牙龈卟啉菌的研究进展

牙周疾病是由细菌及细菌携带物所引起的[1] ,尽管牙周疾病确切的病因学尚不清楚 ,很多观察者认为 ,牙龈卟啉菌 (Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ ,Ｐｇ)是口腔重要的致病菌之一 ,但对牙龈卟啉菌的致病性研究发现 ,该菌具有一系列逃避宿主防御机制及破坏宿主组织的毒性因子 ,如菌毛 ,凝集素样粘附 ,多糖夹膜 ,脂多糖 ,凝血 ,毒性代谢产物 ,外膜膜泡和多种酶。因此现在对牙周炎的研究多集中于对牙龈卟啉菌的研究。因为它是革兰氏阴性产黑色素厌氧菌 ,所以分离鉴定程序繁琐 ,不利于进一步研究。近年来 ,由于基因检测技术的发展…     

牙龈卟啉菌蛋白酶rgpA的基因克隆和序列分析

目的:扩增牙龈卟啉菌蛋白酶rgpA催化结构域(rgpAcd)的基因片断并作鉴定。方法:利用PCR方法,克隆牙龈卟啉菌rgpAcd基因,并将基因片断插入pMD18-TVector,通过限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定。结果:克隆基因测序结果与GeneBank数据库中的序列一致。结论:成功克隆了牙龈卟啉菌rgpAcd的基因,为体外表达其活性蛋白奠定了基础。     

牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系细胞因子研究

目的:研究健康者和成人牙周炎患者牙周组织中牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系中白细胞介素-4、白细胞介素-10及γ-干扰素的比例。方法:Elisa法检测牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系中CD4 、CD8 T细胞所占比例,流式细胞仪检测三种细胞因子数量。结果:两组间3种细胞因子表达无显著差异,但部分个体γ-干扰素表达高于其他两种细胞因子的表达。结论:牙龈卟啉菌阳性个体易患牙周疾病者,γ-干扰素表达增高。     

牙龈卟啉单胞菌牙龈素在牙周炎发病信号通路的研究进展

牙周炎是口腔临床实践中最为常见的疾病之一。革兰阴性厌氧菌牙龈卟啉单胞菌与牙周炎密切相关,牙龈卟啉单胞菌表面的牙龈素（gingipains）和脂多糖被认为是其最重要的毒力因子,是近年来牙周炎机制研究热点,引起研究者的广泛关注。本文结合近年来的研究进展,就牙龈卟啉单胞菌牙龈素引起牙周炎症的机制和所涉及的信号通路作一综述。     

牙龈卟啉菌阳性个体T细胞系细胞因子7例分析

牙周疾病是淋巴细胞等参与作用的炎性反应性疾病,细胞因子在其免疫应答及防御中起重要作用。依据T细胞系Th1和Th2细胞因子间表达的异常可探讨牙周病致病机制。Th1细胞主要分泌白细胞介素-2(IL-2)、r-干扰素(r-IFN),Th2分泌白细胞介素-4(IL-4)和白细胞介素-10(IL-10),在牙周疾病     

牙龈卟啉菌全染色体探针的制备

（1）目的 探讨利用化学发光地高辛标记法制备牙龈卟啉菌47A-1的全染色体探针的方法并测定标记效率。（2）方法 采用苯酚-氯仿-溴化十六烷基三甲胺（CTAB）法制备牙龈卟啉菌47A-1基因组DNA,随机引物地高辛标记法制备核酸探针。在尼龙膜上直接点样,化学发光法检测。（3）结果 CTAB法可获得高质量的牙龈卟啉菌47A-1染色体DNA,地高辛标记0.3μg的牙龈卟啉菌核酸可获得10ng探针DNA,化学发光法检测最低可测出0.002pg标记探针的存在。（4）结论 随机引物地高辛标记法是快速获得牙龈卟啉菌全染色体探针的有效途径。     

牙龈卟啉菌全染色体探针的鉴定

（1）目的 对地高辛标记的牙龈卟啉菌47A-1全染色体探针的敏感性和特异性进行检测。（2）方法 采用斑点印迹法和狭缝印迹法，将获得的牙龈卟啉菌47A-1全染色体探针与口腔中14种共18株常见细菌DNA进行杂交鉴定，检测其敏感性和特异性。（3）结果 探针敏感性达到lng同源序列水平，与18株口腔内常见菌种的杂交结果显示，除与3株同种菌杂交外，与中间型普氏菌、产黑色素普氏菌、栖牙类杆菌、多形类杆菌以及不解糖卟啉菌等相关菌存在不同程度的交叉反应，采用氯化锂法纯化探针对杂交结果没有明显影响。（4）结论 牙龈卟啉菌47A-1全染色体探针敏感性较高但特异性不强，其制和轩容易，化学性质稳定，具有一定的推广使用价值。     

