维甲酸逆转人宫颈癌耐药细胞株耐药性的实验研究

目的 :本研究旨在探讨全反式维甲酸 (ATRA)逆转人宫颈癌Hela/MMC耐药株对MMC的耐药作用。方法 :观察ATRA作用下Hela/MMC细胞的增殖 ,采用MTT法观察ATRA对Hela/MMC药物敏感性的影响 ,半定量RT PCR检测mdrI基因的表达情况。结果 :ATRA能提高MMC对Hela/MMC细胞的杀伤作用 ,上调细胞mdr1mRNA的表达。结论 :ATRA能逆转Hela/MMC对MMC的耐药性 ,但这种作用与mdrl基因表达无关     

维甲酸逆转K526／ADM耐药细胞株耐药性的研究

维甲酸逆转Ｋ５２６／ＡＤＭ耐药细胞株耐药性的研究沈世人王衡邹长木炎苏颖高频关键词维甲酸Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞多药耐药逆转中图号Ｒ７３－３６肿瘤患者反复用药引起耐药性的产生是治疗失败的重要原因，研究如何克服耐药性是提高癌症化疗效果的关键之一。本实验结果提...     

诺美孕酮逆转乳腺癌耐药细胞株多药耐药性的研究

目的 研究诺美孕酮（NOM）对乳腺癌耐药细胞株（MCF7／ADR）多药耐药性（MDR）的影响,探讨其调节机制。方法 应用MTT法,研究NOM对MCF7／ADR药物敏感性的影响。采用半定量逆转录聚合酶联反应（RT－PCR）和免疫细胞化学染色,分析耐药基因MDR1、谷胱甘肽S转移酶Pi(GSTπ）、拓扑异构酶Ⅱα（Topo Ⅱα)和多药耐药相关蛋白（MRP）表达的变化。通过流式细胞技术观察NOM对MCF7／ADR细胞内药物积累和细胞周期的影响。结果 NOM对MCF7／ADR的MDR具有明显的逆转作用,在20,10和5μmol/L浓度时的逆转倍数分别为21,12和8倍,逆转强度明显高于前身化合物甲地孕酮,而与维拉帕米相当。5μmol/L NOM处理MCF7／ADR后,MDRI的mRNA表达水平明显降低,呈现时间依赖性变化;P糖蛋白（P－gp)和GSTπ蛋白的变化符合相应mRNA表达的变化;MRP和Topo Ⅱα基因表达未见明显变化。用NOM 20,10和5μmol/L分别处理2h后,ADR在细胞内的积累分别增加到2．7倍、2．3倍和1．5倍。同时,NOM可明显加强ADR对MCF7／ADR细胞在G2M期的阻滞作用。结论 NOM具有较强的逆转MCF7／ADR细胞MDR的作用,其逆转机制为多种途径,包括时间依赖性下调MDRI和GSTπ基因的表达,增加细胞内药物积累,加强ADR对MCF7／ADR在G2M期的阻滞作用等。     

丹参酮和维甲酸对人宫颈癌细胞株的体外诱导分化作用

在体外细胞培养的基础上，通过细胞形态学、细胞增殖动力学、裸鼠成瘤性的研究，观察丹参酮对人宫颈癌细胞株（ＭＥ＿（１８０））的体外诱导分化作用（并以全反式维甲酸作对照）。结果表明：经无毒剂量的丹参酮和维甲酸处理后，细胞形态趋向良性分化，生长减慢，集落形成率和￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入率明显降低，在裸鼠身上的成瘤时间延长，成瘤能力明显降低；经统计学处理，丹参酮和维甲酸对ＭＥ＿（１８０）细胞均具有较好的诱导分化作用，两者差异无显著意义。     

