原位肝移植中下腔静脉逆灌注法对胆道并发症的影响

目的探讨原位肝移植中下腔静脉逆灌注法对肝移植术后胆道并发症的影响。方法对我院1999年10月至2007年10月间肝移植生存1年以上的86例病例进行回顾性分析。其中经典原位肝Σ植组36例、下腔静脉逆灌注原位肝移植组50例,观察各组胆道并发症的发生情况,分别对两组早期及晚期胆道并发症发生率进行统计分析。结果所有患者随访时间1个月～8年,总共有12例发生胆道并发症,发生率为13.95%。①原位肝移植组36例,5例发生胆道并发症,发生率为13.89%。其中2例为早期并发症 另3例为晚期并发症,5例患者经保守治疗后有好转。②下腔静脉逆灌注法原位肝移植组50例,7例发生胆道并发症,发生率为14%。其中3例为早期并发症,1例死于合并腹腔感染,2例经保守治疗后好转。另4例为晚期并发症,经保守治疗后好转。分别对两组早期及晚期胆道并发症发生率进行统计分析,无显著差异。结论下腔静脉逆灌注法并没有增加肝移植术后胆道并发症发生率。     

大鼠自体原位肝移植逆灌注法对急性肺损伤的影响

目的探讨大鼠自体原位肝移植术中经下腔静脉逆灌注与经门静脉顺灌注法对急性肺损伤的影响。方法SD大鼠24只随机分成逆灌注组、顺灌注组、假手术组,分别建立大鼠自体原位肝移植逆灌注、顺灌注和假手术模型,检测3组术后6h腹主动脉血气、肺髓过氧化物酶活性、肺干湿重比值及肺组织病理形态学变化。结果与假手术组比较,逆灌注组、顺灌注组的动脉血pH值、PaO2、肺干湿重比值明显降低,肺髓过氧化物酶活性显著增高,差异均有统计学意义（P〈0．05）。与顺灌注组比较,逆灌注组动脉血pH值、PaO2、肺干湿重比值升高,肺髓过氧化物酶活性降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。逆灌注组、顺灌注组术后肺组织均存在急性损伤病理表现,逆灌注组损伤程度有所减轻。结论大鼠自体原位肝移植逆灌注法、顺灌注法后均存在急性肺损伤,逆灌注法较顺灌注法损伤程度要轻。     

The efficacy of N-acetylcysteine as a hepatoprotective agent in liver transplantation

Abstract One of the most common complications after liver transplantation is primary graft dysfunction which results from severe deterioration of the microcirculation. The data obtained from our experimental studies indicate that N-acetylcysteine (NAC) is able to reduce the severity of ischemia/reperfusion injury and improves postoperative graft function after liver transplantation in rats. The aim of this pilot study was to evaluate the efficacy of NAC as a hepatoprotective agent under clinical conditions. A group of 30 liver transplanted patients were treated with NAC, and 30 patients (control group) were treated with a 5 % solution of glucose only. In the NAC group we observed a distinct reduction in ischemia/reperfusion injury and improved liver function with less elevated peak transaminases, better macrocirculation, improved liver synthesis function and a lower incidence of primary nonfunction compared with the control group. We conclude that NAC is a very promising substance for reducing graft dysfunction in clinical liver transplantation.     

Tauroursodeoxycholate ameliorates reperfusion injury after pig liver transplantation

Reperfusion injury is a serious problem after clinical liver transplantation, often leading to dys- or even non-function of grafts. The present study was designed to determine whether the hydrophilic bile salt tauroursodeoxycholate (TUDC), known to be hepatoprotective in cholestatic liver disease, mitigates reperfusion injury in an in vivo pig liver transplantation model. Liver transplantation was performed in 12 pigs after a preservation time of 8 h. TUDC was administered to donor and recipient animals, and saline to controls. Blood was drawn at different time points for determination of liver enzymes. Bile samples were collected, and bile flow (BF), and bile salt secretion rate (BSSR) determined. Samples of liver tissue and bile ducts were taken for assessment by light and electron microscopy. Liver enzymes were significantly lower in the TUDC group. BF and BSSR were significantly higher. Microscopy revealed better preservation of bile duct architecture of the TUDC-infused animals. We can conclude that infusions of TUDC in pig livers ameliorate reperfusion injury in vivo. The molecular basis for this finding may be the membrane stabilizing effect of TUDC. Further studies are warranted to clarify its effect. Received: 19 February 1999 Received after revision: 23 August 1999 Accepted: 16 September 1999     

