癌痛消颗粒调节大鼠移植性肝癌VEGF和MVD表达的实验研究

目的：用大鼠walker-256移植性肝癌模型研究癌痛消颗粒对肿瘤血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的影响，以探讨该药癌痛消颗粒抗肝癌作用的机制。方法：将40只大鼠移植性肝癌模型随机分为4组，即癌痛消颗粒高剂量组（A组）、癌痛消颗粒低剂量组（B组）、5-Fu组（c组）、生理盐水组（D组），于造模后第8天对癌痛消治疗组及生理盐水组灌胃给药，5-Fu组腹腔注射给药，连续用药14天后停药24h，处死大鼠，取出瘤块，用免疫组化法检测瘤块中vEGF和MVD的表达情况。另设正常饲养组（E组）大鼠10只，不进行造模及给药，供实验结束时作空白对照用。结果：造模各组（A、B、C、D组）VEGF及MVD的表达水平均明显高于正常组（E组）（P〈0．01）；两者的表达均以D组最高；和D组比较，A、B、C组均可明显降低VEGF及MvD的表达（P〈0．01），A组比B组作用更为明显（P〈0．05）.结论：癌痛消颗粒可下调大鼠移植性肝癌VEGF和MVD的表达，以高剂量组作用更为明显。     

癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌VEGF-C的干预作用

目的观察癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌血管内皮因子C(VEGF-C)表达的影响。方法将40只大鼠移植性肝癌模型随机分为4组,即癌痛消颗粒高剂量组(A组)、癌痛消颗粒低剂量组(B组)、5-Fu组(C组)、模型对照组(D组),并设正常对照组(E组)。于造模后第8天开始给药,连续用药14d后停药24h,处死大鼠,取出瘤块,测量体积、免疫组化法检测瘤块中VEGF-C的表达情况。结果 A、B、C、D组VEGF-C均高于E组,差异均有统计学意义(均P0.05),其中以D组VEGF-C表达最高。A、B、C组VEGF-C均低于D组,差异均有统计学意义(均P0.05)。A组VEGF-C低于B组,差异有统计学意义(P0.05)。结论癌痛消颗粒对大鼠移植性肝癌VEGF-C的表达有抑制作用,且以高剂量组作用更为明显。     

扶正消瘤颗粒含药血清对肝癌HepG2细胞体外增殖和凋亡相关蛋白的影响

目的:观察扶正消瘤颗粒含药血清对肝癌HepG2细胞增殖及凋亡相关蛋白的影响。方法:60只雄性SD大鼠,随机分为6个组,每组10只,分别为扶正消瘤颗粒低剂量组、扶正消瘤颗粒中剂量组、扶正消瘤颗粒高剂量组、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)组、联合组、对照组。中药各剂量组给予不同剂量扶正消瘤颗粒灌胃;5-FU组给予5-FU腹腔灌注;联合组给予中剂量的扶正消瘤颗粒灌胃,同时给予5-FU腹腔灌注;对照组给予生理盐水灌胃。采用四甲基偶氮唑盐比色法检测肝癌HepG2细胞增殖;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞法检测肝癌HepG2细胞凋亡;Western-Blot法观察各组肝癌HepG2细胞P53蛋白、Bcl-2蛋白和Survivin蛋白的表达。结果:扶正消瘤颗粒含药血清可抑制肝癌HepG2细胞的增殖,并呈时间、剂量依赖性;其中联合组对肝癌HepG2细胞的抑制率最高,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);不同浓度扶正消瘤颗粒含药血清均可诱导肝癌HepG2细胞的凋亡,联合组凋亡率最高,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05);与对照组比较,各扶正消瘤颗粒含药血清组均可下调Bcl-2和Survivin蛋白的表达,增强P53蛋白的表达。结论:扶正消瘤颗粒含药血清可诱导肝癌HepG2细胞凋亡,其作用可能是通过抑制Bcl-2和Survivin蛋白的表达,增强P53蛋白的表达实现的。     

