温心胶囊对动脉粥样硬化模型家兔血管内皮细胞保护作用的研究

1　材料1 1　动物　新西兰纯种大白兔 48只 ,3～ 4月龄 ,体重 2 5～ 3ｋｇ,均为雄性。由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。合格证号 :医动字第 0 9-1-2号。1 2　高脂饲料配制　 79 5 %基础饲料、15 %蛋黄粉、0 5 %胆固醇、5 %猪油配制而成。1 3　实验药物　温心胶囊悬液　按处方比例称取中药材 ,并按胶囊制备工艺以 75 %的乙醇提取回收两次 ,调整浓度为 1∶2 ,相当于每毫升悬液含生药量 2ｇ。复方丹参片 :广州市香雪制药股份有限公司生产 ,批号 :9990 3 0 1。胆固醇 :北京化学试剂公司产品 ,批号 :97110 3。2　方法2 1　分组及给药　实…     

兰黄胶囊保护动脉粥样硬化家兔血管内皮的实验研究

随着人们生活水平的提高,饮食结构的改变,动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)成为动脉硬化的血管疾病中最常见的一种,是心脑血管疾病的主要病理基础,其病理过程与血管内皮受损、血管内皮功能减退、脂质浸润、炎性细胞浸润、氧自由基产生等多因素有关.为此,本研究选用家兔喂养高脂饲料联合免疫损伤形成实验性AS模型,观察兰黄胶囊对实验性AS家兔的血脂、超氧化物歧化酶(SOD)与丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)与内皮素(ET)、血栓素A2(TXA2)与前列环素(PGI2)的影响,探讨对血管内皮的保护作用.     

调脂胶囊对动脉粥样硬化家兔血管内皮的保护作用

目的观察调脂胶囊保护血管内皮、防治动脉粥样硬化的疗效并探讨其作用机制。方法将28只家兔随机分为4纽，3组复制动脉粥样硬化模型，其中1组加喂调脂胶囊，1组加喂洛伐他汀，1组单纯高脂饲料喂养，剩余1组普通饲料喂养。每月抽血1次，3月后结束实验，检测血中一氧化氯(NO)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的变化。结果调脂胶囊能明显抑制血中NO含量的降低，能在一定程度上升高6-keto-PGF1α含量。结论调脂胶囊能调节血管舒缩功能，保护血管免受损伤，从而起到抗动脉粥样硬化作用。     

康欣胶囊对兔动脉粥样硬化斑块稳定性的影响

目的观察康欣胶囊对兔动脉粥样硬化(AS)血管斑块稳定性的影响,探讨其稳定斑块的可能机制。方法将40只纯种雄性新西兰大耳白兔随机分为模型组、阿托伐他汀钙组(简称他汀组)、康欣胶囊低剂量组(简称小剂量组)、康欣胶囊高剂量组(简称大剂量组)、正常对照组,每组8只。除正常组外,采用内膜损伤加高胆固醇饮食法建立兔AS模型,分别予相应处理,6周后进行主动脉血管病理形态学观察,采用免疫组化法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)在动脉斑块内的表达。结果康欣胶囊干预组动物血管腔壁比(W/L)、平均光密度、阳性面积百分比均较模型组小,动脉壁组织MMP-2及VCAM-1均较模型组下调,差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01),以大剂量组最为明显。结论康欣胶囊可减少MMP-2、VCAM-1等炎性介质表达,可能是其稳定斑块的机制。     

动脉粥样硬化早期血管内皮细胞损伤及中药治疗的研究现状

自 1 993年Ｒｏｓｓ[1] 提出动脉粥样硬化(ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｎｓｉｓＡＳ)发病机制的“损伤反应假说”以来 ,血管内皮细胞损伤在ＡＳ的形成与发展中的地位日趋受到关注。高血脂等各种相关因子作用于内皮细胞后 ,致其功能障碍 ,血管活性物质、细胞因子、黏附分子等分泌和表达失衡 ,进一步引发ＡＳ早期事件 ,进而细胞形态改变 ,构成早期ＡＳ内皮损伤的一系列特点。许多研究表明 ,中药对内皮细胞具有明显的保护作用 ,可从不同环节干预ＡＳ始动因素 ,将成为中西医结合防治ＡＳ的关注点。1　生理状态下内皮细胞形态及功能正常情况下 ,动脉…     