肝移植逆灌注对术后早期肾功能的影响

目的 探讨肝移植术中逆灌注法对术后早期肾功能的影响.方法 回顾性分析2005年1月至2009年12月南京军区福州总医院肝移植生存期1年以上患者82例.根据其手术方式的不同分为经典原位肝移植组（经典组）29例,下腔静脉逆灌注的原位肝移植组（逆灌注组）53 例.分别测定两组下腔静脉阻断时间、术中输液总量和输血制品总量、移植术后7 d 急性呼吸窘迫综合征（ARDS）发生率、术后7 d尿量,以及术后1 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d血肌酐和血尿素氮.结果 逆灌注组的下腔静脉阻断时间显著短于经典组（P 〈 0.05）.逆灌注组的输液总量和输血制品总量均显著少于经典组（P 〈 0.05）.两组患者术后7 d ARDS发生率无明显差异,术后7 d尿量差异无统计学意义.肌酐术后1 d、3 d、5 d显著低于经典组（P 〈 0.05）.逆灌注组术后1 d、2 d、5 d尿素氮水平显著低于经典组（P 〈 0.05）.结论 与经典原位肝移植术相比,下腔静脉逆灌注肝移植更利于早期肾功能的恢复.     

原位肝移植逆灌注法对术后肺部并发症的影响

目的对比经典原位肝移植术和下腔静脉逆灌注肝移植术的围术期液体处理情况,并探讨两种手术方式对术后肺部并发症的影响。方法回顾性分析我院从2003年1月至2008年12月行肝移植手术的终末期肝病患者169例,根据手术方式的不同分为经典原位肝移植组（经典组）46例和下腔静脉逆灌注原位肝移植组（逆灌流组）123例。观察两组在不同Meld评分下两组患者肺部并发症的发生情况。分析比较两组患者围术期相关因素与术后肺部并发症情况的相关性。结果在Meld评分≤15分和15~25分的情况下,逆灌流组的肺部并发症显著低于经典组。逆灌流组和经典组相比,术中输液总量〉10L和输血液制品总量〉4L的患者明显减少（P=0.023和P=0.040）,术后前3d至少有2d的液体平衡≤-300ml的患者明显增多（P=0.048）。结论与标准经典原位肝移植术相比,下腔静脉逆灌注肝移植能够降低术后肺部并发症的发生率。     

蛋白酶抑制剂对大鼠肝缺血再灌注和原位肝移植后肝功能的保护作用

目的 探讨中性粒细胞及蛋白酶抑制剂在大鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法 建立大鼠热缺血再灌注及原位肝移植模型。检测血清谷丙转氨酶（ＡＬＴ）、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、肝脏髓过氧化物酶（ＭＰＯ）含量,观察肝脏病理组织学改变,定量计数浸润的中性粒细胞等,热缺血组于缺血前用药,缺血４５ｍｉｎ后再灌注４ｈ取样,移植组于受体术前１ｈ用药,移植４ｈ后取样。结果 对照组ＡＬＴ,ＬＤＨ,ＭＰＯ均较实验组显著升高（Ｐ〈０．０１）。组织学观察肝组织损害较重,中性粒细胞浸润明显,与实验组相比有显著差异（Ｐ〈０．０１）。结论 肝脏冷、热缺血再灌注损伤时中性粒细胞参与并起了重要的作用。而应用蛋白酶掏剂抑肽酶（ＡＰ）可以减轻缺血再灌注损伤的程度。并对肝脏功能有保护作用。     

肝移植缺血再灌注损伤的比较蛋白质组学研究

目的 研究肝移植手术中供体肝组织缺血一再灌注损伤的蛋白质变化规律.方法 2009年3月,对3例肝移植供肝于3个时间点切取肝组织标本进行对照研究:(1)新鲜的供肝组织;(2)经过缺血降温保存后修整完毕,但未经血管吻合的肝脏组织;(3)复流后的供肝组织.通过2DE-MALDI-TOF和质谱技术,对上述3个时间点的蛋白表达作出比较.结果 本研究共分离出1580个蛋白点,其中与缺血再灌注损伤有关的蛋白19个.结合19个蛋白质的功能,对这些蛋白质的变化特征进一步分析.结论 我们发现了与肝移植手术中供肝缺血性损伤和再灌注损伤相关的蛋白质,并首次揭示了这些蛋白质在不同损伤阶段独立的变化规律.     

