Graves病介入术后甲状腺细胞凋亡因子的表达

目的 研究Graves病(GD)介入治疗前后凋亡调节蛋白Fas、FasL、Bcl-2、Bax、P53表达改变,了解GD介入治疗术前、术后凋亡因子表达情况及凋亡与疗效的关系.方法 对15例CD患者的150 μmPVA微粒及平阳霉素栓塞甲状腺动脉治疗,于术前、术后44例次成功穿刺甲状腺取标本行切片免疫组化分析,其中术前15例次、栓塞术后1年内16例次、术后1年以上13例次.采用免疫组化半定量积分法检测GD患者Fas、FasL、Bcl-2、Bax及P53表达情况.结果 ①术后15例中9例停药6个月以上无复发,为长期缓解,6例少量抗甲状腺药物(ATD)维持(用药量＜术前用药量的1/4,甲状腺功能正常)为好转.②Fas和FasL阳性细胞数及着色程度均高于术前GD甲状腺组织(P＜0.05).③术后1年内组与术前组Bax阳性细胞数及着色程度均较强(两组比较,P＞0.05),但术后1年以上Bax阳性细胞数及着色程度高于术前组(P＜0.05);Bcl-2阳性细胞数及着色程度术前术后均无明显差别.④术后P53阳性细胞数及着色程度明显高于术前(P＜0.05).结论 甲状腺动脉栓塞治疗GD后促凋亡基因Fas、FasL、Bax及P53表达增强,抗凋亡因子Bcl-2表达无增强.表明GD介入栓塞治疗是从甲状腺腺体细胞凋亡调节的水平发挥了有效的治疗作用.     

桥本氏甲状腺炎与弥漫性甲状腺肿的超声特点及其中医证型分析

目的:探讨桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)和弥漫性甲状腺肿(Graves病,GD)患者超声声像图特点及与中医证型的相关性。方法:选择HT、GD患者及正常对照者各30例,测量甲状腺大小及内部回声、甲状腺上动脉收缩期峰值流速(PSV)及RI,并比较中医证型。结果:1HT组与GD组的声像图均表现为甲状腺厚度不同程度增大,内部回声弥漫性减低;HT患者腺体内网格样改变及低回声小结节多于GD患者,差异均有统计学意义。2HT组与GD组的甲状腺上动脉PSV均高于对照组,GD组明显高于HT组,差异均有统计学意义;3组RI比较差异均无统计学意义。3HT组中医证型以肝郁脾虚型为主,GD组以肝郁化火型多见。结论:甲状腺内部回声、腺体内低回声小结节数目、甲状腺上动脉PSV、中医证型等可为HT与GD的鉴别提供参考。     

甲状腺自身抗体在自身免疫性甲状腺疾病中的临床意义

自身免疫性甲状腺疾病(AITD))主要包括Graves病(GD)、桥本甲状腺炎(HT)、特发性粘液性水肿等，其诊断与鉴别诊断存在一定困难。笔者探讨了促甲状腺激素受体抗体(TRAb)、甲状腺球蛋白抗体(TgAb))及甲状腺微粒体抗体     

生长分化因子11对高糖环境中人甲状腺乳头状癌K1细胞凋亡的影响

 目的 探讨生长分化因子11(growth differentiation factor 11,GDF1)对高糖环境中人甲状腺乳头状癌K1细胞凋亡的影响。方法 将人甲状腺乳头状癌K1细胞分为3组:对照组(Vehicle)、高糖组(HG)和GDF11组(HG+GDF11;GDF11)。各组细胞培养3 d后,流式细胞术检测细胞凋亡率,western blot检测凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2的蛋白水平,实时荧光定量逆转录PCR检测核转录因子E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2)的转录表达,活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内的ROS水平。结果 与对照组相比,高糖环境中K1细胞的凋亡率降低,Bcl-2/Bax蛋白表达比升高,Nrf2基因表达上调,细胞内ROS水平下降;而GDF11干预显著提高高糖环境中K1细胞的凋亡率,降低Bcl-2/Bax蛋白表达比,下调Nrf2基因转录表达,并提高细胞内的ROS水平。结论 GDF11可能通过提高高糖环境中K1细胞内的氧化应激反应促进细胞凋亡。     

