FQ—PCR检测乙型肝炎患者血清HBVDNA

目的评价荧光定量聚合酶链反应 (FQ- PCR)检测 HBV DNA的临床应用价值。方法用 FQ- PCR和酶联免疫吸附试验 (EL ISA)分别检测乙型肝炎患者血清 2 5 1份和健康体检者血清 116份的 HBV DNA和 HBV血清标志物。结果 HBs Ag、HBe Ag和抗 - HBc3项阳性、HBs Ag、抗 - HBe和抗 - HBc3项阳性以及抗 - HBs、抗 - HBe、抗- HBc同时或分别阳性的样品 ,HBV DNA阳性率分别为 96 .5 %、5 6 .6 %和 12 .3% ,HBV DNA拷贝数分别为 1.12× 10 8/ ml、1.45× 10 6/ m l和 6 .6 1× 10 4/ m l。用 EL ISA检测 HBe Ag阳性率仅为 FQ- PCR检测 HBV DNA阳性率的5 5 .4%。结论 FQ- PCR对乙型肝炎早期诊断 ,传染性的判断及疗效考核有临床实用意义     

乙型肝炎表面抗原检测中假性问题探讨

目前国内临床检测乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)多采用 ELISA双抗体夹心一步法 ,该方法检测 HBs Ag时 ,当标本中的 HBs Ag浓度过高 ,可造成假阴性。针对此现象 ,笔者从常规 844例乙肝五项指标检测血清中 ,收集其中 1 0例 HBe Ag、HBc Ab两项阳性 ,而 HBs Ag阴性的血清标本 ,对其稀释后分别进行 ELISA一步法和两步法检测 ,解决因 HBs Ag浓度过高而产生的假阴性问题。材料与方法1　标本来源　从住院及门诊检测乙肝五项指标的患者中选择 1 0例 ,共同特点是 HBe Ag和 HBc Ab的 S/CO>1 .0 (阳性 ) ,HBs Ag的 S/CO<1 .0 (阴性 )。2…     

HBV-DNA荧光定量检测在原发性肝癌患者中的应用价值

目的 :检测原发性肝癌 (PHC) 14 6例血清中乙型肝炎病毒 (HBV) DNA拷贝数 ,进一步研究 HBV感染与PHC关系。方法 :用 EL ISA法检测 PHC14 6例血清中 HBs Ag、HBs Ab、HBe Ag、HBe Ab、HBc Ab;同时采用荧光定量 PCR法 (FQ- PCR)定量检测其血清中 HBV- DNA含量。结果 :14 6例 PHC中 HBVM总感染率达 90 .4 1%(132 / 14 6 ) ,HBV-DNA总阳性率为 5 6 .85 %(83/ 14 6 ) ,平均 HBV- DNA拷贝数为 10 5.36± 1 .32 / ml。在 HBVM各模式组中 ,小三阳组的病例最多占 4 7.95 %(70 / 14 6 ) ,HBV- DNA阳性率为 71.4 3%,平均 HBV- DNA拷贝数为 10 5.0 5± 1 .2 2 / ml;大三阳组例数较少 (7/14 6 ) ,而 HBV- DNA阳性率最高 (10 0 %) ,平均 HBV- DNA拷贝数亦最高达 10 7.0 2± 1 .4 5/ ml。结论 :本研究发现 HBV感染与PHCS发生关系密切 ,HBe Ab的存在与 PHC之间有相关性 ,而 HBc Ab的持续阳性亦可能是 PHC的促发因素之一     

乙肝血清5项指标部分模式HBsAg复检探讨

乙肝病毒表面抗原及其抗体 (HBs Ag、抗 - HBs)、乙肝病毒核心抗体 (抗 - HBc)、乙肝病毒 e抗原及其抗体 (HBe Ag、抗 -HBe) 5项指标 (也称乙肝两对半 )检测对乙肝病毒 (HBV)的感染诊断和在机体内复制程度、传染性强弱判定以及机体对 HBV的免疫力、乙肝疫苗免疫接种效果具有重要意义 ,已列为实验室最常规的乙肝指标检测组合。随着免疫学方法的发展 ,酶联免疫吸附试验 (EL ISA)一步法检测因其快速、简便等已被大多数实验室所采用 ,随之带来乙肝两对半检测模式中 HBs Ag阴性模式增加。为了观察 HBs Ag结果的准确性 ,我们对 5 4份 …     

