131I标记多肽K237的最佳条件及标记肽的体外生物活性

目的探索131I标记多肽K237,获得放射化学纯度高于95%的131I-K237的最佳条件,研究标记产物的体外稳定性及生物学活性。方法应用Iodogen法对K237进行131I标记,采用正交实验筛选最佳标记条件。用高效液相色谱仪(HPLC)联合薄层层析法(TLC)测定标记率及放射化学纯度,SephadexG25层析柱分离纯化131I-K237。将分离纯化的131I-K237(放射化学纯度大于95%)分别放置于室温及37℃水浴箱,于不同时间测定其放射化学纯度以观察其稳定性。应用cck-8法进行人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖抑制实验,分别计算K237及131I-K237对HUVEC的抑制率,判定131I-K237的生物活性。结果最佳标记条件中,K237100μg与Iodogen 50μg,在37℃条件下反应时间40 min,标记率可达70%以上。稳定性实验结果表明,131I-K237在体外放置24 h后,其放射化学纯度>90%。131I-K237和K237对HUVEC细胞增殖的抑制率差异无统计学意义(P>0.05),说明K237被131I标记后,其生物学活性未改变。结论 Iodogen法131I标记多肽K237简单高效,标记产物的生物活性得到保留,未受明显破坏。     

131I-RP215McAb分子探针的制备、鉴定及荷人肺腺癌裸鼠放射免疫显像

目的 制备靶向肺腺癌细胞表面碳水化合物相关抗原(carbohydrate antigen 215,CA215)的核素分子探针131I-RP215单克隆抗体(monoclonal antibody,McAb),鉴定其理化性质并探讨其在荷瘤裸鼠模型中的体内分布情况和放射免疫显像特点.方法 采用氯胺T法对McAb RP215进行131I标记,Sephadex G25M柱纯化标记抗体,并鉴定其理化特性,观察该抗体标记物在荷A549裸鼠模型中的生物分布及放射免疫显像情况.结果 131I-RP215 McAb标记率为(91.03 ±2.36)％,纯化后的放化纯度为(93.15±1.40)％,比活度(3.37±0.42) MBq/μg;具有较好的稳定性及免疫活性.荷瘤裸鼠体内生物分布及SPECT显像结果显示,131 I-RP215 McAb能够在肿瘤组织中选择性浓聚,131I-RP215 McAb作用24h时,肿瘤/肌肉比达最高,且瘤体显影最清晰.结论 成功制备了特性理想的131I-RP215 McAb分子探针,在荷人肺腺癌裸鼠模型中有较好的显像效果.     

靶向整合素αvβ3受体的新型RGD肽二聚体的131I标记与生物活性的初步评价

目的:对所设计的新型精氨酰-甘氨酰-天冬氨酰(Arg-Gly-Asp,RGD)肽进行131I标记,研究其在肿瘤组织中的靶向性及其在荷瘤鼠体内的生物分布与显像,探讨将其应用于肿瘤血管生成显像的可能性。方法:参照文献报道的对环五肽c(RGDfV)构效关系的研究结果及多肽的化学修饰方法,设计了新型二硫键成环的并经亲水性修饰的cRGD肽二聚体[c(RGD)2],采用ChT法进行131I标记,测定c(RGD)2的亲和常数、标记物的稳定性与油水分配系数;建立荷黑色素瘤动物模型,研究131I-c(RGD)2的体内分布、非标记肽竞争抑制及肿瘤显像。结果:131I对c(RGD)2的标记率为(76.35±2.33)%,经Sephadex G10分离纯化后其放射化学纯度达(95.20±3.25)%。c(RGD)2对受体的亲和常数Ka为(0.137±0.057)×109/mol/L,油水分配系数lgP正辛醇/水为-1.628,131I-c(RGD)2在静脉注射后1 h、3 h、5 h与24 h在肿瘤中的摄取率分别为(0.67±0.13)%ID/g、(0.42±0.08)%ID/g、(0.51±0.11)%ID/g与(0.18±0.02)%ID/g,其在肿瘤中的清除相对缓慢,靶本比(T/NT)随时间延长而增高,静脉注射后24 h,肿瘤与肌肉(T/M)和肿瘤与血液(T/B)的摄取比值分别为4.42±1.70与2.27±0.45。131I-c(RGD)2的肝脏摄取低,静脉注射后1 h肿瘤与肝的摄取比可达2.10±0.60;未标记肽可明显抑制肿瘤对131I-c(RGD)2的摄取。荷瘤小鼠全身显像可见肾显影,在静脉注射后3 h胸部显像可见清晰的肿瘤影像。结论:所设计的通过二硫键成环的c(RGD)2可应用ChT法成功完成131I标记,其可被肿瘤组织特异性摄取,有可能应用于肿瘤血管的生成显像。131I-c(RGD)2的肝脏摄取低,在肿瘤显像中具有一定优势。     

