、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平均显著提高,G_(0)~G_(1)期细胞比例、细胞凋亡率及cleaved-caspase3蛋白表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.001)。与Model+miR-199a mimic组比较,Model+miR-199a mimic+LY294002组细胞活力、S期细胞比例及procaspase3蛋白表达水平均显著降低,G_(0)~G_(1)期细胞比例、细胞凋亡率及cleaved-caspase3蛋白表达水平均显著提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:MiR-199a过表达可改善缺氧/复氧诱导的大鼠脑皮层神经元细胞活力并抑制细胞凋亡,从而减轻细胞损伤;这些生物学效应可能是通过激活PI3K-AKT信号通路产生的。     

雷公藤多甙片对AA大鼠调节T细胞及Foxp3表达的影响

目的:观察雷公藤多甙片(TPT)对佐剂性关节炎(AA)大鼠的调节T细胞及Foxp3的影响。方法:将48只大鼠随机分为正常对照组(NC)、模型对照组(MC)、甲氨喋呤组(MTX)、雷公藤多苷片组(TPT),每组12只,分别向(NC除外)各组大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(FCA)造模,造模后第19天给药,NC及MC给予生理盐水,其余2组分别给予MTX、TPT。观察各组大鼠体质量、足跖肿胀度、关节炎指数(AI)、调节T细胞(Treg)、Foxp3表达的变化。结果:1.与NC组相比,MC组大鼠的体质量明显减轻(P<0.05),足跖肿胀度、AI明显升高(P<0.01);与MC组相比,各治疗组体质量明显升高(P<0.05),足跖肿胀度、AI明显降低(P<0.01);与MTX组比较,TPT组大鼠体质量增加更为明显(P<0.05),足跖肿胀度减低更为明显(P<0.05)。2.与NC组比较,MC组CD4+ CD25+ Treg显著降低(P<0.01);与MC组比较,各治疗组CD4+ CD25+ Treg均升高(P<0.05或P<0.01);与MTX组比较,TPT组CD4+ CD25+ Treg升高(P<0.05)。3.与NC组相比,MC组Foxp3蛋白染色指数、蛋白积分光密度值、Foxp3 mRNA的表达水平均明显下调(P<0.01);与MC组比较,MTX组、TPT组Foxp3蛋白染色指数、蛋白积分光密度值、Foxp3 mRNA的表达水平均明显升高(P<0.01或P<0.05);与MTX组比较,TPT组Foxp3蛋白染色指数、蛋白积分光密度值明显升高(P<0.05)。结论:TPT能改善AA大鼠体质量、足跖肿胀度、AI同时能够调节调节T细胞、Foxp3的表达。     

下调miR-25对高糖诱导视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞Smad7和VEGF表达的影响

目的研究miR-25在高糖条件下人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19细胞中表达情况,及下调miR-25对ARPE-19细胞中Smad7和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法体外培养ARPE-19细胞,采用葡萄糖(30 mmol/L)处理细胞模拟高糖状态,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-25表达水平;采用Lipofectamine TM3000试剂盒进行转染,将ARPE-19细胞分为miR-25低表达(antagomir)组、阴性对照(NC)组、高糖(HG)组及正常葡萄糖(NG)组。转染后48 h,光学显微镜观察细胞形态,CKK-8法检测细胞增殖情况,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ARPE-19细胞E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)mRNA表达;蛋白免疫印记(WB)检测E-cad、α-SMA、COL-Ⅰ、VEGF、Smad7蛋白表达情况。结果与NG组比较,HG组ARPE-1细胞miR-25表达显著升高,差异有统计学意义(P0.05);转染miR-25 antagomir后,与HG组和NC组比较,ARPE-19细胞miR-25表达显著下调(P0.05)。与NG组比较,HG组、NC组ARPE-19细胞变长呈纺锤形细胞,细胞中α-SMA、COL-Ⅰ、VEGF表达上调(P0.05),E-cad、Smad7表达下调(P0.05);与HG组、NC组比较,antagomir组纺锤形ARPE-19细胞数量减少,细胞中α-SMA、COL-Ⅰ、VEGF表达下调(P0.05),E-cad、Smad7表达上调(P0.05)。结论高糖条件下,下调miR-25可抑制VEGF表达,促进Smad7表达,抑制人视网膜色素上皮细胞纤维化。     

辛伐他汀对高糖培养肾小管上皮细胞RANTES和TGF-β1表达的影响

目的:探讨高糖环境中人近端肾小管上皮细胞(HK-2)RANTES(regulated upon activation normal T cell expressed and secreted)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达变化及辛伐他汀(Sim)的干预作用.方法:原代培养HK-2分为正常糖对照组(NG)、甘露醇组(MG)、高糖组(HG)、HG+ Sim 2 μmol/L干预组(HG+Sim2)、HG+Sim 4μmol/L干预组(HG+Sim4),RT-PCR法测定细胞RANTES和TGF-β1 mRNA表达,ELISA法检测细胞上清液中RANTES、TGF-β1蛋白含量.结果:RANTES、TGF-β1的mRNA和蛋白在NG及MG仅有少量表达,而在HG则明显升高(P＜0.05);加入Sim后,上述表达均较前下降(P＜0.05),具有浓度依赖性.各组HK-2表达的RANTES和TGF-β1无论是mRNA还是蛋白之间均存在显著正相关(P＜0.01).结论:高糖促进HK-2 RANTES、TGF-β1的表达,而Sim明显抑制高糖环境中上述因子的过度表达,发挥肾脏保护作用.     