乙肝病毒标记物阳性表型血清标本HBV-DNA检验分析的应用价值观察

目的对乙肝病毒标记物阳性表型血清标本进行HBV-DNA检验分析,探讨其在乙型病毒性肝炎诊断及治疗中的临床价值。方法抽取2014年3月~2015年11月本院接诊的460例血清检测Pres1、HBs Ab、HBs Ag、HBe Ag、HBe Ab、HBc Ab-Ig M、HBc Ab-Ig G中两项或两项以上呈阳性的患者作为研究对象,采用PCR荧光定量检测法进行HBV-DNA的测量,分析其检测结果。结果 HBe Ab、HBs Ag、HBc Ab-Ig G阳性组合的占比最高,达30.9%,其HBVDNA水平为(5.4±1.3)×104copy/ml。HBs Ag、HBe Ag、HBc Ab-Ig M阳性组合次之,占比22.8%,HBV-DNA水平为(1.2±0.3)×104copy/ml;对照组血清样本中的HBV-DNA含量显著低于研究组,组间比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论通过采用PCR技术对HBV-DNA含量的分析可加强乙型病毒性肝炎诊断的准确性,为患者提供了更加科学可靠的诊治依据。     

涉外婚前检查HBV感染与保健措施

1　对象和方法1.1　对象　 1997- 0 1～ 2 0 0 3- 0 2来我院接受婚前健康检查者2 4 92人 ,男女各 12 4 6人 ,其中涉外婚检对象 12 4 6人 ,国内婚检对象 12 4 6人。1.2　方法　对所有对象进行 HBs Ag筛查 ,一方为阳性者双方均采用 EL ISA法血清标本进行乙肝病毒表面抗原 (HBs Ag)、表面抗体 (HBs Ab )、乙肝病毒 e抗原 (HBe Ag)和 e抗体(HBe Ab)、乙肝病毒核心抗体 (HBc Ab)等标志物 (HBVM)进行检测。2　结果2 .1　人员情况　除中国台湾、香港、澳门外 ,涉及 31个国家 ;在 12 4 6例中 ,中国台湾、香港籍 984人 ,占 78.97% ;其余国…     

定量PCR法检测HBV DNA与HBV血清标志物的相关性

目的　探讨血清HBV DNA水平与HBV血清标志物 ( HBVM)的相关性。方法　对 1 2 48例临床血清标本采用荧光定量 PCR法进行 HBV DNA检测 ,同时采用 ELISA法进行乙肝免疫学对比检测。结果　血清 HBV DNA水平与 HBV血清标志物的表现模式有关。以 HBs Ag( )、HBe Ag( )、HBc Ab( )模式患者的 HBV DNA阳性检出率最高 ,为 97.3 %( 4 99/5 1 3 ) ,DNA平均拷贝数为 8.41× 1 0 7/ml;其次为HBs Ag( )、HBe Ab( )、HBc Ab( )模式 ,HBV DNA阳性检出率为49.4% ( 1 3 3 /2 69) ,平均拷贝数为 2 .3 3× 1 0 5/ml,均显著高于其他 HBVM模式的患者。结论　 HBe Ag和 HBV DNA有明显的相关性。定量检测 HBV DNA能真实反映 HBV复制情况 ,为乙型肝炎的诊断及疗效评价提供客观依据。     