~(188)Re标记VEGF多肽片段的荷瘤裸鼠体内分布及显像研究

目的 探讨188Re标记VEGF189外显子6编码的多肽(QKRKRKKSRYKS)的方法、标记物在荷瘤裸鼠体内的分布及显像.方法 以S-acetyl-MAG3为双功能螯合剂,正交设计法寻找188Re标记多肽QKRKRKKSRYKS的最佳条件;研究标记物在荷卵巢癌SKOV3裸鼠的体内分布,并在不同时间行SPECT平面显像.结果 采用SPSS 13.0进行分析.结果 188Re标记QKRKRKKSRYKS在最佳标记条件下的标记率为(73.1±5.5)%,HPLC纯化后放射化学纯度>95%,且受体结合活性良好;标记物室温下放置24 h,其放射化学纯度为(91.76±1.36)%;尾静脉注射标记物后,0.5 h荷瘤裸鼠肿瘤部位开始出现放射性浓聚,1 h浓聚更为明显,肿瘤放射性摄取为(1.846±0.511)%ID/g,肿瘤/对侧肌肉组织比值达(2.43±0.30).此外,肝脏、小肠、肾脏及膀胱等部位也可见明显的放射性浓聚,但3 h后肿瘤部位的放射性浓聚影基本消退.结论 188Re-MAG3-QKRKRKKSRYKS能明显聚集于肿瘤组织.     

肺癌特异性靶向小分子多肽的131I标记及其在兔体内的动态显像

目的建立肺癌特异性靶向小分子多肽cNGQGEQc的131I标记方法,并通过SPECT动态显像以研究131I-cNGQGEQc在兔
体内的放射分布特性。方法采用氯胺-T法对N-端连接有酪氨酸的小分子多肽cNGQGEQc进行131I标记,利用纸层析法测定
131I-cNGQGEQc的标记率与放化纯度,并观察131I-cNGQGEQc在生理盐水（NS）和正常人血清中于37 ℃孵育24 h后的体外稳定
性及其脂水分配系数。应用SPECT对经耳缘静脉注入131I-cNGQGEQc的新西兰白兔进行显像,结合感兴趣区时间-放射性曲线
分析,观察家兔体内放射性动态分布变化。结果131I-cNGQGEQc 的标记率为90%,经HPLC 纯化后放化纯度为95%;
131I-cNGQGEQc在NS和正常人血清中其放化纯度分别为（93.12±1.18）%和（88.34±5.43）%。131I-cNGQGEQc的脂水分配系数
lg P（正辛醇∕生理盐水）为-1.75,提示所制备的标记多肽是水溶性的。兔SPECT动态显像示：l min双肾即显影,5 min心、肝影开
始减弱,膀胱显影,随后膀胱影持续增强,30 min后软组织影逐渐减弱;胆囊未显影,腹部呈持续低放射分布;甲状腺区及胃未见
明显核素浓聚;各组织器官T-A曲线均随时间逐渐下降。结论131I-cNGQGEQc的制备方法简便,标记率高（>90%）,在体外具有
良好的稳定性;131I-cNGQGEQc为水溶性,主要经泌尿系统排泄,具有比较理想的体内分布特性。本实验结果为进一步的肺癌
荷瘤裸鼠放射性标记多肽的靶向定位诊断与治疗提供实验基础。
     

