血红素氧合酶在子痫前期胎盘组织中的表达及意义

本文对血红素氧合酶（heine oxygenase，HO）在妊娠期高血压疾病子痫前期患者胎盘中的表达进行分析，旨在探讨其在妊娠期高血压疾病发病中的意义。     

RhoA在子痫前期患者胎盘中的表达

目的:检测正常晚期妊娠和子痫前期患者胎盘RhoA的表达,探讨RhoA在子痫前期发病中的作用。方法:用免疫组织化学SP法及RT-PCR检测40例子痫前期和20例正常晚期妊娠胎盘RhoA蛋白及其mRNA的表达。结果:RhoA主要在滋养细胞表达。轻度子痫前期组和重度子痫前期组RhoA蛋白及mRNA均高于正常晚期妊娠组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:子痫前期患者胎盘RhoA的高表达可能与子痫前期的发病有一定的关系。     

子痫前期患者胎盘组织中BMPR2的表达及其临床意义

目的:研究BMPR2在子痫前期(PE)患者胎盘组织中的表达。方法:收集2017年1月至2017年6月于唐山市工人医院行剖宫产分娩的PE患者40例,其中轻度PE 14例,重度PE 26例。同期选取29例行剖宫产分娩的正常孕妇作为正常妊娠组。应用HE染色、免疫组化、Western blot法检测BMPR2在胎盘组织中的表达。结果:与对照组比较,PE组胎盘组织中BMPR2表达明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。与轻度PE组比较,重度PE组胎盘组织中BMPR2表达明显下降,差异有统计学意义(P0.05)。结论:BMPR2在妊娠期妇女胎盘组织中有不同程度表达,在PE患者胎盘中表达降低,且随着病情加重,表达逐渐降低,其可能与PE的发生、发展有关。     

HO在子痫前期患者胎盘组织和滋养细胞中的表达及青心酮的干预

目的探讨血红素氧合酶（heme oxygenase，HO）在子痫前期胎盘中的表达和作用机制，以及青心酮（DHAP）治疗子痫前期的理论依据。方法应用半定量反转录一聚合酶链反应法检测正常孕妇和妊娠期高血压疾病子痫前期患者胎盘组织以及青心酮干预的滋养细胞中HOmRNA表达水平。结果与正常孕妇组比较，子痫前期组胎盘中HO-1、2mRNA表达明显降低（P〈0．05，P〈0．01）；青心酮能上调滋养细胞中HO-1mRNA的表达水平（P〈0．05），并呈浓度依赖关系。结论子痫前期患者胎盘组织中HO-1、2表达降低，可能系子痫前期疾病发病的重要机制之一。青心酮能够上调滋养细胞中HO-1基因表达，其作用机制可能为通过改善HO—CO系统防治子痫前期。     

PPAR-γ和COX-2在子痫前期患者血浆中的表达及其意义

目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和环氧合酶-2(COX-2)的相关性及其在子痫前期(PE)发生发展中的作用。方法:利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30例正常妊娠孕妇(对照组)和60例PE患者(轻度PE组24例,重度PE组36例)血浆中PPAR-γ、COX-2蛋白表达水平,分析二者在PE中的相关性以及和新生儿出生体质量的关系。结果:PPAR-γ在轻度PE组母体血浆中明显高表达,与对照组和重度PE组比较差异有统计学意义(P0.05),在重度PE组显著降低,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05);COX-2在轻度PE组和重度PE组母体血浆中的蛋白表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);PPAR-γ与COX-2的Spearman相关分析显示二者在轻度PE组的孕妇血浆的表达量呈正相关性(r=0.414,P=0.045),在重度PE组中呈负相关性(r=-0.445,P=0.007);COX-2的蛋白表达量与分娩孕周具有临界负相关关系(r=-0.245,P=0.059);PPAR-γ的蛋白表达量与收缩压、舒张压均呈负相关,而与分娩孕周呈正相关。结论:PPAR-γ与COX-2的蛋白表达水平在重度PE患者血浆中呈负相关,提示二者可能相互影响共同参与PE的发病。     

子痫前期胎盘学研究进展

子痫前期是一种妊娠期特有疾病,以高血压和蛋白尿为临床特征,可伴有全身多脏器损伤.由于其病因不明,除终止妊娠之外缺乏有效的临床治疗方法,始终是引起孕产妇死亡的主要原因之一.目前,子痫前期发病机制的"两阶段"理论已经得到普遍认同,即:第1阶段为胎盘形成的早期,滋养细胞对子宫内膜侵入过浅,子宫螺旋小动脉重铸障碍,导致胎盘"浅着床",是子痫前期发病的始动因素.     

