双溴代马蹄金素衍生物的合成及其抗HBV活性

目的合成马蹄金素[N-（N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基）-O-乙酰基-L-苯丙氨醇,MTS]的类似物,以期寻找到高效低毒的抗乙肝病毒化合物。方法以6,8-二溴-L-酪氨酸为起始原料,通过酯化、酰化、水解、烷基化等反应,合成马蹄金素衍生物并对其进行体外抗乙肝病毒活性测试。结果合成了11个双溴取代的马蹄金素衍生物,在人肝癌细胞HepG2.2.15上对其中的9个化合物进行活性测试,其结果显示,化合物5c、5d、7b、7c在8μg·mL-1的浓度下具有较好的抑制活性,其抑制率分别为44.8%、48.8%、37.3%、38.4%。结论化合物5a在20μg·mL-1的浓度下具有较高的抑制活性,其抑制率达到89.8%,具有进一步研究开发的价值。     

马蹄金素衍生物的合成及抗乙肝病毒活性

以化合物马蹄金素[N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇,MTS]为先导化合物,设计并合成了10个马蹄金素衍生物,所有化合物均为新化合物,其结构经NMR、ESI-MS确认。以HepG2 2.2.15细胞为乙肝病毒载体,对合成的马蹄金素衍生物进行了抗乙肝病毒活性测试。结果表明,在测试浓度范围内,化合物5e(IC50:10.67μmol/L,SI:47.26)、4c(IC50:11.09μmol/L,SI:15.03)、4b(IC50:19.75μmol/L,SI:4.74)、5b(IC50:59.55μmol/L,SI:3.00)和5a(IC50:77.69μmol/L,SI:5.81)对乙肝病毒DNA复制的抑制活性高于阳性对照药物拉米夫定(IC50:82.42μmol/L,SI:41.59)。其中,化合物5e(IC50:10.67μmol/L,SI:47.26)的抑制活性最强,选择指数较高,具有进一步研究开发的价值。     

氮杂环马蹄金素衍生物的合成及抗HBV活性

目的:对苗药马蹄金的活性成分马蹄金素[N-(N-苯甲酰基-L-苯丙氨酰基)-O-乙酰基-L-苯丙氨醇,MTS]进行结构修饰,以期获得抗乙肝病毒(HBV)活性更好、毒性更低目标分子。方法:以MTS为先导化合物,设计合成一系列含氮杂环取代的MTS衍生物并对其进行抗HBV活性测试。结果:合成了新的MTS衍生物共计6个,经体外活性筛选结果显示有3个衍生物具有抗HBV活性。结论:化合物4b、6b、6c显示较好的抗HBV活性,说明含氮杂环取代的苗药马蹄金的活性成分MTS衍生物值得深入研究。     

B环溴取代的白杨素衍生物合成及其抗癌活性

目的 研究B环溴取代白杨素衍生物的体外抗癌活性.方法 合成B环溴取代的白杨素衍生物.并通过MTT法检测其对人急性粒细胞性白血病(HL-60)细胞、人结肠癌(HT-29)细胞和人胃癌(SGC-7901)细胞增殖抑制作用.结果 合成了3个B环溴取代白杨素衍生物.结论 B环溴取代白杨素衍生物具有良好的抗癌活性(IC50=1.15～5.63μmol/L).     

含芳杂环取代的马蹄金素衍生物的设计、合成及抗乙肝病毒活性

以马蹄金素(MTS)为先导化合物,设计、合成了11个新的含芳杂环取代的马蹄金素衍生物,其结构经NMR、ESI-MS确认。采用HepG2 2.2.15细胞为乙肝病毒载体,评价目标化合物的抗HBV活性。结果表明,化合物7a［IC₅₀=2.94 μmol/L,选择指数(SI)=146.39］和9a(IC₅₀=2.21 μmol/L,SI>250)对HBV DNA复制的抑制活性高于先导化合物MTS(IC₅₀=11.16 μmol/L,SI=10.78),且具有更高的SI,提示该化合物在治疗HBV感染时具有更高的安全性,具有潜在的研究开发价值。     