~(99)Tc~m标记VEGFR-3高亲和融合多肽在荷人卵巢癌裸鼠体内的分布和显像研究

目的 研究~(99)Tc~m标记VEGFR-3高亲和融合肽(phage-SHSWHWLPNLRHYAS)在荷人卵巢癌裸鼠体内分布和放射免疫定位显像.方法 用NHS-MAG3为双功能鳌合剂,固相法合成多肽.~(99)Tc~m预亚锡直接标记法进行标记,纸层析法测定标记率.经尾静脉注射于荷瘤鼠体内,取不同时相进行SPECT显像,测定标记物在体内的分布情况并进行分析.结果 融合多肽的~(99)Tc~m标记率为95.27%,放射化学纯度为96%,放射性浓度24.6 MBq/ml.经鼠尾静脉注射后1 h,植瘤部位开始出现放射性浓集,肾脏、肝脏及膀胱组织也可见显像;注射后3 h肿瘤显像最清晰,每克组织注射百分剂量率(%ID/g)为(30.20±6.89).其余大部分脏器的T/NT值均达最高,最高为肌肉(13.13);注射后4 h肿瘤部位显像逐渐消退.对照组裸鼠的肿瘤部位始终未见显像.结论 筛选获得的VEGFR-3高亲和融合肽能够靶向荷瘤鼠体内肿瘤组织,实现肿瘤的靶向受体显像.     

重组人纤溶酶原Kringle5的标记及其肿瘤显像

目的探讨放射性碘标记纤溶酶原Kringle5(K5)用于肿瘤显像的可行性.方法采用基因工程方法制备的重组人纤溶酶原Kringle5(rhK5),以Iodogen法制备125Ⅰ-rhK5和125Ⅰ-rhK5,进行荷瘤裸鼠体内分布和肿瘤显像研究.结果125Ⅰ-rhK5和131Ⅰ-rhK5的标记率为86%和84%,放化纯度为96%和95%.竞争结合实验表明,rhK5标记后其生物活性没有改变;荷瘤裸鼠体内分布显示,12 h肿瘤肌肉组织比可达4.94±0.89;131Ⅰ-rhK5肿瘤显像示肿瘤部位放射性浓聚随时间逐渐增加,3 h可见肿瘤清晰显影.结论Iodogen法制备125Ⅰ-rhK5和131Ⅰ-rhK5纯度高、稳定性好.131Ⅰ-rhK5可进行肿瘤的显像,为肿瘤的显像和治疗奠定了基础.     

重组人纤溶酶原Kringle5的标记及其肿瘤显像

目的探讨放射性碘标记纤溶酶原Kringle5(K5)用于肿瘤显像的可行性。方法采用基因工程方法制备的重组人纤溶酶原Kringle5(rhK5),以Iodogen法制备~(125)I-rhK5和~(131)I-rhK5,进行荷瘤裸鼠体内分布和肿瘤显像研究。结果~(125)I-rhK5和~(131)I-rhK5的标记率为86%和84%,放化纯度为96%和95%。竞争结合实验表明,rhK5标记后其生物活性没有改变;荷瘤裸鼠体内分布显示,12h肿瘤肌肉组织比可达4.94±0.89;~(131)I-rhK5肿瘤显像示肿瘤部位放射性浓聚随时间逐渐增加,3h可见肿瘤清晰显影。结论Iodogen法制备~(125)I-rhK5和~(131)I-rhK5纯度高、稳定性好。~(131)I-rhK5可进行肿瘤的显像,为肿瘤的显像和治疗奠定了基础。     

