改进TA-Fe法显示大鼠肾血管和肾小管的研究

目的 光镜下观察改进单宁酸-氯化铁法（TA—Fe法）媒染肾微血管和肾小管的效果。方法 经TA-Fe法媒染的大鼠肾的两组冰冻切片。一组切片用TA—Fe法，湿片拍照；另一组切片用改进TA—Fe法经脱水、透明、封片。显微摄影。结果 两种TA—Fe法均能显示肾微血管和肾小管。改进TA—Fe法使组织结构更清晰．肾血管球毛细血管分叶更明显。肾小囊上皮、毛细血管内皮细胞、足细胞以及球内系膜细胞核亦被良好显示。切片可较长时间保存。但立体感较改进前略差。结论 改进后的TA—Fe法显示肾微血管和肾血管效果更好，适合做回顾性研究。     

改进前后TA-Fe法媒染肾微血管和肾小管效果的对比

应用TA-Fe法媒染肾微血管[1,2]，为肾微血管构筑和临床有关疾病的诊断和研究提供了一种简便易行的新方法，但是因其需湿片摄影，时间要求严格。而自然干燥后切片易收缩卷曲、脱落，无法保存原始材料进行回顾性研究。为此，我们对TA-Fe法进行了改进，结果令人满意。它既清晰地媒染微血管，又良好显示了肾微血管与肾小管的关系，切片可长时间保存。     

改良单宁酸-氯化铁法媒染子宫血管的实验研究

目的：光镜下观察大鼠子宫各部位血管构筑。方法：应用单宁酸一氯化铁法(TA—Fe法)灌流固定大鼠，取子宫不同位置做冰冻切片，氯化铁显色，常规脱水、透明、封片，显微摄影。结果：子宫壁出现类似电镜负染色效果，组织结构灰黑色，血管双线条状，分支明显，过管壁切面可见内皮细胞或平滑肌；子宫动脉进入肌层分支并形成一、二级血管网和多支环状动脉，环行动脉或二级血管网发出的微动脉和毛细血管进入粘膜，形成密集的三级毛细血管网。结论：经灌流的子宫标本较长时间保存在媒染固定液内，导致血管外结构也被媒染；子宫壁有三级血管网；每个子宫有多支环状动脉；各段子宫血管构筑不尽相同。     

应用单宁酸的负染色效果显示大鼠生殖器官微血管

近百年来,许多学者为研究器官内血管立体构筑倾注了大量心血,创造了多种显示微血管构筑的方法,诸如墨汁灌注法,橡胶、维尼龙血管、淋巴管立体铸型法,微血管铸型扫描电镜法,碱性磷酸酶法（钙铅法）以及单宁酸-氯化铁媒染法（TA-Fe法）,为科学研究及临床应用做出了贡献。继TA-Fe法媒染微血管后,我们又发现单宁酸过度媒染某些组织结构,有类似电镜标本负染色技术效果,清晰地显示了大鼠子宫、卵巢、输卵管等器官的血管构筑特点。     

单宁酸-氯化铁法媒染肺内微血管及细胞的组织学观察

目的　光镜下观察大鼠肺微血管及肺组织细胞。方法　应用单宁酸 氯化铁法 (TA Fe法 )灌流固定大鼠 ,取肺做冰冻切片 ,氯化铁显色 ,光镜下观察。结果　肺内小血管、微血管蜿蜒走行 ,被切成各种断面 ,管壁平滑肌细胞、内皮细胞显示清晰 ,有一定立体感 ;接近被膜的微动脉形成较粗的毛细血管 ,肺泡间毛细血管不易分辨 ,肺间质内有微血管和毛细血管分布 ,微血管周围的肺组织亦被媒染。结论　TA Fe法即可显示肺内微血管 ,又能保存组织细胞结构 ,肺内小动脉和微动脉管壁的平滑肌参与微循环的主动调节机制。     

Harris苏木精染液化学性质的探讨

苏木精·伊红 (Hematoxylin·Eosin ,HE)染色是组织切片常用染色方法 ,苏木精在不同媒染剂如铝、铁、钼、钨等金属离子参与下可以显示多种组织成分 ,用途广泛。与铝、铁混合用于细胞核染色 ;与钼、钨结合适用于神经胶质细胞染色 ;与钨结合适用于细胞有丝分裂染色 ,还能显示骨骼肌和心肌纤维中的横纹及纤维蛋白染色 ;与碳酸锂结合显示神经髓鞘[1～ 3] 。因此在有关苏木精染料的化学性质上就存在着两种不同的观点 :有人认为苏木精是用于细胞核染色的碱性染料[4 ,5] ;也有人认为是酸性染料[1] 。 1 90 0年Harris创立了一种用于细胞核染色的H…     

