肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

背景肝硬化时可对脊髓等身体其他组织器官产生严重的影响.目的应用四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型,探讨肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶分布情况.设计完全随机对照实验.单位首都医科大学解剖教研室.材料实验于2002-03/2003-12在首都医科大学解剖教研室完成.20只Wistar雄性大鼠随机分为肝硬化组和正常组,每组10只.方法肝硬化组经四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型,正常大鼠组不作任何处理.于模型制备后3个月,各组大鼠在麻醉状态下开胸,灌注,固定,取脊髓组织,制备切片,采用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法及Leica Q500IW图像分析系统对肝硬化大鼠脊髓一氧化氮合酶阳性细胞进行数量及灰度的测定.主要观察指标[1]两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度值.[2]两组大鼠一氧化氮合酶阳性细胞分布情况.结果20只大鼠均进入结果分析.[1]两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度均为60(P＞0.05).[2]在脊髓灰质区,一氧化氮合酶阳性细胞主要分布在中央管周围即脊髓板层第Ⅹ层和中间外侧核.还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法呈色为强阳性,细胞形态多为三角形和梭形,胞核不着色,胞质色深.细胞中等大小,以25 μm为主.在脊髓颈、胸、腰各段灰质中间带一氧化氮合酶阳性细胞分布的数量基本相等,没有特异性变化.结论肝硬化大鼠与正常大鼠-氧化氮合酶在脊髓内的表达基本相同.一氧化氮在脊髓节段的分布特性可能说明肝硬化大鼠在低级交感神经的调控上与正常无差异.     

肝硬化大鼠脊髓内—氧化氮合酶阳性神经元的分布(英文)

背景:肝硬化时可对脊髓等身体其他组织器官产生严重的影响。目的:应用四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型,探讨肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶分布情况。设计:完全随机对照实验。单位:首都医科大学解剖教研室。材料:实验于2002-03/2003-12在首都医科大学解剖教研室完成。20只Wistar雄性大鼠随机分为肝硬化组和正常组,每组10只。方法:肝硬化组经四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型,正常大鼠组不作任何处理。于模型制备后3个月,各组大鼠在麻醉状态下开胸,灌注,固定,取脊髓组织,制备切片,采用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法及LeicaQ500IW图像分析系统对肝硬化大鼠脊髓—氧化氮合酶阳性细胞进行数量及灰度的测定。主要观察指标:①两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度值。②两组大鼠一氧化氮合酶阳性细胞分布情况。结果:20只大鼠均进入结果分析。①两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度均为60(P>0.05)。②在脊髓灰质区,一氧化氮合酶阳性细胞主要分布在中央管周围即脊髓板层第Ⅹ层和中间外侧核。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法呈色为强阳性,细胞形态多为三角形和梭形,胞核不着色,胞质色深。细胞中等大小,以25μm为主。在脊髓颈、胸、腰各段灰质中间带一氧化氮合酶阳性细胞分布的数量基本相等,没有特异性变化。结论:肝硬化大鼠与正常大鼠-氧化氮合酶在脊髓内的表达基本相同。一氧化氮在脊髓节段的分布特性可能说明肝硬化大鼠在低级交感神经的调控上与正常无差异。     

肝硬化门脉高压大鼠组织中一氧化氮合酶分布及其活性研究

目的 探讨一氧化氮（NO）与门脉高压症的关系。方法 采用四氯化碳（CCl4）复制肝硬化模型成功后，用NADPA黄递酶组织化学染色方法观察一氧化氮合酶（NOS）在肝组织、腹主动脉中的分布，并比较其活性。结果 NADPH黄递酶组织化学染色法证实NOS主要分布于细胞、肝血管内皮、腹主动脉内皮及血管平滑肌细胞中，实验组总体NOS活性高于血管平滑肌细胞中，实验组总体NOS活性高于对照组。结论 NO参与门脉高压及其高动力循环状态的发生。     