子痫前期及正常妊娠孕妇胎盘组织PTEN表达的研究

目的:研究PTEN在子痫前期胎盘组织及正常妊娠胎盘组织中的表达以探讨其与子痫前期发病的关系。方法:通过逆转录聚合酶链反应法检测37例重度子痫前期、22例轻度子痫前期及53例正常妊娠胎盘组织中PTEN的核酸表达水平,运用免疫组织化学检测PTEN在胎盘组织中的定位,通过免疫印迹法检测PTEN蛋白表达的水平。结果:免疫组织化学技术显示,PTEN选择性表达于胎盘血管内皮细胞浆中,RT-PCR及免疫印迹结果显示:重度子痫前期胎盘组织中PTEN的表达量低于轻度子痫前期及正常妊娠,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:与正常妊娠及轻度子痫前期相比,重度子痫前期时PTEN表达发生改变,提示PTEN在重度子痫前期的发病机制中可能发挥了作用。     

子痫前期患者胎盘组织氧化应激与PeroxiredoxinⅡ

目的:研究子痫前期胎盘组织氧化应激情况及PeroxiredoxinⅡ的表达,探讨PeroxiredoxinⅡ在子痫前期氧化应激机制中的作用。方法:用蛋白免疫印迹法检测15例子痫前期患者及15例正常妊娠者胎盘组织中PeroxiredoxinⅡ表达,测定相应组织中SOD活力及MDA、H2O2含量。结果:子痫前期患者胎盘组织中,PeroxiredoxinⅡ的表达明显低于正常妊娠组(P<0.05)。子痫前期组氧化应激指标SOD活力为89.74±18.26U/mg-prot,明显低于正常妊娠组105.23±21.88U/mgprot(P<0.01);MDA含量96.69±32.88nmol/mgprot,明显高于对照组63.29±13.74nmol/mgprot(P<0.05);H2O2含量为81.65±17.93nmol/mgprot,显著高于对照组的68.58±13.55nmol/mgprot(P<0.01)。H2O2含量与PeroxiredoxinⅡ表达量呈负相关。结论:PeroxiredoxinⅡ与子痫前期发生发展中的氧化应激机制存在密切关系。     

子痫前期胎盘组织差异表达基因ABCG_2的克隆和鉴定

目的:克隆和鉴定子痫前期胎盘组织差异表达基因,确定与子痫前期相关的基因。方法:应用荧光mRNA差异显示技术寻找并克隆子痫前期胎盘组织差异表达的基因,对其中的ATP结合盒转运子G_2(ATP binding cassette transporter G_2,ABCG_2)基因用半定量RT-PCR技术验证其表达。结果:ABCG_2基因在子痫前期胎盘组织中高表达,半定量RT-PCR结果与mRNA差异显示的结果相符合,ABCG_2基因在子痫前期胎盘组织中的表达高于正常胎盘组织,差异有显著性(P<0.05)。结论:荧光mRNA差异显示技术可用于筛选子痫前期胎盘组织差异表达基因,并应用此技术发现了ABCG_2基因在子痫前期患者胎盘组织表达水平增高。     

survivin和livin在子痫前期胎盘中的表达及意义

目的:检测抑凋亡基因survivin和livin在子痫前期患者胎盘的表达,研究滋养细胞凋亡与子痫前期的关系。方法:用免疫组化SP法检测胎盘组织中survivin和livin的表达,其中子痫前期20例、子痫4例、正常晚期妊娠20例,用计算机图像分析系统定量分析。结果:(1)survivin主要位于绒毛小叶的合体滋养细胞及细胞滋养细胞,在子痫前期的表达显著低于正常晚期妊娠(P<0.05),随病情加重表达降低;(2)livin主要在合体滋养细胞的细胞核中表达,在子痫前期、子痫组的表达均低于正常晚期妊娠(P<0.05);(3)子痫前期、子痫中survivin和livin表达无相关性(P>0.05)。结论:子痫前期及子痫患者胎盘组织中survivin、livin的表达均明显低于正常对照组,但两者无相关性(r=0.142,P=0.298,P>0.05)。     