帕博西尼逆转人食管鳞癌奥沙利铂耐药细胞株耐药性的研究

  目的  建立人食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药细胞株KYSE150-OXA,研究细胞周期蛋白依赖性激酶4/6(cyclin-dependent kinase 4/6,CDK4/6)抑制剂帕博西尼(palbociclib)对耐药细胞株耐药性的逆转及其机制。  方法  CCK-8检测耐药细胞对奥沙利铂、紫杉醇(paclitaxel,PTX)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)以及CDK4/6抑制剂palbociclib的耐药性;流式细胞术检测化疗药物对耐药细胞凋亡和周期的影响;Western blot检测细胞中多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)及细胞周期相关蛋白的表达量;CalcuSyn软件计算palbociclib与L-OHP联合用药对细胞增殖的作用。  结果  成功建立人体外ESCC L-OHP耐药细胞株KYSE150-OXA,耐药指数(resistance index,RI)为11.23±0.59,耐药细胞KYSE150-OXA对PTX和5-FU也表现出耐药性,Western blot结果显示耐药细胞中MDR1蛋白表达升高(4.46±0.22)倍;与亲本细胞KYSE150相比,耐药细胞株G1期细胞显著增多,且CDK4、CDK6及Cyclin D1表达显著升高;palbociclib增加KYSE150-OXA对L-OHP的敏感性;低浓度palbociclib与L-OHP表现出拮抗作用,高浓度时表现为协同作用;palbociclib处理组细胞中磷酸化视网膜母细胞瘤蛋白(phospho-retinoblastoma,pRb)降低(91±2)%及细胞周期蛋白A(Cyclin A)降低(89±6)%。  结论  成功建立人体外ESCC L-OHP耐药细胞株KYSE15 0-OXA;palbociclib可能通过抑制异常激活的Cyclin D-CDK4/6-pRb信号通路逆转耐药细胞对L-OHP的耐药性。      

潘生丁对KB细胞株对多药耐药逆转作用的实验研究

目的：观察了潘生丁对ＫＢ细胞株多药耐药的逆转作用并对其作用机制进行探讨。方法：使用ＭＴＴ法检测比较ＫＢ母细胞和耐药细胞株对长春新碱（ＶＣＲ）的药物敏感度并观察潘生丁对耐药的逆转程度;用＾３Ｈ标记的ＶＣＲ检测细胞内药物浓度的变化。结果：潘生丁作用下,ＫＢ母细胞和耐药细胞株的药物敏感度均有增高并呈剂量相关关系,有ＭＰＰ表达的耐药细胞株对ＭＲＰ表达的耐药细胞株对ＶＣＲ的敏感度比母细胞株高１７倍,母细胞株     

屈洛昔芬逆转人乳腺癌耐药细胞株MCF7／ADR多药耐药性的研究

目的：研究屈洛昔芬（DRO）对乳腺癌耐药细胞株（MCF7／ADR）多药耐药性（MDR）的影响。方法：应用MTT，半定量RT－PCR和免疫细胞化学染色，研究DRO对MCF7／ADR药物敏感性，耐药相关基因MDR1，谷胱甘肽S转移酶Pi(GST-π），拓扑异构酶Ⅱα（Topo Ⅱα)和多药耐药相关蛋白（MRP）表达的影响。流式细胞技术观察细胞内药物积累。结果：在20，10和5μmol/L浓度时DRO对MCF7／ADR耐药性的逆转倍数分别为16，8和3倍，逆转强度与同类化合物三苯氧胺相当。DRO处理后，MDR1和GSTπ基因表达水平明显降低。DRO使ADR在细胞内的积累分别增加到2.5(20μmol/L),2.0(10μmol/L)和1.5(5μmol/L)倍。结论：DRO具有较强的逆转MCF7／ADR耐药性的作用，其逆转机制是多途径的。     

卡维地洛逆转膀胱癌细胞株多药耐药性

目的：研究卡维地洛对人膀胱癌耐药细胞株BIU-87／ADM的多药耐药性逆转作用。方法：应用MTT法检测人膀胱癌耐药细胞株(BIU-87／ADM)的耐药性；将卡维地洛与多柔比星联合作用于B10-87和BIU-87／ADM细胞，检测细胞内多柔比星聚集量。结果：卡维地洛与多柔比星共同温育BIU-87／ADM细胞后．能使BIU-87／ADM细胞内多柔比星聚积量增加，与单用多柔比星比较，差异有显著性。结论：卡维地洛对多柔比星有增敏作用，卡维地洛可逆转人膀胱癌细胞株BIU-87／ADM的多药耐药性。     