芹菜素诱导人肝癌Hep G2细胞分化

目的:研究芹菜素诱导人肝癌Hep G2细胞分化作用。方法:体外培养人肝癌Hep G2细胞,瑞氏-姬姆萨和考马斯亮蓝染色观察Hep G2细胞形态和微管蛋白排列的变化。放射免疫法检测细胞液甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein,AFP);酶促反应试剂盒检测细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)和γ-谷胺酰转肽酶(γ-glutamyltranspeptidase,γ-GT)的活性;Diamondstone分光光度法测定细胞酪氨酸α-酮戊二酸转氨酶(tyrosine-α-Ketoglutaric acid transaminase,TAT)的含量。结果:10μmol/L芹菜素和全反式维甲酸处理人肝癌Hep G2细胞48小时后,细胞的形态和微管微丝由肿瘤细胞向成熟细胞分化;细胞AFP的分泌和γ-GT的合成显著降低(P<0.01);ALP和TAT的合成则显著升高(P<0.01)。结论:全芹菜素具有诱导人肝癌Hep G2细胞分化作用。     

白杨素衍生物的合成及其抗肿瘤活性

利用Baker-Venkataraman重排法,以2,4,6-三羟基苯乙酮为原料,经羟基保护、酰化、重排、成环、脱保护5步反应全合成白杨素。以白杨素为骨架,再利用7位羟基的活性,在C-7位引入水溶性基团——烷胺基,设计合成了未见文献报道的21种白杨素系列衍生物8a-8u,其结构经¹H NMR、¹³C NMR、IR和MS确证。采用MTT法评价了目标化合物对HCT-116(人体结肠癌细胞系),HeLa（人体宫颈癌细胞系）,DU-145（人体前列腺癌细胞系）,SGC-7901(人体胃癌细胞系)和HEK-293(人胚肾细胞系)的抗肿瘤活性。其体外抗肿瘤活性实验表明,7-(2-哌嗪乙氧基)-5-羟基-2-苯基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(8o)具有较好的抗肿瘤活性。     

丹参素及其衍生物的合成

目的：探讨丹参素的合成方法，并以苯基乳酸为先导化合物，通过设计、合成衍生物，对其进行结构修饰。方法：使用硼氢化钾代替锌汞齐还原羰基，通过乙酰化反应对丹参素及其衍生物进行结构修饰。结果：使用硼氢化钾将羰基还原成羟基，合成了丹参素及其衍生物的乙酰化产物，经^1H—NMR证实其结构。结论：使用硼氢化钾还原羰基，产物单一，条件温和，易于控制。     

穿心莲内酯衍生物的合成及其抗炎免疫活性

目的合成穿心莲内酯衍生物,并进行抗炎免疫活性研究,比较不同结构穿心莲内酯衍生物的活性。方法以穿心莲内酯(A)为底物合成了14-去氧-11,12-二去氢穿心莲内酯(DDA)、14-去氧穿心莲内酯(DA)、异穿心莲内酯(IA)、穿心莲酸(AA)等穿心莲内酯衍生物。采用蛋清致大鼠足肿胀模型观察穿心莲内酯衍生物的抗炎活性,小鼠碳粒廓清实验观察其免疫活性。结果目标物结构经红外、质谱、核磁共振氢谱确证。穿心莲内酯衍生物A、DDA、DA、IA、AA均有较好的抗炎活性;A、DDA、DA、AA有显著的免疫抑制作用,而IA无免疫抑制作用。结论初步生物活性实验表明:穿心莲内酯类化合物的抗炎活性与双键的位置有关,具有环内双键的穿心莲内酯类化合物较具有环外双键的抗炎活性强,IA的四氢呋喃环可能增强抗炎作用;穿心莲内酯类化合物的免疫抑制作用与双键位置有一定关系,具有环外双键的较具有环内双键的免疫抑制作用强,IA无免疫抑制作用可能与其四氢呋喃环有关;A的五元内酯开环物AA的活性与母体相当,说明五元内酯环打开与否和抗炎免疫作用无关。     