荧光定量PCR检测HBVDNA与血清HBV标志物的关系

目的　探讨荧光定量 PCR检测血清 HBVDNA与血清 HBV标志物的关系。方法　采用酶联免疫吸附法(ELISA)和荧光定量 PCR(FQ- PCR)两种方法同时检测 357份肝炎患者血清 ,并对结果进行对比分析。结果　肝硬化组HBVDNA含量明显低于 HBs Ag携带者组 (P<0 .0 5)。血清 HBs Ag、抗 - HBc、HBe Ag阳性组 HBVDNA含量明显高于HBs Ag、抗 - HBc、抗 - HBe和 HBs Ag、抗 - HBc阳性组 (P<0 .0 1 ) ,而后两组 HBVDNA检出率仍较高。结论　 FQ- PCR可真实反映 HBV感染、复制及病程变化 ,对乙型肝炎临床诊断及治疗均有较大的指导意义     

乙型肝炎患者病毒复制指标与乙肝标志物及肝功能关系分析

目的探讨乙型肝炎患者病毒复制指标(HBV DNA)与乙肝标志物及肝功能的关系。方法对68例乙型肝炎患者采用电化学发光法检测血清中的乙型肝炎e抗体(HBe Ab)、核心抗体(HBc Ab)、e抗原(HBe Ag)、表面抗体(HBs Ab)、表面抗原(HBs Ag)水平。采用实时荧光定量法检测血清中的HBV DNA水平,采用全自动生化仪检测血清中的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和胆碱酯酶(CHE)。结果 HBs Ag/HBe Ag/HBc Ab阳性组(大三阳组)患者血清中的HBV DNA阳性率以及定量结果高于其他组(P0.05);HBe Ag阳性组中HBVDNA的阳性表达率高于HBe Ag阴性组中HBV DNA的阳性表达率(P0.05);HBV DNA载量≤10~3、10~3HBV DNA载量106、HBV DNA载量≥106的患者间血清AST和ALT水平差异有统计学意义(P0.05),随着HBVDNA载量的增加血清AST和ALT显著增加;但三组间的CHE差异无统计学意义(P0.05)。结论乙型肝炎患者HBV DNA水平和乙肝患者的病毒复制情况、炎症程度有着密切的联系,但需要与乙肝标志物结合才能更加客观和准确的评价患者的病情变化和严重程度。     

HBV1896C变异株与乙肝血清标志物的关系

在 HBe Ag阴性患者中 ,有些因前 C区终止密码终止变异 ,导致 HBe Ag合成和分泌障碍 ,但HBV仍在复制 ,这些患者具有传染性。若临床上以HBe Ag阳性作为诊断指标 ,则 HBV1896C有变异的患者就不能得到及时治疗。目前对 HBV1896C变异患者的诊断是进行 HBV DNA测序 ,但测序检测一般实验室难以开展。笔者采用 PCR- ELISA法对 43例 HBs Ag( + ) /HBe Ab( + ) /HBc Ab( + )患者进行 HBV1896c变异株的检测 ,现报告如下。材料与方法1　病例来源　 2 0 0 2年 2～ 6月 ,本院门诊及住院HBs Ag( + ) /HBe Ab( + ) /HBc Ab( + )患者 …     

新生儿血清乙型肝炎病毒表面抗原弱反应性结果分析

目的分析新生儿血清乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)弱反应性的原因。方法将35例父母HBs Ag均为非反应性而新生儿单独出现HBs Ag弱反应性的病例设为观察组,进行乙型肝炎病毒(HBV)DNA检测,于1周后进行HBV感染血清标志物和HBV DNA复检,并与100例HBs Ag为非反应性的对照组进行比较。结果观察组2次HBV DNA检测均5.0×102拷贝/m L。观察组初检HBs Ag水平显著高于1周后复检水平(P0.01),1周后HBs Ag均0.05 IU/m L,呈非反应性;乙型肝炎表面抗体(抗HBs)水平显著低于1周后复检水平(P0.05)。而乙型肝炎e抗原(HBe Ag)、乙型肝炎e抗体(抗HBe)、乙型肝炎核心抗体(抗HBc)水平差异无统计学意义(P0.05)。初检时观察组与对照组新生儿HBV感染血清标志物的2种常见模式进行比较,同样发现抗HBs水平差异具有统计学意义(P0.05),而HBe Ag、抗HBe、抗HBc差异无统计学意义(P0.05)。结论 35例新生儿HBs Ag弱反应性是由于乙型肝炎疫苗注射产生的干扰现象,且干扰时间较短,随着抗体水平的升高,HBs Ag含量随即下降直至为非反应性。     