人鼻粘膜的微血管构筑

用新鲜胎儿和新鲜成人标本作墨汁灌注连续切片、冰冻切片碱性磷酸酶染色光镜观察和微血管铸型扫描电镜观察方法研究了人鼻粘膜的微血管构筑。鼻甲粘膜内微动脉吻合形成两级微动脉拱。微静脉吻合形成浅、深静脉丛、下鼻甲粘膜的深静脉丛是由短而卷曲的微静脉吻合而成的致密静脉丛。在中、下鼻甲粘膜内观察到动－静脉吻合。对粘膜内微血管构筑的机能意义进行了讨论。     

大鼠海马微血管构筑的定量分析及衰老变化

目的:观察并定量分析大鼠海马的微血管构筑及衰老变化。方法:采用单宁酸-氯化铁媒染微血管的方法分别观察青龄、老龄大鼠海马与额叶皮质的微血管构筑,并采用MiVnt图像分析系统对海马与额叶皮质的微血管密度(MVD)及微血管面积密度(MVA)进行定量分析。结果:老龄大鼠海马、皮质的微血管数量显著减少,分布杂乱、扭曲缠结。定量分析显示老龄大鼠海马、皮质的MVD值和MVA值均明显低于青龄大鼠,差异具有统计学意义。结论:老龄大鼠海马及额叶皮质的MVD值、MVA值均明显低于青龄大鼠,这是老年血管性痴呆发生机制的主要形态学依据。     

应用单宁酸-氯化铁法显示小脑不同部位的微血管构筑

目的　光镜下观察 6只大鼠小脑前叶、后叶及蚓部微血管构筑。方法　用单宁酸 -氯化铁法 (TAFM)媒染显示小脑内血管。结果　小脑各部位皮质、髓质动脉均来源于软脑膜动脉和小脑动脉中央支 ,软脑膜动脉分支多以直角进入小脑皮质 ,分别在分子层、蒲肯野细胞层、颗粒层形成毛细血管网 ;小脑后叶髓质中微动脉呈爪状分支 ,小叶两侧皮质深层微动脉或毛细血管可跨过髓质互相沟通。结论　 TAFM显示小脑微血管构筑清晰、立体感强 ,并发现小叶内皮质深层微血管之间有吻合支     

溃变纤维Fink-Heimer Ⅱ法镀银染色后漂白复染技术

Fink-Heiller Ⅱ法能较好地分辨溃变纤维和溃变终末,广泛它用于神经束略的追踪。但该法常因正常组织中有许多金属银颗粒不能全部去除而造成切片背景不清,又固不能区分溃变来末梢周围的细胞构筑关系而致评价溃变终末的范围造成困难。本实验将Fink-Heimer Ⅱ法染色后的切片作漂白处理,而后作焦油紫复染。结果表明,经漂白处理的切片正常组织完全漂白而使背景清晰,而黑色的溃变纤维不受影响,完全保留。经复染的切片,复染的神经细胞显示较佳,能很好地反映出溃变终末的分布范围。因而是一种较为理想的溃变染色技术。     

组织化学染色技术在超薄生物塑化标本中的应用

目的 探讨组织化学染色技术是否可以应用于塑化标本并验证染色塑化标本是否具有自发荧光。 方法 选取1个手掌标本经超薄生物塑化技术做成组织块,进行连续切片,切片数量56张,并按切片顺序进行染色处理：原始切片,苏木素-伊红染色,凡尔霍夫- 酸性品红染色,亚甲蓝-天青Ⅱ号染色,在扫描仪、光学显微镜和激光扫描共焦显微镜下观察染色效果和组织结构特点并进行比较。 结果 3种染色技术都可应用于塑化切片染色。苏木素-伊红染色显示肌肉、结缔组织呈红色或紫红色,骨质呈紫蓝色或蓝色。凡尔霍夫-酸性品红染色显示弹力纤维呈黑色,胶原呈红色,其他组织为黄色或棕黄色。亚甲蓝-天青Ⅱ号染色显示肌腱呈紫红色,骨质呈粉红色,软骨呈紫罗兰,其他组织呈紫色。但细胞内结构的染色效果并不理想。在激光扫描共焦显微镜下,胶原纤维、弹力纤维和肌肉纤维具有自发荧光,结构清晰可辨。结论 常用的组织化学染色技术适合于超薄塑化切片染色,染色切片的各种组织结构比未染色的观察效果好。染色后,塑化切片中具有自发荧光的结构在激光扫描共焦显微镜下亦可清晰显影。     