印迹基因H19在子痫前期孕妇胎盘组织中的印迹状态

目的 探讨印迹基因H19印迹状态在子痫前期发病中的作用.方法 2007年8月-2008年3月第三军医大学附属大坪医院、西南医院、新桥医院妇产科行剖宫产分娩的子痫前期孕妇24例为子痫前期组(其中轻度子痫前期3例、重度子痫前期21例);同期行择期剖宫产的正常足月孕妇50例为正常晚孕组.采用PCR-RFLP法检测两组孕妇胎盘组织中H19基因的印迹状态,并对子痫前期组H19基因组DNA杂合子小同印迹状态孕妇的血压进行分析.结果 (1)正常晚孕组胎盘组织中有H19基因组DNA杂合子20例(40%),纯合子30例(60%);子痫前期组胎盘组织中有H19基因组DNA杂合子11例(46%),纯合子13例(57%).两组孕妇H19基因组DNA杂合子比较,差异无统计学意义(P>0.05).(2)正常晚孕组20例H19基因组DNA杂合子孕妇全部为单等位基因表达;子痫前期组11例H19基因DNA杂合子孕妇中,有5例(45%)为双等位基因表达,单等位基因表达6例(55%),子痫前期组存在印迹丢失,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01).(3)子痫前期组H19基因DNA杂合子中双等位基因表达孕妇的收缩压为(194±21)mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),舒张压为(124±18)mm Hg;单等位基因表达孕妇的收缩压为(171±9)mm Hg,舒张压为(104±8)mm Hg,两者血压比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 子痫前期患者胎盘组织中H19基因存在印迹丢失,且印迹丢失与血压水平变化有关.提示H19基因印迹丢失可能参与子痫前期的发病,并与疾病的严重程度密切相关.     

跨膜型血管内皮生长因子受体1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其意义

目的研究跨膜型血管内皮生长因子受体1(Flt-1)在子痫前期患者胎盘组织中的表达变化及其意义。方法采用RT-PCR方法检测20例子痫前期患者(观察组)胎盘组织中Flt-1mRNA的相对表达量[以Flt-1与β肌动蛋白(β-actin)电泳条带吸光度(A)值的比值表示],并以20例正常孕妇(对照组)为对照;采用蛋白印迹(westernblot)法检测和比较两组各18例胎盘组织中Flt-1的蛋白相对表达量[其余4例标本因蛋白提取不理想而废弃,以Flt-1与磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)电泳条带A值的比值表示]。结果两组孕妇胎盘组织中均有Flt-1的表达,观察组孕妇胎盘组织Flt-1mRNA相对表达量为2·25±0·19,对照组为1·23±0·29,两组比较,差异有统计学意义(P<0·05);观察组孕妇胎盘组织Flt-1蛋白相对表达量为2·67±1·19,对照组为0·94±0·51,两组比较,差异也有统计学意义(P<0·05)。结论Flt-1可能参与了子痫前期的病理生理过程。     

