皮肤全层缺损真皮修复不同阶段对表皮再生的影响

背景：当前组织工程研究多着重表皮干细胞和真皮支架材料的研究,而少有真皮新生速度和真皮修复不同时期组织结构对表皮新生和重建影响的报道。 目的：观察真皮修复过程中对表皮修复和重建的影响以及是否有促进表皮修复速度的最佳阶段。 方法：新西兰大耳白兔10只分别于第0,7,14天在背部制成3个直径约为3 cm的创面,随机分为0,7,14 d组,每组计10个创面,3组创面分别于皮肤全层损伤修复后21,14,7 d植入自体表皮细胞羊膜载体复合膜。7 d后取材,采用大体观察、常规组织学观察(苏木精-伊红染色,Mallory PTAH染色)、Ⅰ型胶原免疫组织化学观察等化学染色动态观察创面愈合情况。 结果与结论：0 d组创面与周边正常有毛皮肤齐平,与周边组织连接明显较7 d组及14 d组紧密,7 d组尚有凹面,而14 d组创面凹陷明显较7 d组大而深,与周边组织分界明显,这表明0 d组皮肤缺损的修复效果明显优于其他2组(P < 0.05)。 0 d组Ⅰ型胶原阳性的成纤维细胞、血管及胶原纤维等组成的真皮网状层和乳头层较其他2组明显(P < 0.05),创面愈合率高(P < 0.05)。真皮修复的不同时期,对表皮再生的促进作用存在不同,全层皮肤缺损处于真皮修复的增生晚期与重建初期是促进表皮新生的最佳阶段。 关键词：表皮再生;羊膜;碱性成纤维生长因子;维生素C;皮肤缺损;皮肤组织工程     

缓释降解支架复合碱性成纤维细胞生长因子诱导心肌血管再生的作用☆

摘要 背景：研究证实碱性成纤维细胞生长因子具有刺激血管再生及侧支重建的作用，但是，以往多通过外周静脉、左心房或冠脉介入途径给药，心肌局部难以达到有效治疗浓度。 目的：基于高分子材料聚乳酸/乙醇酸的降解特性，复合碱性成纤维细胞生长因子，保证蛋白生长因子在局部组织中靶向释放，观察其诱导心肌血管再生效果。 方法：以聚乳酸、乙醇酸为原料，二氯甲烷溶解后加入重组人碱性成纤维细胞生长因子，通过模具塑形，制成外径/内径分别为3.0/ 2.8 mm、壁厚0.1 mm、长度10 mm的圆柱形中空管状支架备用。于小型猪冠脉前降支中、远端1/3交界处阻断，局部心肌颜色变为暗紫色，超声观察前壁心尖局部室壁运动异常证实模型制作成功，随机分至空白支架对照组和碱性成纤维细胞生长因子支架组，支架通过自主设计的机械打孔装置植入。6周后，免疫组织化学染色量化分析血管重建的增殖细胞数量，并结合Image Pro Plus软件量化各组新生血管密度，SPECT结合软件Emory Cardiac Toolbox分析灌注缺损区域质量百分率的变化。 结果与结论：6周后碱性成纤维细胞生长因子支架组增殖细胞数量、新生血管密度较空白支架组显著增加(P < 0.001)，心肌核素显像显示灌注质量缺损百分率较空白支架组显著减少(P < 0.001)。结果证实，复合碱性成纤维细胞生长因子的聚乳酸/乙醇酸支架能够显著增加新生血管密度，进而改善缺血部位心肌血流灌注。 关键词：心肌缺血；药物缓释；碱性成纤维细胞生长因子；支架；血管再生；生物医用可降解高分子材料 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.21.045     