宫瘤消胶囊对子宫内膜异位症大鼠异位内膜中Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:观察宫瘤消胶囊对子宫内膜异位症(内异症)模型大鼠异位内膜中凋亡基因Bcl-2、Bax蛋白的表达的影响,为该药治疗内异症提供理论依据。方法:于大鼠动情期行自体移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,造模成功后随机分为模型组、桂枝茯苓胶囊组及宫瘤消胶囊小、中、大剂量组,各组分别给予指定药物进行灌胃干预,另取一组正常大鼠为正常内膜组,用生理盐水灌胃。用免疫组织化学法检测各组大鼠异位内膜中凋亡基因Bcl-2和Bax的蛋白表达情况。结果:与正常内膜组比较,模型组Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2蛋白的表达明显升高,Bax/Bcl-2比值降低(P0.01);与模型组比较,宫瘤消胶囊各剂量组Bax蛋白表达明显升高,Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax/Bcl-2比值增加(P0.05,P0.01),且作用随药物剂量增加而增加(P0.05,P0.01)。结论:宫瘤消胶囊可能通过调节凋亡基因Bcl-2和Bax的表达来实现对异位内膜的凋亡的控制。     

罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌TACE后HIF-1α和Bcl-2表达的影响

目的:观察罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌行经导管肝动脉化疗栓塞术(TACE)后组织中乏氧诱导因子(α)(HIF-1α)和凋亡抑制基因Bcl-2表达的影响,探讨该药对肝肿瘤乏氧微环境的作用。方法:建立大鼠移植性肝癌模型后,随机分为5组。对TACE+生理盐水组和TACE+罗勒胶囊大、中、小剂量组大鼠进行TACE,并分别给予生理盐水和大、中、小剂量罗勒胶囊灌胃,对非TACE对照组大鼠只进行开腹操作,不进行TACE。10d后取出移植性肝癌病理标本,免疫组化法检测肿瘤组织中HIF-1α和Bcl-2表达情况。结果:行TACE的4组大鼠瘤重与非TACE组比较均明显减轻(P<0.05),TACE+罗勒胶囊大剂量组瘤重较TACE+生理盐水组显著减轻(P<0.05);HIF-1α和Bcl-2阳性表达率方面:TACE+生理盐水组与非TACE组比较显著升高(P<0.01),TACE+罗勒胶囊大、中剂量组较TACE+生理盐水组显著降低(P<0.05)。结论:罗勒胶囊能使肿瘤组织中HIF-1α和Bcl-2表达降低,改善肝肿瘤局部的乏氧微环境并促进细胞凋亡,抑制大鼠移植性肝癌TACE术后肿瘤的复发。     

中药罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌TACE后VEGF和Bcl-2表达的影响

目的 观察罗勒胶囊对大鼠移植性肝癌经肝动脉化疗栓塞术(TACE)后细胞中VEGF和Bcl-2表达的影响,探讨罗勒胶囊对肝肿瘤TACE后乏氧微环境的影响及意义。方法 建立大鼠移植性肝癌模型,10 d后将造模成功的大鼠随机分为5组。对TACE+生理盐水组和TACE+罗勒胶囊高、中、低剂量组4组大鼠进行TACE,并分别给予生理盐水10 mL/(kg·d)和罗勒胶囊300、150、75 mL/(kg·d) ig,对非TACE对照组大鼠只进行开腹操作,不进行TACE。给药10 d后取出移植性肝癌病理标本,免疫组化法检测肿瘤组织中VEGF和Bcl-2表达情况。结果 瘤质量：行TACE的4组大鼠与非TACE组比较均明显减轻(P<0.05,P<0.01),TACE+罗勒胶囊高剂量组较TACE+生理盐水组显著减轻(P<0.05);VEGF和Bcl-2阳性表达率：TACE+生理盐水组与非TACE组比均显著升高(P<0.01);TACE+罗勒胶囊高、中、低剂量组较TACE+生理盐水组显著降低(P<0.01);TACE+罗勒胶囊高剂量组较TACE+罗勒胶囊中、低剂量组显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 中药罗勒胶囊能改善肝肿瘤局部的乏氧微环境并促进细胞凋亡,使肿瘤组织中VEGF和Bcl-2表达降低,抑制大鼠移植性肝癌TACE术后肿瘤的侵袭和转移。     

