大鼠胰腺β细胞分泌颗粒内钙离子超微结构定位的研究

目的: 观察大鼠胰腺β细胞内钙离子在亚细胞水平的分布情况.方法: 用胶原酶原位灌注法分离大鼠胰岛,在含100 mL/L胎牛血清、11.1 mmol/L葡萄糖的RPMI-1640培养基中培养过夜后,离心,将胰岛细胞团分为实验组(外源性胰岛素100 mU/L孵育240 min)和对照组(外源性胰岛素100 mIU/L孵育0 min),采用改进的焦锑酸钾沉淀的细胞化学方法对胰腺β细胞分泌颗粒内钙离子进行超微结构定位.结果: 超微结构显示胰腺β细胞内钙离子呈高电子密度的黑色颗粒状.对照组的胰岛素分泌颗粒内钙离子沉积明显高于实验组,并伴有钙离子外排.实验组胰腺β细胞靠近细胞膜区钙离子沉积增加.结论: 离子细胞化学定位法是研究组织中钙离子分布的有效方法.胰腺β细胞的分泌功能可能与胰岛素分泌颗粒内钙离子浓度密切相关.     

利用焦锑酸钾沉淀法和电镜—能谱技术研究失血心肌细胞内Ca^…

利用焦锑酸沉淀法和电镜－能谱技术研究失血心肌细胞内的Ｃａ＾２＋的分布。结果表明：在失血心肌细胞的线粒体和内质网内的Ｃａ＾２＋明显增多。这一结果对探失血心肌细胞损伤机理具有一定意义。     

焦锑酸盐电镜组化显示细胞内钙离子

本文介绍焦锑酸盐法在研究细胞内Ca~(2+)的应用。采用Wistar鼠离体心脏钙矛盾模型、Wistar鼠脑缺血与再灌流模型和内毒素诱发兔脑水肿模型,在电镜下对细胞内Ca~(2+)进行定位显示,并运用x线显微分析对Ca~(2+)进行了验证。此外,本文还对该方法的优缺点,方法的改进和Ca~(2+)的鉴定进行了探讨,旨在为揭示Ca~(2+)与细胞中毒的发病机制提供新的实验手段。     

急性和亚急性高原低氧大鼠海马神经细胞的电镜研究

目的观察急性和亚急性高原低氧大鼠海马神经细胞的超微结构变化,为探讨神经细胞在机体对低氧应激反应中的作用,以及低氧对大鼠海马神经细胞形态和功能的影响提供形态学依据。方法将平原SD大鼠运至高原地区（4100m）,在第7天和第30天,取大鼠海马用常规电镜方法进行染色,观察高原低氧环境下神经细胞的形态变化。结果电镜下急性和亚急性组高原低氧大鼠海马CA．区和CA,区神经细胞的形态、胞浆内的细胞器有明显变化。结论高原低氧环境对大鼠海马神经细胞的形态和功能有一定的影响,揭示在高原低氧环境下学习和记忆的减退是机体应激反应异常的表现。     

氨培养胎鼠神经细胞钙离子浓度变化与凋亡的相关性

目的 观察体外培养神经细胞在氨作用下钙离子浓度变化与凋亡的关系,探讨氨毒性机制.方法 体外培养胎鼠神经细胞7d,实验分组为对照组、低氨组和高氨组;分别作用24 h后,用流式细胞仪测定神经细胞凋亡比率,用Fluo-3/AM荧光探针测定细胞内钙离子浓度.结果 对照组神经细胞有少量凋亡,细胞内钙离子浓度正常,随着NH4CL浓度的提高,细胞内钙离子浓度明显升高,神经细胞凋亡增加.低氨组和对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05）,高氨组和低氨组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 氨诱导神经细胞凋亡与细胞内钙离子浓度相关.     

针刺血清对体外培养神经细胞内钙离子浓度的影响

目的:通过观察针刺大鼠经穴后收集的血清对体外培养的神经细胞内Ca2 浓度的影响,为探讨针灸作用的机制中是否存在着体液因素提供直接的证据.方法:取新生大鼠大脑皮层细胞进行原代培养.7～10 d后应用荧光分子探针Fluo-3AM染色,激光共焦扫描显微镜动态扫描观察加入正常大鼠血清和电针刺激百会、足三里、曲池、三阴交2周后的血清对神经细胞内Ca2 浓度的影响.结果:加入正常血清后,细胞内的Ca2 浓度会有一定的升高,经过一段时间后升高的Ca2 浓度会趋向平稳.而再加入针刺血清后,在一定程度上可以降低神经细胞Ca2 的浓度.结论:针刺腧穴后,除了神经的调节机制外,针刺血清中存在某种活性物质,可以明显地使神经细胞内Ca2 浓度降低,为针灸体液因素的存在提供了直接的证据.     