体内胶原网架生物学转归中碱性成纤维细胞生长因子的表达

摘要 背景：脱细胞真皮基质作为一种新型的真皮替代物,用于组织缺损的修复,但对于脱细胞真皮基质在长期生物学转归过程中碱性成纤维细胞生长因子的表达变化规律,国内外尚未见相关报道。 目的：观察体内胶原网架长期生物学转归中碱性成纤维细胞生长因子的表达变化规律。 方法：选用成年雄性Wistar大鼠21只用于制备脱细胞真皮基质。取84只大鼠,于脊柱左侧作一深至深筋膜表面、面积为2.5 cm×2.5 cm的创口,回植脱细胞真皮基质至成年雄性Wistar大鼠背部皮下,以对侧正常皮肤做对照。于术后3,5,7,10 d,2,3,4,6,8,10周,4,6,8,10个月取材,采用免疫组织化学方法检测碱性成纤维细胞生长因子的表达。 结果与结论：碱性成纤维细胞生长因子3 d时开始出现阳性表达,并于10 d达到峰值,4周后趋于稳定,8周后各组未见明显变化,与正常皮肤表达一致。提示在脱细胞真皮基质长期的生物学转归过程中,脱细胞真皮基质的改建首先从周边开始逐渐向中央迁移,并于6~8周后改建趋于稳定,被视为自身组织,并参与机体正常组织代谢过程。 关键词：碱性成纤维细胞生长因子;脱细胞真皮基质;吸光度;免疫组织化学;转归 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.47.020     

长波紫外线照射皮肤成纤维细胞表皮生长因子受体的表达*☆

背景：长波紫外线与人体皮肤老化关系密切,主要作用于表皮和真皮全层。 目的：观察长波紫外线照射对体外培养的皮肤成纤维细胞的表皮生长因子受体表达的影响。 方法：体外培养人成纤维细胞,将细胞分为对照组、长波紫外线照射5,10,20 J/cm2组。照射24 h后,分别用实时PCR和Western blot检测表皮生长因子受体mRNA和蛋白的表达情况。 结果与结论：体外培养的皮肤成纤维细胞随着长波紫外线照射剂量的增加,表皮生长因子受体的mRNA与蛋白水平均显著增加,提示长波紫外线可以诱导成纤维细胞里的表皮生长因子的表达。     

人重组骨形态发生蛋白2及碱性成纤维细胞因子纤维蛋白复合物修复兔陈旧性关节软骨缺损：18周组织学观察

背景：纤维蛋白的天然网状结构为骨髓细胞黏附、增殖提供了良好的三维空间环境，且同时又限制了人重组骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子的快速扩散，使两者随着纤维蛋白的逐渐降解而缓慢释放，最终诱导间充质细胞向软骨转化。 目的：观察人重组骨形态发生蛋白2和碱性成纤维细胞生长因子分别复合纤维蛋白后，修复兔陈旧性关节软骨缺损的效果。 设计、时间及地点：组织形态学观察，于2005-07/2006-02在石河子大学医学院完成。 材料：清洁级健康8周龄新西兰大白兔18只36膝，随机分为3组：人重组骨形态发生蛋白2组、碱性成纤维细胞生长因子组、对照组，6只12膝/组。人重组骨形态发生蛋白2，碱性成纤维细胞生长因子为英国BioSource产品；冻干人纤维蛋白原为上海莱士血制品有限公司产品。 方法：各组兔均于双侧膝关节股骨髌股关节面制备直径4 mm、深3 mm的全层软骨缺损，4周后在原切口再次开腔，清除缺损区内的纤维组织，钻通骨髓腔，成为陈旧性关节损伤。人重组骨形态发生蛋白2组用注射器注入人重组骨形态发生蛋白2+冻干人纤维蛋白原，使复合物添满缺损区；碱性成纤维细胞生长因子组同法注入碱性成纤维细胞生长因子+冻干人纤维蛋白原；对照组单纯注入等量的冻干人纤维蛋白原。 主要观察指标：光镜及电镜观察骨缺损区组织修复及软骨再生情况，并进行组织学评分。 结果：18只兔（36膝）均进入结果分析。人重组骨形态发生蛋白2组修复后10，14周，软骨缺损被白色半透明坚硬组织平滑修复，富有光泽，与正常软骨边界清楚，至18周时修复组织与正常软骨边界模糊，质地坚硬，表面平滑光润；碱性成纤维细胞生长因子组修复后10，14，18周时均有1膝关节缺损区未能完全修复；对照组全程均未见软骨修复。与对照组比较，人重组骨形态发生蛋白2组、碱性成纤维细胞生长因子组再生软骨组织学评分均明显降低（P < 0.01），且前组下降幅度优于后组（P < 0.05）。 结论：人重组骨形态发生蛋白2纤维蛋白复合物可有效修复兔陈旧性关节软骨缺损，且短期效果优于碱性成纤维细胞生长因子纤维蛋白复合物。     