雌性大鼠去势后下丘脑一氧化氮合酶阳性神经元的形态学研究

目的：观察雌性大鼠行去势术后下丘脑视前区内一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元的变化，通过形态学研究来揭示一氧化氮（NO）与下丘脑GnRH分泌变化的关系。方法：采用免疫细胞化学方法，在光学显微镜下对丘脑视前内侧区（MPA）和视前外侧区（LPA）内NOS阳性神经元进行形态观察和细胞计数。采用图像分析系统测定NOS阳性神经元内的免疫产物的平均光密度（AOD）值。结果：（1）大量胞体呈椭圆形，突起明显的NOS阳性神经元见于LPA和MPA。（2）去势术后3个月和6个月组，NOS阳性神经元数目比对照组均有显的增高（P＜0．01）。（3）去势3个月和6个月组，NOS阳性神经元的AOD值比对照组均有显性增高（P＜0．01）。（4）在分布上有亚区差异，即去势3个月或6个月组，LPA的NOS阳性神经元的数目和AOD值与MPA相比均有显性差异（P＜0．05－0．01）。结论：提示大鼠去势后，在较长时间内，下丘脑NOS阳性神经元在形态上呈现出与GnRH 神经元相似的变化。     

自发性高血压大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化

目的：观察自发性高血压大鼠脑尾壳核内神经元型一氧化氮合酶阳性神经元的变化。 方法：实验于2003—05在暨南大学人体解剖教研室完成，取自发性高血压大鼠（实验组）和京都种威斯特大鼠（对照组）各30只，分别于3月龄，6月龄和12月龄测血压并处死，ABC免疫细胞化学方法观察大鼠脑内神经元型一氧化氮合酶阳性神经元，实验组使用兔抗神经元型一氧化氮合酶多克隆抗体。阴性对照用0．01mol／L磷酸盐缓冲液替代-抗体。每只大鼠计数20～30片，取其均数计数尾壳核的神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的数目，代表其密度。 结果：各组大鼠在实验过程中无死亡，全部进入结果分析。①对照组3，6，12月龄大鼠血压分别为[（97．5&;#177;12．0）、（107．3&;#177;9．8）、（113．3&;#177;12．8）mmHg（1mmHg=0．133kPa）]，差异无显著性意义；实验组3，6，12月龄自发性高血压大鼠血压逐渐升高，分别为[（116．3&;#177;13．5）、（151．5&;#177;8．3）、（177．0&;#177;9．0）mmHg]，差异有显著性意义（P〈0．05）；实验组大鼠血压均高于同鼠龄对照组大鼠，差异均有显著性意义（P〈0．05）。②大鼠尾壳核的神经元型一氧化氮合酶阳性神经元中等大小，突起较多较长，还可见阳性神经纤维呈网状分布。大鼠尾壳核内的神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的密度改变：对照组和实验组3月龄无明显变化，实验组6月龄和12月龄明显减少。③对照组3，6和12月龄京都种威斯特大鼠尾壳核神经元型一氧化氮合酶阳性神经元无明显变化[（9．41&;#177;0．77），（8．64&;#177;1．28），（8．51&;#177;0．77）个／mm^2]；实验组自发性高血压6，12月龄大鼠神经元型一氧化氮合酶阳性神经元呈逐渐减少的趋势，与3月龄比较，差异有显著性意义[6个月（6．59&;#177;0．70），12个月（7．30&;#177;0．96），3个月（8．90&;#177;1．09）个／mm^2, P〈0．05]，实验组6，12月龄大鼠神经元型一氧化氮合酶阳性神经元均低于同鼠龄对照组大鼠，差异均有显著性意义（P〈0．05）。 结论：自发性高血压大鼠为模拟人类原发性高血压的良好动物模型，自发性高血压大鼠的血压随月龄而有不同。自发性高血压大鼠尾壳核内神经元型一氧化氮合酶免疫阳性神经元的改变有可能是通过影响血压调节中枢的交感活性而间接调控高血压的发生。     

胚胎期大鼠下丘脑一氧化氮合酶阳性神经元的组织化学分析

目的　分析不同孕期大鼠胚胎下丘脑内一氧化氮合酶 (NOS)阳性神经元的表达 ,探讨一氧化氮 (NO)在下丘脑发育过程中的作用。方法　应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶 (NADPH d)组织化学方法观察孕 13～ 2 0d大鼠胚胎下丘脑内NOS阳性神经元的形态及分布。结果　首次观察到孕 15d大鼠胚胎下丘脑室旁核内NOS阳性神经元 ,并在生前迅速发育。孕 17d下丘脑外侧区也出现NOS阳性神经元。但生前未在视上核见NOS阳性表达。结论　在胚鼠下丘脑室旁核和外侧区即有NOS阳性神经元存在 ,提示NO可能与这些核团的发育及其功能有关     

肝硬化门脉高压大鼠组织中一氧化氮合酶分布及其活性研究

目的探讨一氧化氮(NO)与门脉高压症的关系.方法采用四氯化碳(CCl4)复制肝硬化模型成功后,用NADPH黄递酶组织化学染色方法观察一氧化氮合酶(NOS)在肝组织、腹主动脉中的分布,并比较其活性.结果NADPH黄递酶组织化学染色法证实NOS主要分布于肝细胞、肝血管内皮、腹主动脉内皮及血管平滑肌细胞中,实验组总体NOS活性高于对照组.结论NO参与门脉高压及其高动力循环状态的发生.     