子痫前期患者胎盘和脐动脉组织Rho相关蛋白激酶Ⅱ的表达及意义

目的 探讨子痫前期患者胎盘和脐动脉组织中Rho相关蛋白激酶Ⅱ(RockⅡ)的表达变化及其意义.方法 采用RT-PCR、蛋白印迹法分别检测35例轻度子痫前期患者(轻度子痫前期组)、38例重度子痫前期患者(重度子痫前期组)及45例正常晚期妊娠妇女(对照组)胎盘及脐动脉组织中RockⅡmRNA及其蛋白表达水平;采用免疫组化方法 对RockⅡ在胎盘组织中的表达进行定位,B超检测脐动脉收缩期最大血流速度(S)与舒张末期血流速度(D)的比值.结果 (1)RockⅡ主要表达于胎盘合体滋养细胞的细胞质.(2)轻度子痫前期组、重度子痫前期组及对照组胎盘组织RockⅡmRNA表达水平分别为0.82±0.14、0.93±0.13及0.70 4-0.12,分别比较,差异也均有统计学意义(P＜0.01);轻度子痫前期组、重度子痫前期组及对照组胎盘组织RockⅡ蛋白表达水平分别为0.79±O.15、0.92±0.12及0.68±0.11,分别比较,差异也均有统计学意义(P＜0.01).(3)轻度子痫前期组、重度子痫前期组及对照组脐动脉组织RockⅡmRNA表达水平分别为0.69±0.13、0.55±0.12及0.76±0.10,分别比较,差异也均有统计学意义(P＜0.01);轻度子痫前期组、重度子痫前期组及对照组脐动脉组织RockⅡ蛋白表达水平分别为0.68±0.10、0.51±0.12及0.75±0.13,分别比较,差异也均有统计学意义(P＜0.01).(4)脐动脉组织RockⅡmRNA及蛋白表达水平与脐动脉S/D值均无相关性(P＞0.05).结论 RockⅡ在子痫前期患者胎盘组织中的表达水平升高,在脐动脉组织中的表达水平降低,可能参与了子痫前期的病理、生理过程.     

HtrA1在子痫前期孕妇血清、胎盘组织中的表达及意义

目的:探讨HtrA1(high temperature requirement A1)在子痫前期孕妇血清、胎盘组织中的表达及意义。方法:HtrA1属分泌型蛋白,可采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定同期住院孕妇的空腹血清HtrA1浓度,其中正常晚期妊娠30例、轻度子痫前期25例、重度子痫前期20例;同时应用免疫组化SABC法检测胎盘组织中HtrA1的表达。结果:正常晚期妊娠、轻度子痫前期及重度子痫前期孕妇血清HtrA1浓度分别为(160.63±32.52)pg/ml、(210.82±32.52)pg/ml及(233.68±38.61)pg/ml,组间差异显著(P<0.05);正常晚期妊娠、轻度子痫前期及重度子痫前期孕妇胎盘组织中HtrA的平均灰度值分别为156.03±5.07、149.89±2.69及140.05±4.96,组间差异显著(P<0.05)。结论:随着病情加重,孕妇血清及胎盘组织中HtrA1的表达显著增高。HtrA1与子痫前期的发生、发展有关。     

孕妇血清及其新生儿脐血、胎盘组织中脂肪型脂肪酸结合蛋白表达变化与子痫前期发病的关系

目的 探讨孕妇血清及其新生儿脐血中脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)水平、胎盘组织中FABP4 mRNA的表达变化在子痫前期发病中的作用.方法 选择2008年12月-2009年10月在福建省妇幼保健院产科住院分娩的60例重度子痫前期孕妇,按发病时孕周不同分为早发型子痫前期组(发病时孕周≤34周)和晚发型子痫前期组(发病时孕周>34周)各30例;另选同期正常晚期孕妇60例,根据孕周不同分为早发型对照组(孕周≤34周)和晚发型对照组(孕周>34周)各30例.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测孕妇血清FABP4、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)及新生儿脐血FABP4水平;采用稳态模型评估法计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);采用逆转录(RT)PCR技术检测胎盘组织中FABP4 mRNA的表达;记录临床相关指标,包括孕妇入院时体质指数(BMI)、收缩压(SP)、舒张压(DP)及平均动脉压(MAP)、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、肾小球滤过率(GFR)、24 h尿蛋白定量和新生儿出生体质量.结果 (1)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清中FABP4水平分别为(176±9)及(170±9)ng/L,早发型及晚发型对照组分别为(81±13)及(94±15)ng/L,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清FINS、HOMA-IR水平分别为(21.9±4.3)mU/L、5.1±1.7及(22.6±4.0)mU/L、4.9±1.5,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(3)早发型及晚发型子痫前期组孕妇胎盘组织中FABP4 mRNA的表达水平分别为3.17±0.89及2.97±0.72,均高于晚发型对照组的1.00±0.28,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);但早发型子痫前期组与晚发型子痫前期组比较,差异无统计学意义(P>0.05).(4)早发型及晚发型子痫前期组新生儿脐血中FABP4水平分别为(92±10)及(100±8)ng/L,均低于晚发型对照组的(141±18)ng/L,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).早发型子痫前期组、晚发型子痫前期组及晚发型对照组新生儿出生体质量两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05).相关性分析结果显示,脐血FABP4水平与孕妇血清FABP4及胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均呈明显负相关(r分别为-0.882、-0.678,P<0.05),与新生儿出生体质量呈明显正相关(r=0.728,P<0.05).(5)早发型及晚发型子痫前期组孕妇血清中FABP4水平与胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均呈明显正相关(r分别为0.609、0.403,P<0.05),与血TG(r分别为0.702、0.562),FINS(r分别为0.528、0.423),HOMA-IR(r分别为0.566、0.519),Cr(r分别为0.443、0.523),UA(r分别为0.438、0.413)均呈明显正相关(P<0.05),而与血HDL(r分别为-0.539、-0.498),GFR(r分别为-0.717、-0.778)均呈明显负相关(P<0.05).结论 子痫前期孕妇血清FABP4水平及胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平均明显升高,且两者呈明显正相关.提示FABP4水平升高可能是子痫的期发病的重要因素之一,而胎盘组织中FABP4 mRNA表达水平升高可能是导致子痫的期孕妇血清FABP4水平升高的主要原因.     

