氯沙坦对肝星状细胞增殖和凋亡的作用

目的：观察氯沙坦对肝星状细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用CCK8试剂盒检测氯沙坦对肝星状细胞增殖的抑制情况;重复实验可计算IC50;采用AnnexinV-FITC/PI双染法经流式细胞仪检测肝星状细胞的凋亡情况。结果：氯沙坦可抑制肝星状细胞的增殖,并呈明显的剂量依赖性,1 000 μmol?L-1时肝细胞的抑制率可达（95.22±3.54）%,IC50值为（326.21±30.27） μmol?L-1;AnnexinV-FITC/PI双染法检测显示,各浓度的氯沙坦均能促进细胞凋亡,与对照组比较有显著性差异（P<0.01）。结论：氯沙坦有抑制肝星状细胞细胞增殖及促进其凋亡的作用。     

苏拉明在肝纤维化大鼠肝星状细胞增殖和凋亡中的作用(英文)

本研究旨在探究苏拉明在肝星状细胞（HSCs）增殖、凋亡中的作用。将HSCs株分别在不同浓度的苏拉明和无苏拉明的培养基中体外培养。应用MTT法检测细胞增殖率,流式细胞术测定细胞周期和增殖指数;TUNEL法检测细胞凋亡率;显微镜下观察细胞形态学变化。结果显示苏拉明干预后,与对照组比较HSCs增殖率均显著减低;苏拉明(1.4×10^-5mol/L)干预72小时,HSCs增殖率降低最明显,且呈时间和剂量依赖性;苏拉明(1.4×10^-5mol/L)干预24小时,G₁期HSCs百分比显著升高,增殖指数显著降低,而HSCs凋亡率无显著变化。苏拉明对HSCs形态无显著影响。我们认为在实验剂量范围内,苏拉明可抑制HSCs增殖,而对HSCs凋亡无影响。     

维拉帕米对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的观察维拉帕米对人肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)增殖和凋亡的影响。方法采用不同浓度的维拉帕米对HSCs处理48 h,CCK-8试剂盒(cell counting Kit-8)检测细胞增殖抑制率,HE染色观察细胞形态超微结构的变化,流式细胞仪Annexin-V/PI双染法检测HSCs的凋亡率。结果维拉帕米可抑制HSCs的增殖,且有剂量相关性,其IC50值为(150±10)mmol·L-1;HE染色可见维拉帕米组出现不同程度的细胞体积变小、核浓缩深染等凋亡形态改变;Annexin-V/PI双染法检测显示,不同浓度的维拉帕米均可诱导HSCs凋亡,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论维拉帕米可抑制HSCs的增殖,诱导其凋亡。     

丹皮酚体外对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨丹皮酚对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响。方法 HSC加入丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h后,MTT比色法和锥虫蓝染色法检测HSC的存活率。HSC与丹皮酚33.2 mg·L-1分别作用6,12,24,36和48 h,锥虫蓝染色法检测HSC的存活率。HSC与丹皮酚1.66～69.7 mg·L-1作用48 h用细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性测定试剂盒检测细胞上清中LDH活性。丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1与HSC作用24 h分别用光学显微镜、Hoechst 33258染色和流式细胞术检测HSC细胞形态、细胞凋亡和凋亡率;丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h用流式细胞术检测细胞周期。结果 MTT实验结果表明,丹皮酚16.6～49.8 mg·L-1对HSC增殖具有明显抑制作用,且具有浓度效应关系(r=0.955,P<0.05),作用48 h时IC50值为105.4 mg·L-1。锥虫蓝染色实验结果表明,丹皮酚对HSC存活率的抑制作用不仅具有浓度效应关系(r=-0.936,P<0.05),浓度为33.2 mg·L-1时还具有时间效应关系(r=-0.965,P<0.05)。丹皮酚16.6～69.7 mg·L-1作用48 h无明显细胞毒性。流式细胞仪检测结果显示,丹皮酚8.3～49.8 mg·L-1作用24 h能显著促进HSC细胞凋亡(P<0.05),且具有浓度效应关系(r=0.920,P<0.05)。丹皮酚33.2和49.8 mg·L-1作用48 h可调节细胞周期,G0/G1期细胞增加(P<0.01),S期细胞减少(P<0.01),具有浓度依赖性(r=0.980,P<0.05)。结论丹皮酚具有促进HSC凋亡和抑制HSC增殖的作用,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。     

