大剂量电离辐射对肺细胞和脾细胞分泌CSF的作用

大剂量电离辐射对肺细胞和脾细胞分泌ＣＳＦ的作用张鸿来，张铭，刘树铮在放射生物学的研究中，电离辐射对机体造血、免疫功能的影响及其剂量效应关系，一直受到人们的重视。多年的研究证明，大剂量电离辐射对机体的造血、免疫功能有着明显的抑制作用，这主要是由于骨髓造...     

低剂量辐射对小鼠胸腺细胞浆和细胞核蛋白质表达的影响

目的　研究低剂量电离辐射对昆明小鼠胸腺细胞浆和细胞核蛋白质表达的影响。方法　在分离 75mGy照射组和假照射组小鼠胸腺细胞浆和细胞核的基础上 ,采用SephadexG 10 0凝胶过滤和高效液相分析两组小鼠胸腺细胞蛋白质的表达 ,通过小鼠脾淋巴细胞转化和人外周血淋巴细胞染色体畸变检测这些蛋白质表达的生物活性。结果　胸腺细胞浆相对分子质量为 6 1 4× 10 3的蛋白质和胸腺细胞核相对分子质量 30 4× 10 3的蛋白质照射组比假照射组明显增加。并且这些增加的蛋白质组分对ConA刺激正常小鼠脾淋巴细胞转化和X射线损伤人外周血淋巴细胞所致染色体畸变具有刺激和保护作用。结论　低剂量辐射兴奋效应可能与胸腺细胞浆 6 1 4× 10 3的蛋白质和胸腺细胞核 30 4× 10 3的蛋白质表达增高有关。     

低剂量电离辐射对高剂量辐射致癌的影响

低剂量辐射 (LDR)免疫增强效应及其诱导的适应性反应已得到大量实验研究和人体观察资料证实 ,其生物学意义引起许多学者的关注[1 5 ]。免疫系统是机体防御系统的重要组成部分 ,特别是免疫监视作用在肿瘤发生、发展和转归上起着十分重要的作用。因此LDR免疫增强效应及其诱导的适应性反应对机体抗肿瘤能力影响的研究具有重要的理论和临床意义。本研究较系统地探讨了LDR对高剂量辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤 (TL)的影响及其免疫学机理 ,其结果对评价LDR对机体健康影响及在临床上的应用具有重要的意义。一、材料和方法1 动物 :雌性C57BL 6J纯…     

X射线对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

采用荧光分光光度法对裂解ＤＮＡ进行定量，并用琼脂糖凝胶电泳法定性研究Ｘ射线全身照射后小鼠胸腺细胞凋亡。结果表明，４ＧｙＸ射线照后２小时胸腺细胞凋亡开始增加，于照后１４小时达峰值，尔后呈下降趋势。ＤＮＡ裂解率在照后２４小时降至１４小时的５０％，这可能是内环境中巨噬细胞吞噬凋亡小体所致。在照射后１４小时研究其剂量－效应关系发现，高剂量照射使ＤＮＡ裂解明显增多，形成１８０ｂｐ（ｂａｓｅｐａｉｒｓ）左右或其整倍数的ＤＮＡ断片，电泳呈现＂梯形图谱＂；而低剂量辐射可使ＤＮＡ裂解率降低。剂量－效应曲线呈Ｊ型。     

rhG—CSF对6.5Gy照射小鼠近期有远期造血恢复作用的影响

为了观察重组人粒细胞集落刺激因子对机体长期造血功能恢复的影响，设计了二次照射小鼠模型，即首次γ线照射后给予不同剂量的ｒｈＧ－ＣＳＦ治疗，待外周血细胞恢复正常后，给予等剂量第二次照射，照后不再接受任何治疗，观察前后两次照射后外周血细胞的恢复和活存率的改变。     