结扎大鼠胸导管诱发胰组织结构的形态学变化

目的 观察胰淋巴淤滞动物模型胰组织结构变化和胰淀肽沉积情况,探讨淋巴淤滞对胰组织细微和超微结构的影响. 方法 10月龄大鼠20只,采用腹部结扎大鼠胸导管,建立胰淋巴淤滞动物模型,造模后6个月取材,部分胰组织经石蜡包埋切片,行HE和刚果红染色;部分经冷冻切片,行免疫组织化学染色和光镜观察;部分标本进行透射电镜样品制备和观察. 结果 HE和刚果红染色切片光镜观察显示,胰腺小叶间隙增宽,呈明显的结缔组织增生、脂肪堆积;胰岛淡染或着朱红色,组织间隙明显增宽.免疫组织化学染色切片光镜观察显示,在胰岛及其周围,呈现胰淀肽强阳性棕褐色着色反应.超薄切片透射电镜观察显示,胰腺小叶间隙增宽,可见血管和扩大的淋巴管;胰岛细胞间隙增宽,细胞间隙内可见大量脂滴样物质和胶原原纤维样结构.结论 胸导管结扎可导致胰淋巴引流障碍,引起胰淋巴管扩张,结缔组织间隙增宽,脂肪堆积,胰岛细胞间隙扩大,胰淀肽沉积等,这些结构变化可能影响胰岛的功能.     

AMACR/34βE12/p63鸡尾酒双染对诊断前列腺癌及癌前病变的价值

目的探讨AMACR／34βE12／p63鸡尾酒双染对诊断小灶性前列腺癌及癌前病变的价值。方法从2005年6月起对3个月内临床连续送检的105例前列腺穿刺活检标本,6例前列腺癌根治标本和19例经尿道和耻骨上摘除的良性前列腺增生标本总计130个病例,1030个组织块中需要用免疫组织化学辅助诊断的262个组织块分别作AMACR／34βE12／p63鸡尾酒双染,同时作这3个抗体的单项染色,并结合HE切片和临床资料观察结果作出诊断。结果鸡尾酒双染切片中前列腺癌和高级别上皮内瘤变（HGPIN）上皮细胞呈蓝黑色,良性腺体的基底细胞呈红色。癌的蓝黑色腺上皮周围无红色基底细胞围绕,HGPIN的蓝黑色腺上皮周围有间断或连续的红色基底细胞。共在214个（82％）组织块中发现前列腺癌,包括31处小灶性癌。64个（24％）组织块中发现HGPIN,包括局灶性HGPIN和小腺泡性HGPIN。1个组织块有不典型性腺瘤样增生。未发现上皮细胞AMACR阳性同时基底细胞34βE12和p63阴性的良性腺体。结论鸡尾酒双染有助于提高小灶性前列腺癌和HGPIN检出率。     

声带鳞状细胞癌早期改变的病理学观察

目的探讨声带鳞状细胞癌早期病理学的特点,提高病理诊断水平。方法总结89例声带鳞状细胞癌早期改变病例的病理资料,对其石蜡切片进行HE染色、PAS染色及p53、Ki-67免疫组化染色;以59例声带角化症（分为单纯增生组40例和异型增生组19例）和30例声带浸润癌（浸润深度〉3mm的癌）作为对照。结果在HE染色下,声带鳞状细胞癌的早期改变可区分为两种类型：Ⅰ型为上皮全层癌变型,占67．4％（60／89）;Ⅱ型为上皮基底层及副基底层癌变型,占32．6％（29／89）,又可分为Ⅱa和Ⅱb两个亚型。HE染色显示有可疑微小浸润者52例,PAS染色示其中的43例（83％）的可疑病灶周边基膜样物质消失,有微浸润,Ⅰ型微浸润的比例较Ⅱ型明显偏低（P=0．007）。HE染色下3例（3．4％,3／89）认为无微浸润者经深切证实有浸润,并经PAS染色确认。Ⅰ型和Ⅱ型的p53表达率差异无显著性（P=0．445）,而Ki-67阳性率Ⅰ型高于Ⅱ型（P=0．048）。癌早期改变组的p53阳性率高于声带角化症伴单纯增生组（P=0．008）,而与声带角化症异型增生组和声带进展癌组之间的差异无统计学意义（P=0．240,P=0．268）。癌早期改变组的Ki-67阳性率明显低于浸润癌组（P=0．000）,并明显高于角化症伴单纯增生组（P=0．001）,但与角化症伴异型增生组之间差异无显著性（P=0．248）。结论声带鳞状细胞癌早期改变可区分为Ⅰ型和Ⅱ型,Ⅱ型癌变可在不累及上皮全层的情况下,由上皮的基底层和（或）副基底层细胞直接向固有膜内增生及癌变,此型占全部病例的近1／3,早期浸润是Ⅱ型诊断的可靠依据;Ⅱ型的存在提示声带鳞状细胞癌的早期发生和演进可能存在不同的机制;PAS染色和p53、Ki-67免疫组化染色有助于声带鳞状细胞癌Ⅱ型早期的诊断。     