新型二硫代二丙酰胺类衍生物的设计合成及其血管内皮细胞保护活性

目的 以卡托普利为先导化合物,设计合成一类新型二硫代二丙酰胺类衍生物,并考察其血管内皮细胞保护活性。方法 保留先导物卡托普利结构上的巯基丙酰胺骨架和侧链甲基,对脯氨酸片段进行结构改造并进行二聚化,设计合成了5个二硫代二丙酰胺类衍生物。以人脐静脉内皮细胞为实验细胞株,利用400 μmol/L过氧化氢溶液刺激3 h建立氧化诱导损伤细胞模型,以卡托普利为阳性对照药测试目标化合物对血管内皮细胞的保护活性。结果 所有目标化合物结构均通过核磁共振波谱（¹HNMR、¹³CNMR）和电喷雾电离质谱法（ESI-MS）确证。初步的血管内皮细胞保护活性测试结果表明,除化合物4c外4个目标化合物均具有不同程度的血管内皮细胞保护活性,其中化合物4e即3,3’-二硫（N-（［1,1’-联苯］-3-基甲基）-2-甲基丙酰胺）活性最优。结论 将卡托普利分子结构上的脯氨酸替换为4-甲基苄胺及4-叔丁基苄胺等相对较大的疏水性片段并进行二聚化,能显著改善其血管内皮细胞保护活性。     

高效液相色谱法测定桔梗中木犀草素与芹菜素的含量

目的采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定桔梗中木犀草素和芹菜素的含量。方法采用Alltima C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.5%磷酸(35∶65)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长340nm,柱温25℃。结果木犀草素和芹菜素质量浓度分别在11.20～67.20μg/ml(r=0.999 6)和12.25～73.50μg/ml(r=0.999 9)范围内与峰面积呈现良好的线性关系;木犀草素和芹菜素平均加样回收率分别为99.03%、99.71%,RSD分别为0.77%、1.38%(n=6)。结论 HPLC简便、准确、可靠,可用于中药桔梗中木犀草素和芹菜素的含量测定。     

一种新型阿魏酸NO供体的合成

目的:依据药理学相关理论,设计并合成一种新型阿魏酸NO供体衍生物.方法:以阿魏酸为原料,经过羧基的酯化,溴化物取代以及硝化反应,合成阿魏酸NO供体衍生物.结果:共得到两个目标产物,分别是4-硝酸酯丙氧基-3-甲氧基苯丙烯酸甲酯和4-硝酸酯丁氧基-3-甲氧基苯丙烯酸甲酯,结构经1H NMR和质谱进行了确证.结论:首次合成...     

芹菜素对雌性大鼠性周期的影响

目的探索芹菜素对正常雌性大鼠性周期的影响。方法选取16只性周期规律(4日为一个性周期)的S-D雌性大鼠,随即分为两组,芹菜素灌胃组(实验组)和三蒸水灌胃组(对照组),每组8只,于间情Ⅱ期给实验组大鼠用芹菜素(10mg/100g体重)一次性灌胃,对照组大鼠给三蒸水(2m l/只)灌胃,然后每日早晚两次做阴道涂片,连续一个月观测阴道上皮细胞的周期性变化。结果实验组大鼠的性周期缩短,其中情前期和间情Ⅱ期缩短最显著,而情期延长。结论芹菜素能够明显干扰雌性大鼠的生殖内分泌,缩短其性周期。     

侧脑室注射芹菜素对情期雌性大鼠生殖轴影响的研究

目的 通过动物实验探讨芹菜素在生殖轴调控中的作用及作用部位。方法 通过阴道涂片选用处于情期的成年雌性SD大鼠,分别于侧脑室注入人工脑脊液、DMSO、10^7mol／L芹菜素,正常食水分别饲养3d、5d后断头取血、腺垂体、卵巢。应用放射免疫方法分别测定血清、垂体组织、卵巢组织中FSH、LH、E2及P含量。结果侧脑室注射芹菜素,引起FSH、LH、E2及P的水平明显降低。结论 芹菜素在下丘脑水平发挥作用,使FSH、LH、E2、P的含量减少。     

芹菜素对大鼠生精细胞凋亡作用的影响

目的研究芹菜素对大鼠生精细胞凋亡的影响。方法应用percoll不连续密度梯度分离培养大鼠睾丸生精细胞,应用流式细胞术观察芹菜素对生精细胞凋亡的影响。结果芹菜素作用于大鼠生精细胞,FCM分析显示芹菜素能促进生精细胞凋亡,并呈剂量依赖方式。结论芹菜素能呈剂量依赖式促进睾丸生精细胞凋亡。     