肝硬化门脉高压大鼠组织中一氧化氮合酶分布及其活性研究

目的探讨一氧化氮 (NO)与门脉高压症的关系。方法采用四氯化碳 (CCl4)复制肝硬化模型成功后 ,用NADPH黄递酶组织化学染色方法观察一氧化氮合酶 (NOS)在肝组织、腹主动脉中的分布 ,并比较其活性。结果NADPH黄递酶组织化学染色法证实NOS主要分布于肝细胞、肝血管内皮、腹主动脉内皮及血管平滑肌细胞中 ,实验组总体NOS活性高于对照组。结论NO参与门脉高压及其高动力循环状态的发生     

雌性大鼠去势后下丘脑一氧化氮合酶阳性神经元的形态学研究

目的观察雌性大鼠行去势术后下丘脑视前区内一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元的变化,通过形态学研究来揭示一氧化氮(NO)与下丘脑GnRH分泌变化的关系。方法采用免疫细胞化学方法,在光学显微镜对下丘脑视前内侧区(MPA)和视前外侧区(LPA)内NOS阳性神经元进行形态观察和细胞计数。采用图像分析系统测定NOS阳性神经元内的免疫产物的平均光密度(AOD)值。结果(1)大量胞体呈椭圆形,突起明显的NOS阳性神经元见于LPA和MPA。(2)去势术后3个月和6个月组,NOS阳性神经元数目比对照组均有显著的增高(P<0.01)。(3)去势3个月和6个月组,NOS阳性神经元的AOD值比对照组均有显著性增高(P<0.01)。(4)在分布上有亚区差异,即去势3个月或6个月组,LPA的NOS阳性神经元的数目和AOD值与MPA相比均有显著性差异(P<0.05～0.01)。结论提示大鼠去势后,在较长时间内,下丘脑NOS阳性神经元在形态上呈现出与GnRH神经元相似的变化。     

大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶的表达及动态改变

目的：探讨大鼠急性脊髓损伤后不同时段髓内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA动态表达。方法：36只SD大鼠抽签法随机分组，任选一组作为对照。采用Allen法制作急性脊髓损伤模型，在损伤后2，6，12，24，48h等时段，以反转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)分析：iNOS mRNA表达。在脊髓损伤后24h，用免疫组化方法分析iNOS在脊髓不同类型神经细胞中的表达与分布，并以比色法测定脊髓损伤后血清NOS及一氧化氮的含量。结果：脊髓损伤后，神经元、星形细胞和小胶质中均可见iNOS表达，以神经元表达为主。脊髓损伤后2h可见iNOS表达0．56&;#177;0．02，24h达高峰1．20&;#177;0．05，48h开始降低0．70&;#177;0．06。血清中NOS及一氧化氮的动态改变与损伤组织iNOS mRNA变化趋势相一致。结论：研究资料提示脊髓损伤后脊髓内iNOS表达增高，过量产生的一氧化氮加重了继发性脊髓损伤。     

辣椒素对大鼠三叉神经节一氧化氮合酶阳性神经元的影响

目的:研究辣椒素对大鼠三叉神经节内一氧化氮合酶(nitricoxidesyn-thase,NOS)阳性神经元的影响,探讨辣椒素治疗三叉神经痛的镇痛机制。方法:把辣椒素配成浓度为30mmol/L溶液备用,按用量分成4组(20,30,50和100μL组),各5只。分别皮下注射处理大鼠三叉神经眶下支,24h后取材,切片,免疫组化染色,镜检,计算机图像分析。结果:正常侧半月节内NOS阳性神经元染色、分布、形态均正常,各组随辣椒素用量增多,着色神经元及神经纤维较浠散而浅淡,真至未见或仅见极少着色的神经元及神经纤维。各组大鼠三叉神经节NOS平均吸光度比较经方差分析,差异有非常显著性意义(F=149.136,P<0.01),并且随着用药量的增加其差值也更大。结论:辣椒素对大鼠三叉神经节内NOS阳性神经元有明显的影响,NOS参与口面部的痛与镇痛。     