甲基丙烯酸羟乙酯塑料包埋切片技术在小鼠胎脑组织学分析中的应用

目的 探索塑料包埋切片法在小鼠胎脑组织学分析中的应用。 方法 取胚胎期13.5d（E13.5）小鼠,4% 多聚甲醛4℃固定过夜,分离胎鼠头部,甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)塑料包埋组织并切片;对切片进行HE 染色。 结果 与石蜡包埋相比,采用HEMA塑料包埋的方法进行胎鼠脑组织学分析,形态结构保存较完整、HE染色效果较清晰。 结论 利用塑料包埋技术进行小鼠胎脑组织学分析,优于石蜡包埋方法。     

“Harris Hematoxylin,” What Harris Really Wrote and the Mechanism of Hemalum Stains

Abstract

In current textbooks, Harris “hematoxylin” stain includes differentiation in acid alcohol, followed by bluing of sections. However, Harris (1900) did not mention differentiation, but strongly recommended progressive staining with an acidified or diluted solution of his formula or with Mayer's acid hemalum. A review of the chemistry of hematoxylin and hemalum stains showed binding of unoxidized hematoxylin by tissues. Oxidation of hematoxylin yields anionic hematein, which does not contain a quinonoid ring. Two hematein ions form a chelate with an Al⁺⁺⁺ cation. Hemalum is bound to tissues by coordinate and hydrogen bonds. Dye binding by nuclei occurs mainly via non-ionic bonding. Protons of acids added to the hemalum solution or used in differentiation compete with the metal for binding sites. When appropriate amounts of acid are added to the hemalum solution, nuclei are stained selectively. Acidified hemalum solutions require only two steps, staining and washing, and yield perfectly reproducible staining patterns, even in the hands of trainees. (The J Histotechnol 10:257, 1987.)     

家兔窦房结的形态学研究

目的 :了解窦房结的形态结构。方法 :取 1 0例家兔心脏 ,常规石蜡包埋整心连续切片 ,HE染色、Masson三色染色和磷钨酸苏木素染色后 ,在光镜下观察。在光镜观察的基础上 ,另取 2例家兔窦房结对其特化的P细胞和T细胞进行透射电镜观察。结果 :家兔窦房结位于界沟上部 ,约 1 / 3跨越腔耳角 ,形态大小变化较大 ,内部有丰富的小血管分布 ,附近有一较大动脉和神经分布 ,未见分层分部现象。P细胞内可见线粒体、电子致密颗粒和高尔基氏器 ,细胞核大而圆可见核仁。T细胞介于P细胞与普通心肌细胞之间。结论 :家兔窦房结的位置较高 ,其细胞发育较为成熟 ,个体差异较大     

Intracellular localization of carbonic anhydrase in the frog nephron.

The intracellular distribution of carbonic anhydrase has been studied in the frog nephron by a histochemical method. The study of the detailed intracellular localization was possible by sectioning tissue embedded in plastic (Sorwall, JB-4), before staining essentially according to Hansson. This procedure preserves the intracellular structure well and the resolution is high. For light microscopy sections from 1 to 10 mum were used. For electron microscopy 0.25 mum thick sections were stained and examined in the electron microscope using an accelerating voltage of 100 kV. The highest concentrations of the enzyme seem to be localized to the cell membranes or their immediate neighbourhood. A faint cytoplasmic staining may sometimes be observed. In distal tubule cells the apical part of the cell membrane was heavily stained. Weaker staining was found at the lateral membranes and their infoldings and to some extent the basal parts of the cell membrane. In the canaliculi cells only the lateral and basal parts of the membranes were stained. This latter localization is similar to that in the parietal cells of the mammalian stomach.