侧脑室注射芹菜素对情期雌性大鼠生殖激素含量影响的研究

目的 探讨芹菜素在生殖轴调控中的作用及作用部位。方法 通过阴道涂片选用情期成年雌性大鼠50只，随机分为五组，分别侧脑室注入人工脑脊液、二甲基亚砜、芹菜素10^-5M、hCG及芹菜素10^-5M＋hCG，各组再分为3d组、5d组。分别于侧脑室注射后的3d、5d断头取血、卵巢及垂体，应用放射免疫方法分别测定血清、卵巢组织及垂体组织中FSH、LH、E2及P含量，以观察浓度为10^-5M的芹菜素对生殖轴的作用。结果 1．人工脑脊液组与二甲基亚砜组无明显差异。2．单用100^-5芹菜素组与人工脑脊液组相比FSH、LH、E2、P的含量数值小，其差异有显著性。3．单用hCG组与人工脑脊液组相比FSH、LH的含量数值小，而E2、P的含量数值大，其差异均有显著性。4．10^-5M M芹菜素与hCG合用组与单用10^-5M芹菜素组相比FSH及LH的含量数值小，而E2、P的含量数值大，其差异均有显著性。5．10^-5M芹菜素与hCG合用组与单用hCG组相比FSH、LH的含量数值大，而E2、P的含量数值小，其差异均有显著性。结论 芹菜素在下丘脑水平发挥作用，进而作用于腺垂体、卵巢。10^-5M芹菜素能够抑制FSH、LH的合成，从而抑制E2、P的分泌。10^-5M芹菜素与hCG合用时可表现出抗雌激素的作用。     

芹菜素选择性抑制人胃癌细胞活力和诱导细胞凋亡

目的:对比研究芹菜素对人胃癌BGC-823细胞和永生化人胃粘膜上皮GES-1细胞活力和细胞凋亡的影响。方法:体外培养BGC-823和GES-1细胞。MTS比色法测定细胞活力。PI染色FCM分析细胞凋亡率。ELISA法检测细胞Caspase-3活性。结果:芹菜素对BGC-823细胞活力有显著抑制作用(P<0.05),呈浓度依赖性,其IC50是22μmol/L;然而,对GES-1细胞活力抑制作用弱,其IC50达到77μmol/L;选择指数是3.5(77/22)。芹菜素选择性诱导BGC-823细胞Sub G1百分率增高(P<0.05),同时,活化BGC-823细胞Caspase-3(P<0.05)。结论:芹菜素具有选择性抑制人胃癌BGC-823细胞活力和诱导细胞凋亡作用。     

玉米须药材中芹菜素及微量元素含量测定

目的:分析玉米须中芹菜素及微量元素的含量,为玉米须的质量评价提供理论依据。方法:采用高效液相色谱法测定芹菜素的含量,采用原子吸收光谱法测定玉米须中铜、铁、镁、钾、锌元素的含量。结果:不同产地玉米须中芹菜素及微量元素含量差异较大。芹菜素的含量为0.000 6%~0.034 1%,Cu、Fe、Mg、K、Zn的含量范围分别为3.32~20.12μg·g~(-1)、0.14~0.66μg·g~(-1)、2.23~3.39μg·g~(-1)、0.82~6.73μg·g~(-1)、0.01~0.45μg·g~(-1)。结论:本研究所建立的芹菜素及微量元素测定方法稳定,可为玉米须饮片的质量控制提供依据。     

API通过耗竭GSH抑制人肝癌Hep G2细胞活性和诱导凋亡

目的:研究芹菜素(apigenin,API)是否通过耗竭谷胱甘肽(glutathione,GSH)诱导人肝癌Hep G2细胞活性抑制和凋亡。方法:体外培养Hep G2细胞。分光光度法测定细胞GSH水平。MTS比色法测定细胞活力。PI染色FCM分析细胞凋亡率。结果:API降低Hep G2细胞GSH水平(P<0.05),呈浓度依赖性。API以浓度依赖方式抑制Hep G2细胞活性(P<0.05),同时,诱导Hep G2细胞Sub G1百分率增高(P<0.05);500μM GSH预孵育30min,能有效阻断API降低细胞GSH水平、抑制细胞活性和诱导细胞凋亡作用(P<0.05)。结论:API通过耗竭细胞GSH抑制Hep G2细胞活性和诱导细胞凋亡。