黄芪黄酮对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经节的保护作用及机制

目的 探讨黄芪黄酮对糖尿病周围神经病变大鼠背根神经节氧化应激及细胞凋亡的影响及机制.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、黄芪黄酮组和阳性对照组,每组10只.模型组、黄芪黄酮组和阳性对照组腹腔注射2％的链脲佐菌素制备糖尿病周围神经病变大鼠模型,正常对照组腹腔注射等量枸橼酸盐缓冲液.造模成功后,分别给予黄芪黄酮组、阳性对照组大鼠灌胃黄芪黄酮、金芪降糖片,给予其他两组灌胃等量蒸馏水.造模30 d时,采用血糖仪及Von Frey仪分别测量各组大鼠血糖及机械痛阈值.取各组大鼠的背根神经节组织,检测细胞凋亡率、膜电位水平,并测定背根神经节组织的活性氧簇(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛含量以及细胞色素C(Cyt-C)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved Caspase3)、p38和磷酸化p38(p-p38)的蛋白表达水平.结果(1)造模30 d时,与正常对照组比较,模型组大鼠的血糖水平、背根神经节细胞凋亡率升高,背根神经节组织的ROS和丙二醛含量以及Cyt-C、Bax、cleaved Caspase3、p38、p-p38蛋白表达水平均增加,而机械痛阈值及背根神经节组织的膜电位水平、SOD含量、Bcl-2蛋白表达水平均降低(均P<0.05).(2)造模30 d时,与模型组比较,黄芪黄酮组和阳性对照组大鼠的血糖水平、背根神经节细胞凋亡率均降低,背根神经节组织的ROS和丙二醛含量以及Cyt-C、Bax、cleaved Caspase3、p38、p-p38蛋白表达水平均下降,机械痛阈值及背根神经节组织的膜电位水平、SOD含量、Bcl-2蛋白表达水平均升高(均P<0.05);且与阳性对照相比,黄芪黄酮组背根神经节细胞凋亡率下降,背根神经节组织的ROS和丙二醛含量以及Cyt-C、Bax、p38、p-p38蛋白表达水平均降低,机械痛阈值、背根神经节组织的膜电位水平、SOD含量均升高(均P<0.05).结论 黄芪黄酮可抑制糖尿病大鼠背根神经节组织氧化应激反应、细胞凋亡以及p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路,从而减轻周围神经损伤.     

扶正抑瘤颗粒药物血清诱导小鼠肝癌细胞凋亡及其机制的研究

目的:研究中药复方扶正抑瘤颗粒药物血清对小鼠肝癌H22细胞凋亡的影响及其作用机制.方法:采用扶正抑瘤颗粒药物血清,温育体外培养的H22小鼠肝癌细胞.流式细胞仪进行细胞周期分析,检测凋亡率;透射电镜观察细胞超微结构变化;链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(streptavidin-biotin peroxidase complex,SABC)免疫细胞化学法观察凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的变化.结果:扶正抑瘤颗粒药物血清可影响细胞周期,使小鼠肝癌H22细胞的增殖阻滞在G1/G0期,并可测到凋亡峰,同时可下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达(扶正抑瘤颗粒药物血清组与空白对照组比较,P<0.05).结论:扶正抑瘤颗粒可通过影响细胞生长周期,调节Bcl-2和Bax蛋白的表达诱导小鼠肝癌细胞凋亡.     