脂清胶囊对家兔动脉粥样硬化形成的影响

目的探讨中药脂清胶囊对高脂血症家兔斑块形成的影响以及作用机制。方法将48只新西兰家兔随机分为正常组,高脂组,阳性对照组(血脂康组)及3个剂量的脂清胶囊组。在实验开始和给药2周后分别检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),给药4周后测肝脏脂质含量、血清一氧化氮(NO)、血栓素B2(TXB2)和内皮素1(ET-1)。第6周末处死动物,行主动脉病理形态学观察。结果脂清胶囊对动脉粥样硬化家兔模型血清TC及LDL-C以及肝脏中TC的升高有明显对抗作用,同时还能显著地抑制其主动脉粥样硬化斑块形成,另外还能使其血清NO显著升高,TXB2和ET-1显著降低。结论脂清胶囊具有明显的抗脂代谢紊乱和抗动脉粥样硬化作用。     

脑心通胶囊对动脉粥样硬化家兔血管内皮功能的影响

目的:观察脑心通胶囊对动脉粥样硬化的防治作用及其作用机制。方法:将健康家兔行颈总动脉球囊损伤和喂饲高脂饲料方法造模,分为模型组(n=8)、西药对照组(n=8)和中药组(n=8),正常组(n=8)不行手术,4周后,西药对照组喂以辛伐他汀5 mg/(kg·d)+高脂饲料120 g/d;中药组以脑心通胶囊90 mg/(kg·d)给药+高脂饲料120 g/d。共喂养4周。并分别于实验第0周、4周末、8周末取血、处死动物,取材,切片;用分光光度法检测8周末血浆一氧化氮含量,用ELISA法检测8周末血浆内皮素-1水平。结果:8周末,模型组兔血浆NO含量较正常西药对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01);西药对照组和中药组兔血浆NO含量较模型组明显升高(P<0.01);其中中药组兔血浆NO水平升高较西药对照组更为明显(P<0.01);8周末,模型组家兔血浆ET-1水平较正常西药对照组明显上升;与模型组比较,西药对照组及中药组兔血浆ET-1水平均显著下降(P<0.05),两组间比较差异无统计学意义。结论:脑心通胶囊可促进NO合成和分泌并抑制ET-1表达,利于恢复NO/ET-1平衡,保护内皮细胞功能,从而达到抗动脉粥样硬化的作用。     

软脉胶囊对实验性动脉粥样硬化家兔的流式细胞学指标的影响

目的：观察软脉胶囊对实验性动脉粥样硬化家兔的流式细胞学指标的影响。方法：采用喂养法复制家兔动粥样硬化模型，用流式细胞检测技术测定细胞凋亡率、增殖率、Bcl-2、Fas、Bax基因的表达产物。结果：软脉胶囊高、低剂量组细胞凋亡率Fas、Bax明显高于模型组；软脉胶囊高、低剂量组的Bcl-2明显低于模型组。结论：软脉胶囊抗动脉粥样硬化形成的机制是通过降低基因Bcl-2的表达和增加基因Fas、Bax的表达，促进细胞凋亡。     

动脉粥样硬化、冠心病与血管内皮细胞损伤机制的研究概况

由于近年来对血管内皮细胞(VEC)生物学功能认识的不断深入，对动脉粥样硬化(AS)和冠心病(CHD)发病机制的研究重点逐渐转向VEC功能障碍。作者综述了近年来动脉粥样硬化、冠心病与血管内皮细胞损伤机制的研究概况。并指出了阻断白细胞、血小板与内皮细胞的粘附，对于高脂血症、动脉粥样硬化的防治具有重要的生物学意义。     

活血胶囊对兔动脉粥样硬化斑块血管内皮细胞生长因子和血管细胞黏附分子-1表达的影响

目的:探讨活血胶囊对兔动脉粥样硬化斑块的作用及其稳定动脉粥样硬化斑块的机制。方法:53只健康雄性日本大耳白兔随机分为空白组及实验组。空白组喂普通饲料,实验组喂高脂饲料,10周末,检测血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C);随后将实验组兔分为4组:模型组,辛伐他汀(2.2 mg·kg-1·d-1),活血胶囊高(1.5 g·kg-1·d-1)、低剂量组(0.5 g·kg-1·d-1),同时继续喂高脂饲料。20周末,检测血清TC,TG,LDL-C,处死动物,取主动脉标本,测定内膜/中膜厚度比,用免疫组化法检测血管内皮细胞生长因子(VEGF),血管内皮细胞黏附分子-1(VCAM-1)在动脉斑块中的表达。结果:与正常组比较,模型组血清TC,TG,LDL-C,内膜/中膜厚度比,VEGF,VCAM-1在动脉斑块中的表达显著升高,差异具有显著性(P<0.01);与模型组比较,活血胶囊组TC,TG,LDL-C,主动脉内膜/中膜厚度比均明显低于模型组(P<0.05);高剂量组与低剂量组比较,差异具有显著性(P<0.05);免疫组化染色发现模型组、活血胶囊高、低剂量组、辛伐他汀组均可见染成黄褐色的VEGF,VCAM-1阳性表达信号,主要存在于粥样斑块区,空白组家兔主动脉VEGF及VCAM-1阳性表达几乎为零,积分吸光度结果提示3个药物干预组表达均比模型组减少(P<0.01,P<0.05)。结论:活血胶囊可抑制VEGF,VCAM-1在兔胸主动脉的表达,抑制血管新生和炎症反应,这可能是该药延缓AS进程,稳定斑块的作用机制之一。     