金雀异黄酮对去卵巢大鼠基底前脑一氧化氮合酶神经元的影响

目的:研究去卵巢及金雀异黄酮(genistein,GS)治疗后基底前脑一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)阳性神经元数目变化,探讨GS改善去卵巢大鼠学习记忆能力的可能机制,为使用GS防治绝经后老年性痴呆提供理论依据。方法:实验于2003-03/2004-01在中山大学人体解剖学教研室脑研究室进行。将36只3月龄雌性SD大鼠分为假手术组、去卵巢对照组、苯甲酸雌二醇组及金雀异黄酮组,每组9只,分别进行干预。术后8周取脑切片,进行NADPH-d组化方法染色,计数分析基底前脑各区NOS阳性神经元数目。结果:各组大鼠基底前脑内侧隔核NOS阳性神经元数目差异无显著性意义(P>0.05);去卵巢对照组斜角带核垂直支及水平支的NOS阳性神经元数目分别为(33.13±9.80)个和(48.55±6.60)个,均高于假手术组、苯甲酸雌二醇组及金雀异黄酮组(P<0.01),金雀异黄酮组斜角带核垂直支及水平支的NOS阳性神经元数目与假手术组、苯甲酸雌二醇组相比差异均无显著性意义(P>0.05)。结论:去卵巢之后大鼠基底前脑一氧化氮增加,产生神经元的毒性作用,使中枢神经系统退行性变导致大鼠学习记能力下降;GS能减少基底前脑一氧化氮水平,有望替代雌激素用于防治疗女性绝经期后中枢神经系统退行性疾病。     

角叉菜胶炎性痛及痛过敏诱导大鼠脊髓后角神经元一氧化氮合酶变化的时间特征

目的：观察角叉菜胶炎性痛及痛过敏中脊髓后角一氧化氮合酶的变化，特别是其时间特征。 方法：实验于2004-05／08在河北工程学院医学院生理学实验室完成。选用清洁级健康雄性Wistar大鼠40只，随机分为5组，每组8只：对照组：不加任何处理。注射角叉菜胶12h组，注射角叉菜胶24h组，注射角叉菜胶48h组，注射角叉菜胶72h组，大鼠右后掌足跖部皮下注射30异／L角叉菜胶0．1mL建立炎性痛模型，分别在注射角叉菜胶后12，24，48，72h取材。应用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶组织化学法测定脊髓一氧化氮合酶表达。应用光学显微镜下观察并计数脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞数目；应用HPLAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统软件测定尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞的灰度值，用于定量分析染色深度，灰度值与染色深度呈反比。结果：纳入动物40只，均进入结果分析。①L5脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞数量的变化：对照组可见少量尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞，注射角叉菜胶后12，24，48h，无论是同侧还是对侧的脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内，阳性细胞数目均较对照维增加，24h达到高峰，以后逐渐减少，至72h，两侧均恢复至对照水平。此外，两侧脊髓后角比较，在注射角叉菜胶后各时间点，注射侧的阳性细胞数目均比对侧多。②L5脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板层尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞染色深度的变化：注射角叉菜胶后，双侧脊髓后角尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞染色均逐渐加深，至24h达高峰，以后逐渐降低。统计结果表明，12，24，48h组阳性细胞染色深度均较对照组明显加深（即灰度值降低），其中24h加深最显著；至72h时，注射部位对侧脊髓后角Ⅰ-Ⅱ板层内的阳性细胞染色已恢复至对照组水平，而同侧尚未降至对照组水平。两侧比较，发现注射角叉菜胶后各时间点，注射同侧均较对侧阳性细胞染色加深。 结论：角叉菜胶炎性痛及痛过敏中，脊髓后角一氧化氮合酶活性增强，且这种增强有一定的时间变化特征。     