电离辐射对小鼠骨髓基质细胞分泌的干细胞因子mRNA转录的影响

骨髓基质细胞 (Ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌ,ＢＭＳＣ)是造血微环境的重要组成成分 ,也是产生造血活性物质所必需的结构基础 ,同时也能分泌多种造血因子。ＢＭＳＣ受到辐射损伤后 ,Ｍ ＣＳＦ、Ｇ ＣＳＦ、ＧＭ ＣＳＦ、ＩＬ 1、ＩＬ 4、ＩＬ 5等造血因子ｍＲＮＡ水平发生了变化[1 ] ,但对于其分泌的造血调控的重要细胞因子———干细胞因子 (Ｓｔｅｍｃｅｌｌｆａｃｔｏｒ,ＳＣＦ)在放射损伤后其ｍＲＮＡ水平有什么变化 ,以及这些变化与造血功能障碍之间是否有关系 ,至今尚未见报道。本文作者观察了体外培养的小鼠ＢＭＳＣ…     

rhM—CSF与单核细胞协同对残留白血病祖细胞抑制作用的研究

应用造血祖细胞体外甲基纤维素培养法,观察基因重组人巨噬细胞集落刺激因子(rhM-CSF)对急性早幼粒细胞白血病(APL)完全缓解后骨髓残留白血病祖细胞(L—CFU)的抑制作用,培养前用rhM—CSF与去单核和未去单核的骨髓单个核细胞作用。结果表明:rhM—CSF对L—CFU有明显的抑制作用和诱导分化作用,且与单核细胞的协同作用有关。     

电离辐射对小鼠胸腺Th17细胞相关细胞因子的影响

目的 通过研究电离辐射对小鼠胸腺Th17细胞相关细胞因子的影响,探讨高、低剂量辐射诱导不同的免疫效应中Th17细胞功能。方法 将健康ICR小鼠按随机数字表法分为健康对照组、低剂量照射组(0.05、0.075 Gy)和高剂量照射组(0.5、1.0、2.0、4.0 Gy)探讨剂量-效应关系,用X射线深部治疗机进行不同剂量的全身照射,于照射后24 h处死。同时,探讨时间-效应关系,即分为健康对照组、低剂量照射组(0.075 Gy)和高剂量照射组(2.0 Gy),于照射后12、24、48 h处死,取胸腺组织制备成组织匀浆,ELISA法检测小鼠胸腺细胞中白介素-17a(IL-17a)与白介素-21(IL-21)的浓度。结果 在时间-效应结果中,与健康对照组相比,0.075 Gy照射组胸腺细胞IL-17a和IL-21分泌量呈下降趋势,其分泌量于48 h降到最低(t=3.85、4.73,P<0.05);而2.0 Gy照射组均呈大幅度上升趋势,其分泌量在48 h达到最高(t=-6.74、-6.19,P<0.05);在剂量-效应结果中,与健康对照组相比,较低剂量照射组胸腺细胞IL-17a与IL-21分泌量下降,在0.05 Gy最低(t=8.39、16.45,P<0.05);较高剂量照射组胸腺细胞的分泌量上升,在4.0 Gy时升至最高(t=-15.60、-18.62,P<0.05)。结论 高剂量辐射可以诱导小鼠胸腺细胞IL-17a与IL-21分泌量的增加,而低剂量辐射使其下降,表明Th17细胞相关的细胞因子在低剂量辐射诱导的免疫功能增强效应和高剂量辐射诱导免疫抑制效应中起着重要的作用。     