Glut-1 shRNA及诱导自噬对HEp-2细胞的增殖、凋亡和迁移的影响

目的 葡萄糖转运蛋白-1(Glut-1)短发夹RNA(shRNA)及诱导自噬是否可以影响喉癌HEp-2细胞生长、迁移.方法 构建Glut-1 shRNA稳转株(HEp-2细胞),分为Control组、阴性对照(NC)组、Glut-1 shRNA组、NC+雷帕霉素(RAP)组、Glut-1 shRNA+RAP组、NC+过...     

依达拉奉对血管性痴呆大鼠海马突触可塑性的影响

目的:探讨依达拉奉(edaravone,Eda)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马CA1区神经元突触可塑性的调节作用及分子机制。方法:成年雄性SD大鼠30只,随机分成3组:假手术组、VD组、VD+Eda组,每组10只。应用Morris水迷宫(Morris water maze,M W M)测试各组大鼠的空间认知功能。MWM后,分别记录每只大鼠海马CA1区神经元长时程增强(long-term potentiation,LTP)并进行分析比较;电生理记录后,大鼠断头取脑,制备脑冰冻切片,免疫组织化学测定海马CA1区神经生长相关蛋白-43(G AP-43)的表达情况。结果:VD组大鼠有明显的空间认知障碍;Eda治疗后,VD+Eda组大鼠的空间认知障碍得到显著改善。VD+Eda组兴奋性突触后电位(excitatory postsynaptic potential,EPSP)斜率增加百分比显著高于VD组(P0.05)。VD组GAP-43的表达量显著低于假手术组(P0.01),VD+Eda组GAP-43的表达量显著高于VD组(P0.05)。结论:依达拉奉可通过提高VD大鼠海马CA1区的突触可塑性改善空间认知障碍,其机制与依达拉奉上调VD大鼠海马CA1区GAP-43的表达有关。     

SIRT1通过调节FoxO3a/BIM通路减轻心肌细胞高糖缺氧复氧损伤

目的探讨SIRT1通过调节FoxO3a/BIM通路在心肌细胞高糖缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤中的作用。方法正常培养的对数期H9C2心肌细胞,随机分为高糖常氧组(high glucose,HG组)、高糖H/R组和高糖H/R+Srt1720组(H/R+Srt组)。3组H9C2细胞均经高糖培养基(葡萄糖浓度为33mmol/L)培养24h建立高糖模型,高糖H/R组置于37℃、缺氧培养箱(体积分数95%N2+体积分数5%CO2)培养4h,37℃、复氧(体积分数90%O2+体积分数10%CO2)2h建立心肌细胞高糖H/R损伤模型,高糖H/R+Srt组于H/R前24h给予SIRT1激动剂Srt1720(20μmol/L)。高糖H/R结束后,采用ELISA法检测培养液上清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率,JC-1染色法检测线粒体膜电位(JC-1单/多聚体比值),Western blot法检测心肌细胞SIRT1、细胞质磷酸化FoxO3a(phosphor-FoxO3a,P-FoxO3a)、细胞核FoxO3a及BIM蛋白表达。结果高糖H/R组、高糖H/R+Srt组细胞凋亡率[(42±7)%、(27±5)%]、JC-1单/多聚体比值(5.2±0.9、3.3±0.6)、培养液上清LDH水平[(485±62)、(394±52)u/L]均高于HG组[(19±4)%、1.7±0.4、(264±42)u/L](P0.05),且高糖H/R组高于高糖H/R+Srt组(P0.05);高糖H/R组H9C2细胞SIRT1(0.41±0.07)、细胞质P-FoxO3a(0.34±0.05)表达低于高糖HG组(0.62±0.10、0.51±0.07)(P0.05),细胞核BIM(0.83±0.13)和FoxO3a(0.57±0.06)表达高于高糖HG组(0.49±0.07、0.33±0.04)(P0.05);高糖H/R+Srt组H9C2细胞SIRT1(0.75±0.12)、细胞质P-FoxO3a(0.62±0.08)表达高于高糖H/R组,细胞核BIM(0.45±0.05)和FoxO3a(0.26±0.03)表达低于高糖H/R组(P0.05)。结论 SIRT1可通过抑制FoxO3a/BIM通路的活化来减轻H9C2心肌细胞高糖H/R损伤。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护士选择性应用静脉留置针现状分析

[目的]了解护士选择性应用留置针的现状以及主要影响因素,为指导临床留置针合理应用提供理论依据。[方法]采用自设问卷对138名护士留置针选择性使用情况及其影响因素进行调查。[结果]约1／4的护士并不知道应选择性使用留置针,近60％的护士在实际工作中选择留置针的意识较差;护士选择性应用留置针的决策受多因素影响;不同科室、职称及是否具有带教资格选择性应用留置针的影响因素不尽相同;绝大部分护士希望参加选择性应用留置针相关内容的培训。[结论]临床护士操作前考虑留置针选择的意识有待加强。建议实施有针对性的培训以提高护士选择性应用留置针的能力。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。