血清CysC、β2-m、尿mAlb的检测对DM2早期肾损害的诊断价值

为探讨糖尿病早期肾损伤的实验诊断，我们分别对50例早期糖尿病肾病（DN）和50例健康对照者的血胱抑素C（Cystatin C，Cys C）、β2-微球蛋白（β2-m）、尿微量白蛋白（mAlb）进行分析，探讨血清Cysc、β2-m、尿mAlb在DN早期诊断中的临床应用价值。现报道如下。     

尿β2-m、Alb检测对糖尿病肾病早期诊断的价值

本文通过对糖尿病人常规检测蛋白阴性的病人,进行尿β2-m、Alb检测,以探讨糖尿病患者尿β2-m、Alb改变对糖尿病肾病的早期诊断价值。     

遗传性白内障小鼠晶状体的比较蛋白质组分析

目的： 比较研究先天性遗传性白内障的晶状体蛋白质表达谱的改变。方法: 采用自发的Crygs基因突变先天性隐性遗传白内障小鼠模型,分别提取白内障与正常小鼠晶状体总蛋白,进行固相pH梯度（IPG）等电聚焦双向电泳,R－250染色,使用PDQuest 7.30图像分析软件分析电泳图像。选择部分差异蛋白点胶上酶解,应用MALDI-TOF/TOF仪器进行串联质谱（MS/MS）鉴定及分析。结果: 上样量为882 μg时,白内障和正常小鼠分别检测到(417±53)个蛋白点（n=3）和(370±41)个蛋白点（n=3）。上样量为190 μg时,白内障和正常小鼠分别检测到(60±7)个蛋白点和(57±5)个蛋白点（n=3）。对γS、BFSP/filensin、γF、βA1、βB1、βB2和αB等7种差异蛋白进行了鉴定。突变小鼠晶状体正常γS、念珠状纤维结构蛋白（BFSP/filensin）缺失,γF表达下调（＜4倍）,异常βA1、βB1、βB2和αB表达上调（＞4倍）,分子量比正常小,提示βA1、βB1、βB2和αB可能发生裂解。结论: 蛋白质的双向电泳和质谱分析有助于基因突变后下游蛋白的功能分析。Crygs基因突变导致γS晶状体蛋白的异常,并引起细胞骨架蛋白（BFSP/filensin）和其它晶状体蛋白（γF、βA1、βB1、βB2和αB等）继发改变,从而间接诱发白内障。     

尿液Survivin和Cox-2蛋白检测对膀胱癌早期诊断的价值

近年来研究发现,早期膀胱癌中生存素（Survivin）、环氧化酶-2（Cox-2）有高水平的表达。2005年以来,我们通过对42例早期膀胱移行细胞癌患者同时行尿液Survivin、Cox-2蛋白和脱落细胞学检测,探讨尿液Survivin和Cox-2蛋白检测对膀胱癌早期诊断的临床价值。现报道如下。     

糖尿病肾脏损伤的CLIA早期诊断

本文对 76例尿常规检测蛋白阴性,血清BUN和Cr检测正常的糖尿病患者,进行尿微量白蛋白 (mAlb)、血和尿β2微球蛋白(β2 -m)的检测,以探讨其对糖尿病患者肾脏早期损伤的诊断价值。1　对象和方法1 1　对象1 1 1　正常对照组　40人 (男 22,女 18 ),均为健康体检的本院职工,年龄     

提取人血浆中β2GPI的一种简便高效方法及其在自身免疫病诊断中的应用研究

目的：利用聚乙二醇（PEG）4000沉淀配合亲和层析和离子交换层析的方法从人血浆中提取β2GPI蛋白，并研究相关的临床意义。方法：用180g/L的PEG4000从人血浆沉淀含β2GPI的组分，所得组分重溶后进行Heparin-Sepha-rose CL-6B亲和柱层析和Source 15 S离子交换柱层析，用分离纯化的β2GPI和购买的纤溶酶原（Plasminogen，PLG）建立反复妊娠丢失患者血清抗体抗β2GPI和抗PLG抗性的ELISA检测方法。结果：经SDS-PAGE和Western blot检测，本方法分离提取得到的蛋白为纯度大于95％的β2GPI。抗p2GPI和抗PLG抗性的检测结果呈正相关关系（r=0．750），且两者检出的阳性率无统计学意义（P〉0．05）。结论：结合了PEG沉淀和两步层析方法可以有效地从人血浆中提取得到p2GPI蛋白用于相关检测和研究。     

