应用ELISA方法计算抗体亲和力的研究进展

主要介绍了用ELISA方法计算不同情况的抗体亲和力.     

三种方法检测梅毒螺旋体抗体结果比较

目的比较甲苯胺红不加热血清试验（TRUST法）、ELISA法及明胶颗粒凝集试验（TPPA法）检测梅毒螺旋体抗体的结果符合率。方法对临床受血者输血前系列检查中TP-ELISA法阳性标本，进行双孔复检，仍阳性者进一步用TRUST法和TPPA法检测。结果44例TP-ELISA法阳性标本中，TRUST法阳性18例，TPPA法阳性39例。TRUST法与ELISA法的阳性符合率为40．9％，TRUST法与TPPA法的阳性符合率为43．6％，TPPA法与ELISA法的阳性符合率最高，为88．6％。结论TRUST法与ELISA法、TPPA法符合率均较低，适宜疗效观察；ELISA法与TPPA法的阳性符合率较高，结果较为准确可靠，适合大样本筛查。     

间接ELISA法检测儿童血清MenCPS抗体水平

C群脑膜炎奈瑟菌所致流行性脑脊髓膜炎病情较为危重，患者发病急骤，病情进展迅速，病死率高，而且很容易出现局部爆发流行，对人类健康造成极其严重的危害。近些年C群流脑在我国广西、安徽等地出现多次爆发流行，故其诊断和预防引起了学者的高度重视。为此，我们建立了抗C群荚膜多糖IgG抗体的间接ELISA法，并对385名儿童抗体水平进行了检测，旨在为流脑的防治工作提供相关依据。     

ELISA法定量检测血清抗精子抗体

目的用酶联免疫定量方法检测血清中抗精子抗体的浓度.方法采用ELISA方法定量检测875例不育症患者的血清中抗精子抗体.结果875例患者中,291例抗精子抗体阳性,阳性率为25.3%.其中男性阳性率10%,女性阳性率为15.3%.结论不育患者检测血清中抗精子抗体具有显著的临床意义.     

ELISA法检测600例献血者血清梅毒抗体的应用评价

目的探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清梅毒抗体的准确性和实用性。方法采用ELISA法和梅毒螺旋体特异性抗体明胶凝集试验（TPPA）对75份梅毒患者和525份非梅毒患者的血清标本进行检测比较。结果TP—ELISA共检出梅毒螺旋体抗体阳性74份、TPPA共检出阳性73份,两法阳性检出率分别为98．7％和97．3％。TP—ELISA法有2例假阳性结果,假阳性率为0．38％。TPPA无假阳性结果。统计学处理,两法结果无统计学差异（P〉0．05）。结论ELISA法有较高的准确性、敏感性和特异性。具有试剂成本低,操作方便,可使用酶标仪判读,原始数据易于保存等特点,是大批量样本筛查的理想方法,应作为目前临床、血站诊断和筛查血清梅毒特异性抗体的首选。     

ELISA法检测丙型肝炎抗体

酶联免疫吸附试验（ELISA）是免疫学检验的主要技术手段,ELISA技术是利用酶的高效催化和放大作用与特异性抗原一抗体反应相结合而建立的一种标记免疫技术,具有高度的特异性和敏感性。因其操作简单、特异性强、成本低等特点,被广泛使用于手工操作、酶标仪加洗板机、全自动酶免分析系统等各档次实验室。日常ELISA检测中,当实验人员判断实验结果呈假阳性时,可能不加分析地就会把可疑标本重新复查,从负责的角度来讲,这种做法是无可厚非的,但会造成不必要的试剂浪费,也可延长报告时间。在实际工作中,我实验室采取了一步复查前的补救措施,效果不错,特进行交流。     

甲基苯丙胺半抗原设计与抗体间接ELISA检测方法的优化

目的:提供一种有效的甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)半抗原设计,并对MA抗体ELISA检测方法进行优化.方法:将合成的MA半抗原与破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)和牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)分别偶联(TT/BSA-SMA)作为免疫抗原和包被抗原,...     