肿瘤耐药基因表达的临床意义及其逆转研究

对人白细胞病多药耐药细胞株K562／A02和人肺癌耐PDD细胞株A549PDD系统研究表明，耐药表型是多基因的，它随诱导的药物不同，肿瘤肿类，分化程度以及宿主微环境的不同而表现为一种或同种耐药同时表达，临床研究肿瘤共524例包括白血病260例，实体瘤264但目前能在临床证实跟一些肿瘤耐药相关的基础只有mdrl/P-gp。用比较敏感细菌和对应的耐药细胞cDNA阵表达水平的判别新技术发现了除已知mdrl等等耐药基因以外新的与药相关基因，这也为基因组学在耐药基因研究开辟了新的途径。开发出新的耐药逆转剂PZT11、PND和抗耐药肿新药PHⅡ-7有望在临床发挥作用。抗P－gp／抗CD3微型双功能抗体也有望成为逆转肿瘤耐药新有力工具。     

槲皮素对多药耐药细胞株KB-MRP的耐药逆转研究

目的:研究槲皮素(quercetin)对多药耐药细胞株KB-MRP的耐药逆转作用。方法:使用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同浓度槲皮素对细胞株KB-MRP的抑制率,确定其非细胞毒性浓度。用MTT法分别检测阿霉素(ADM)、依立替康(CPT-11)、长春新碱(VCR)、环磷酰胺(CTX)对细胞株KB-3-1、KB-MRP以及使用槲皮素处理后的KB-MRP的半数抑制浓度(IC50)。通过流式细胞术检测KB-3-1、加入槲皮素前后KB-MRP细胞内的化疗药物阿霉素(ADM)的荧光强度以及加入槲皮素前后多药耐药细胞株KB-MRP的MRP1蛋白表达。结果:终浓度为0~40μmol/L的槲皮素对KB-MRP无明显细胞毒作用。KB-MRP对ADM、VCR、CPT-11均有不同程度的耐药但对CTX不耐药。使用20μmol/L槲皮素处理后KB-MRP对上述ADM、CPT-11、VCR的敏感度均有不同程度的提高,胞内的化疗药物阿霉素(ADM)的荧光强度增强。槲皮素的浓度提高至40μmol/L时,KB-MRP对上述药物的敏感程度提高更明显。流式细胞仪结果显示经槲皮素处理后KB-MRP细胞MRP1表达明显下降。结论:槲皮素可以逆转KB-MRP的多药耐药,逆转效果与剂量相关,逆转机制可能与MRP1的表达下调有关。     

盐酸千金藤素逆转K562/ADR细胞的多药耐药性及其与bcl-2的关系

目的　研究盐酸千金藤素(CEP)对K5 62 /ADR细胞多药耐药性的逆转作用及逆转机制。方法　采用MTT法测定阿霉素(ADR)单用及与CEP ,维拉帕米(VER)合用对K5 62 ,K5 62 /ADR细胞的直接细胞毒作用;采用免疫组织化学(IHC)法测定K5 62细胞,K5 62 /ADR细胞内bcl 2的表达,以及药物对bcl 2表达水平的影响。结果　联合应用ADR和4μmol/LCEP使K5 62 /ADR细胞对ADR的IC50 由13 5 μmol/L降至1 73 μmol/L ,其逆转倍数为7 8倍,但对K5 62细胞无明显影响;联合应用ADR和4μmol/LVER使K5 62 /ADR细胞对ADR的IC50 降至7 5 0 μmol/L ,其逆转倍数为1 8倍,但对K5 62细胞也无明显影响。用IHC法检测bcl 2的表达,K5 62 /ADR细胞中bcl 2的表达量为2 6 79% ,远高于K5 62细胞中表达量4 98% ,而联合应用ADR和4μmol/LCEP使K5 62 /ADR细胞中bcl 2的表达量降至13 16%。结论　CEP可部分逆转K5 62 /ADR细胞的耐药性,其机制可能与降低bcl 2的表达有关。     