尿视黄醇结合蛋白对慢性肾盂肾炎的诊断价值

视黄醇结合蛋白（RBP）是低分子蛋白。其尿浓度可反映肾近曲小管重吸收功能，具有灵敏度和特异度较高的特点。本文对68例慢性肾孟肾炎做尿RBP检测，并与尿β2-微球蛋白（β2-m）相比较，以评估尿RBP对慢性肾盂肾炎的临床应用价值。     

人源脂肪细胞SH2B1β基因的克隆表达

目的获取人源脂肪细胞SH2B1β基因序列,构建SH2B1β-pET28a（＋）重组表达质粒,在大肠杆菌中对其进行表达。方法利用RT—PCR方法从人源分化成熟的脂肪细胞RNA中扩增出SH2B1β的cDNA片段．并插入pET28a（＋）中,转化大肠杆菌BL21（DE3）,通过IPTG诱导表达带6xHis标签的融合蛋白。结果PCR和酶切电泳鉴定结果显示SH2B1β基因克隆入载体中,测序结果证实克隆的基因序列与GenBank中的人源SH2B1β序列相符,SDS—PAGE电泳结果表明获得相对分子质量约75000的目的蛋白。结论成功获取了人源脂肪细胞的SH2B1β基因,并在BL21（DE3）中高效表达目的蛋白,为下一步表达纯化SH2B1β重组蛋白及蛋白的初步功能研究奠定基础。     

尿微量蛋白检测及尿蛋白电泳在肾脏疾病诊断中的应用

我们应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶电泳技术来进行蛋白尿的分类,并结合尿β2-微球蛋白（β2-m）,尿视黄醇结合蛋白（RBP）,尿微量白蛋白及α2-巨球蛋白测定进行对照分析,探讨尿微量蛋白检测及尿蛋白电泳在肾脏疾病中的诊断价值。     

尿γ-GT、β_2-MG、尿微量白蛋白联合检测对高血压和糖尿病患者早期肾损伤的诊断意义

国内外对。肾脏受损早期诊断的研究较多，尿液中γ-GT、β2-MG等无创伤检测在。肾脏早期损伤的诊断意义已引起人们的重视。高血压、糖尿病极易引起。肾脏的损伤。我们对部分高血压、糖尿病患者检测尿液中的γ-GT、β2-MG和尿微量白蛋白（m-pro），以探讨其联合检测在早期。肾脏损伤中的诊断意义。     

血与尿β2-m、α1-m、IgG和尿Alb联检对糖尿病、高血压病患者早期肾功能损伤的判断

判断糖尿病、高血压早期肾脏功能,对治疗及预后提供可靠依据。我们收集了208例患者血、尿样本,分别进行β2-微球蛋白（β2-m）、α1-微球蛋白（α1-m）、免疫球蛋白（IgG）、尿微量白蛋白（Alb）联检,现将结果报道如下。     

胱抑素C和尿蛋白联合分析对早期糖尿病肾病的诊断价值研究

目的探讨糖尿病患者血清胱抑素C（CysC）、尿白蛋白（Alb）、β2微球蛋白（β2-M）、Tamm-Horsfall蛋白（T—HP）及视黄醇结合蛋白（RBP）的变化对早期糖尿病肾病的诊断价值。方法分别采用免疫比浊法和放射免疫法对糖尿病病人和正常人血清中的Cysc含量及尿中4项尿蛋白指标（Alb、β2-M、T—HP和RBP）的水平进行联合检测。结果糖尿病患者尿Alb、β2-M、RBP及血清CysC显著高于正常人（P〈0．01）,而尿T—HP则明显低于正常人（P〈0．01）,尿RBP水平与尿Alb含量呈显著正相关（r=＋0．47,P〈0．05）。随着肾脏病变的加重上述各项指标的异常改变更趋显著。结论联合检测糖尿病病人尿Alb、β2-M、T—HP、RBP及血清CysC有助于糖尿病肾病的早期诊断。     