原儿茶醛对ox-LDL损伤的血管内皮细胞保护作用

目的:观察原儿茶醛对ox-LDL诱导的人脐静脉血管内皮细胞株(CRL-1730)损伤的保护作用。方法:ox-LDL诱导人血管内皮细胞损伤,并以不同剂量的原儿茶醛干预24 h,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量,比色法测定细胞培养液中NO含量和NOS活性,流式细胞术测定细胞内CD40蛋白表达。结果:原儿茶醛对ox-LDL引起的CRL-1730损伤血管内皮细胞数量的减少和培养液中NO、NOS的降低有明显的抑制作用;ox-LDL可引起细胞内CD40蛋白表达增加,原儿茶醛可以抑制此作用。结论:原儿茶醛对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤具有保护作用,其机制可能与CD40/CD40L抗炎途径有关。     

淫羊藿苷对缺氧诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对缺氧所致血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)损伤的影响。方法 建立体外细胞缺氧模型,用MTT法观察ICA对缺氧损伤的血管内皮细胞活性的影响,测定细胞中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及乳酸脱氢酶(LDH)活力,并对细胞进行Hoechst33342荧光染色、电镜观察细胞超微结构,运用流式细胞仪及DNA琼脂糖凝胶电泳分析DNA断裂情况,以观察ICA对缺氧诱导的内皮细胞凋亡的影响。结果 ICA能抑制缺氧引起的血管内皮细胞的减少,降低LDH活力,并抑制缺氧条件下MDA生成,提高SOD活力;缺氧能诱导血管内皮细胞凋亡,表现为细胞核浓缩,沿核膜排列成块状,DNA琼脂糖凝胶电泳显示典型“梯形条带”,流式细胞仪分析呈现典型凋亡亚二倍体峰。ICA能显著抑制缺氧诱导的内皮细胞凋亡。结论 ICA具有保护缺氧诱导的血管内皮细胞损伤的作用,其作用机制与抗脂质过氧化物产生、提高SOD活力以及抗细胞凋亡有关。     

槲皮素对TNF-α损伤的血管内皮细胞的保护作用

目的:用TNF-α诱导血管内皮细胞(ECV-304)损伤,观察槲皮素对ECV-304的保护作用.方法:采用MTT法观察槲皮素对ECV-304活性的影响:硫代巴比妥酸法测定细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量;用比色法测定细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)含量;免疫细胞化学法观察内皮细胞核转录因子-κB(NF-κB)的表达.结果:TNF-α对ECV-304具有损伤作用,槲皮素能显著抑制TNF-α诱导ECV-304内NO和MDA释放和NF-κB的表达;并能提高TNF-α诱导ECV-304内SOD活性.结论:槲皮素对TNF-α诱导ECV-304损伤具有保护作用,其机制可能与其减少NO释放和抗氧化作用有关,而抗氧化作用主要是通过调节NF-κB的表达.     

金樱子总黄酮对过氧化氢损伤内皮细胞的保护作用

目的 研究金樱子总黄酮对过氧化氢损伤人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cells,HUVEC)的保护作用.方法 体外培养HUVEC,用不同浓度H2O2诱导HUVEC损伤构建内皮细胞氧化损伤模型,采用MTT法测定各组细胞活力;用酶标仪测定各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;Western Blot检测各组细胞凋亡抑制蛋白Bcl-2及促凋亡蛋白Bax的表达情况.结果 MTT观察结果表明600μmol/L H2O2为构建氧化损伤HUVEC模型的合适浓度.与H2O2损伤组比较,不同浓度总黄酮预处理组的细胞活力均显著升高(P＜0.01);不同浓度总黄酮预处理组细胞培养液中的SOD、CAT和GSH-Px活性均明显增加(P＜0.01),且随着总黄酮浓度的增大而升高.与H2O2损伤组比较,0.12 mg/ml处理组Bcl-2蛋白表达无显著升高,0.24 mg/ml和0.48 mg/ml处理组Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P＜0.05);而各浓度预处理组Bax蛋白表达水平显著降低(P＜0.05或P＜0.01).结论 金樱子总黄酮能保护氧化损伤的HUVEC,其保护机制与提高SOD、CAT、GSH-Px三种抗氧化酶的活性,上调Bcl-2蛋白的表达、下调Bax蛋白的表达来抑制细胞凋亡有关.     