青蒿琥酯对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡的影响

摘 要 目的:探讨青蒿琥酯（Artesunate,Art）对大鼠肝星状细胞（HSC-T6）增殖和凋亡的影响。方法: 选用活性良好的HSC-T6细胞进行体外培养,应用倒置显微镜观察药物作用后的细胞形态改变;用CCK-8测定不同浓度、不同时间Art对该细胞增殖的抑制作用的影响;用Annexin Ⅴ和PI双染的流式细胞术检测HSC-T6的细胞凋亡率的影响。结果:①倒置显微镜结果显示,Art作用过的贴壁细胞数目变少、突触变短变细、细胞表面变皱、由星形变成圆形。②12.5～200 μg·ml^-1的Art在0～72 h范围内对HSC的增殖有明显的抑制作用（P＜0.01）,抑制率有时间和剂量依赖性。③流式细胞仪结果显示随着剂量、时间的增加,凋亡率显著增加（P＜0.05）。结论:Art能抑制HSC T6细胞的增殖,并可促进细胞凋亡。     

阿米洛利对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的：探讨阿米洛利对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖的影响。方法：将HSC T6细胞与不同浓度的阿米洛利共同培养24 h。MTT法观察阿米洛利对HSC T6增殖的效应，以乳酸脱氢酶(LDH)法观察阿米洛利对HSC T6的毒性作用。结果：阿米洛利浓度＞1.875 μmol·L 1时对HSC增殖有抑制作用(P＜0.01)，1.875～60 μmol·L 1未发现阿米洛利对HSC有毒性作用(P＞0.05)。结论：阿米洛利可抑制HSC的增殖，其作用不是非特异性细胞毒作用所致。     

山莨菪碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的：研究山莨菪碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响，为应用山莨菪碱防治肝纤维化提供实验依据。方法：采用链霉蛋白酶、胶原酶原位灌流，以Nycodenz为分离介质，单层一步密度梯度离心法．分离大鼠的肝星状细胞。并以MTT比色法观察山莨菪碱对肝星状细胞的增殖效应．用流式细胞仪检测了肝星状细胞在细胞周期中DNA含量的改变。结果：山莨菪碱能明显抑制细胞增殖，并呈药物浓度依赖关系，DNA合成受到抑制。结论：山莨菪碱在体外具有抗肝纤维化的作用，它对于防治肝纤维化可能有一定的临床意义和应用前景。     

联苯双酯对大鼠肝星状细胞增殖和凋亡及PPARγ表达的影响

摘 要 目的： 探讨联苯双酯(dimethyl dicarboxylate biphenyl,DDB)对大鼠肝星状细胞HSC-T6增殖和凋亡及过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferator-activated receptor gamma, PPARγ)表达的影响。方法: 接种HSC T6细胞于96孔板和6孔板中,分别用CCK 8法和流式细胞术测定不同浓度联苯双酯作用于细胞24 h后对细胞增殖和凋亡的影响;实时荧光定量PCR（Quantitative Real time PCR,Q-PCR）和Western blotting分别检测药物对HSC-T6细胞PPARγ mRNA和蛋白的表达的影响。结果: 相比于对照组（0 μmol·L^-1）,DDB在实验浓度（8～64 μmol·L^-1）能明显抑制HSC T6的增殖（P<0.05),促进HSC T6的凋亡（P<0.05);药物处理过的HSC T6细胞PPARγ mRNA及其蛋白表达均有显著提高。结论:DDB可通过上调HSC T6细胞中PPARγ的表达抑制细胞的增殖,促进细胞的凋亡。     

化纤灵方药物血清对肝星状细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨化纤灵方药物血清对肝星状细胞(HSC)增殖及凋亡的影响.方法:传代培养的大鼠HSC系HSC-T6与中药复方化纤灵方药物血清(5%、10%、20%)共同培养48 h后,应用MTT法检测HSC-T6细胞增殖,琼脂糖凝胶电泳法及流式细胞仪测定细胞凋亡.结果:复方化纤灵方药物血清能显著抑制体外培养的HSC-T6增殖,中、高剂量组凋亡率分别为(20.37±0.78)%、(21.69±2.35)%、显著高于正常对照组(P<0.01);化纤灵方药物血清均可诱导HSC凋亡.结论:复方化纤灵方能抑制HSC增殖并促进其凋亡,可能是抗肝纤维化作用的主要机制.     