牙龈卟啉菌相关疫苗防治牙周炎的现状研究

众所周知,牙周炎是发生在牙齿周围支持组织的细菌感染性疾病,以牙龈炎症和出血、牙周袋形成、牙槽骨吸收和牙松动、移位以致脱落为主要症状。牙周炎主要发生在成人,是导致成人牙齿丧失的主要原因,在世界范围内均有较高的发病率。不仅如此,牙周炎还与许多系统性疾病(如心血管疾病、中风、冠状动脉粥样疾病及糖尿病)相关。因此,研究有效和可靠     

牙髓卟啉菌和牙龈卟啉菌外膜蛋白及膜泡的氨基酸组成分析

牙髓卟啉菌(Porphyromonas endodontalis,Pe)和牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是牙髓病和牙周病的重要优势厌氧菌。 研究表明:Pe和Pg的外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)和膜泡(vesicles,Ves)是非常重要的功能基团。为观察Pe,Pg中OMP和Ves的氨基酸组成及含量,为牙髓病、     

四环素对侵袭性牙周炎血清抗牙龈卟啉菌抗体水平的影响

目的 评价结合四环素的机械性牙周治疗对侵袭性牙周炎（AP）患者牙周附着水平、牙槽骨组织和血清抗牙龈卟啉菌（Pg）抗体亲和力水平的影响。方法研究对象由26例AP患者、20例牙周健康者组成。牙周治疗前及治疗3、6和12个月后常规临床检查,记录牙周附着水平;治疗前及治疗3个月和6个月后拍摄全口曲面断层片。记录釉牙骨质界到骨缺陷底及釉牙骨质界到牙槽嵴顶的距离;治疗前后,实验检测所有受试者血清抗取抗体亲和力水平。亲和力通过二乙醇胺分离ELISA测定。结果结合四环素的机械性牙周治疗后,牙周附着水平有显著改善（P〈0．01）;釉牙骨质界到骨缺陷底的影像改变显著（P〈0．05）;其血清抗Pg表面抗原脂多糖抗体亲和力水平亦明显下降（P〈0．01）。结论结合四环素的机械性牙周治疗对AP患者可获得满意的疗效。     

氦氖激光对牙龈卟啉菌杀菌作用及形态影响的实验研究

目的：研究氦氖激光照射对牙龈卟啉菌杀菌及形态的影响，以期寻求治疗牙周炎的新手段。方法：用功率为6．3mW的氦氖激光照射牙龈卟啉菌，将细菌分为1个空白对照组和5个实验组。分别用不同照射时间（16、32、48、64、80min）的氦氖激光（波长632．8nm，功率6．3mW）进行照射，数活菌数和透射电镜下观察其形态学改变。结果：氦氖激光照射前后活细菌数无显著变化，但菌体的形态产生明显固缩。结论：单纯氦氖激光照射Pg，无明显的杀菌作用，但能使菌体形态发生变化。     

蜂胶对牙龈卟啉单胞菌及牙龈成纤维细胞的影响

目的了解蜂胶对牙龈卟啉单胞菌（porphyromonas gingival，Pg）生长的抑制作用及对人牙龈成纤维细胞的毒性作用。方法采用液体稀释法测定蜂胶对Pg的最小杀菌浓度（MBC），用MTT法测定不同浓度蜂胶作用24h后牙龈成纤维细胞的细胞相对增殖率（RGR），了解蜂胶作用24h后细胞连续7d的增殖回复情况。结果蜂胶对取的MBC为1．56g／L，相当于0．125～0．25mg／L的奥硝唑。蜂胶浓度为MBC时RGR达到70％以上；4g／L蜂胶组的RGR为52．1％，作用细胞24h后，连续7d细胞数持续增加，吸光度逐渐接近阴性对照组。结论蜂胶对Pg的生长有显著抑制作用，且细胞毒性较小，毒性作用可逆。     