膀胱癌中Fas、FasL、Bcl-2及Bax的表达及意义

目的 探讨凋亡调节基因Fas、FasL、Bcl-2及Bax在膀胱移行细胞癌中的表达及其与膀胱癌发生、发展和预后之间的关系。方法 采用免疫组化染色法检测40例膀胱移行细胞癌、24例正常膀胱组织中Fas、FasL、Bcl-2及Bax的表达。结果 Fas表达于正常组织和膀胱癌组织中,FasL、Bcl-2及Bax仅表达于膀胱癌组织中;Fas的表达与膀胱癌病理分级负相关,FasL、Bcl-2的表达与膀胱癌病理分级正相关;Fas、Bax在初发膀胱癌组织中的表达大于复发膀胱癌。结论 Fas、FasL、Bcl-2及Bax的表达,可能与膀胱癌细胞的凋亡及免疫逃避等密切相关,影响膀胱癌的发生、发展和预后。     

Ox-LDL诱导人肾小球系膜细胞凋亡在慢性肾炎中的作用

目的 :探讨氧化低密度脂蛋白 (Ox-LDL)诱导肾小球系膜细胞凋亡的调控机制及其在慢性肾炎中的作用。方法 :通过人肾小球系膜细胞体外培养 ,采用原位末端标记和DNA凝胶电泳检测低浓度的Ox -LDL (0、 2 5、 5 0、10 0 μg/ml)对系膜细胞凋亡的影响 ,免疫组化维生素E干预前后Ox-LDL对系膜细胞Bax/Bcl- 2表达的影响 ;按血浆LDL水平 ,把有不同程度肾小球硬化的慢性肾炎患者肾标本分为LDL正常组和LDL升高组 ,分别采用DNA原位末端标记和免疫组化 ,检测肾小球细胞凋亡及Bax/Bcl- 2蛋白表达。结果 :低浓度Ox-LDL (0～ 10 0 μg/ml)以剂量依赖方式促进肾小球系膜细胞凋亡 ,并使肾小球系膜细胞Bax的蛋白表达呈时间 -剂量依赖性增加 ,P <0 0 1,Bcl- 2的蛋白表达轻度升高后呈时间 -剂量依赖性下降 ,P <0 0 1,导致Bax/Bcl- 2比值增大 ;维生素E干预后这种变化不明显 ,P >0 0 5。LDL升高组肾小球凋亡和Bax蛋白表达明显增加 ,P <0 0 1;Bcl- 2变化不明显 ,P >0 0 5 ,血LDL水平与肾小球硬化指数、凋亡指数、Bax/Bcl- 2比值有显著正相关关系。结论 :Ox -LDL能诱导肾小球系膜细胞凋亡 ;Bax/Bcl- 2比值上升可能是Ox -LDL诱导肾小球系膜细胞凋亡的重要机制 ;脂质异常可能是导致肾小球硬化中细胞减少的重要原因     