益髓理血饮减少二甲基苯蒽诱导的骨髓增生异常综合征大鼠骨髓细胞凋亡

目的：探索中药复方益髓理血饮对二甲基苯蒽诱导的骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS) 模型大鼠骨髓细胞凋亡的作用。方法：采用化学诱变剂二甲基苯蒽诱导建立大鼠MDS模型,并分为正常对照组、模 型+PBS组、模型+复方皂矾丸组、模型+益髓理血饮低剂量组和模型+益髓理血饮高剂量组,每组12 只。于造模第14 天开始分组连续给药30 d。观察各组大鼠一般情况,给药后的第31天将各组的大鼠处死,显微镜下观察骨髓细胞的病 理学改变,检测各组大鼠外周血细胞、免疫组织化学检测Bcl-2和Bax蛋白表达,流式细胞仪检测骨髓细胞凋亡情况。 结果：与正常对照组相比,模型+PBS组大鼠骨髓细胞病态造血,外周白细胞、红细胞、血红蛋白和血小板下降明 显,促凋亡蛋白Bax明显增加,抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显减少(P<0.01),与模型+PBS组相比,治疗各组大鼠外周白细 胞、红细胞、血红蛋白和血小板升高,促凋亡蛋白Bax明显减少,抑凋亡蛋白Bcl-2表达明显增加(P<0.05或P<0.01),尤 以模型+益髓理血饮高剂量组最为明显(P<0.01);与正常对照组相比,模型+PBS组骨髓细胞的总凋亡率、早期凋亡率 和晚期凋亡率均有所增加(P<0.01),治疗各组的凋亡率均有所下降(P<0.05或0.01),尤其总凋亡率和早期凋亡率下降更 为明显,仅有益髓理血饮对降低晚期凋亡率疗效明显(P<0.01),且高剂量组优于低剂量组。结论：中药复方益髓理血 饮治疗MDS能改善其外周血细胞情况,降低促凋亡蛋白Bax表达,升高抑凋亡蛋白Bcl-2表达,减少骨髓细胞凋亡。     

软坚消瘿颗粒对AIT大鼠细胞因子Th1/Th2及凋亡蛋白Fas/FasL、Bcl-2/Bax的影响

目的通过对AIT大鼠软坚消瘿汤改变剂型后颗粒剂的疗效,观察细胞因子(Th1/Th2)及甲状腺细胞凋亡相关调控蛋白Fas/Fas L、Bcl-2/Bax的影响,并探讨其作用机制。方法将48只雌性大鼠按体重大小随机分为4组,即正常组、模型组、雷公藤组、软坚消瘿颗粒组。造模采用腹部皮下多点免疫注射猪甲状腺球蛋白与弗氏佐剂溶合物,同时配合饮用高碘水制备AIT大鼠模型。经过6 w治疗后,检测以下指标:采用免疫组化法测定大鼠细胞因子Th1,Th2及甲状腺组织凋亡蛋白Fas、Fas-L、Bax、Bcl-2的表达;同时测定以上4种凋亡蛋白的灰度值。结果 (1)凋亡蛋白的变化:模型组与正常组比较Fas、Fas-L、Bax显著升高,Bcl-2显著降低(P<0.01);疗后软坚消瘿颗粒组及雷公藤组与模型组比较有显著差异(P<0.01);治疗二组比较无显著性差异(P>0.05);(2)细胞因子Th1/Th2的变化:模型组与正常组比较Th1/Th2显著升高(P<0.01);疗后软坚消瘿颗粒组及雷公藤组与模型组比较有显著差异(P<0.01);治疗二组比较无显著性差异(P>0.05)。结论 (1)软坚消瘿颗粒组及雷公藤组可有效降低细胞因子Th1/Th2,从而起到治疗作用;(2)软坚消瘿颗粒组及雷公藤组通过调控凋亡蛋白,起到抑制细胞凋亡的作用,从而减轻或延缓本病的发生与发展。     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶对人肝癌SMMC-7721细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨三氧化二砷联合氟尿嘧啶（5-FU）对肝癌细胞凋亡相关因子Bcl—2和Bax表达的影响。方法体外培养人肝癌SMMC-7721细胞株,将细胞分为四组,即AS2O3组、5-FU组、As2O3＋5-Fu组及对照组,采用免疫细胞化学法检测各组SMMC-7721细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果As2O3组、5-Fu组、As2O3＋5-FU组细胞Bcl-2蛋白表达较对照组明显降低,Bax蛋白表达明显升高（P〈0．01）;联合用药组细胞Bcl-2蛋白表达较单用药组明显降低,Bax蛋白表达明显升高（P〈0．01）。结论As2O3联合5-FU可下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达,从而诱导肝癌细胞凋亡。     