白刺总黄酮对血管内皮细胞损伤的保护作用的研究

目的研究白刺总黄酮对血管内皮细胞损伤的保护作用及机制。方法用过氧化氢（H2O2）诱导血管内皮细胞损伤,用酶标仪检测细胞内一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）以评价氧化的程度。结果不同浓度的白刺总黄酮可促进受损的内皮细胞修复,同时提高SOD、NOS、GSH—Px活力和NO水平。结论白刺总黄酮具有保护血管内皮细胞损伤的作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

槲皮素对高糖损伤血管内皮细胞的保护作用

目的:研究槲皮素对高糖损伤血管内皮细胞(VECs)的保护作用。方法:实验分对照组,损伤组和槲皮素保护组。用含10 mg/ml葡萄糖、20％胎牛血清的DMEM培养基离体培养 VECs。MTT比色法测细胞存活数量,荧光分光光度法测细胞释放一氧化氮(NO)量及细胞内脂质过氧化物丙二醛(MDA)的生成量,分光光度法测细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放量。结果:10~(-2)、10~(-3)、10~(-4)、10~(-5)mg/ml槲皮素可促进高糖损伤的VECs增殖,10~(-2)、10~(-3) mg/ml槲皮素,可抑制高糖损伤的VECs释放LDH,减少MDA生成量,促进其释放NO。结论:槲皮素对高糖损伤VECs有保护作用。     

杨梅总黄酮对H_2O_2诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的:探讨杨梅总黄酮对过氧化氢(H2O2)诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养人脐静脉血管内皮细胞ECV-304,通过H2O2诱导建立血管内皮细胞损伤模型,利用噻唑蓝(MTT)染色法研究杨梅总黄酮对血管内皮细胞存活率的影响,以MDA、LDH、SOD、NO含量的测定研究杨梅总黄酮对血管内皮细胞氧化应激的影响。结果:与模型组比较,杨梅总黄酮各给药组细胞存活率及SOD、NO活性显著提高,MDA含量和LDH漏出量显著降低。结论:杨梅总黄酮可能通过抑制氧化应激,达到保护内皮细胞的作用。     

风湿祛痛胶囊对VEGF诱导的人脐静脉内皮细胞功能的影响

目的:观察风湿祛痛胶囊对血管内皮细胞生长因子(VEGF)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的增殖、迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力的影响,以及对VEGF受体2(VEGFR2)的干预作用。方法:VEGF体外诱导HUVEC,加入风湿祛痛胶囊低、中、高质量浓度(0. 02,0. 1,0. 5μg·L-1)作用后,分别采用噻唑蓝(MTT)比色法、转移小室(transwell)法、黏附实验、细胞侵袭及管腔形成实验检测HUVEC的增殖活性、迁移、黏附、侵袭及管腔形成能力,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中VEGFR2磷酸化水平和蛋白含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测VEGFR2 mRNA表达水平。结果:与正常组比较,VEGF诱导24,48 h后均能显著升高HUVEC的增殖活性(P 0. 01),诱导24 h能明显升高HUVEC的迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力(P 0. 01),显著升高HUVEC中VEGFR2磷酸化及蛋白和mRNA表达水平(P 0. 01);与VEGF组比较,风湿祛痛胶囊低、中、高质量浓度组作用48 h均能明显抑制HUVEC增殖活性(P 0. 05,P 0. 01),作用24 h对VEGF诱导的HUVEC迁移、黏附、侵袭和管腔形成能力有明显抑制作用(P 0. 05),也能下调VEGFR2磷酸化及蛋白和mRNA表达水平(P 0. 05)。结论:风湿祛痛胶囊能降低VEGF诱导的HUVEC细胞增殖、迁移、黏附、侵袭及管腔形成能力,这一作用可能与其抑制VEGFR2的磷酸化、蛋白和mRNA表达水平有关。     

全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞纤溶活性的影响

目的观察不同浓度全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞（VEC）释放组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）活性的影响。方法以凝血酶和不同剂量的全蝎纯化液同时作用于培养的人脐静脉内皮细胞（VEC-340）,12h后收集细胞液测定t-PA和PAI活性。结果与空白组比较,凝血酶组t-PA活性降低,PAI活性增高,差异有统计学意义（P〈0.01）,与凝血酶组比较,全蝎大剂量、中剂量、小剂量组t-PA活性均增高,PAI活性降低,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凝血酶对VEC-340细胞具有损伤作用,可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。全蝎纯化液可促进血管内皮细胞释放t-PA,抑制PAI分泌,对纤溶平衡具有调节作用。提示这可能与全蝎纯化液增加血管内皮细胞抗血栓能力有关。