去甲肾上腺素和酚妥拉明对大鼠肝星状细胞的影响

目的：探讨α-肾上腺素激动剂去甲肾上腺素和拮抗剂酚妥拉明对体外活化的肝星状细胞（HSC-T6）的影响。方法：体外对HSC-T6进行复苏和培养传代;MTT法检测HSC-T6的增殖;放射免疫法检测HSC-T6培养上清液中透明质酸(HA)和III型前胶原（PCIII）的浓度;流式细胞仪检测HSC-T6凋亡率;免疫细胞化学染色检测组织基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)和基质金属酶-13(MMP-13)蛋白的表达。结果：在体外培养的活化HSC-T6中,去甲肾上腺素（10-5,10-7,10-9 mol&#8226;L-1）能促进细胞增殖,升高分泌HA和PCIII水平,增强TIMP-1蛋白的阳性表达并降低其凋亡率;酚妥拉明（10-5,10-7,10-9 mol&#8226;L-1）能抑制细胞增殖,促进MMP-13的阳性表达并增加HSC-T6的凋亡率。结论：去甲肾上腺素具有促进肝纤维化的作用,酚妥拉明则具有抗纤维化的作用,该作用与其对HSC-T6增殖、凋亡及HA和PCIII分泌水平调控有关。     

内毒素刺激的Kupffer细胞对肝星状细胞增殖的影响

目的　探讨内毒素 (LPS)及其刺激的Kupffer细胞对大鼠肝星状细胞 (HSC)增殖的影响。方法　用链酶蛋白酶和胶原酶原位灌流 ,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠肝脏HSC和Kupffer细胞 ,制备LPS刺激的Kupffer细胞培养上清液 (KCCM ) ,并以MTT法观察LPS及KCCM对HSC增殖的效应。结果　无LPS刺激和浓度为 1μg/ml的LPS刺激所得的KCCM对HSC有显著增殖作用 (P <0 0 1) ,且两组之间有差异 (P <0 0 5 ) ;浓度为 10 μg/ml的LPS刺激所得的KCCM对HSC无影响 (P >0 0 5 ) ;加入兔抗人转化生长因子 β1(TGF β1)可抑制低浓度LPS刺激的KCCM对HSC的增殖作用 (P <0 0 1) ;LPS浓度为 1μg/ml和 10 μg/ml对HSC直接作用均无增殖效应 (P >0 0 5 )。 结论　内毒素刺激的KCCM可促进HSC增殖 ,与肝纤维化的发生可能有关     

灯盏花素对离体大鼠肝星状细胞增殖的影响

目的：研究灯盏花素对离体大鼠肝星状细胞增殖与凋亡的影响,探讨灯盏花素在抗肝纤维化方面的作用。方法：用袁桃霞等的肝星状细胞分离方法获得原代培养的肝星状细胞,采用MTT比色法检测肝星状细胞的增殖,TUNEL法检测DNA断裂、凋亡情况。结果：①灯盏花素对肝星状细胞（HSC）增殖有一定的抑制作用,且与其浓度和作用时间有关;②灯盏花素处理组HSC凋亡率与对照组相比差异无显著性。结论：灯盏花素对大鼠肝星状细胞增殖有抑制作用。     