HBV-DNA与HBV-TRFIA检测结果比较分析

目的　探讨乙肝患者血清 HBV DNA的表达水平及其与乙肝标志物的相互关系 ,了解用 TRFIA法检测 HBV- M,其对应的 HBV- DNA拷贝数。方法　用荧光聚合酶链反应 ( FQ- PCR)对患者进行 HBV-DNA检测 ,同时用 TRFIA法定量测定乙肝表面抗原、表面抗体、e抗原、e抗体和核心抗体指标。结果　在 39例患者血清中检测出 HBV- DNA病毒基因拷贝值范围为 2 .1× 1 0 3～ 3.8× 1 0 8copies/ ml,平均含量为 2 .95× 1 0 6copies/ ml,总阳性检出率为 43.3% ;2 0例 HBs Ag( + )、HBe Ag( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV-DNA阳性为 1 6例 ,阳性检出率为 80 % ;42例 HBs Ag( + )、抗 - HBe( + )、抗 HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 1 7例 ,阳性检出率为 40 .5 % ;9例 HBs Ag( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 3例 ,阳性检出率为33.3% ;1 0例抗 - HBs( + )、抗 - HBe( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 1例 ,阳性检出率为 1 0 % ;3例 HBs Ag( + )、HBe Ag( + )、抗 - HBe( + )、抗 - HBc( + ) ,其 HBV- DNA阳性为 2例 ,阳性检出率为66.7% ;而 2例 HBV- M全 ( - )的 HBV- DNA也全 ( - )。结论　 FQ- PCR是测定乙肝病人血清中 HBVDNA含量较特异、灵敏的方法 ,能反映乙肝病毒的复制水平和活跃程度 ;乙肝血清学标志物定量     

415例HBV感染的不同血清学指标组合的HBV—DNA的检测

目的 了解HBV感染的不同血清学指标组合的HBV－DNA阳性情况。方法 对415份血清同时行ELISA方法测定HBV－M及普通PCR法检测HBV－DNA。结果 HBsAg( )组HBV－DNA阳性率为77．8％（270，347），HBsAg(-)组HBV－DNA阳性率19．1％（13／68），二者差别显著（P＜0．001）。其中153例HBsAg( )HBeAg( )抗HBc( )血清，HBV－DNA全部阳性，阳性率为100％，HBsAg（ ）抗HBe( ）抗HBc( )组血清HBV－DNA阳性率为66．9％（79／118），HBsAg( )抗HBc( )组血清HBV－DNA阳性率为50％（38／76），抗HBs( )组为18％（9／50），9例抗HBs( )抗HBe（＋）抗HBc( )血清中2例HBV－DNA阳性，2例抗HBs( )抗HBc( ）血清中1例HBV－DNA阳性，4例单一抗HBc( )血清中1例HBV－DNA阳性。结论 单凭HBsAg或HBeAg是否阳性来判断肝脏中HBV复制及有无传染性是不够的，易造成部分慢性乙型病毒性肝炎的漏诊，对HBsAg阴性无论抗HBs是否阳性，只要有HBV感染后的任何血清学依据，都应进一步检测血清HBV－DNA作为诊断乙型肝炎的第二步筛选，有条件时肝活检加以证实。     