组织工程皮肤移植过程中白细胞介素10和肿瘤坏死因子α的表达

背景：白细胞介素10和肿瘤坏死因子α在异体异种皮肤移植局部免疫与排斥反应中发挥了重要作用。但在组织工程人工皮肤移植过程中局部皮肤组织内白细胞介素10和肿瘤坏死因子α的表达情况目前尚不清楚。 目的：采用表皮干细胞联合脱细胞真皮构建人工皮肤并移植修复兔全层皮肤缺损创面,观察创面修复效果和局部皮肤组织白介素10与肿瘤坏死因子α的表达变化。 方法：将体外培养的人表皮干细胞或角质细胞接种到脱细胞真皮支架中,构建组织工程人工皮肤;取新西兰白兔常规制作背部全层皮肤缺损创面随机分为4组,表皮干细胞组、角质细胞组用含表皮干细胞或角质细胞的组织工程皮肤移植于皮肤缺损创面;脱细胞真皮组移植单纯脱细胞真皮;对照组创面空置。观察创面修复情况,局部炎症反应,创面愈合时间。各组分别于术后7d在部分创面取材观察组织形态和白细胞介素10与肿瘤坏死因子α表达。 结果与结论：含表皮干细胞的人工皮肤移植后创面愈合良好,局部炎症反应轻微,无出血、积脓、坏死,创面愈合时间较角质细胞组明显缩短。白细胞介素10在各组均有表达,其中表皮干细胞组表达最强,角质细胞组次之,脱细胞真皮组和对照组最弱。肿瘤坏死因子α在各组也均有表达,其中角质细胞组表达最强,表皮干细胞组次之,脱细胞真皮组和对照组较弱。说明以表皮干细胞作为种子细胞联合脱细胞真皮构建人工皮肤可用有效促进皮肤缺损创面的修复治疗,创面修复过程中局部皮肤组织内白细胞介素10和肿瘤坏死因子的表达变化可能是其取得较好效果的主要机制之一。     

含有生肌液的组织工程皮肤修复兔皮肤缺损

背景：在皮肤开放创面上进行缺损修复与重建是组织修复领域的研究焦点。构建含有中药的组织工程皮肤修复创面缺损的研究并不多见。 目的：将含有生肌液的皮肤支架与自体皮肤细胞复合，构建含药组织工程皮肤，修复兔皮肤缺损。 设计：自体对照动物实验。 单位：实验于2005-02/08在天津市天津医院骨科研究所细胞工程室完成。 材料：同窝大耳白兔8只，体质量1.6~1.8 kg。自行提取生肌液(1 500 g/L)，成分为当归、生地、龟板、象皮、血余、生石膏、炉甘石；明胶-壳聚糖支架材为料天津大学提供，分别修剪成1.3 cm直径的圆片，60Co照射灭菌；DR无细胞真皮基质由江苏省启动市医疗用品研究所提供。 方法：分离培养兔皮肤细胞，获取第3代角质形成细胞与成纤维细胞。延兔脊柱两侧制作直径1.5 cm的圆形全层皮肤缺损创面4个。分为4组，阴性对照组（明胶-壳聚糖支架贴附于创面后滴加生理盐水），人工真皮组（DR无细胞真皮基质贴附于创面后接种细胞悬液），非含药组织工程皮肤组（明胶-壳聚糖支架贴附于创面后接种细胞悬液），含药组织工程皮肤组（生肌液-明胶-壳聚糖支架贴附于创面后接种细胞悬液）。 主要观察指标：①术后13 d测量剩余创面面积。②术后7 d、10 d取材行组织学与免疫组织化学染色检测。 结果：①术后13 d各组创面面积均有不同程度的缩小，剩余面积阴性对照组>人工真皮组>非含药组织工程皮肤组>含药组织工程皮肤组，非含药组织工程皮肤组、含药组织工程皮肤组与阴性对照组比较差异有显著性意义（P < 0.05)。②术后10 d，阴性对照组、人工真皮组、非含药组织工程皮肤组均有炎性肉芽组织增生，无表皮组织形成；含药组织工程皮肤组形成接近正常的上皮组织及幼稚的真皮组织。非含药组织工程皮肤组与人工真皮组BrdU标记弱阳性，含药组织工程皮肤组BrdU标记强阳性。 结论：实验采用的方法使种子细胞在含有生肌液的明胶-壳聚糖支架上增殖，在体修复皮肤损伤，能够有效扩展皮肤缺损处的覆盖面积，缩短皮肤缺损的愈合时间。     