抗康柏西普抗体筛选用ELISA检测方法的建立

目的:为评价康柏西普免疫原性,建立一种恒河猴血清中的抗康柏西普抗体检测方法。方法:建立一种以康柏西普为包被蛋白、羊抗人Ig G Kappa light chain抗体为检测抗体的ELISA检测方法,并验证其精密度和专属性。同时运用细胞增殖实验确定阳性样品抗康柏西普抗体的活性。结果:所建立的检测方法最佳包被浓度为5μg·m L-1,检测抗体的最佳稀释倍数为2 500倍。阳性判断阈(cut point)为0.162,批内和批间变异系数均未超过15%。康柏西普浓度在小于10μg·m L-1时对检测无干扰。24个血清样品中,抗康柏西普抗体阳性率为62.5%,HUVEC细胞增殖实验显示无阳性血清具有中和康柏西普生物学活性的能力。结论:经验证,该方法可应用于抗康柏西普抗体的检测,为临床前及临床研究提供支持。     

双抗原夹心酶联免疫法检测抗白细胞介素-3的抗体

目的 :建立一种多用途、快速简便和易行的检测抗白细胞介素 3(IL 3)抗体的酶联免疫检测方法。方法 :以高纯度的基因工程人白细胞介素 3(rhIL 3)包被酶标板 ,以辣根过氧化物酶标记rhIL 3,建立了检测抗rhIL 3抗体的一步法双抗原夹心法。结果 :特异性 :与相似的蛋白分子 (其它细胞因子抗体 )无交叉反应 ,实验动物和人的正常血清反应呈阴性。灵敏度 :最低检出限为抗IL 3的单抗 5ng/ml。精密性 :组间和组内变异系数均 <1 2 %。应用于rhIL 3长期毒性实验取得良好的检测效果。结论 :此法特异性强、灵敏度高、方法稳定、操作简便 ,与其它细胞因子的单抗无交叉反应 ,能在同一条件下检测不同种属动物血清中的IL 3抗体 ,用于IL 3长期毒性实验等明显优于间接酶联免疫法。     

3种不同方法检测肺炎支原体抗体IgM结果比较

目的:比较3种不同方法检测肺炎支原体抗体IgM结果。方法:从某院收集1832例疑似肺炎支原体感染的患儿末梢血及血清,采用胶体金法、间接荧光法、酶联免疫吸附法3种方法进行MP-IgM检测。结果:1832例中采用胶体金法检测阳性率42.07%,间接荧光法阳性率20.52%,酶联免疫吸附法阳性率21.0%,胶体金法在肺炎支原体抗体IgM检测中的阳性检出率明显高于间接荧光法和酶联免疫吸附法,差异具有统计学意义(P<0.05);间接荧光法与酶联免疫吸附法两组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:3种方法各有优缺点,胶体金法在肺炎支原体抗体IgM检测中的阳性检出率明显高于间接荧光法和酶联免疫吸附法,且操作简便,结果报告快速,可作为临床肺炎支原体筛查指标;间接荧光法与酶联免疫吸一致性好,但操作相对繁琐,适合临床肺炎支原体抗体感染首选指标。     

两种方法检测血清甲胎蛋白(AFP)的比较

目的对电化学发光免疫法与微粒子酶联免疫法检测血清甲胎蛋白作对比分析.方法随机抽取150份临床送检的标本,用电化学发光免疫法与微粒子酶联免疫法测试甲胎蛋白的含量,对测试数据进行相关性试验、线性试验、精密度试验、回收试验.结果两法无显著性差异(P＞0.05),但电化学发光免疫法的线性范围较宽(1-980ng/ml),重复性较好(批内CV值3.4%,批间CV值3.5%),回收率较高(97.2%).结论电化学发光免疫法检测血清甲胎蛋白优于微粒子酶联免疫法检测血清甲胎蛋白     

多种梅毒检测方法的比较

目的 应用多种不同的血清学检测方法测定血清标本梅毒抗体并评价检测结果.方法 收集梅毒患者血标本100 例,分别采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、胶体金快速检测试验(ACONSYP)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)检测血清梅毒.结果 先进行TP-ELISA初筛检测为梅毒阳性者的100 例患者血清中,其他几种方法都是阳性者94 例,其中TRUST阳性94 例,TPPA 阳性98 例,SYP 阳性96 例.但在120 例非梅毒对照组中,经TP-ELISA 检测阴性人数为114 例,特异性为95%.结论 多种方法均存在一定的假阴性和假阳性,对于TP-ELISA 阳性标本,为了提高梅毒检出率,要做TRUST 和TPPA 复检.     