17α雌二醇对转基因细胞株(APP/PS1N2a)β-淀粉样蛋白生成的影响

目的 探讨17α雌二醇（ESUB>2/SUB>α）对稳定表达人β-淀粉样前体蛋白（APP）/早老因子-1（PS1）即APP /PS1基因的神经母细胞瘤细胞株（Neuro-2a）（APP/PS1 NSUB>2/SUB>a）β-淀粉样蛋白（Aβ）产生的影响及可能机制。方法 将APP/PS1 NSUB>2/SUB>a细胞用10×10SUP>-9/SUP> mol/L E2α预处理2d,更换培养液后,分别进行如下处理：1.加入不同浓度ESUB>2/SUB> a（25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L）和溶媒（对照组）,用免疫印迹法(Western blotting)检测APP/PS1 NSUB>2/SUB> a细胞内和细胞外的Aβ蛋白水平及细胞BACE1蛋白水平;2.加入 100nmol/L ESUB>2/SUB>α、20nmol/L葡萄糖和5mIU葡萄糖氧化酶（GOX）。24h后,进行二氢乙啶(DHE)染色观察APP/PS1 N2a细胞中活性氧（ROS）含量的变化。结果 不同浓度E2α（25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L）处理后,细胞外Aβ蛋白水     

HbA2正常的β地中海贫血携带者基因突变分析

目的对血红蛋白电泳时HbA2在正常范围内的β地中海贫血的基因突变类型进行分析。方法对所有的标本进行血常规、血红蛋白电泳,PCR-反向斑点杂交同时检测17种中国人常见的β地中海贫血基因突变确定其基因型,对于经常规基因检测不能确诊的基因突变,采用直接测序法。结果 1084例确诊为轻型β地中海贫血的标本中,血红蛋白电泳时1018例HbA2≥3.5%,占93.91%,66例〈3.5%,占6.09%,这66例轻型β地中海贫血有9种基因突变类型,分别为：CD41-42（-TTCT）35例、CD17（A→T）15例、IVS-Ⅱ-654（C→T）4例、-28（A→G）4例、CD71-72（＋A）3例、CD43（G→T）2例、IVS-Ⅰ-1（G→T）1例、-29（A→G）1例、CD31（-C）1例。结论血红蛋白电泳时HbA2在正常范围内并不能完全排除轻型β地中海贫血,轻型β地中海贫血的诊断需结合血常规、血红蛋白电泳、基因检测等综合分析,以避免漏诊、误诊。     

2型糖尿病与阿尔茨海默病互为发病风险的机制探讨

目的：比较2型糖尿病（T2DM）大鼠和Alzheimers病（AD）大鼠模型胰腺与海马病变,通过检测糖原合成激酶-3β（GSK-3β）及蛋白酯酶2A（PP2A）变化,探讨两者之间共同的发病基础。方法：用高糖、高脂及高蛋白饮食加小剂量链脲佐菌素（STZ）尾静脉注射建立2型糖尿病模型,海马定位注射STZ建立AD大鼠模型,蛋白质印迹法及免疫组化法检测大鼠大脑和胰腺组织tau蛋白磷酸化及淀粉样β蛋白（Aβ）水平;放射性配体结合实验检测GSK-3β和PP2A活性。结果：T2DM大鼠海马组织中,tau蛋白呈过度磷酸化状态,Aβ水平增加,PP2A活性下降,GSK-3β活性上升,与AD大鼠大脑各项改变相似;在AD大鼠胰腺组织中,Aβ水平增加,PP2A活性下降,GSK-3β活性上升,与2型糖尿病大鼠胰腺组织病变程度相似。但在2组大鼠胰腺组织中均未检出tau蛋白。结论：在T2DM中,由于GSK-3β的活性增高和PP2A的活性降低,导致大脑tau蛋白过度磷酸化及Aβ沉积,是T2DM成为AD发病的重要风险因子的重要原因;在AD中,由于胰岛素抵抗导致胰腺出现Aβ的沉积可能是导致T2DM发病的重要原因。     

CRP与β2-m检测在糖尿病肾病早期诊断中的临床意义

我们通过对2型糖尿病患者血清C-反应蛋白(CRP)与β2-微球蛋白(β2-m)的检测来探讨两者对DN早期诊断的临床价值.     