不同来源人羊膜间充质干细胞的混合培养

背景：人羊膜间充质干细胞可诱导分化为神经样细胞,但在培养过程中发现干细胞增殖的数量不足。 目的：为了获得足够数量的人羊膜间充质干细胞,观察人羊膜间充质干细胞混合培养的生长情况及经碱性成纤维细胞生长因子诱导人羊膜间充质干细胞向神经样细胞的分化情况。 方法：将两个不同胎盘来源的羊膜分离培养、混合,采用细胞分离和培养技术获取人羊膜间充质干细胞,分离人羊膜间充质干细胞后传代培养,加入碱性成纤维细胞生长因子诱导分化。当细胞传至第3代时,随机取培养的6份人羊膜间充质干细胞(半量)为A组,6份人羊膜间充质干细胞(半量)为B组,将A、B组各剩余的半量人羊膜间充质干细胞混合为C组。3组细胞浓度均为1.0×107 L-1。以活细胞计数和MTT比色法比较3组细胞扩增数量,以免疫组织化学法检测羊膜间充质干细胞神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白的表达。 结果与结论：混合人羊膜间充质干细胞之间有互相促增殖的作用。人羊膜间充质干细胞具有较强的可朔性,经碱性成纤维细胞生长因子诱导的人羊膜间充质干细胞可表达神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白。     

碱性成纤维细胞生长因子促进冻干肌腱移植重建前交叉韧带的早期血管生成：组织学表现

背景：以往实验已证实碱性成纤维细胞生长因子在体内外均有促新生血管形成的作用。冻干法可以减低移植物的抗原性，经冻干处理后的移植物保存时间长并且运输方便，更容易商品化。冻干肌腱补充活性细胞生长因子有望加速新血管的生成。 目的：拟验证碱性成纤维细胞生长因子促进冻干肌腱移植重建前交叉韧带后早期血管的生成作用。 设计、时间及地点：对照观察动物实验，于2006-06/2007-06在解放军第四军医大学西京医院骨科研究所完成。 材料：选用健康成年家犬14只。 方法：取2只犬，无菌手术取其双下肢伸趾长肌腱16条，冻干处理后供实验用。将其余12只犬左、右侧膝关节分别移植单纯冻干肌腱和复合100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子后冻干肌腱重建前交叉韧带。 主要观察指标：分别于移植后1，2，3，4，5，6周取材，每次取2只。进行苏木精-伊红染色，通过图像分析仪定性观察新生血管的生成情况。 结果：复合碱性成纤维细胞生长因子冻干肌腱组移植后两三周出现新生血管，四五周达到高峰；单纯冻干肌腱组移植后四五周出现新生血管。复合碱性成纤维细胞生长因子冻干肌腱组新血管长入肌腱的时间先于对照组，深度深于对照组。 结论：复合100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子的冻干肌腱移植重建前交叉韧带后，在新血管形成的时间及长入肌腱的深度方面均优于单纯冻干肌腱。     

NaOH消蚀法制备脱细胞真皮基质修补腹壁疝*

背景：与其他疝修补材料相比,脱细胞真皮基质具有易血管化、抗感染、从而可用替代传统补片用于感染腹壁缺损重建等特点。 目的：观察NaOH消蚀法制备的脱细胞真皮基质作为修补材料应用于腹疝的应用价值。 方法：以全厚猪皮制成脱细胞真皮基质,45只SD雄性大鼠制备腹壁疝模型,随机数字表法分为腹壁疝组：直接缝合皮肤,Marlex网组和脱细胞真皮基质组：分别应用大小为3.5 cm×4.0 cm的Marlex网和脱细胞真皮基质缝合皮肤;观察修复后1周时有无腹壁疝发生,脱细胞真皮基质组修复后1,2,3,5,10周分别取材,其中每周各组取4只用于苏木精-伊红染色,光镜观察。修复后第5周Marlex网组和脱细胞真皮基质组各取6只用于抗张力试验。 结果与结论：术后1周脱细胞真皮基质组与Marlex网组腹壁疝发生率均显著低于腹壁疝组(P < 0.001)。脱细胞真皮基质的胶原纤维无明显变化,即有少量成纤维细胞植入,术后2周可见新生血管,术后5周脱细胞真皮基质内部血管密度基本稳定。将单独脱细胞真皮基质片与Marlex网行抗张力试验,Marlex网的抗张力显著高于脱细胞真皮基质(P < 0.001)。但植入体内5周后,脱细胞真皮基质筋膜组织的抗张力高于Marlex-筋膜组织(P < 0.05)。提示复合消蚀制备的脱细胞真皮基质可以作为良好的疝修补材料。     

Implantation of a new porous gelatin-siloxane hybrid into a brain lesion as a potential scaffold for tissue regeneration.