Fas／FasL、Bax及Bcl-2在1型糖尿病大鼠中的表达及其与凋亡的关系

目的探讨Fas／FasL、Bax及Bcl-2在1型糖尿病大鼠中的表达及其与凋亡的关系。方法链脲佐菌素诱导1型糖尿病大鼠模型,TUNEL法检测1型糖尿病大鼠（模型组）及其正常大鼠（正常组）胰腺组织的细胞凋亡,应用RT-PCR法及其免疫组化法检测Fas／FasLmRNA、Bcl-2／BaxmRNA及蛋白的表达情况。结果模型组胰腺组织中细胞的凋亡比正常组的大鼠多,Fas／FasLmRNA及BaxmRNA的表达水平在模型组的表达均比正常组显著提高,而Bcl-2mRNA的表达水平显著下降,两者相比差异均有统计学意义（均P〈0．05）。随血糖的升高,凋亡指数亦增加,Fas／FasLmRNA及BaxmRNA的表达升高,但Bcl-2mRNA的表达下降。结论Fas／FasL的表达及其细胞凋亡在大鼠l型糖尿病的形成中起着重要作用,Bax对凋亡起促进作用,Bcl-2对凋亡起抑制作用。     

消癥煎膏直肠给药对大鼠子宫肌瘤细胞凋亡的研究

[目的]观察消癥煎膏直肠给药对子宫肌瘤模型鼠肌瘤细胞凋亡的干预作用。[方法]雌性SD大鼠用苯甲酸雌二醇加注黄体酮复制子宫肌瘤病理模型大鼠后，随机分成消癥煎膏高、中、低剂量组，动物模型组，桂枝茯苓胶囊对照组，另设正常空白对照组，共6大组，每组10只。持续给药一个月，末次给药24h后处死大鼠，放免法测定雌二醇水平，观察子宫脏器系数变化，取肿瘤组织，常规石蜡包埋、病理切片检测子宫平滑肌组织凋亡细胞形态学情况，免疫组化法检测抑制细胞凋亡基因Bcl-2蛋白表达情况。[结果]消癥煎膏能明显降低肌瘤大鼠血清中雌激素水平，降低模型大鼠子宫系数，改善子宫组织病理状况，使平滑肌Bcl-2蛋白阳性点数量明显减少，能显著抑制模型大鼠瘤样增生（P〈0．01），以消癥煎膏高剂量组最为明显。[结论]消癥煎膏具有诱导子宫肌瘤细胞凋亡的作用，能降低子宫肌瘤模型鼠细胞凋亡蛋白Bcl-2阳性表达，抑制子宫肌瘤细胞增殖，缩小子宫肌瘤。     

参地颗粒对系膜增生性肾小球肾炎大鼠单个核细胞凋亡及炎症紊乱的干预作用

目的 观察参地颗粒作用于系膜增生性肾小球肾炎（mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN）大鼠后,外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells,PBMCs）的凋亡,B淋巴细胞瘤- 2（B- cell lymphoma- 2,Bcl- 2）蛋白、Fas蛋白的表达,单核细胞趋化蛋白- 1（monocyte chemotactic protein 1,MCP- 1）、转化生长因子- β1（transforming growth factor- β1,TGF- β1）水平的变化,探讨其作用机制。方法 从60只SD大鼠中随机抽取10只作为正常组,剩余50只均用于MsPGN模型复制,模型制作成功后,再分为模型组（11只）、缬沙坦组（10只）、参地颗粒组（10只）。各组大鼠在模型复制完成后第21天开始给药,缬沙坦组每日予缬沙坦溶液灌胃,参地颗粒组予参地颗粒溶液灌胃,模型组、正常组予生理盐水灌胃,连续干预12周。光学显微镜下观察各组大鼠病理损伤情况,实验室方法检测各组大鼠24 h尿蛋白（24- hour urinary protein,24hUPr）、PBMCs凋亡率、Bcl- 2蛋白、Fas蛋白表达水平及血清MCP- 1、TGF- β1水平。结果 治疗第8、12周参地颗粒组24hUPr水平较缬沙坦组显著降低（P<0.05）。与正常组比较,模型组大鼠PBMCs凋亡率、血清MCP- 1、TGF- β1水平升高（P<0.05）,Bcl- 2蛋白表达水平下降,Fas蛋白表达水平上升（P<0.05）;与模型组比较,缬沙坦组、参地颗粒组PBMCs凋亡率、MCP- 1、TGF- β1水平均降低（P<0.05）,Bcl- 2蛋白表达水平上升,Fas蛋白表达水平下降（P<0.05）;参地颗粒组PBMCs凋亡率、血清TGF- β1水平低于缬沙坦组（P<0.05）,Bcl- 2蛋白表达水平上升程度大于缬沙坦组（P<0.05）。参地颗粒组MsPGN大鼠肾脏系膜细胞增生被明显抑制。结论 参地颗粒可以减轻肾脏炎症反应,消减尿蛋白,改善MsPGN大鼠的肾脏病理损害,其机制可能是通过调节凋亡调控蛋白Bcl- 2、Fas蛋白表达水平,降低MsPGN大鼠PBMCs凋亡率,下调MCP- 1、TGF- β1的表达水平实现的。     