恶性间皮瘤细胞凋亡与凋亡调节蛋白Bax及Bcl-2表达的关系

目的研究恶性间皮瘤组织中Bcl-2、Bax表达,肿瘤细胞自发凋亡率(AI)与患者生存时间之间的关系。方法选取79例恶性间皮瘤标本,采用免疫组织化学方法检测肿瘤细胞中Bcl-2、Bax的表达。采用脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端原位标记法(TUNEL)检测肿瘤细胞的自发凋亡率。结果79例中,女性患者32例,男性47例。发病年龄11~79岁,发病高峰年龄40~50岁。患者生存时间5~160个月。根据组织学亚型分类:上皮细胞型51例,肉瘤样型20例,混合型8例。肿瘤细胞自发凋亡率(AI)为0.14~6.9%,高凋亡指数组的生存时间明显短于低凋亡指数组(P<0.01)。另外,Bcl-2阴性表达组的凋亡指数(AI=1.92)大大高于Bcl-2阳性组的凋亡指数(AI=0.82,r=0.288 0,P=0.01),说明Bcl-2的表达与肿瘤细胞凋亡之间存在联系。但是凋亡指数与另外一种凋亡调节蛋白Bax之间无显著联系(r=0.0770,P=0.46)。Bcl-2和Bax两种凋亡调节蛋白表达情况对恶性间皮瘤患者的生存时间没有显著性影响(分别为r=0.077 3,P=0.43;r=0.145 7,P=0.26)。结论恶性间皮瘤细胞凋亡指数可以作为判断其预后的重要指标,Bcl-2的表达与肿瘤细胞的凋亡有相关性。     

低氧训练对大鼠心、肝、肾、海马组织细胞凋亡的影响及其机制研究

目的:观察低氧训练对大鼠心、肝、肾、海马组织细胞凋亡及HIF-1α、Bax、Bcl-2表达的影响,探讨低氧训练的适应机理。方法:70只SD大鼠按体重随机分为7组,每组10只,即正常对照组(A)、高住8 h组(B)、高住12 h组(C)、常氧运动组(D)、8 h高住低练组(E)、12 h高住低练组(F)和一次力竭运动组(G)。D、E、F组大鼠每天在坡度为0的动物跑台上,以25 m/min的速度训练1 h。训练后,分别将B、E组和C、F组依次放入氧浓度为12.5%(相当于海拔4000 m)的低氧舱内8 h和12h。5 d/周,实验期4周。最后一次训练,B、C、D、E、F、G组以25 m/min的速度训练至力竭,24 h后大鼠均实施速眠新II腹腔麻醉后心脏取血致死,取材。采用HE染色、原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)及蛋白免疫组织化学法检测大鼠心、肝、肾、海马组织细胞凋亡和HIF-1α、Bcl-2、Bax表达。结果:(1)随时间延长,高住组大鼠心、肝、肾、海马组织出现棕褐色凋亡细胞;12 h高住低练组大鼠心、肝、肾组织可见细胞肿胀、间隙明显增大,凋亡细胞核随时间延长明显增多,而海马组织凋亡细胞核明显减少;常氧运动组可见较多凋亡细胞核,一次力竭运动组可见大量凋亡细胞核。(2)高住组、常氧运动组、高住低练组、一次力竭运动组心、肝、肾细胞凋亡指数、Bax、HIF-1α表达显著高于正常对照组(P<0.05),而高住12 h组、常氧运动组、一次力竭运动组海马区细胞凋亡指数、Bax、HIF-1α显著高于正常对照组(P<0.05)。12 h高住低练组心、肝、肾凋亡指数、Bax及HIF-1α表达显著高于常氧运动组(P<0.05),而高住低练组海马区细胞凋亡指数、Bax及HIF-1α表达显著低于常氧运动组(P<0.05)。高住组、常氧运动组、8 h高住低练组心、肝、肾、海马细胞凋亡指数、凋亡发生率及Bax、HIF-1α表达显著低于一次力竭运动组(P<0.05);12 h高住低练组心、肝、肾凋亡发生率、凋亡指数及Bax、HIF-1α表达显著高于高住组和常氧运动组(P<0.05),而高住组和常氧运动组及一次力竭运动组海马组织凋亡发生率、凋亡指数及Bax、HIF-1α表达显著高于高住低练组。(3)各实验组心、肝、肾Bcl-2蛋白表达显著高于正常对照组(P<0.05);与一次力竭运动组相比,高住8h组、常氧运动组有下降趋势,但无统计学意义;随着低氧暴露时间延长,高住组心、肝、肾Bcl-2蛋白表达增加不明显,高住低练组Bcl-2蛋白表达随低氧暴露时间延长而增加;而高住组、高住低练组海马区Bcl-2蛋白表达随低氧暴露时间延长而降低。结论:(1)耐力运动、8 h和12 h的4000 m低氧暴露、8 h高住低练可提高大鼠有氧代谢能力。(2)低氧、耐力运动、高住低练、一次力竭运动诱导大鼠心、肝、肾、海马组织HIF-1α、Bcl-2及Bax蛋白表达,细胞凋亡率与凋亡指数及损伤与低氧刺激和大强度运动有关,12 h高住低练及一次力竭运动对运动能力影响最明显。(3)Bcl-2与Bax参与调控心、肝、肾、海马组织细胞凋亡,HIF-1α表达可能协同Bcl-2家族调控凋亡相关因子的表达,在低氧训练导致的组织细胞凋亡中发挥双重效应。(4)低氧刺激对不同组织影响不一,对心、肝、肾影响较大,海马组织相对稳定。     