粒细胞集落刺激因子对急性辐射损伤小鼠胸腺细胞亚群及其近期输出功能的影响

目的 观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对急性辐射损伤小鼠胸腺细胞亚群重建及近期输出功能的影响。方法 雌性BALB/c小鼠50只给于6 Gy ⁶⁰Co 1次性全身照射后随机均分为GCSF组和对照组。GCSF组小鼠给予重组人G-CSF 100 μg·kg^-1·d^-1皮下注射,连续14 d,对照组小鼠给予等体积磷酸盐缓冲液(PBS)皮下注射,连续14 d。照后7、14、21 和28 d颈部脱臼处死小鼠,取出胸腺制成单个核细胞悬液,使用流式细胞仪检测胸腺双阴性细胞发育4阶段(DN1~4)细胞比例的变化,以及CD4 +CD8 +、CD4 +CD8-、CD4-CD8 +细胞亚群的比例。使用荧光定量PCR的方法检测照后30 和60 d 10⁵个胸腺细胞中T细胞受体重排删除环(sjTREC)拷贝数,判断胸腺输出功能。结果 照后7 d,胸腺DN细胞大量增殖,DN1细胞比例下降,DN4细胞比例增高,GCSF组DN1细胞比例在此时间点明显高于对照组(t=9.59,P＜0.05)。照后21 d GCSF组DN3、 DN4细胞比例均分别高于对照组(t=16.37、 7.6, P＜0.05)。照后7 d CD4 +CD8 +细胞比例降至最低,14 d出现反弹,21 d再次下降,以后逐渐恢复,照后28 d GCSF组CD4 +CD8 +细胞比例恢复正常并明显高于对照组 (t=12.22, P<0.05)。G-CSF对胸腺CD4 +CD8-细胞比例影响不大。照后21 d GCSF组CD4-CD8 +细胞比例明显高于对照组(t=3.77, P<0.05)。荧光定量PCR结果提示照后30 d GCSF组胸腺细胞sjTREC拷贝数明显高于对照组(t=5.95,P＜0.01),但照后60 d 两组胸腺细胞sjTREC拷贝数差异无统计学意义。结论 G-CSF可促进急性辐射损伤小鼠胸腺双阴性及双阳性细胞的增殖、分化,提高胸腺输出功能,加快中枢免疫重建。     

低剂量辐射对丝裂霉素C损伤小鼠胸腺和脾细胞的影响

目前低剂量辐射兴奋效应的发生和存在机制的研究已取得了一定的成果。低剂量辐射与低浓度化学因子之间的交叉适应性反应有助于阐明低剂量辐射兴奋效应的机制，低刺量辐射与低浓度化学因子之间存在明显的遗传学交叉适应性反应已有报道。但是，从免疫学角度探讨低剂量电离辐射诱导丝裂毒素C（MMC）损伤的适应性反应未见报道。因此，笔者利用小鼠胸腺细胞自发增殖和脾淋巴细胞转化，观察低剂量γ射线能否诱导抗MMC损伤的免疫学适应性反应。     

小鼠胸腺和牌细胞对淋巴因子反应的辐射剂量效应关系

作者研究了Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经０．１～８．０ＧｙＸ射线全身照射后淋巴因子效应细胞反应性的变化．结果发现，照后２４小时胸腺细胞对ＩＬ－１反应的剂量效应曲线由两个斜率不同的成分组成，其Ｄ３７，分别为１．６５和４．０９Ｇｙ；照后１２和２４小时脾细胞对ＩＬ－２反应的Ｄ３７分别为５．５８和３．４６Ｇｙ；ＣＴＬＬ－２细胞在为０．５～１０Ｇｙ剂量范围内，对ＩＬ－２反应性呈剂量依赖性降低，Ｄ３７为８．７７Ｇｙ。提示ＩＬ－２效应细胞的辐射抗性高于ＩＬ－１效应细胞．     

剂量辐射刺激小鼠骨髓细胞G-CSF受体表达

利用＾１２５Ｉ标记的Ｇ－ＣＳＦ（＾１２５Ｉ－Ｇ－ＣＳＦ）检测小鼠骨髓细胞表面Ｇ－ＣＳＦ受体表达，发现＾１２５Ｉ－Ｇ－ＣＳＦ与其受体的结合在３７℃，６０分钟内完成，３×１０＾６骨髓细胞表面的最大结合量（Ｂｍａｘ）为１５．１ｐｍｏｌ，解离常数（Ｋｄ）７８．６ｐｍｏｌ，推算细胞表面Ｇ－ＣＳＦ受体数为３１００个左右；小剂量辐射（５０－２５０ｍＧｙ）照射小鼠后４８小时，检测骨髓细胞表面Ｇ－ＣＳＦ受体数，发…     