异甘草酸镁对大鼠肝星状细胞增殖和活力的影响

目的观察异甘草酸镁对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖和活力的影响。方法用含不同浓度异甘草酸镁的培养基（0、0.01、0.1、1.0、10.0 mg/ml）培养HSC,通过MTT法和LDH法检测异甘草酸镁对HSC增殖和活力的影响,并同时观察其形态变化。结果MTT法测得与空白对照组（0 mg/ml）比较,培养基所含的异甘草酸镁浓度为1.0 mg/ml时,对HSC具有明显的抑制增殖作用;10.0 mg/ml时,其抑制增殖作用达到最高峰。LDH法测得各浓度组的异甘草酸镁给药组细胞上清液中LDH活力无明显差异。结论异甘草酸镁在一定剂量范围内对HSC具有明显的抑制增殖作用,但对细胞上清液LDH活力无明显的影响。     

Neferine inhibits cultured hepatic stellate cell activation and facilitates apoptosis: A possible molecular mechanism

Neferine is a major alkaloid component of “Lian Zi Xin”, embryos of the seeds of Nelumbo nucifera Gaertner, Nymphaeaceae. Previous studies have shown that neferine has an inhibitory effect on pulmonary fibrosis through its anti-inflammatory and anti-oxidative activities and inhibition of cytokines and NF-κB. However, it is unknown whether neferine also has an inhibitory effect on liver fibrosis through inhibition of TGF-β1 and collagen I and facilitation of apoptosis of hepatic stellate cells. This study examined the effects of neferine on cultured hepatic stellate (HSC-T6) cells and explored its possible action mechanisms by means of MTT assay, enzyme-linked immunosorbent assay, flow-cytometric annexin V–PI assay and Hoechst 33258 staining, as well as real-time PCR and western blotting. The results showed that neferine administration (2, 4, 6, 8 and 10 μmol/l) significantly decreased the TGF-β1 and collagen I produced in HSC-T6 cells, and increased the HSC-T6 cell apoptosis in a dose-dependent manner. Neferine treatment for 48 h at concentrations of 6 and 10 μmol/l significantly increased Bax and caspase 3 mRNAs and proteins, and reduced Bcl2 and alpha-smooth muscle actin (α-SMA) mRNAs and proteins. Our data indicate that neferine efficiently inhibits cultured HSC-T6 cell activation and induces apoptosis by increasing Bax and caspase 3 expression via the mitochondrial pathway.     

鳖甲活性多肽的合成及对肝星状细胞增殖的抑制作用(英文)

探讨鳖甲活性多肽的固相合成及对肝星状细胞(HSC-T6)增殖的抑制作用。根据鳖甲活性多肽的序列结构,采用固相方法对多肽进行全合成,并用MALDI-TOFMS质谱对合成多肽进行分析鉴定;肝星状细胞(HSC-T6)培养至对数生长期后,加入不同浓度合成多肽作用肝星状细胞株HSC-T6,采用MTS法分析HSC-T6生长的抑制作用;使用AnnexinV-FITC/PI法检测HSC凋亡率。结果显示通过固相合成可以得到与原序列结构一致的鳖甲合成多肽;鳖甲合成多肽浓度依赖性地抑制肝星状细胞增殖,并能显著提高肝星状细胞早期凋亡率。因此,可以成功地合成鳖甲活性多肽,且对肝星状细胞增殖有明显的抑制作用。     

黑老虎根提取物调控微小 RNA-193对肝星状细胞 HSC-T6增殖凋亡的影响

目的探讨黑老虎根提取物对肝星状细胞(HSC-T6)增殖、凋亡的影响及分子机制。方法于2018年10月至 2019年12月进行该研究。将肝星状细胞 HSC-T6分为实验组(1、2、3组)、过表达微小 RNA(miR-NC)组、过表达微小 RNA-193(miR-193)组、实验 3+抑制物 miR-NC(anti-miR-NC)组、实验 3+抑制物 miR-193(anti-miR-193)组。流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡情况;细胞计数试剂盒 8(CCK-8)检测细胞存活率;蛋白质印迹法检测活化胱天蛋白酶 -3(cleaved caspase-3)、增殖细胞核抗原(Ki67)蛋白表达;时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测 miR-193表达水平。结果与对照组相比,实验 2、3组HSC-T6细胞 G0-G1期比例［(34.03±2.66)%实比(42.60±2.74)%、(50.37±3.42)%］细胞凋亡率［(7.40±0.88)%比(15.56±1.30)%、(21.75±1.62)%］、cleaved caspase-3(0.23±0.01比