大黄素对化疗药诱导肝癌细胞凋亡的增强作用

目的 观察大黄素对化疗药5-氟尿嘧啶（5-Fu）诱导肝癌细胞HepG2凋亡的影响。方法 不同浓度大黄素单用或与5-Fu联合作用HepG2细胞，以流式细胞仪（FCM）及末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡；免疫组织化学（sP）法检测Bax、Bcl-2、凋亡诱导因子（AIF）蛋白表达的改变。结果 2、4μg／m1大黄素分别与5-Fu联用，作用细胞16、24、48h后，时间依赖性地诱导HepG2细胞凋亡，且随大黄素浓度的增加细胞凋亡率有增加的趋势。联用组细胞凋亡率及Bax、Bcl-2、AIF蛋白表达与5-Fu单用组相比差异均有极显著性意义（均P〈0．01）。各组细胞凋亡率与Bax蛋白表达呈正相关（r=0．881，P〈0．05），与Bcl-2蛋白表达呈负相关（r=-0．942，P〈0．01），与AIF蛋白表达呈正相关（r=0．900，P〈0．05）。结论 大黄素可显著增强5-Fu诱导HepG2细胞凋亡的作用，可能与调控Bax、Bcl-2、AIF蛋白表达有关。     

大黄对急性肝衰竭大鼠细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3表达影响

目的:观察大黄对急性肝衰竭大鼠细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3表达的影响,旨在探讨其防治急性肝衰竭的作用机制。方法:30只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和大黄组。大黄组大鼠造模前3 d予大黄水煎液10 g/(kg·d)灌胃,采用D-氨基半乳糖(D-Ga1N)/内毒素脂多糖(LPS)腹腔注射造成大鼠急性肝衰竭模型。造模6 h后,取血检测血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)和总胆红素(TBIL)含量,并开腹取大鼠肝组织,应用原位末端标记(TUNEL)法检测肝细胞凋亡情况,应用免疫组化法分别检测肝组织中Bcl-2和Caspase-3蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清AST、ALT、TBIL含量和肝细胞凋亡指数(AI)及Caspase-3蛋白表达均明显升高(均P0.01),Bcl-2蛋白表达明显下降(P0.01);与模型组比较,大黄组大鼠血清AST、ALT和TBIL含量、AI及Caspase-3蛋白表达均显著下降(均P0.01),而Bcl-2蛋白表达明显上调(P0.01)。结论:大黄可明显减轻急性肝衰竭大鼠肝脏损伤,其作用机制可能与上调Bcl-2表达、下调Caspase-3表达,从而抑制肝细胞凋亡有关。     

Kupffer细胞和自然杀伤细胞在大鼠实验性肝癌中分布及意义

目的：探讨Kupffer细胞(KC)、肝脏自然杀伤(NK)细胞在实验性肝癌细胞凋亡中的作用及其相互关系。方法：建立在诱癌过程中控制KC功能状态的肝癌试验动物模型，应用免疫组化S—P法检测各组大鼠肝癌中的CD68、CD57及Bcl-2、Bax的表达，对各组CD68、CD57阳性细胞数进行定量比较与相关分析，并比较各组Bcl-2、Bax的表达。结果：(1)CD68阳性细胞数在激活组、单纯诱癌组、抑制组依次递减；(2)CD57、CD68阳性细胞数呈正相关；(3)抑制组Bcl-2阳性表达率显著高于激活组，而Bax阳性率显著低于激活组。结论：(1)KC在肝脏NK细胞归巢、分化和活化中发挥着重要作用。(2)KC和肝脏NK细胞可促进实验性肝癌细胞的凋亡，抑制肝癌的形成。     