熊去氧胆酸减轻移植肝缺血再灌注损伤的临床前瞻性随机对照研究

目的 探讨熊去氧胆酸(UDCA)减轻移植肝缺血再灌注损伤(IRI)的临床效果.方法 将80例终末期肝病成人患者随机分为两组,一组42例,肝移植术后第1天起给予UDCA 10～15 mg·kg-1·d-1,维持治疗3个月,为UDCA组;另一组38例肝移植患者不使用UDCA,作为对照.分析两组术后3周内的肝生化指标、"严重IRI致移植物功能恢复延迟"、急性细胞性排斥反应(ACR)及药物性肝损伤的发生情况,以及术后3个月内血管及胆管并发症、患者死亡率、病毒性肝炎和原发性肝病复发情况.结果 UDCA组供肝热缺血时间和冷缺血时间分别为(3.33±0.92)min和(10.3±1.9)h,对照组分别为(3.68±1.16)min和(9.8±2.4)h,两组间的差异无统计学意义.UDCA组术后第7、14及21天的血清丙氨酸转氨酶显著低于对照组(P＜0.05),第7天的天冬氨酸转氨酶(AST)和γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)也显著低于对照组(P＜0.05);两组其它时段AST、γ-GT及各时段胆红素总量、直接胆红素及碱性磷酸酶水平的差异均无统计学意义.UDCA组"严重IRI致移植物功能恢复延迟"发生率为9.5%(4/42),对照组为26.3%(10/38),两组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组术后3周内ACR发生率和严重程度、药物性肝损伤发生率及术后3个月内胆管和血管并发症发生率的差异无统计学意义,患者死亡率的差异也无统计学意义.结论 UDCA可有效减轻移植肝的缺血再灌注损伤,降低"严重IRI致移植物功能恢复延迟"的发生率;但在冷缺血时间＜12 h的情况下,未能显示出保护胆管的临床效果.     

冷保存再灌注损伤对大鼠移植肝术后早期胆盐分泌的影响

目的 探讨大鼠移植肝脏经历冷保存再灌注损伤（CPRI）后胆盐谱的变化规律。方法 建立专门用于胆汁胆盐检测的柱前衍生反相高效液相色谱法（RP—HPLC）。大鼠被随机分为对照组（A组,n=6）、供肝冷保存1h组（B组,n=6）和供肝冷保存12h组（C组,n=6）。对各组大鼠术后14d的胆汁标本进行RP—HPLC分析。结果 共检出11种胆盐。CPRI可以显著影响大鼠移植肝胆盐的组成,主要表现为疏水性的牛磺胆酸和牛磺脱氧胆酸比重的持续增加以及亲水性的牛磺猪脱氧胆酸和牛磺熊脱氧胆酸比重的一过性升高。术后1～4d,胆盐疏水指数（HI）无显著变化;从术后5d开始,胆盐HI显著上升,术后7～10d达到高峰。且供肝冷保存时间越长,HI升高越显著。结论 经历CPRI后,移植肝胆汁疏水性胆盐比重的上升可能是导致胆汁细胞毒性增加的主要原因之一。     

大鼠肝脏移植再灌注细胞凋亡与凋亡调控的研究

目的：探讨大鼠肝脏组织再灌注后细胞凋亡及其调控机制。方法：SD大鼠132只，进行原位肝移植，取灌注保存及再灌注后的肝脏组织。采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法和逆转录多聚酶链反应，检测肝组织中的凋亡细胞及bcl-2 mRNA、bax mRNA和Fas mRNA。结果：肝移植再灌注后，大鼠肝脏组织标本中凋亡细胞尤其明显。肝脏冷灌注保存180min时，未检测到凋亡抑制基因bcl-2的表达，但可明显检测到bax和Fas基因的表达。移植再灌注后，可检测到bax和Fas基因及凋亡抑制基因bcl-2。结论：移植再灌注肝组织中，细胞凋亡是早期细胞死亡的重要原因，其发生可能与凋亡诱导基因bax和Fas的高表达以及凋亡抑制基因bcl-2的低表达有关。     