For brain tissue regeneration, any scaffold for migrated or transplanted stem cells with supportive angiogenesis is important once necrotic brain tissue has formed a cavity after injury such as cerebral ischemia. In this study, a new porous gelatin-siloxane hybrid derived from the integration of gelatin and 3-(glycidoxypropyl) trimethoxysilane was implanted as a three-dimensional scaffold into a defect of the cerebral cortex. The porous hybrid implanted into the lesion remained at the same site for 60 days, kept integrity of the brain shape, and attached well to the surrounding brain tissues. Marginal cavities of the scaffolds were occupied by newly formed tissue in the brain, where newly produced vascular endothelial, astroglial, and microglial cells were found with bromodeoxyuridine double positivity, and the numbers of those cells were dose-dependently increased with the addition of basic fibroblast growth factor (bFGF) and epidermal growth factor (EGF). Extension of dendrites was also found from the surrounding cerebral cortex to the newly formed tissue, especially with the addition of bFGF and EGF. The present study showed that a new porous gelatin-siloxane hybrid had biocompatibility after implantation into a lesion of the central nervous system, and thus provided a potential scaffold for cell migration, angiogenesis and dendrite elongation with dose-dependent effects of additive bFGF and EGF.     

Basic fibroblast growth factor promotes nerve regeneration in a C- -ion-implanted silicon chamber

We reported previously that a silicone tube whose inner surface has been implanted with negatively charged carbon ions (C-) enables a nerve to regenerate across a 15-mm inter-stump gap. In this study, we investigated whether a C- -ion-implanted tube pretreated with basic fibroblast growth factor promotes peripheral nerve regeneration. The C- -ion-implanted tube significantly accelerated nerve regeneration, and this effect was enhanced by basic fibroblast growth factor.     

纳米羟基磷灰石复合胶原膜的组织学评估

摘要 背景：初期使用的胶原、聚乳酸等单组分诱导骨再生膜在诱导成骨的效率方面已逐渐暴露其缺陷,于是以胶原、聚乳酸等可吸收材料为载体,羟基磷灰石、纤维生长因子、骨形成蛋白等为填料的诱导骨再生膜成为国内外研究的重点。 目的：观察纳米羟基磷灰石复合胶原膜组织反应对诱导骨再生的适用性。 方法：将聚丙交酯乙交酯膜、胶原膜、纳米羟基磷灰石复合胶原膜光滑面和粗糙面分别植入大鼠皮下,于10,20,30, 45 d取出,采用苏木精-伊红染色法,依照纤维包膜定量、定性、界面定性和降解率等进行组织学评分,研究3种膜的组织反应和降解情况。 结果与结论：纳米羟基磷灰石复合胶原膜在各个观察时间均有散在的淋巴细胞,但未见明显的巨噬细胞。随着时间的延长,膜逐渐变小,钙化物随着植入时间的延长而增加。胶原膜组织反应轻微,45 d几乎完全降解。聚丙交酯乙交酯膜浸润增多,纤维包裹明显。结果提示纳米羟基磷灰石复合胶原膜具有良好的生物相容性和适度的降解性,适合引导骨组织再生的需要。 关键词：引导骨组织再生;纳米羟基磷灰石复合胶原膜;组织学评估;生物降解;聚丙交酯乙交酯 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2010.42.011     