利用焦锑酸钾沉淀法和电镜—能谱技术研究失血心肌细胞内Ca~（2＋）的分布

利用焦锑酸钾沉淀法和电镜－能谱技术研究失血心肌细胞内的Ｃａ（２＋）的分布。结果表明：在失血心肌细胞的线粒体和内质网内的Ｃａ（２＋）明显增多。这一结果对探讨失血肌细胞损伤机理具有一定意义。     

钙激活钾通道在钙离子致神经细胞损伤中的作用

采用膜片钳单通道记录方法,观察原代培养新生ＳＤ大鼠皮层神经元的钙激活钾通道比（Ｋｃａ）特征及胞内不同游离钙水平对通道开放动力学的调节,结果显示：培养ＳＤ大鼠皮层神经元的Ｋｃａ以大电导活动占优势,胞内游离钙为１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ时,通道几乎不开放,在１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时达最大激活。由此表明神经元上Ｋｃａ通道开放概率明显依赖于胞浆中钙离子和膜电位,Ｋｃａ对胞内钙离子浓度变化极为敏感,钾通道的开放剂可     

心肌亚细胞Ca^2＋分布电镜细胞化学定位研究

应用Ｃａ￣（２＋）细胞化学探针—焦锑酸钾技术，结合电镜Ｘ线电子探针显微分析技术，研究心肌细胞内Ｃａ￣（２＋）定位、分布。结果：正常心肌细胞Ｃａ￣（２＋）以细小颗粒形态主要位于肌浆网腔、肌膜、细胞核，而胞浆和线粒体Ｃａ￣（２＋）分布少。Ｘ线电子探针证实沉淀颗粒主要为Ｃａ￣（２＋），直接证实心肌亚细胞Ｃａ￣（２＋）的高度隔空化分布，为进一步深入研究心肌缺血再灌注等Ｃａ￣（２＋）异常代谢变化提供新的研究方法。     

海洛因成瘾大白鼠中脑腹侧被盖区超微结构变化的研究

目的　模仿人类吸毒成瘾方式建立海洛因成瘾动物模型 ,研究其中脑腹侧被盖区超微结构改变 ,为深入研究海洛因成瘾神经生物学、行为学、神经药理学、成瘾戒断治疗等奠定基础。方法　采用递增法人为建立海洛因成瘾动物模型 ,设立对照组和模型组 ,取两组动物中脑腹侧被盖区于电镜下观察超微结构改变。结果　海洛因成瘾大白鼠中脑腹侧被盖区神经元胞体、轴突、树突都出现变性、坏死、调亡等超微病理结构改变。正常对照组电镜超微影像正常。结论　海洛因成瘾大鼠脑组织出现广泛性、多发性损害 ,且以变性为主 ,神经元凋亡是海洛因成瘾致脑神经元死亡的主要形式。     

面神经损伤后面运动神经元死亡的时间进程及电镜观察

目的 研究面神经低位切断伤及压榨伤后,大鼠面运动神经元的形态学变化及其死亡的时间进程.方法 手术制作大鼠右侧面神经的低位切断伤、压榨伤模型,左侧为正常对照侧.用甲苯胺蓝染色及透射电镜技术观测面运动神经元死亡情况及其形态学变化.结果 面神经切断伤及压榨伤均可引起面运动神经元死亡且于伤后4同时达到高峰.切断伤组死亡率(51.19±9.57)%,压榨伤组死亡率(27.90±4.68)%;除损伤后第一天外,损伤后各时间点切断伤组神经元死亡数目明显较压榨伤组多(均P＜0.01).电镜观察死亡神经元具有凋亡的形态学特征.结论 面神经切断伤及压榨伤均可引起面运动神经元死亡,死亡数目与损伤形式有关.对重度的神经损伤,临床神经修复应争取在损伤后4周内进行.     

低氧预适应对神经细胞能量代谢调节作用

低氧预适应是通过亚致死的低氧处理后,激活体内小分子内源性保护机制,让机体对接下来的更严重或致死性低氧刺激产生耐受/抗性。神经细胞是一种能接收和传导兴奋的细胞,对氧含量的变化十分敏感,其能量代谢随氧气变化较为显著。在低氧环境下,神经细胞的腺嘌呤核苷三磷酸(adenosinetriphosphate, ATP)合成减少可激活AMP激活的蛋白激酶[adenosine5’-monophosphate(AMP)-activated protein kinase, AMPK]和TSC1/TSC2复合体抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)。mTOR的一个复合物mTOR复合体1(mTORC1)的表达对机体的能量代谢产生影响。低氧预适应,通过激活或抑制一些基因表达让神经细胞有效利用氧气,使机体产生低氧耐受。在氧浓度低的生存环境下,通过低氧预适应调节能量变化增加机体存活的可能性。高原、航空航天事业、水下作业以及病理性的低氧时,低氧预适应诱导相关分子变化可防止对氧有大量需求的脑组织发生病变,增加神经细胞的存活时间,减少死亡。     