131I-rhTSH在荷人分化型甲状腺癌裸鼠模型的体内分布和放射免疫显像

目的：以重组人促甲状腺素（recombinant human thyrotropin,rhTSH）为靶向探针,测定131I标记rhTSH的标记率、放化纯度和比活度,并探讨其在荷人分化型甲状腺癌（differentiated thyroid carcinoma,DTC）裸鼠模型中的体内分布情况和放射免疫显像（radioimmunoimaging,RII）。方法：采用氯胺T法,利用131I标记rhTSH,Sephadex G25M 柱纯化放射性标记物,纸层析法测定其标记率、放化纯度、室温稳定性及血清稳定性,并计算其放射性比活度,进而研究该放射性标记药物在荷K1裸鼠模型中的生物分布及RII情况。结果：131I-rhTSH标记率为（93.04±1.13）%,放化纯度为（97.71±1.14）%,比活度为（4.92±0.06）MBq/μg;131I-rhTSH放于室温1、6、12、24 h后所测得的放射性化学纯度分别为（92.94±0.34）%、（91.81±0.64）%、（91.38±1.20）%、（90.43±0.74）%;而与血清孵育1、6、12、24 h后所测得的放射性化学纯度分别为（92.59±0.73）%、（91.33±0.98）%、（91.01±0.73）%、（89.58±1.33）%。荷K1裸鼠模型的体内分布及单光子发射型计算机断层成像（single photon emission computed tomography,SPECT）显示分子探针131I-rhTSH可以在肿瘤组织中靶向聚集,在24 h 时肿瘤/肌肉（T/NT）比达最高,且肿瘤显影最清晰。结论：成功制备了分子探针131I-rhTSH,在荷人DTC裸鼠模型中有较好的靶向作用,为DTC的进一步诊治奠定基础。     

131I-rMIF荷瘤小鼠体内生物学分布及肿瘤靶向性研究

目的研究放射性碘131标记基因重组巨噬细胞移动抑制因子(recombinant macrophage migration inhibitionfactor,rMIF)在荷瘤小鼠体内分布及肿瘤靶向性,为肿瘤早期诊断提供新的制剂。方法利用Iodogen(四氯二苯基甘脲)法放射性碘131标记rMIF(131I-rMIF),体外研究肝癌细胞系H22对该制剂的摄取;小鼠尾静脉注射131I-rMIF,研究其在H22荷瘤小鼠的生物学分布特征及放射自显影特征。结果成功制备了131I-rMIF,生物学活性良好。标记率87.34%,放化纯94.95%。室温放置48 h仍保持稳定。在0.5、1、2和4 h时,肝癌细胞H22对131I-rMIF的摄取率均明显高于对Na131I的摄取率(P<0.05)。生物学分布研究表明,小鼠尾静脉注射131I-rMIF后,肝、肾的放射性较高,其他脏器放射性较低。荷瘤模型在注射后1、3、6、24 h肿瘤/对侧肌肉(T/NT)的放射性比值分别为2.701±0.230、3.931±0.281、4.242±0.111和3.587±0.241。荷瘤鼠的放射自显影显像显示131I-rMIF注射后6 h后可以在肿瘤部位明显浓聚。结论131I-rMIF标记物稳定,标记率高,在荷肝癌小鼠中肿瘤靶向性分布明显,值得进一步研究。     