新型气体信号分子硫化氢对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨新型气体信号分子硫化氢(H2S)对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的调节作用.方法:24只Wistar大鼠,随机分为对照组(8只)、低氧组(8只)和低氧 NaHS组(8只).以化学分光光度法测定血浆H2S含量;采用原位缺口末端标记方法(TUNEL)检测大鼠肺动脉平滑肌细胞的凋亡,并行图像分析计算单位面积细胞凋亡率;采用免疫组织化学方法检测肺动脉平滑肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Fas和caspase-3表达,并进行定位和半定量分析.结果:低氧组与对照组比较,低氧组大鼠血浆中H2S含量下降36%,应用TUNEL检测肺动脉平滑肌细胞单位面积凋亡率减少52.9%,肺动脉平滑肌细胞Bcl-2蛋白表达增高123.9%,Fas蛋白表达减弱45%,caspase-3表达与对照组差异无显著性;低氧组与低氧 NaHS组比较,低氧 NaHS组大鼠血浆中H2S含量升高65%,应用TUNEL检测到肺动脉平滑肌细胞单位面积凋亡率较低氧组增高62.5%,肺动脉平滑肌细胞Bcl-2蛋白表达减弱36.4%,Fas和caspase-3蛋白表达分别增高84.8%、34.5%;结论:低氧时肺动脉平滑肌细胞凋亡减少,H2S可能通过抑制肺动脉平滑肌细胞Bcl-2蛋白表达、增加Fas和caspase-3蛋白表达,促进低氧时肺动脉平滑肌细胞凋亡.     

被动吸烟大鼠生精细胞凋亡与Bcl-2、Bax表达的相关性研究

目的探讨被动吸烟对大鼠生精细胞凋亡和Bcl-2（B淋巴细胞瘤/白血病-2基因）、Bax（Bcl-2相关X蛋白）表达水平的影响,以及生精细胞凋亡与Bcl-2、Bax表达之间的相关性。方法用60日龄SD雄性大鼠40只建立被动吸烟大鼠模型,按染毒剂量不同随机均分为4组：0 g/m3组、6.49 g/m^3组、12.98 g/m^3组、25.96 g/m^3组,染毒剂量分别为0、1、2、4枝香烟,均每日2次,每次30 min,4周后处死。TUNEL检测凋亡,免疫组化（S-P法）检测Bcl-2、Bax表达。结果染毒组凋亡细胞数量增多。Bcl-2阳性表达随染毒剂量的增加呈下降趋势,Bax在染毒组中的表达明显要高于对照组,凋亡指数（AI）与Bax的表达强度呈正相关,与Bcl-2表达强度呈负相关。结论吸烟可致大鼠生精细胞凋亡,可能是通过Bcl-2表达下降、Bax表达升高,引发生精细胞凋亡增多。     

淫羊藿素对人肝癌Hep-G2细胞增殖、凋亡的影响及作用机制

【摘要】 目的 探讨淫羊藿素对人肝癌Hep-G2细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法体外培养人肝癌Hep-G2细胞;采用MTT比色法检测淫羊藿素对人肝癌Hep-G2细胞增殖的影响;将Hep-G2细胞分为：空白对照（Control)组、低剂量（2.5 μM/L)组、中剂量（5 μM/L)组和高剂量（10 μM/L)组;蛋白质印记检测增殖、凋亡相关蛋白Ki-67、Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达情况;克隆形成实验检测各组肝癌细胞增殖情况;流式细胞仪检测Hep-G2细胞凋亡情况。结果MTT结果显示淫羊藿素对肝癌Hep-G2细胞的IC50为5.38 μM/L;与空白对照组相比,低剂量组肝癌Hep-G2细胞Ki-67蛋白相对表达量、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量、Caspase-3蛋白相对表达量显著升高（均P<0.05）;与低剂量组相比,中剂量组肝癌Hep-G2细胞Ki-67蛋白相对表达量、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量、Caspase-3蛋白相对表达量显著升高（均P<0.05）;与中剂量组相比,高剂量组肝癌Hep-G2细胞Ki-67蛋白相对表达量、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白相对表达水平显著降低,细胞凋亡率、Bax蛋白相对表达量、Caspase-3蛋白相对表达量显著升高（均P<0.05）。结论淫羊藿素可以抑制肝癌Hep-G2细胞增殖并促进其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达以及增强caspase-3的活性相关。