多种神经营养因子联合诱导培养骨髓间充质干细胞向少突胶质样细胞的定向分化

背景：轴突再生后髓鞘化是影响脊髓损伤后恢复的一个关键性因素,而少突胶质细胞存活的多少直接影响轴突再生后髓鞘化。 目的：探讨骨髓间充质干细胞经神经营养因子诱导培养后,向少突胶质样细胞定向分化的可行性。 设计、时间及地点：细胞分子生物学的体外实验,于2006-09/2007-06在同济医院骨科实验室完成。 材料：选用2~4周龄SD大鼠5只,雌雄不拘,取其双侧股骨、胫骨骨髓,分离培养骨髓间充质干细胞。培养用诱导因子表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子为美国Invitrogen公司产品。 方法：取培养至第4代的骨髓间充质干细胞,加入含有20 ng/mL碱性成纤维细胞生长因子、20 ng/mL表皮生长因子、N2添加剂的无血清培养基的诱导液诱导48 h后,加含500 ng/mL胰岛素样生长因子1、N2添加剂的分化培养液培养3 d。 主要观察指标：相差显微镜观察诱导过程中骨髓间充质干细胞的形态学变化。半定量RT-PCR检测少突胶质细胞特异性标志物mRNA的表达。应用神经元细胞标志物抗微管相关蛋白,星形胶质细胞标志物抗神经纤维酸性蛋白,少突胶质细胞标志物抗半乳糖脑苷脂、抗磷脂碱性蛋白抗体进行免疫细胞化学染色,检测骨髓间充质干细胞定向分化为少突胶质样细胞的阳性率。 结果：①骨髓间充质干细胞向少突胶质样细胞诱导分化过程中的形态学变化：经诱导分化后,大部分骨髓间充质干细胞表现出少突胶质细胞的形态学特征,胞质向细胞核回缩,细胞突起向外延伸,折光性增强,随时间延长多个细胞突起相互连接形成典型的网状结构。②少突胶质细胞特异性标志物mRNA的表达：细胞诱导分化后可检测到磷脂碱性蛋白mRNA、半乳糖脑苷脂mRNA的特异性条带。③少突胶质细胞阳性率：在诱导分化条件下,半乳糖脑苷脂阳性率为65%,磷脂碱性蛋白阳性率为45%,微管相关蛋白2阳性率为10%。 结论：碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子与胰岛素样生长因子联合应用能够有效促进骨髓间充质干细胞向少突胶质样细胞定向分化。     

Isolation of neural stem cells from damaged rat cerebral cortex after traumatic brain injury

Nestin-positive cells were seen around the damaged area at 24 h, 72 h and 7 days after rat traumatic brain injury. Tissue was isolated from around the damaged area at 72 h after injury and spheres were cultured with basic fibroblast growth factor and epidermal growth factor. These spheres could not be isolated at 24 h and 7 days after injury. Isolated spheres consisted of nestin-positive neural stem cells. Neurospheres differentiated into Tuj1-positive, glial fibrillary acidic protein-positive and O4-positive cells after 4 days in culture without basic fibroblast growth factor and epidermal growth factor. These results indicate that isolated and cultured neurospheres can differentiate into neurons and glia. An increase in nestin-positive cells around a cerebral cortical damaged area might contribute to neurogenesis and neuroplasticity.     

纳米银敷料结合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗烧伤残余创面

目的：观测纳米银敷料结合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗烧伤残余创面的疗效。 方法：选取临床深Ⅱ度及Ⅲ度烧伤所致残余创面患者40例,随机分为两组,每组20例。治疗组应用纳米银敷料结合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶进行换药;对照组应用生理盐水和无菌石蜡油纱布换药。观测记录各组病例的愈合时间、创面感染例数、不同时相点创面愈合率、各组治疗前和治疗7 d时创面细菌培养情况、药物不良反应。 结果：治疗组的愈合时间明显短于对照组(P < 0.01);治疗组不同时相点创面愈合率明显高于对照组(P < 0.01);治疗组创面感染例数明显少于对照组(P < 0.01);治疗7 d后,治疗组致病细菌检出率明显低于对照组(P < 0.01)。 结论：将纳米银敷料结合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶应用于可以非手术治疗的烧伤残余创面,有较好的抗菌作用及促进创面修复作用,能有效缩短烧伤残余创面的愈合时间。 关键词：纳米银敷料;重组牛碱性成纤维细胞生长因子;烧伤;残余创面 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2009.47.036     