小鼠骨髓树突状细胞的体外诱导培养及生物学特性分析

目的探讨从小鼠骨髓中体外诱导培养树突状细胞（DC）的可行性并进行生物学特性分析与鉴定。方法用重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rmGM-CSF）体外诱导小鼠骨髓细胞分化为树突状细胞,倒置显微镜动态观察形态学变化,扫描电镜观察其表面形态特征,流式细胞术分析细胞表面分子,同时进行抗原吞噬功能和刺激初始型T淋巴细胞增殖能力的检测。结果经体外诱导培养可获得大量未成熟和成熟DC,出现典型树突状形态。未成熟DC的细胞表型为CD11c^high、MHCⅡ^low、CD86^low,具有极强的抗原吞噬能力;未成熟DC经LPS刺激培养后可转变为成熟DC,细胞表型为CD11c^high、MHCⅡ^low、CD86^low,可显著刺激同种异体混合淋巴细胞增殖。结论体外诱导培养可获得小鼠骨髓来源的未成熟和成熟DC。     

Mechanisms of the elimination of low dose hyper-radiosensitivity in T-47D cells by low dose-rate priming

Purpose:?To investigate the mechanisms of elimination of low-dose hyper-radiosensitivity (HRS) in T-47D cells induced by 0.3?Gy low dose-rate (LDR) priming.

Materials and methods:?The mitotic ratio was measured using mitotic marker histone H3 phosphorylation in LDR primed as well as untreated T-47D cells. The HRS response in unprimed cells receiving medium which was irradiated after being harvested from unprimed cells was measured with or without serum present during cell conditioning. 4,6-benzylidene-D-glucose (BG) was used to inhibit protein synthesis during LDR priming.

Results:?LDR primed T-47D cells were HRS-deficient and showed a decrease in mitotic ratio with increasing dose while unprimed, i.e., HRS-competent T-47D cells, showed no decrease in mitotic ratio for doses in the HRS-range. HRS was eliminated in LDR primed cells, in cells receiving medium transfer from LDR primed cells, and in cells receiving LDR irradiated medium harvested from unprimed cells. The efficacy of the transferred medium depended on the presence of serum during cell conditioning. LDR priming eliminated HRS even in the presence of protein synthesis inhibitor BG.

Conclusions:?LDR priming of T-47D cells as well as LDR priming of medium conditioned on T-47D cells induce a factor in the medium which cause the early G₂-checkpoint to be activated in recipient cells by doses normally in the HRS dose-range.     

低剂量照射对LAK细胞体外杀伤肿瘤靶细胞的影响

作者采用＾Ｈ－ＴｄＲ释放实验，观察了低剂量γ射线照射的ＬＡＫ细胞体外杀伤肿瘤靶细胞的影响。来自健康献血员的外周血淋巴细胞，用重组白介素２培养９６小时获取ＬＡＫ效应细胞，在细胞培养的不同时期给予培养中的细胞一次不同剂量的γ射线照射。     