角叉菜胶炎性痛及痛过敏诱导大鼠脊髓后角神经元一氧化氮合酶变化的时间特征

目的:观察角叉菜胶炎性痛及痛过敏中脊髓后角一氧化氮合酶的变化,特别是其时间特征。方法:实验于2004-05/08在河北工程学院医学院生理学实验室完成。选用清洁级健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为5组,每组8只:对照组:不加任何处理。注射角叉菜胶12h组,注射角叉菜胶24h组,注射角叉菜胶48h组,注射角叉菜胶72h组,大鼠右后掌足跖部皮下注射30g/L角叉菜胶0.1mL建立炎性痛模型,分别在注射角叉菜胶后12,24,48,72h取材。应用尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶组织化学法测定脊髓一氧化氮合酶表达。应用光学显微镜下观察并计数脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞数目;应用HPLAS-1000高清晰度彩色病理图文分析系统软件测定尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞的灰度值,用于定量分析染色深度,灰度值与染色深度呈反比。结果:纳入动物40只,均进入结果分析。①L5脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞数量的变化:对照组可见少量尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞,注射角叉菜胶后12,24,48h,无论是同侧还是对侧的脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内,阳性细胞数目均较对照组增加,24h达到高峰,以后逐渐减少,至72h,两侧均恢复至对照水平。此外,两侧脊髓后角比较,在注射角叉菜胶后各时间点,注射侧的阳性细胞数目均比对侧多。②L5脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞染色深度的变化:注射角叉菜胶后,双侧脊髓后角尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸-黄递酶阳性细胞染色均逐渐加深,至24h达高峰,以后逐渐降低。统计结果表明,12,24,48h组阳性细胞染色深度均较对照组明显加深(即灰度值降低),其中24h加深最显著;至72h时,注射部位对侧脊髓后角Ⅰ～Ⅱ板层内的阳性细胞染色已恢复至对照组水平,而同侧尚未降至对照组水平。两侧比较,发现注射角叉菜胶后各时间点,注射同侧均较对侧阳性细胞染色加深。结论:角叉菜胶炎性痛及痛过敏中,脊髓后角一氧化氮合酶活性增强,且这种增强有一定的时间变化特征。     

一氧化氮合酶阳性神经元与小鼠学习记忆障碍的关系

背景通过竞争性抑制一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS),可损害大鼠的学习记忆行为,表明NO/NOS对维持正常的学习记忆功能是必需的,但有关学习记忆障碍时NOS神经元的变化尚不十分清楚.目的探讨NOS神经元与学习记忆障碍的关系.设计完全随机设计,对照实验研究.地点和材料本研究地点为中南大学湘雅医学院人体解剖学和神经生物学系,材料为健康昆明雄性小鼠32只,6～8周龄,体质量20～25 g,购于湖南医科大学动物学部.干预32只小鼠随机分为模型组和对照组,每组各取7 d和14 d两个时间点,每个时间点各8只小鼠.采用辐射式三等份Y型迷宫测试装置,检测动物的空间辨别性学习记忆能力.应用免疫组化结合组织化学方法显示学习记忆障碍小鼠脑中NOS神经元的变化.主要观察指标检测动物的空间辨别性学习记忆能力,观察切片NOS神经元形态并计数.结果随训练次数的增加,对照组小鼠在Y型迷宫中的正确次数逐渐增加(术前第1天8.3±1.2,术后第7天10.1±1.0),而模型组小鼠术后在Y型迷宫测试中的正确次数较术前(8.3±1.2)明显减少(术后第7天4.7±2.4,P＜0.05),与对照组同时间点相比,差异有显著性意义(P＜0.01).但术后14 d模型组小鼠在迷宫测试中的正确次数渐有增加(9.3±0.7).学习记忆障碍小鼠海马CA1-4区NOS神经元数目显著减少,齿状回颗粒细胞层和梨状区皮质外颗粒细胞层内出现大量新的NOS神经元.结论海马内NOS神经元与小鼠学习记忆有重要关系;梨状区皮质和齿状回颗粒细胞层内出现新的NOS神经元可能是学习记忆障碍后的代偿性反应.它们可能在随后的学习记忆功能恢复中发挥了重要作用.     

大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶的表达及动态改变

目的:探讨大鼠急性脊髓损伤后不同时段髓内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA动态表达。方法:36只SD大鼠抽签法随机分组,任选一组作为对照。采用Allen法制作急性脊髓损伤模型,在损伤后2,6,12,24,48h等时段,以反转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)分析iNOSmRNA表达。在脊髓损伤后24h,用免疫组化方法分析iNOS在脊髓不同类型神经细胞中的表达与分布,并以比色法测定脊髓损伤后血清NOS及一氧化氮的含量。结果:脊髓损伤后,神经元、星形细胞和小胶质中均可见iNOS表达,以神经元表达为主。脊髓损伤后2h可见iNOS表达0.56±0.02,24h达高峰1.20±0.05,48h开始降低0.70±0.06。血清中NOS及一氧化氮的动态改变与损伤组织iNOSmRNA变化趋势相一致。结论:研究资料提示脊髓损伤后脊髓内iNOS表达增高,过量产生的一氧化氮加重了继发性脊髓损伤。     