A Monoclonal Antibody Based Capture ELISA for Botulinum Neurotoxin Serotype B: Toxin Detection in Food

Botulism is a serious foodborne neuroparalytic disease, caused by botulinum neurotoxin (BoNT), produced by the anaerobic bacterium Clostridium botulinum. Seven toxin serotypes (A – H) have been described. The majority of human cases of botulism are caused by serotypes A and B followed by E and F. We report here a group of serotype B specific monoclonal antibodies (mAbs) capable of binding toxin under physiological conditions. Thus, they serve as capture antibodies for a sandwich (capture) ELISA. The antibodies were generated using recombinant peptide fragments corresponding to the receptor-binding domain of the toxin heavy chain as immunogen. Their binding properties suggest that they bind a complex epitope with dissociation constants (KD’s) for individual antibodies ranging from 10 to 48 × 10⁻¹¹ M. Assay performance for all possible combinations of capture-detector antibody pairs was evaluated and the antibody pair resulting in the lowest level of detection (L.O.D.), ~20 pg/mL was determined. Toxin was detected in spiked dairy samples with good recoveries at concentrations as low as 0.5 pg/mL and in ground beef samples at levels as low as 2 ng/g. Thus, the sandwich ELISA described here uses mAb for both the capture and detector antibodies (binding different epitopes on the toxin molecule) and readily detects toxin in those food samples tested.     

ELISA法定量测定抗精子抗体AsAb

目的 通过对抗精子总抗体(AsAb)的测定,探讨其与临床不育(或不孕)症的关系.方法 对107例志愿者AsAb的类型和含量用ELISA法进行了分型和定量研究.结果 总抗体的测定上限可达500U/ml;回收率在96.4%～103.0%之间;批内重复性为2.1%～5.0%;本试剂盒呈色稳定性较好,操作简单.通过测定其参考值范围为AsAb＜75.3U/ml.结论 该法准确可靠,可作为临床诊断不育或不孕症病因的辅助诊断方法.     

CLIA法与ELISA法对检测血清HBeAb与HBcAb结果的分析

目的通过CLIA与ELISA对临床标本HBeAb与HBcAb的检测结果,探讨两种方法在临床应用及统计学中的意义。方法对2016年2月至2016年6月间来我院就诊患者共430例,采用CLIA法与ELISA法同时检测血清HBeAb和HBcAb,并对检测结果进行分析。结果当HBs Ag阴性时,CLIA法与ELISA法HBeAb阳性值之间差异性具有相关性(P<0.05),同时,CLIA法与ELISA法检测HBeAb与HBcAb阴性结果之间差异均具有相关性(P<0.05)。结论 CLIA法与ELISA法检测血清HBeAb与HBcAb结果有差异性,应用及流行病统计时应注意方法学的选择。     

ELISA试剂盒方法测定重组人胰高血糖素类多肽-1(7-36)浓度

目的：定量检测血浆样本中重组人胰高血糖素类多肽-1（7-36）[rhGLP-1（7-36）]的含量。方法：用LINCO公司生产的试剂盒对rhGLP-1（7-36）的标准品和血浆样本进行定量检测。结果：测定的特异性、灵敏度、测量范围、重现性和回收率满足生物制品药代动力学研究的要求。结论：用LINCO公司生产的试剂盒定量血浆样品中的rhGLP-1（7-36），该检测方法符合生物制品检测方法，可以作为其药代动力学研究血药浓度的检测方法。     

3种计算方法测定阿司匹林含量的比较研究

目的:比较3种计算方法测定阿司匹林、水杨酸双组分体系中阿司匹林含量的方法。方法:配制系列浓度的水杨酸、阿司匹林混合标准品溶液,于230nm～350nm波长范围内进行扫描,记录2组分在265、295、320.5nm波长处的吸收度,分别采用等吸收双波长法、近似倍率系数法、水杨酸浓度分级近似计算法进行数据处理,计算阿司匹林回收率。结果:3种方法测定阿司匹林回收率分别为(99.11±1.68)%、(98.82±1.17)%、(96.23±4.10)%。结论:近似倍率系数法测定结果波动小,比较稳定,对大量样品的测定而言,其不失为一种简单有效的方法。