HBV-DNA定量与HBV模式及肝功损害指标定量关系研究

目的探讨HBV-DNA定量与HBV模式及肝功损害指标定量关系。方法随机抽选369例乙肝或疑似乙肝病毒感染者,荧光定量聚合酶链反应(PCR)对患者血清HBV-DNA定量,酶联免疫吸附法测定乙型肝炎血清标志物模式(HBV-M),采用全自动生化仪进行天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GPT)、总胆红素(TBIL)等肝功指标含量的检测。结果 HBV模式下HBs Ag+HBe Ag+HBc Ab(大三阳)患者的血清HBV-DNA阳性检出率(93.8%)及平均含量对数值(7.31±1.23)明显高于HBs Ag+HBe Ab+HBc Ab(小三阳)患者(P0.05);HBs Ag+HBe Ab+HBc Ab(小三阳)患者的血清HBV-DNA阳性检出率(41.0%)及平均含量对数值(5.03±1.31)低于HBs Ag+HBc Ab患者(P0.05),但均显著高于其他各HBV-M模式(P0.05)。HBV-DNA定量与AST、ALT等肝功损害指标呈正相关性(r=0.235,P=0.014;r=0.254,P=0.009)。结论 HBV-DNA定量与HBV-M模式关系密切,与ALT、AST呈正相关性,定期检测HBV-M和HBV-DNA能全面了解HBV感染、复制以及传染性状态。     

献血者HBsAg阴性HBV DNA阳性血液样本电化学发光检测分析

目的对献血者血液筛查HBs Ag阴性HBV DNA阳性的样本,用电化学发光免疫分析法(ECLIA)和定量核酸(NAT)测定的结果并进行分析。方法对本血站2016年3-11月56 448例无偿献血者血液标本筛查出97例HBs Ag阴性HBV DNA定性检测阳性的样本(实验组)进行HBV DNA定量检测,再与随机抽取的100例HBs Ag和HBV DNA均阴性的样本(对照组)分别进行ECLIA检测HBs Ag和HBc Ab。结果实验组NAT定量检测HBV阳性有55例,其中病毒载量20 IU/m L有36(65.45%)例,病毒载量20 IU/m L有19(34.55%)例,病毒载量范围在(37.4~394)IU/m L(中位数41.3 IU/m L),与NAT定性阳性符合率为56.70%;实验组用ECLIA检出HBs Ag阳性15例,而对照组未检出HBs Ag阳性样本(χ2校正=14.612,P0.05);实验组的HBc Ab阳性率96.91%(94/97)明显高于对照组的38.00%(38/100)(χ2=77.284,P0.05),差异有统计学意义。结论核酸检测技术应用于献血者血液筛查可有效降低隐匿性乙型肝炎的输血传染;电化学发光免疫分析法能降低ELISA漏检HBs Ag风险;HBc Ab在HBV DNA阳性样本中的阳性率较高,可作为血液筛查的补充方法。     

广州番禺地区开展核酸血液筛查的应用情况

目的分析广州番禺地区开展核酸血液筛查以来情况,探讨核酸检测技术(NAT)在血液筛查中的应用价值。方法采用罗氏诊断Cobas S201系统对两遍酶免4项(ELISA)及ALT筛查阴性的献血者标本进行HIV-RNA、HCV-RNA和HBV-DNA 3项联合、6样本混样检测,对混样阳性的样本进行拆分实验,并对拆分阳性的标本进行分项确证实验,对确证实验HBV-DNA阳性的样本进行乙肝两对半血清学标志物的酶免检测。结果共完成40 107例标本的核酸混样检测,拆分阳性的标本60例,阳性率为0.150%(60/40 107)。对这60例样本做分项鉴别实验,结果HBV-DNA阳性47例,阳性率为0.117%(47/40 107),其余13例确认阴性。对47例分项鉴别实验HBV-DNA阳性的样的进行乙肝两对半血清学标志物检测,结果显示:单独HBc Ab阳性15例(31.9%),HBc Ab阳性伴HBs Ab弱阳性15例(31.9%)(其中有2例HBs Ab较强阳性S/CO分别达到14.6、22.3),HBe Ab、HBc Ab阳性8例(17.0%),单独HBs Ab阳性4例(8.5%),两对半全部阴性4例(8.5%),HBs Ab、HBe Ab、HBc Ab 3项阳性的1例(2.1%)。结论血站酶免4项及ALT筛查阴性的血液仍然存在一定的输血传染残余风险,HBs Ag阴性HBV-DNA阳性样本的两对半抗体阳性组合模式有6种,以单独HBc Ab阳性和HBc Ab阳性伴HBs Ab弱阳性占比最大。应用ELISA联合NAT进行血站血液筛查能更有效保障血液安全。     