牙龈卟啉菌PCR产物硷基差异的测定

牙周病原菌之一－虎龈卟啉菌的ｒＲＮＡ操纵子１６ｓ与２３ｓｒＲＮＡ基因之间的可转录间隙区经ＰＣＲ扩增；扩增产物的ＤＮＡ序列差异采用双聚体泳 动度测定。     

牙龈卟啉单胞菌感染对牙龈上皮细胞中基质金属蛋白酶13表达的影响

 目的 通过体外建立牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）感染牙龈上皮细胞模型,探讨P. gingivalis W83、ATCC 33277感染牙龈上皮细胞后基质金属蛋白酶13（MMP-13）表达的变化。方法 将P. gingivalis W83、ATCC 33277作用于牙龈上皮细胞6、12、24和48 h,采用ELISA检测上清液中MMP-13蛋白浓度变化,实时PCR 检测MMP-13 mRNA相对含量变化。结果 P. gingivalis感染牙龈上皮细胞后,MMP-13蛋白和mRNA表达的总体趋势随时间的延长表达水平逐渐增高。P. gingivalis感染牙龈上皮细胞6和12 h后, P. gingivalis ATCC 33277感染组和W83感染组MMP-13蛋白表达水平与对照组相比无明显差异,而MMP-13 mRNA的相对表达量高于对照组（P＜0.05）;感染24和48 h后,P. gingivalis ATCC 33277感染组和W83感染组MMP-13蛋白和mRNA的相对表达量均明显高于对照组（P＜0.05）,且P. gingivalis W83感染组MMP-13明显高于P. gingivalis ATCC 33277感染组（P＜0.05）。结论 P. gingivalis能够促进牙龈上皮细胞分泌MMP-13,造成牙周组织破坏。P. gingivalis W83降解细胞外基质的能力高于P. gingivalis ATCC 33277,更利于细菌向深部组织扩散。     

牙龈卟啉单胞菌FtsZ降解试验模型-clpP基因缺失株的构建

目的 建立牙龈卟啉单胞菌分裂关键蛋白FtsZ （FtsZPg）体内降解试验模型,即构建蛋白酶编码基因clpP缺失的E.coli MG1655.方法 将一段两端含靶基因同源臂的PCR产物电转入L-阿拉伯糖诱导后表达λ噬菌体重组蛋白、具有较强重组能力、含质粒pKD46的菌株E.coli MG1655感受态细胞,以PCR产物中的氯霉素抗性基因替代靶基因.结果 利用氯霉素抗性平板筛选阳性重组体,得到E.coli MG1655的ClpP蛋白酶基因敲除突变株.通过琼脂糖凝胶电泳和DNA测序最终鉴定阳性clpP基因缺失株.结论 本试验成功构建了E.coli MG1655 clpP敲除株;该敲除株有望在探讨重要牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌分裂关键蛋白FtsZPg与蛋白酶clpP的关系中发挥一定作用.     

牙龈卟啉单胞菌与非口腔疾病关系的研究进展

牙龈卟啉单胞菌是常见的牙周致病菌。近来,大量证据表明牙龈卟啉单胞菌不仅是口腔中常见致病菌,而且与非口腔疾病密切相关,包括炎症性肠炎、癌症、心血管疾病、阿尔茨海默病、类风湿关节炎、糖尿病、早产及非酒精性肝炎等。本文就近年来关于牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌与非口腔疾病关系的研究进展进行综述,有助于判别牙龈卟啉单胞菌是否可作为这些非口腔疾病的辅助诊断标记和潜在治疗靶标,进而有利于开发相关疾病的治疗策略。     

青春期龈炎下菌斑中牙龈卟啉单胞菌kgp基因的调查分析

牙龈蛋白酶是一种由牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis, Pg)产生和分泌的蛋白酶,它与持续的Pg感染、牙龈炎症、肿胀、出血倾向、龈沟液的产生及牙周组织破坏等病理过程密切相关,其中牙龈蛋白酶K(gingipains k,Kgp)是最有潜能的纤维蛋白降解酶.曾有报道青春期龈炎下菌斑中的Pg具有相对的Kgp基因型,为评估青春期龈炎的P.gingivalis特异Kgp基因型的发生率,揭示其与牙周疾病严重程度间有无相关关系,从而为牙周疾病的预防提供信息,现做了以下调查分析.     

牙龈卟啉菌381对纯钛及钛75合金种植体表面失泽的腐蚀

目的：研究牙龈卟啉菌３８１对纯钛及钛７５合金种植体表面失泽腐蚀。方法将纯钛（ＴＡ２）、钛７５合金机加成１０ｍｍ＊１０ｍｍ＊１ｍｍ板片，数量分别为３０片和６０片，取钛７５合金试件３０片与纯钛试件分别进行化学钝化处理，将每组试件３０片随机分空白对照组、培养基对照组、实验组各１０片，厌氧环境中将牙龈卟啉菌３８１接种到改良ＧＡＭ培养基上，将试件贴附表面，每周转换传递１次，共１０ｗｋ．０．５ｍＬ．Ｌ＾－１Ｄ     

牙龈卟啉菌内毒素诱导人牙周纤维细胞释放细胞因子的实验研究

目的：研究牙龈卟啉菌内毒素诱导人牙周纤维细胞释放白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的影响。方法：放射免疫检测法。结果;表明人牙周纤维细胞在牙龈卟啉菌内毒素作用下释放ＩＬ－６,而不能释放ＴＮＦ。结论：人牙周纤维细胞释放ＩＬ－６的量与内毒素的浓度和作用的时间有关。