尿α1-m、β2-m、m-Alb和TRF联检对糖尿病肾病早期诊断的价值

本文采用免疫速率散射比浊法对反映肾脏早期损害的尿α1-m、β2-m、m-Alb和TRF的四项指标进行联检,观察糖尿病肾病（DN）早期改变,并探讨其意义。     

探讨胱抑素C检测对糖尿病肾病的诊断价值

目的探讨血清胱抑素在糖尿病肾病中的早期诊断价值。方法应用免疫比浊法测定血清CysC浓度,并与血清尿素氮、肌酐、尿β2-MG进行比较。结果 CysC、BUN、Cr、β2-MG检测结果糖尿病性肾病组较单纯糖尿病组与健康对照组明显增高,差异有非常显著性（P〈0.01）,糖尿病性肾病组中CysC、BUN、Cr、β2-MG阳性率分别为96.6（56/58）,67.24%（40/58）,70.7%（41/58）,84.5（49/58）,血清CysC浓度与β2-MG、BUN、Cr比较差异有显著性（P〈0.05）。结论 CysC在糖尿病肾病（DN）早期诊断上有较高的检出率,具有一定的诊断价值。     

转化生长因子β1对乳鼠心肌细胞转化生长因子结合蛋白2表达的影响

 目的：探讨转化生长因子β1（TGF-β1）在诱导心肌细胞表达转化生长因子结合蛋白2（LTBP2）中的作用及信号传导通路。 方法：培养乳鼠心肌细胞;实时定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）、蛋白质印迹和免疫细胞化学方法检测不同时间和不同浓度的TGF-β1对大鼠乳鼠心肌细胞LTBP2基因及蛋白表达的影响;用TGF-β1相关信号通路阻断剂探讨TGF-β1调节LTBP2表达改变的信号传导机制。 结果：LTBP2基因表达随着TGF-β1浓度增加（0、2、5、10 ng/mL）而明显升高,在5 ng/mL时刺激最强（P < 0.05）;5 ng/mL的TGF-β1刺激下心肌细胞内LTBP2基因和蛋白表达的升高呈时间依赖性,均在12 h最高,24 h开始呈下降趋势（P < 0.05或P<0.01）;免疫细胞化学结果显示TGF-β1明显升高LTBP2的表达。信号传导通路研究显示TGF-β1在心肌细胞内主要通过ERK信号通路和PI3K信号通路诱导LTBP2的表达。 结论：TGF-β1在乳鼠心肌细胞内通过ERK信号通路和PI3K信号通路上调LTBP2的表达。     

脑脊液生物标志物在阿尔茨海默病与非痴呆神经疾病间的浓度比较

目的观察脑脊液淀粉样蛋白和总tau（t-tau）蛋白、磷酸tau（p-tau）蛋白等生物标志物在阿尔茨海默病（alzheimer’s disease,AD）患者和非痴呆神经疾病患者中的鉴别诊断作用。方法采用ELISA方法检测12例AD患者和22例非痴呆神经疾病患者脑脊液标本中淀粉样蛋白Aβ（1-40）、Aβ（1-42）、t-tau蛋白、p-tau蛋白的浓度水平。结果与AD患者相比,非痴呆神经疾病患者Aβ（1-42）、t-tau水平增高,Aβ（1-40）、p-tau水平降低。在诊断效果上,Aβ（1-40）、总tau蛋白曲线下面积较大,特异性、灵敏度均大于80%。与另一实验室结果比较,p-tau在两个实验室的检测结果相关性较好（R2=0.950）。结论 Aβ（1-40）和t-tau在AD组与非痴呆神经疾病组之间差异具有统计学意义,可用于两组间的鉴别诊断。P-tau检测方法稳定,实验室间重复性良好,适于临床开展。