多次低剂量照射对雄性糖尿病大鼠脾细胞凋亡和免疫因子的影响

目的 观察多次低剂量辐射(LDR)对糖尿病(DM)大鼠脾细胞凋亡和免疫因子的影响。方法 大鼠随机分为对照组、DM组和DM+LDR组;剂量分别为25、50和75 mGy,共照射15次;照射后4周,采用流式细胞术检测脾细胞凋亡和TCRα β百分数的变化,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清和脾细胞培养上清IL-2含量的变化。结果 与对照组相比,DM和DM + LDR两组大鼠体重均下降,尤以DM组明显。DM+LDR组大鼠血糖水平虽明显高于对照组(t₂₅=23.321、 t₅₀=18.329、 t₇₅=9.23,P<0.01),但显著低于DM组(t₂₅=3.574、 t₅₀=4.593、 t₇₅=5.577,P< 0.01)。同时发现:与对照组相比,DM+LDR各组脾细胞凋亡增加,其中DM+50 mGy组增加明显(t₅₀=4.102,P<0.01)。血清IL-2含量也增加,但是差异均无统计学意义。脾细胞培养上清IL-2含量明显下降(t₂₅=7.778、 t₅₀=7.411、 t₇₅=8.325,P<0.01)。与DM组相比,DM+LDR各组脾细胞凋亡和TCRα β百分数均明显降低(凋亡:t₂₅=4.772、 t₅₀=3.346、 t₇₅=6.778;TCRα β:t₂₅=3.381、 t₅₀=5.807、 t₇₅=2.356,P<0.05～P<0.01)。血清IL-2含量呈下降趋势;脾细胞培养上清IL-2含量均有升高趋势。结论 多次LDR能够削弱糖尿病造成的大鼠体重减轻和血糖升高,降低糖尿病所致的脾细胞凋亡,并能调节脾脏免疫因子,改善其失衡状态。     

生殖细胞中辐射诱导适应性反应的研究Ⅰ 辐射剂量及间隔时间对适应性反应的影响

本文作者利用小鼠初级精母细胞的短期实验和精原干细胞的长期实验，对低剂量辐射的剂量、照射方式和大剂量辐射的剂量以及间隔时间进行了研究。结果证明；１０～２００ｍＧｙＸ射线都能诱导适应性反应出现；大剂量辐射的剂量水平对适应性反应的影响不太明显，即在０．７５～４．５Ｇｙ之间均可见到适应性反应；小剂量辐射与相继大剂量辐射之间的间隔时间对适应性反应的出现有很大影响，即０．５小时，大于和等于２４小时不出现适应性反应；５０ｍＧｙ×４的多次照射和慢性小剂量照射１．１０Ｇｙ￣（６０）Ｃｏγ射线仍可诱导明显的适应性反应出现。这些结果表明，在生殖细胞中可见到辐射诱导的适应性反应现象。     

Transcriptomic profiling suggests a role for IGFBP5 in premature senescence of endothelial cells after chronic low dose rate irradiation

Abstract

Purpose: Ionizing radiation has been recognized to increase the risk of cardiovascular diseases (CVD). However, there is no consensus concerning the dose-risk relationship for low radiation doses and a mechanistic understanding of low dose effects is needed.

Material and methods: Previously, human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) were exposed to chronic low dose rate radiation (1.4 and 4.1 mGy/h) during one, three and six weeks which resulted in premature senescence in cells exposed to 4.1 mGy/h. To gain more insight into the underlying signaling pathways, we analyzed gene expression changes in these cells using microarray technology. The obtained data were analyzed in a dual approach, combining single gene expression analysis and Gene Set Enrichment Analysis.

Results: An early stress response was observed after one week of exposure to 4.1 mGy/h which was replaced by a more inflammation-related expression profile after three weeks and onwards. This early stress response may trigger the radiation-induced premature senescence previously observed in HUVEC irradiated with 4.1 mGy/h. A dedicated analysis pointed to the involvement of insulin-like growth factor binding protein 5 (IGFBP5) signaling in radiation-induced premature senescence.

Conclusion: Our findings motivate further research on the shape of the dose-response and the dose rate effect for radiation- induced vascular senescence.     

低剂量辐射诱导小鼠脾细胞蛋白表达及生物活性

目的：为了探讨低剂量辐射兴奋效应的分子机理,本文作者对昆明小鼠接受７５ｍＧｙＸ射线全身照射后４ｈ的脾细胞进行了蛋白分子表达的研究。方法用凝胶过滤和高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）分析蛋白分子表达,通过＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入的淋巴细胞转化和人外周血淋巴细胞染色体畸变率观察蛋白分子表达的生物活性。结果发现相对分子质量为１７００００、１８５００和５００００ ３种蛋白质的表达在照射后发生改变,这３种蛋白质分别在脾细