荧光定量聚合酶链反应对乙型肝炎病毒的检测分析

1　对象和方法1.1　对象　 5 30例乙肝患者来自 2 0 0 1- 0 1～ 2 0 0 1- 12我院消化内科门诊 ,男 310例 ,女 2 2 0例 ,男∶女为 1.4 1∶ 1,年龄在 12～6 0岁。其中病毒的标志物为大三阳 (即 HBs Ag、HBe Ag及抗 -HBc均为阳性 )者 310例 ,小三阳 (即 HBs Ag、抗 - HBe及抗 - HBc均为阳性 )者 2 2 0例 ,诊断符合 1995 - 0 5北京第五次全国传染病和寄生虫病会议讨论修订的病毒性肝炎诊断标准方案 (试行 )。1.2　方法　采用荧光定量聚合酶链反应 (FQ- PCR)方法对血清中 HBV进行定量检测 ,血清 HBV- DNA定量测定正常参考阈值为 <10 …     

HBsAg阴性献血者血清(浆)HBV DNA检测的意义

目的　明确HBsAg阴性献血者血清 (浆 )HBVDNA检测的应用价值。 方法　采用聚合酶链反应 (PCR)检测HBsAg阴性献血者血清 (浆 )HBVDNA。如HBVDNA为阳性 ,则进一步检测乙肝“两对半”血清学指标。结果　 5 0 0份标本中有 1 4份为HBVDNA阳性 ,检出率为 2 .8%。进一步检测其它HBV感染的血清学指标 ,发现这 1 4份标本中有 5份表现为抗 HBs、抗 HBe和抗 HBc一项或两项阳性。对HBVDNA的定量测定表明 ,其含量在 1 0 4～ 1 0 6拷贝数 /ml。结论　为尽可能减少输血后HBV感染的发生 ,有必要采用PCR方法检测HBsAg阴性献血者血清 (浆 )HBVDNA     

RF对ELISA检测血清HBeAg假阴性干扰的分析

目的证实类风湿因子(RF)对酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎e抗原(HBe Ag)假阴性干扰的存在。方法收集乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)、HBe Ag均阴性而RF阳性新鲜血清样本,与HBe Ag阳性对照品9∶1混合配成HBe Ag阳性且RF阳性的试验样本,分别用不同的ELISA试剂检测样本的HBe Ag。使用RF吸附乳胶对干扰样本进行预处理,比较预处理前后HBe Ag水平的变化。结果试验中RF对3种不同厂商生产的HBe Ag ELISA试剂均有不同程度的假阴性干扰。9例假阴性样本预处理后有7例转为阳性。结论 RF可影响ELISA检测HBe Ag的S/CO值,引起假阴性结果,样本预处理可以有效消除大部分RF的干扰。     

HBsAg阴性献血员群体中出现乙型肝炎病毒感染后抗体标志

[引言]血液中出现一种或几种乙型肝炎病毒(HBV)抗原决定簇的抗体(抗HBs、抗HBc和抗HBe),可以作为接触过HBV的血清学证据。在这方面,对抗HBs的研究最为广泛。这一指标在输血方面有实际意义,因为抗HBs阳性血液被看作是非传染性的血。抗HBc的出现是过去感染HBV的一个非常敏感的标志,也是HBV活性复制的标志。血清中检出抗HBc是HBV存在的唯一标志,因此输给HBsAg阴性的人可以导致输血后乙