甲状腺疾病患者血清可溶性细胞间粘附分子-1的研究

目的 探讨血清可溶性细胞间粘附分子-1(sICAM-1)水平与甲状腺疾病的关系.方法 采用125I-sICAM-1 RIA方法,检测了健康人273名(对照组),Graves(GD)病患者557例,初诊慢性淋巴细胞性甲状腺炎(HT)患者33例,初诊单纯性甲状腺肿(SG)患者17例,初诊非毒性结节性甲状腺肿(NTNG)患者9例的血清sICAM-1水平,比较各组间差异及其与其他指标的相关性.变量资料为正态分布时,应用ANOVA或t检验进行组间比较;不满足条件时,应用秩和检验(Kruskal-Wallis或Mann-Whitney)进行分析.结果 初诊GD组[58例,(255.04±82.40)μg/L]和HT组[(227.22±77.08)μg/L]sICAM-1水平均高于对照组[(149.89±39.45)μg/L](GD:Z=-9.401,HT:Z=-5.902;P均＜0.01),而sG组[(173.82±59.50)μg/L]和NTNG组[(159.31±28.73)μg/L]与对照组差别无统计学意义(SG:Z=-1.9,NTNG:Z=-0.949;P均＞0.05).初诊及各治疗阶段GD伴突眼组sI-CAM-1水平均高于非突眼组,但仅在治疗≥19个月组差异有统计学意义[(211.58±53.58)与(189.50±39.99)μg/L;t=2.004,P＜0.05].复发GD突眼及非突眼组sICAM-1水平亦显著高于对照组(X2=88.257,P＜0.01).在经抗甲状腺药物(ATD)治疗后甲状腺功能恢复正常且病情稳定的GD患者中,sICAM-1水平随疗程延长逐步缓慢降低,且当疗程≥19个月时,GD组在非突眼及突眼患者中,其血清sICAM-1[(189.50±39.99),(211.58±53.58)μg/L]与各自初诊组[(244.75±81.58),(287.36±79.20)μg/L]差异有统计学意义(F=9.986和3.398,P＜0.01和P＜0.05),但直至停药时仍高于对照组[(185.25±39.64)与(149.89±39.45)μg/L;Z=-3.813,P＜0.05].结论 血清sICAM-1可反映自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者体内的自身免疫状态,其测定对GD、HT有辅助诊断价值,这对于了解GD患者的自身免疫活动程度、预测GD眼病的发生和GD复发、确定合理的疗程和停药时机可能具有重要意义.     

移植胰腺冷缺血后细胞凋亡与Bcl-2Bax表达的研究

目的：探讨胰腺移植后供胰冷缺血损伤后细胞凋亡与Bcl-2、Bax表达的关系。方法：建立小型猪胰腺移植冷缺血再灌注模型，根据供胰冷缺血时间（CIT）分为：CIT 0h组、CIT 3h组、CIT 6h组、CIT 9h组。切除受体猪胰腺制作成糖尿病模型，胰腺移植完成30min后观察胰腺病理变化及TUNEL法检测胰腺细胞凋亡、免疫组织化学法进行Bcl-2、Bax测定。结果：CIT 3h、CIT 6h、CIT 9h组供胰细胞凋亡指数（AI）明显高于冷缺血时间0h组，随着冷缺血时间的延长Bcl-2表达及Bcl-2／Bax比率逐渐下降，Bax表达则逐渐增强。结论：冷缺血时间越长，胰腺细胞凋亡程度越重，细胞凋亡不仅与Bcl-2、Bax自身表达水平有关，也与Bcl-2／Bax比率失衡有关。     