环氧合酶2在大鼠肝移植缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨环氧合酶2(COX-2)在大鼠肝移植缺血再灌注损伤中的表达及其作用机制.方法 54只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为3组:正常对照组(6只);肝移植组(24只);干预组(24只).RT-PCR法检测COX-2 mRNA的表达;免疫组织化学染色显示COX-2阳性细胞的分布情况;ELISA法检测血清TNF-α和IL-10的含量.采用单因素方差检验分析各检测指标结果.结果 各组血清学检测指标和TNF-α表达变化与移植肝的组织学损伤相一致.COX-2 mRNA的表达为肝移植缺血再灌注损伤机制所必需,抑制其表达可加重移植物缺血再灌注损伤.结论 COX-2参与了肝移植缺血再灌注损伤,并且是重要效应分子,可能起到了降低移植物缺血再灌注损伤的保护性作用.     

Lazaroid U-74389G预处理对大鼠心脏停搏供体肝移植缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨在心脏停搏供体肝移植中 ,LazaroidU 74 389G预处理对大鼠供肝热缺血损伤的保护作用。方法实验以U 74 389G预处理与否、以及供肝获取前经历的心脏停搏时间 4 5或6 0min分为 4组 ,分别为N 4 5组、N 6 0组、tN 4 5组和tN 6 0组 ,而后行大鼠原位肝移植 ,比较各组术后存活率、肝功能、MDA和肝脏病理学改变。结果N 4 5组、N 6 0组、tN 4 5组和tN 6 0组肝移植术后1周的存活率分别为 2 5 % (2 / 8)、0 (0 / 8)、5 8% (7/ 12 )和 33% (4/ 12 )。U 74 389G的预处理可以显著提高心脏停搏供体肝移植的存活率 ,并能够改善术后肝功能和减轻肝脏病理学改变 ,降低MDA的表达。结论在心脏停搏供体肝移植中 ,U 74 389G预处理可以减轻热缺血再灌注对供肝造成的损伤 ,提高肝移植存活率     

丙酮酸乙酯预先给药对原位肝移植术大鼠肝损伤的影响

目的 评价丙酮酸乙酯预先给药对原位肝移植术大鼠肝损伤的影响.方法 成年健康雄性SD大鼠40只,体重220～ 250 g,作为肝移植术的供体和受体.采用随机数字表法,将受体大鼠随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、肝移植组(LT组)和丙酮酸乙酯组(EP组).S组仅行单纯开关腹手术,LT组和EP组分别采用二袖套法建立大鼠原位肝移植模型,EP组于切皮前1h时尾静脉注射丙酮酸乙酯40 mg/kg.于新肝期2h时采集静脉血样,检测血清ALT和AST的活性;取肝中叶组织检测MDA含量和SOD活性.结果 与S组比较,LT组和EP组血清ALT、AST的活性和肝组织MDA含量升高,SOD活性降低(P＜0.05或0.01);与LT组比较,EP组血清ALT、AST的活性和肝组织MDA含量降低,SOD活性升高(P＜0.05或0.01).结论 丙酮酸乙酯预先给药可减轻原位肝移植术大鼠肝损伤.     

rhIL-10在大鼠肝移植再灌注损伤和急性排斥反应中的作用

目的：我们通过大鼠原位肝移植，探讨了重组人白介素10（rhIL-10)对肝移植后再灌注损伤和急性排斥反应的影响。方法：供体ACI（RTI^a)大鼠，受体为LEW（RTI^1)大鼠，rhIL-10的注射分别为0、2、10、50μg.kg^-1.d^-1。结果：rhIL-10 10μg.kg.d^-1治疗组的平均生存时间比对照组显著延长（P＜0．01），其平均血清和组织中CINC浓度与且相比明显减少（P＜0．05），rhIL-10治疗组于再灌注后12h平均末梢血中性粒细胞总数与对照组相比明显减少（P＜0．05），10μg.kg^-1.d^-1治疗组在移植后7－10d的末梢血中性粒细胞总数与对照组相比差异有显著意义（P＜0．05），移植后第1天和第7天rhIL-10治疗组的肝损伤程度和白细胞浸润程度比对照组减轻。结论：rhIL-10抑制了肝移植后再灌注损伤和急性排斥反应时CINC的生成，延长了肝移植后生成时间。     