电针对脊髓损伤后一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨电针对脊髓损伤后一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)基因及其蛋白表达的影响。方法采用改良的Allen's垂击法致大鼠脊髓(T10)中度损伤,损伤后即刻进行督脉电针治疗,于术后1、4、24、48h处死动物,分别用RT-PCR法和NADPH-黄递酶组织化学染色法测定各型NOSmRNA及其蛋白的表达,并进行图像定量统计学分析。结果电针可不同程度地降低nNOSmRNA、iNOSm-RNA的表达,降低NOS活性。结论电针早期治疗可能通过降低一氧化氮(NO)的形成减轻脊髓继发性损伤,有一定的神经保护作用。     

绞股蓝总皂苷对血管性痴呆大鼠海马一氧化氮合酶阳性神经元及核酸的保护作用研究

背景绞股蓝对实验性脑缺血大鼠具有脑保护功能,血管性痴呆大鼠同样具有海马神经元的缺血缺氧性损伤,绞股蓝对此是否也有保护作用 ? 目的观察绞股蓝总皂苷( gypenosides, GP)对血管性痴呆( vascular dementia, VD)大鼠海马神经元型一氧化氮合酶( neuronal nitric oxide synthase, nNOS)阳性神经元及核酸的保护作用. 设计随机对照研究. 地点和对象研究在武警医学院中心实验室进行 ,二级雄性 wistar大鼠 30只,体质量 240～ 260 g,由天津市医学实验动物中心提供. 干预采用随机数字法将 30只雄性大鼠分为对照组、模型组及给药组.模型组用改进的 Pulsinelli 4-血管阻断方法建立大鼠 VD模型.给药组灌胃给药 GP 200 mg/kg,按照大鼠 VD模型的制备方法进行手术.对照组同样进行手术但不灼烧颈动脉,不夹闭颈总动脉. 主要观察指标①大鼠海马 nNOS表达.②大鼠海马 DNA和 RNA荧光染色强度. 结果模型组大鼠海马 CA1区和 CA3区 nNOS阳性神经元数分别为( 20.47± 4.22)个和( 25.47± 3.52)个,明显少于对照组 [(24.73± 5.72)和( 37.13± 5.10)个 ]( P< 0.05), DNA和 RNA吖啶橙染色后的荧光强度(反映 DNA和 RNA含量)也明显减弱.给药组海马 CA1区和 CA3区 nNOS阳性神经元数分别为( 30.00± 3.63)个和( 38.00± 5.00)个,比模型组明显增多( P< 0.001);给药组海马 DNA和 RNA吖啶橙染色后的荧光强度强于模型组,且与对照组相似. 结论 GP可明显增强血管性痴呆大鼠海马 nNOS阳性神经元的表达,对海马神经元 DNA和 RNA损伤有保护作用.     

大剂量甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶表达及细胞凋亡的影响

背景:甲基强的松龙(MP)具有多方面的神经保护作用,目前广泛应用于治疗急性颅脑和脊髓损伤,但其作用机制尚不完全清楚。目的:探讨大鼠脊髓损伤后应用大剂量甲基强的松龙(MP)对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达及细胞凋亡的影响。设计:采用随机分组、安慰剂对照实验研究。单位:大连医科大学第一附属医院骨科。材料:实验在大连医科大学第一附属医院骨科实验室完成。成年雄性SPF级SD大鼠56只,体质量300～350g。由大连医科大学实验动物中心提供。干预:成年大鼠随机分为脊髓损伤后应用大剂量甲基强的松龙组(A组)和应用生理盐水组(B组)。损伤后不同时间点(4,8h,1,3,7,14,21d)按Tarlov标准评价大鼠双后肢神经功能恢复情况,然后处死。用苏木精-伊红(HE)染色观察损伤脊髓组织病理变化,用免疫组化染色检测iNOS阳性细胞,原位末端标记法(TUNEL法)标记凋亡细胞。主要观察指标:两组大鼠各时相点iNOS表达阳性细胞率,凋亡指数和Tarlor平分。结果:HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变甲基强的松龙组明显轻于生理盐水组。两组均发现凋亡细胞及iNOS表达,神经细胞凋亡指数及iNOS表达均为生理盐水组大于甲基强的松龙组(P<0.01或P<0.05)。结论:大剂量甲基强的松龙能抑制大鼠脊髓损伤后iNOS表达及细胞凋亡。