AIF、Bax和Bcl-2在中子及γ射线照射致肠道损伤中的表达

目的 探讨AIF、Bax和Bcl-2在中子及7射线照射致肠道损伤中的表达变化及意义.方法 290只BALWc雄性小鼠,随机分为对照组(24只)、2.5Gy中子照射组(80只)、4.0Gy中子照射组(60只)、5.5Gy γ射线照射组(72只)及12.0Gy γ射线照射组(54只),分别采用5.5和12.0Gy γ射线以及2.5和4.0Gy的中子照射,并于照射后6h,1、2、3、5、10d活杀,取空肠组织,用免疫组织化学和图像分析技术定量分析MF、Bax及Bcl-2蛋白的表达变化.结果 对照组小鼠空肠绒毛及隐窝上皮细胞质AIF呈强阳性,Bax和Bd-2呈弱阳性.中子和γ射线照射后6h～1d,隐窝细胞核中AIF呈强阳性,表达明显增加(P<0.01);4.0Gy中子照射后Bax强阳性持续至照射后3d,表达明显增加(P<0.01).5.5、12.0Gy γ射线及2.5Gy中子照射后6h～5d,Bcl-2于上述部位呈强阳性,表达明显增加(P<0.01).4.0Gy中子照射后6h～3d,Bcl-2于上述部位呈弱阳性,表达无改变(P>0.05).结论 中子及γ射线照射后空肠隐窝上皮细胞核中AIF表达增加,参与了肠上皮细胞凋亡的过程.中子照射时的Bax表达强于γ射线照射时,γ射线照射时的Bcl-2表达强于中子照射时,二者变化规律不同,提示中子和γ射线致肠道损伤具有不同的分子机制.     

PCNA,Bcl-2和Bax在翼状胬肉中的表达及其意义

目的检测翼状胬肉中PCNA,Bcl-2和Bax的表达水平,探讨PCNA,Bcl-2和Bax在翼状胬肉发病中的作用。方法采用免疫组化Elivision法检测20例翼状胬肉、10例正常结膜中的PCNA,Bcl-2和Bax表达水平。结果20例翼状胬肉中PCNA,Bcl-2和Bax的阳性表达率分别为95%(19/20),95%(19/20)和80%(16/20),正常结膜中PCNA,Bcl-2和Bax的阳性表达率分别为60%(6/10),20%(2/10)和60%(6/10)。PCNA和Bcl-2阳性表达两组间差异有显著意义(P<0.05),而Bax阳性表达两组间差异无显著意义(P>0.05)。结论翼状胬肉的发生发展可能与PCNA的高表达和Bcl-2与Bax表达失衡有关,可能是细胞异常增殖和凋亡失衡的共同结果。     

P53，Bax,Bcl—2蛋白表达及细胞凋亡在急性放射性皮肤溃疡发生发展过程中的作用探讨

目的：研究细胞凋及一些凋亡相关基因（p53,bcl-2,bax)的表达在急性放射性皮肤贵疡发生发展过程中的作用,方法：采用Wistar大鼠以^60Cor射线进行局部照射,建立急性放射性皮肤溃疡动物模型,观察病变40d,然后采用免疫组化方法检测皮肤溃疡组织中P53,Bcl-2,Bax蛋白表达,并采用原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡,结果,照后14d照射野内开始出现皮肤细胞和小血管平滑肌中,照后14－21d为Bax蛋白表达高峰,之后逐渐减弱,主要定位于血管内皮细胞,部分成纤维细胞及新生表皮细胞中,Bcl-2则在照后1－11d呈弱或中度阳性,定位于表皮,毛囊上皮及血管内皮口,之后为阴性或可疑阳性,照后11－35d,上述细胞特别是血管内皮细胞凋亡率较正常伤口愈合早期增高,结论：辐射诱导的P53,Bax-Bcl-2表达的变化及细胞亡率特别是血管内皮细胞凋亡率的增主屿放射性皮肤溃疡发生,发展及难愈合（不能形成有效肉芽组织）的分子机制相关。     