消化道肿瘤裸鼠碘-131 标记短肽 Tyr-GX1 的显影特征

目的 分析碘-131（131I）标记短肽酪氨酸修饰的血管靶向肽（Tyr-GX1）在荷结肠癌与胃 癌裸鼠体内的显影特征。方法 采用Iodogen 碘标法标记Tyr-GX1,检测其标记率和稳定性。建立荷结肠 癌、胃癌裸鼠模型（分别设置为结肠癌组和胃癌组）,均注射131I 标记短肽Tyr-GX1,观察24 h 后显影特 征。结果 纸层析法结果表明,131I 标记短肽Tyr-GX1 的标记率较高,为（95.67±0.79）% ;放射化学纯度为 （96.68±1.68）%。24 h 稳定性测试显示,131I 标记短肽分别与人血清、乙二胺四乙酸、生理盐水、半胱氨酸混 合后标记率仍然维持在90% 以上。结肠癌组、胃癌组裸鼠尾静脉注射131I 标记的短肽Tyr-GX1 后8 h 开始裸 鼠右后肢背侧荷瘤部位放射性浓聚较心血池本底升高,并随着时间延长而升高;结肠癌组16 h 时达峰值随后 稍有降低,荷瘤部位和心血池本底放射性摄取比值（T/NT）均>1。结肠癌组与胃癌组T/NT 比值在不同时 间、不同组间及变化趋势上有差异（P <0.05）。随着时间延长,结肠癌组和荷胃癌组裸鼠心、肺、肝、肾、胃、 肌肉、肿瘤、血液和甲状腺组织中Tyr-GX1 摄取率逐渐降低（P <0.05）,其中肝、肾组织均具有较高的放射 性。结肠癌组和胃癌组1、6、12 和24 h 肿瘤组织的摄取率均高于心脏、甲状腺、胃和肌肉组织（P <0.05）。 结论 131I 标记短肽Tyr-GX1 对结肠癌和胃癌裸鼠肿瘤血管靶向性较好,与恶性肿瘤组织有较高的结合率, 而结肠癌与胃癌的放射性浓聚和达峰时间有所不同;131I 标记短肽Tyr-GX1 可能在消化道恶性肿瘤血管靶向 诊断和治疗方面具有潜在价值。     

^125I标记抗人ADAMl51多克隆抗体在荷胃癌裸鼠体内的生物分布和放射免疫显像

目的研究^125I标记抗人ADAMl5多克隆抗体（^125I-anti-ADAMl5抗体）在荷人胃癌裸鼠体内的生物分布。方法以氯胺T法制备^125I-anti-ADAMl5抗体并测定其在生理盐水和人血清中的稳定性。经荷胃癌裸鼠模型尾静脉注入^125I-anti-ADAMl5抗体后1、4、8、24和48h对裸鼠进行SPECT平面显像,采用感兴趣区（ROI）技术进行半定量分析,计算肿瘤与非瘤组织的放射性计数比值（T／NT）和肿瘤与裸鼠全身的放射性计数比值。于48h显像后处死荷瘤裸鼠,取心、肺、甲状腺和肿瘤等多个脏器组织称重并测量其放射性计数,计算各组织的每克组织百分注射剂量率（％ID／g）。结果^125I-anti-ADAMl5抗体标记率为（75．16d-9．43）％,纯化后放射化学纯度可达（99．44d-O．21）％。经尾静脉注入^125I-anti。ADAMl5抗体后,随时间的延长,T／NT逐渐增高。在48h时肿瘤清晰显影,T／NT可达3．84±0．43。结论^125I-anti-ADAMl5抗体在荷胃癌裸鼠体内具有肿瘤靶向定位能力,能获得良好的放射免疫显像图像。     