P-170糖蛋白在多药耐药(MDR)K562/ADM细胞中的定位研究

目的：确定P-170糖蛋白在多药耐药（MDR）K562/ADM细胞中表达的位置，方法：通过免疫反应并利用流式细胞仪（FCM）检测表达P-170糖蛋白细胞的百分含量；用免疫电镜技术检测P-170糖蛋白在细胞中的位置及其表达水平。结果：敏感株K562细胞与耐药株K562/ADM细胞对P-170糖蛋白的表达有非常明显的差异；不同的K562/ADM细胞表达P-170糖蛋白的量差别较大；少量的K562细胞也有极少的P-170糖蛋白的表达，细胞表达的P-170糖蛋白位于细胞膜上，结论：多药耐药K562/ADM细胞表达的P-170糖蛋白最终被镶嵌在细胞膜上；在该蛋白质从被表达，修饰和转运到细胞膜上的过程中，该蛋白质不具有成熟P-170糖蛋白的特异构象。     

肾综合征出血热病毒感染人肾小球系膜细胞的电镜观察

进一步探讨肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）病毒对肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）的作用及其在ＨＦＲＳ肾脏损害发病机理中的作用。用透射电镜观察ＨＦＲＳ病毒ＳＲ－１１株感染的人ＭｓＣ。发现感染细胞多有不同程度的病理改变，胞浆内可见病毒样颗粒及病毒包涵体。ＨＦＲＳ病毒对人ＭｓＣ的直接损害作用可能与ＨＦＲＳ的肾脏损害有关。     

荧光下豚鼠听觉离体毛细胞的凋亡改变

目的:探讨离体耳蜗毛细胞的凋亡改变。方法:采用胶原酶制备离体耳蜗毛细胞、0.01%吖啶橙进行荧光染色,荧光显微镜观察凋亡改变。结果:凋亡毛细胞的主要形态特征包括:胞核皱缩;荧光显微镜下凋亡毛细胞呈红色或红黄色荧光,毛细胞形态完整,无胞膜破裂或胞质溢出。结论:离体耳蜗毛细胞的凋亡改变使细胞呈红色或红黄色荧光,胞膜完整。     

电镜下几种凋亡细胞的形态特征

 目的 观察不同种类、不同原因引起的凋亡细胞的基本形态及差异。方法 用透射电镜观察原位组织和培养细胞在生理条件下和外界因素作用下产生的凋亡细胞,其中有卵巢颗粒膜细胞、烷化剂作用的光感受细胞、培养的人膀胱癌T24细胞株和肝癌细胞株。结果 凋亡细胞的基本形态变化有：胞体变小、胞质浓缩、核染色质凝聚,而核膜、质膜及细胞器保存完好。各种凋亡细胞间的形态差异主要表现为核染色质凝聚的形态不同：有的凝聚染色质边移于核膜下,或呈新月形;有的核染色质凝聚成块状,散布于核内;有的呈致密凝聚,占据整个核区。结论 电镜下观察到凋亡细胞的核染色质凝聚除边移外还有其他形态,正常组织中的暗细胞和坏死组织中的凝固性坏死细胞应与凋亡细胞相区别。     

Study on the migration of nerve stem cell in vitro Induced by glioma cells

Objective： Previous studies have shown that glioma cells induced the migration of nerve stem cells （NSCs） in vivo. This study was exploring whether this situation could happen in vitro. Methods： Supematant from 05 glioma cell lines or astrocytes cultured in serum-free medium growing in logarithmic phase were separately placed in lower chambers and NSCs were placed in the upper chambers of Trans-well culture system. After 36 h co-incubation, these NSCs spheres occurred on the middle membrane were counted. Results： Results demonstrated that the supematant from 05 glioma cell culture, not from the astrocytes, enhanced the migration of NSCs （ P 〈0.01）. Conclusion： Some components in 05 glioma cell culture can attract the migration of NSCs.     

旋毛虫肌幼虫培养细胞的扫描电镜观察

目的:观察旋毛虫(Trichinella spiralis,T1)肌幼虫培养细胞的超微结构.方法:分离旋毛虫肌幼虫细胞,进行体外传代培养.利用简单重复序列区间扩增(ISSR-PCR)标准引物对第3代培养细胞及肌幼虫基因组进行扩增,利用扫描电镜观察贴壁细胞的形态特征.结果和结论:旋毛虫肌幼虫第3代培养细胞和旋毛虫肌幼虫DNA的ISSR-PCR扩增产物均在1 000 bp和750 bp处出现相同条带.扫描电镜下旋毛虫培养细胞的彤态有多种类型,可分为圆颗粒形、多角形、三角扇形、蜂窝型、似分裂型及褶皱型等.其中以圆颗粒形细胞占多数.