细胞因子联合纹状体条件培养液定向诱导间充质干细胞体外分化为多巴胺能神经元

背景：在众多体外诱导间充质干细胞向多巴胺能神经元的诱导分化研究中，诱导阳性率仍不理想。 目的：实验应用碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和纹状体条件培养液定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为多巴胺能神经元，拟探讨提高诱导阳性率的方法。 设计、时间及地点：以细胞为对象的对照观察细胞学实验，于2006-07/2007-12在山东大学齐鲁儿童医院和山东大学第二医院血液实验室完成。 材料：健康成年Wistar大鼠用于骨髓间充质干细胞的分离，新生Wistar大鼠用于纹状体条件培养液的制备。 方法：采用贴壁法分离纯化健康成年Wistar大鼠骨髓间充质干细胞进行传代培养。取出生24 h内新生Wistar大鼠，完整剥离其大脑组织制备纹状体条件培养液。取体外培养的第5代间充质干细胞，用含碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子的预诱导液进行预诱导，24 h后去除预诱导液，换用纹状体条件培养液进行诱导。 主要观察指标：倒置显微镜下观察细胞形态变化，并应用细胞免疫化学技术检测细胞内神经元特异烯醇化酶和酪氨酸羟化酶表达。 结果：大鼠骨髓间充质干细胞经碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子和纹状体条件培养液诱导后细胞胞体逐渐回缩成团，形成梭形，部分细胞可见突起伸出，类似神经元。细胞免疫化学检测，诱导后细胞神经元特异烯醇化酶阳性表达率为( 72.70±14.81)%，酪氨酸羟化酶阳性表达率为(34.50±15.93)%。 结论：应用碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子联合纹状体条件培养液诱导分化体系，获得了高比例的神经元，其中包括较多的多巴胺能神经元。     

Altered cutaneous nerve regeneration in a simian immunodeficiency virus / macaque intracutaneous axotomy model

To characterize the regenerative pattern of cutaneous nerves in simian immunodeficiency virus (SIV)‐infected and uninfected macaques, excisional axotomies were performed in nonglabrous skin at 14‐day intervals. Samples were examined after immunostaining for the pan‐axonal marker PGP 9.5 and the Schwann cell marker p75 nerve growth factor receptor. Collateral sprouting of axons from adjacent uninjured superficial dermal nerve bundles was the initial response to axotomy. Both horizontal collateral sprouts and dense vertical regeneration of axons from the deeper dermis led to complete, rapid reinnervation of the epidermis at the axotomy site. In contrast to the slower, incomplete reinnervation previously noted in humans after this technique, in both SIV‐infected and uninfected macaques epidermal reinnervation was rapid and completed by 56 days postaxotomy. p75 was densely expressed on the Schwann cells of uninjured nerve bundles along the excision line and on epidermal Schwann cell processes. In both SIV‐infected and uninfected macaques, Schwann cell process density was highest at the earliest timepoints postaxotomy and then declined at a similar rate. However, SIV‐infection delayed epidermal nerve fiber regeneration and remodeling of new sprouts at every timepoint postaxotomy, and SIV‐infected animals consistently had lower mean epidermal Schwann cell densities, suggesting that Schwann cell guidance and support of epidermal nerve fiber regeneration may account for altered nerve regeneration. The relatively rapid regeneration time and the completeness of epidermal reinnervation in this macaque model provides a useful platform for assessing the efficacy of neurotrophic or regenerative drugs for sensory neuropathies including those caused by HIV, diabetes mellitus, medications, and toxins. J. Comp. Neurol. 514:272–283, 2009. © 2009 Wiley‐Liss, Inc.     

人工真皮复合自体薄皮移植治疗皮肤软组织缺损

背景：修复皮肤软组织缺损自体或异体植皮治疗,往往需要多次植皮。而国内临床上应用人工真皮较少,应用经验亦不足。 目的：评价人工真皮治疗皮肤软组织缺损的疗效。 方法：收集因皮肤软组织缺损,行人工真皮结合自体薄皮移植修复创面的22例患者,其中骨外露6例,肌腱外露2例,表皮肿瘤切除3例,其他11例。一期清创移植人工真皮,2~4周后局部肉芽组织生长良好,外露肌腱、骨组织被类真皮组织覆盖,二期移植自体薄层皮片。观察取皮部位、损伤部位、操作性能、密封性、不良反应情况,结合评价临床效果及综合评价。 结果与结论：20例患者人工真皮结合二期自体薄皮移植全部存活,至二期植皮所需时间(18.50±4.27) d,其中1例患者因感染再次手术,2例患者行人工真皮后未行二期植皮,而自动上皮化;随访至3个月,21例损伤部位表皮生长性、外观性均良好、无瘢痕增生,1例因感染而致瘢痕增生严重、外观不良,但生长性良好;20例患者取皮部位无明显的色素沉着及色素脱出,无严重增生性瘢痕,上皮形成时间为(15.35±4.67) d。说明人工真皮结合自体薄皮移植修复皮肤软组织缺损,操作简便,创面愈合质量高,供皮区损伤轻微,至二期植皮时间较长,总体临床效果良好。