人肝细胞癌转铁蛋白受体显像及靶向治疗研究

目的 探讨^131I-D2C5用于肿瘤受体成像和放射免疫治疗的价值。方法 人肝细胞癌SMMC-7721采用隧道包埋法植入Balb／c（-／-）裸鼠肝左叶,建立原位种植肿瘤模型。①12只荷瘤裸鼠随机分为两组,每组6只,分别经尾静脉注射^131I-D2C5、^131I-mIgG,放射剂量均为14．8MBq／只;SPECT采集^131I-D2C5和^131I-mIgG注射后6h、24h放射白显影图像;γ计数器检测体内放射性分布。②18只荷瘤裸鼠随机分为两组,每组9只,每周分别经腹腔注射^131I-D2C5 ,^131I-mIgG,连续6周;另外9只荷瘤裸鼠每周腹腔注射生理盐水200肛l作为对照组。8周后比较各组肿瘤体积,计算其生长抑制率,评估肿瘤坏死程度。结果 注射^131I-D2C5后6h时,裸鼠肝肿瘤部位显影,24h时肿瘤显影最清晰。注射^131I-mIgG后,肿瘤部位未见明显放射性浓聚。24h时^131I-D2C5组裸鼠体内肿瘤／血为6．6,肿瘤／肝为2．2,肿瘤／肌肉为20．8。静脉注射^131I-D2C5导向治疗较^131I-mIgG更显著抑制人肝细胞癌裸鼠模型中肿瘤的生长,促进肿瘤坏死。结论 ^131I-D2C5能与人肝细胞癌SMMC-7721高特异性、高亲和力地结合。在肝癌显像及生物靶向治疗中具有广泛的应用前景。     

18F-FPA的合成及对荷前列腺癌裸鼠的显像研究

目的 探讨显像剂2-18 F-氟丙酸(18 F-FPA)的合成及对荷前列腺癌裸鼠的显像价值.方法 利用CFN-multi-200型多功能药物合成模块自动化合成18 F-FPA,进行质量控制.建立荷PC3前列腺癌裸鼠(16只)和荷22RV1前列腺癌裸鼠(4只)模型,分别进行18 F-FPA显像,并与18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)和11 C-胆碱显像进行对比,评价18F-FPA对前列腺癌的显像价值.将荷PC3前列腺癌裸鼠分为4组进行生物分布测定,计算每克组织百分注射剂量率(％ID/g)和肿瘤与非肿瘤比值.结果 18F-FPA的合成过程约40 min,产率为(38±2)％(未经时间校正),放射化学纯度大于97％,体外稳定性良好.注射18F-FPA后显像,两种荷瘤裸鼠肿瘤均显影清晰,而18 F-FDG和11C-胆碱显像肿瘤仅轻微摄取.荷PC3前列腺癌裸鼠的肿瘤在注射18F-FPA后0.5、1.0、2.0和4.0h的生物分布分别为(6.91±0.72)、(6.99±0.55)、(7.17±0.25)和(6.49士0.74)％ID/g,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 18 F-FPA合成简单,对荷前列腺癌裸鼠有较好的显像效果,有望用于临床前列腺癌的检测.     

Radiolabeling LyP-1 peptide and preliminary biodistribution evaluation in mice bearing MDA-MB-435 xenografts

Background Recent studies have shown the LyP-1 peptide can home to either tumor lymphatics or the tumor cells and be internalized by targeted cells.This study aimed to investigate the possibility of us...     

LyP-1肽的131碘标记及其生物分布研究

目的：探讨Na131 I标记LyP-1肽的可能性以及Na131 I标记的LyP-1肽在乳腺癌裸鼠体内的生物分布。方法：包含LyP-1序列的十环肽（YCGNKRTRGC）通过固相合成法合成。在两个半胱氨酸之间形成二硫键以维持肽的环形结构。LyP-1肽通过氯胺-T 法进行Na131 I标记。通过尾静脉途径将Na131 I标记LyP-1肽以及对照肽注射于荷MDA-MB-435乳腺癌裸鼠体内并测量其生物分布情况。结果：LyP-1肽的Na131 I标记率可达80％±5％（n＝5）,放射化学纯度约96％。在37℃新鲜人血清中Na131 I标记 LyP-1肽24h其放射化学纯度仍然达92％。在生物分布研究中,Na131 I标记 LyP-1肽在肿瘤中的聚集水平明显高于其他组织。结论：通过氯胺-T 法可以成功的将131 I标记于LyP-1肽。131 I标记的LyP-1肽在37℃新鲜人血清中24h仍然保持稳定,并可被肿瘤组织高度摄取。