激肽释放酶基因在子痫前期患者中的表达及活性变化

目的:了解激肽释放酶基因表达与子痫前期发生、发展的关系。方法:用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及酶底物S2266分别检测子痫前期轻、重度患者共30例及30例正常孕妇(对照组)胎盘中激肽释放酶基因表达及尿液中激肽释放酶活性的差异。结果:与对照组相比,子痫前期患者胎盘中激肽释放酶mRNA的表达水平及尿液中激肽释放酶活性明显降低(P<0.01);而且子痫前期重度患者的上述指标较子痫前期轻度患者更低(P<0.05)。结论:激肽释放酶基因表达缺陷或抑制与子痫前期的发生、发展以及病情轻重相关。     

轴突导向因子netrin-1在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与胎盘新生血管形成的关系

目的探讨轴突导向因子 netrin-1在子痫前期孕妇胎盘组织中的表达及其对胎盘新生血管形成中的作用。方法采用 RT-PCR 和免疫印迹技术分别检测正常妊娠妇女20例(正常妊娠组)和子痫前期孕妇20例(子痫前期组,其中轻度12例,重度8例)的胎盘组织中轴突导向因子netrin-1 mRNA 和蛋白的表达;采用免疫组化并通过抗 F8因子抗体检测两组孕妇胎盘组织中的血管密度。结果 (1)正常妊娠组及子痫前期组孕妇胎盘组织中 netrin-1 mRNA 相对吸光度(A)值分别为0.51±0.08和0.41±0.06,netrin-1蛋白 A 值分别为26.4±1.8和20.5±1.3。两组分别比较,差异有统计学意义(P<0.01)。子痫前期组轻度和重度孕妇 netrin-1 mRNA A 值分别为0.48±0.08和0.34±0.07,netrin-1蛋白 A 值分别为22.8±1.3和18.2±1.0。两者分别比较,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)子痫前期组孕妇胎盘血管密度为(54±8)个,正常妊娠组孕妇为(65±10)个,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);子痫前期组中重度孕妇血管密度为(48±7)个,轻度孕妇为(60±9)个,两者比较,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)正常妊娠组孕妇胎盘组织中 netrin-1 mRNA 及其蛋白表达与血管密度呈正相关关系,相关系数(r)分别为0.67和0.71(P 均<0.01);子痫前期组孕妇胎盘组织中 netrin-1 mRNA 及其蛋白表达与血管密度呈正相关关系,r 分别为0.61和0.70(P 均<0.01);子痫前期组轻度孕妇胎盘组织中 netrin-1 mRNA 及其蛋白表达与血管密度呈正相关关系,r 分别为0.69和0.73(P 均<0.01);重度孕妇胎盘组织中 netrin-1 mRNA 及其蛋白表达与血管密度呈正相关关系,r 分别为0.71和0.75(P 均<0.01)。结论子痫前期孕妇胎盘组织中 netrin-1表达下降,可能是胎盘血管密度降低的原因之一。