氡诱发小鼠肺损伤与P53和Bcl-2、Bax蛋白表达的研究

目的 建立氡染毒小鼠肺损伤模型,观察不同剂量组小鼠肺组织损伤情况,分析氡对P53、Bcl-2、Bax在肺组织中表达的影响。方法 建立氡染毒小鼠模型,使染毒累积剂量分别达到30工作水平月(WLM)和60WLM;采用TUNEL法检测小鼠肺组织细胞凋亡程度;采用免疫组化SP法及Westernblot法,检测各组肺组织P53、Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果 与正常对照组相比,氡染毒30和60WLM小鼠肺细胞凋亡指数均明显增加(t=18.11、-10.30,P<0.05);氡染毒30WLM组P53蛋白明显增加(t=-11.08,P<0.05);60WLM组P53蛋白和Bax蛋白表达明显增加(t=-7.00、-2.52,P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显下降(t=4.36,P<0.05);氡染毒30和60WLM与对照组相比,Bcl-2、Bax比值均明显下降(t=2.78、4.07,P<0.05)。结论 氡染毒可使小鼠肺损伤,出现肺细胞凋亡,P53、Bcl-2、Bax途径可能参与了肺细胞的凋亡调节。     

The significance of FDG uptake in bilateral thyroid glands

AIM: To evaluate the significance of bilateral fluorodeoxyglucose (FDG) uptake in the thyroid glands. METHODS: Bilateral thyroid FDG uptake, defined as visualization of thyroid glands, was found in 66 (3.4%) of 1925 subjects who underwent our FDG PET cancer-screening program. Additionally, 16 of the 41 patients with Graves' disease and hyperthyroidism (GD(H)) and six of the 20 subjects with Graves' disease and euthyroidism (GD(E)), who had FDG uptake in thyroid glands, were enrolled in this study. RESULTS: Among the 66 subjects, 22 were normal variant, 39 subjects had chronic thyroiditis (35 subjects presented with diffuse goitre and four with multinodular goitre), and five subjects had multinodular goitre (MNG) without chronic thyroiditis. Fourteen of 22 (63.6%) of the subjects with the normal variant had a visual uptake intensity less than that of the liver, while 30 of 39 (76.9%) of the subjects with chronic thyroiditis and 14 of 22 (63.6%) of the subjects with Graves' disease had visual uptake intensity greater than or equal to liver uptake. Two of the five subjects with MNG with focally intense uptake were proven to have thyroid carcinoma. Bilateral loser uptake in thyroids associated with thymus and symmetrical skeletal muscle uptake were found in GD(H). The standard uptake value (SUV) (mean+/-SD) in subjects with chronic thyroiditis (2.76+/-1.24) were higher, while those with GD(H) (1.59+/-0.36) were lower than that of the normal variant (1.99+/-0.63). Subjects with hypothyroidism (3.04+/-1.39) had higher SUV levels than those subjects with euthyroidism (2.44+/-1.11). In addition, patients with GD(H) had lower levels than those with GD(E) (2.0+/-0.38). CONCLUSION: (1) Bilateral thyroidal uptake of FDG can be found in normal variants and subjects with various thyroid disorders, showing varieties of uptake patterns. (2) Diffuse intense uptake and higher SUV levels are a clue to a diagnosis of chronic thyroiditis, especially for those with hypothyroidism. (3) Focally intense uptake suggests the possibility of a thyroid carcinoma. (4) Sparse uptake associated with the thymus and symmetrical skeletal muscle uptake and lower SUV level raise the possibility of Graves' disease with hyperthyroidism.