供肝两种再灌注方式对肝移植术后早期肝功能影响的对比研究

目的探讨原位肝移植术中供肝的两种再灌注方式对术后早期肝功能恢复的影响。方法将41例原位肝移植患者随机分为先后开放组与同时开放组,于术前1d、术中进入无肝期后、供肝复流后、术后1~5d连续监测肝功能、凝血功能等相关指标。结果先后开放组术后1d的PT值显著长于同时开放组[(24.3±5.0)svs(20.5±3.9)s,P=0.011)],其余各项反映肝功能的指标两组间差异无统计学意义。结论原位肝移植术中采用门静脉、肝动脉同时开放进行再灌注的供肝合成凝血因子的功能恢复较早。除此以外,这两种再灌注方式对术后早期肝功能恢复的影响差异无统计学意义。     

Effects of warm Carolina rinse on microvascular reperfusion injury in rat liver transplantation

Abstract Recently, it has been demonstrated that the use of both cold Carolina rinse (CR, 4°C) as well as warm Ringer's lactate (RL, 37°C) attenuates microvascular perfusion failure and leukocyte (WBC) accumulation in liver grafts. The aim of this study was to analyse in vivo whether warming of CR can also lead to a reduction in microvascular reperfusion injury in rat liver transplantation. Syngeneic orthotopic liver transplantation, including arterial reconstruction, was performed in male Lewis rats (180–300 g). Livers were stored in University of Wisconsin (UW) solution for 24 h and rinsed with 15 ml CR which was either cold 4 °C ( n = 7) or warm 37 °C ( n = 8) prior to reperfusion. Hepatic microcirculation and WBC accumulation were assessed by intra-vital fluorescence microscopy, and graft function was determined by analysis of bile flow during the 90-min reperfusion period. Warm CR yielded significantly ( P < 0.01) improved sinusoidal perfusion when compared with cold CR; however, the extent of WBC adherence in both sinusoids and postsinusoidal venules did not vary between the groups. In addition, bile flow was slightly increased after warm CR. We conclude that after 24 h of cold storage in UW solution, warming of CR may offer additional benefit in the prevention of microcirculatory reperfusion injury without affecting WBC accumulation.     

治疗性高碳酸血症对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨治疗性高碳酸血症对大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 清洁级雄性Wistar大鼠32只,6周龄,体重220～280 g,采用完全随机设计的方法两两配对实施肝脏原位移植16只.采用随机数字表法,将受体鼠随机分为2组(n=8):肝移植组(LT组)和治疗性高碳酸血症组(TH组).LT组再灌注即刻吸入50％ O2-50％N2混合气体2 h;TH组再灌注即刻吸入O2-N2-CO2混合气体lh,调节气体浓度和呼吸频率,维持FiO2 50％、PaCO2 80～ 100 mm Hg,而后继续吸入50％O2-50％N2混合气体lh.再灌注期间记录MAP、PaO2和PaCO2.再灌注2h时,取动脉血样,测定血清ALT、AST、TNF-α、IL-1和IL-6的水平;取肝组织,测定NF-κB活性,计算凋亡指数,观察肝组织病理学结果.结果 与LT组比较,TH组血清ALT、AST、TNF-α、IL-1和IL-6水平、肝组织NF-κB活性和凋亡指数降低,MAP、PaO2和PaCO2升高(P＜0.05).TH组肝组织病理学损伤较LT组减轻.结论 治疗性高碳酸血症可减轻大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤,机制与抑制炎性反应和细胞凋亡有关.     

肝移植热缺血损伤与细胞因子表达的研究

目的　探讨心脏停搏供体肝移植中 ,供肝热缺血损伤与肝移植术后细胞因子的表达。方法　将实验鼠以供肝获取前经历的心脏停搏时间 0、30和 6 0min分为 3组 ,每组 2 0只 ,分别为HB组、NHBD 30组和NHBD 6 0组 ,而后行大鼠原位肝移植。比较术后各组肝移植大鼠血清中TNF α、IL 6和CINC的变化。结果　随着供肝遭受的热缺血时间延长 ,肝移植大鼠术后血清中TNF α、IL 6和CINC均呈上升趋势 ,并分别于术后 3、6和 6h达到峰值 ,各组间差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　在心脏停搏供体肝移植中 ,供肝的热缺血损伤与TNF α、IL 6和CINC的表达上调有关