2-甲氧基雌二醇逆转K562/AO2细胞耐药及其机制的初步研究

目的研究2-甲氧基雌二醇(2-ME)对K562/AO2细胞耐药性逆转作用及其可能机制。方法利用不同浓度的2-ME作用于K562及K562/AO2细胞,MTT法检测细胞对阿霉素的耐药性,计算耐药倍数及逆转倍数;利用AnnexinV /PI双染色法检测K562/AO2细胞的凋亡效应。结果与K562细胞相比,K562/AO2细胞的耐药倍数为50倍;2-ME可显著降低阿霉素对K562/AO2细胞的IC50,逆转倍数为5.9倍。AnnexinV /PI双染色法检测显示,1、4、16 μmol/L的2-ME处理K562/AO2细胞后细胞凋亡率分别为10.32%、21.56% 和16.45%, 而对照组凋亡率仅为6.68%。结论2-ME能够逆转K562/AO2阿霉素耐药,其机制可能与诱导K562/AO2细胞凋亡有关。     

二甲亚砜对K562/ADM耐药细胞株耐药性的逆转作用

目的：研究二甲亚砜对K562／ADM耐药细胞的逆转作用。方法：通过加入二甲亚砜后耐药细胞的生长情况，逆转倍数的计算，细胞内过氧化物染色的阳性程度以及电镜下观察耐药细胞诱导前后的变化。结果：二甲亚砜诱导K562／ADM耐药细胞前后生长情况有显著差异且逆转借故为4．0，Pox染色阳性程度明显递增，电镜下可观察诱导后K562／ADM耐药细胞有向成熟分化趋势。结论：二甲亚砜对逆转K562／ADM的耐药性是有益的。     

Reversing Effect of Agosterol A, a Spongean Sterol Acetate, on Multidrug Resistance in Human Carcinoma Cells

The effect of agosterol A, a novel polyhydroxylated sterol acetate isolated from a marine sponge, on P-glycoprotein (P-gp)-mediated multidrug-resistant cells (KB-C2) and the multidrug resistance associated protein (MRPl)-mediated multidrug-resistant cells (KB-CV60) was examined. Agosterol A reversed the resistance to colchicine in KB-C2 cells and also the resistance to vincristine in KB-CV60 cells at 3 to 10 μM concentration. Agosterol A at 3 μM increased the vincristine concentration in both KB-C2 cells and KB-CV60 cells to the level in parental KB-3-1 cells. Agosterol A also decreased the efflux of vincristine from both KB-C2 cells and KB-CV60 cells to the level seen in KB-3-1 cells. Agosterol A inhibited the [³H]azidopine-photolabeling of P-gp and also inhibited the uptake of [³H]S-(2,4-dinitrophenyl)glutathione (DNP-SG) in inside-out membrane vesicles prepared from KB-CV60 cells. We conclude that agosterol A directly inhibited drug efflux through P-gp and/or MRP1.     

槐耳浸膏逆转人胃癌耐药细胞多药耐药性的实验研究

摘 要：［目的］ 体外观察槐耳浸膏对胃癌耐药细胞（SGC-7901/FU）多药耐药性的影响。［方法］ CCK-8法检测SGC7901/FU细胞的耐药性;谷胱甘肽（GSH）还原酶循环法检测SGC-7901/FU细胞内GSH含量的变化;流式细胞仪检测SGC-7901/FU细胞的凋亡率。［结果］ SGC-7901/FU细胞内GSH含量［(13.20±1.51) nmol/106细胞］较SGC7901细胞［(6.47±0.85) nmol/106细胞］显著增高(P＜0.05);槐耳浸膏能抑制SGC7901/FU细胞增殖,24h、48h的半数抑制浓度(IC50)分别为2.43mg/ml和2.04mg/ml; 0.1~0.5mg/ml浓度范围内槐耳浸膏增加SGC-7901/FU细胞对5-Fu、DDP的敏感性,并降低GSH含量;槐耳浸膏与5-Fu联用能显著增加SGC-7901/FU细胞凋亡率 (P＜0.05)。［结论］ 槐耳浸膏能部分逆转SGC-7901/FU细胞的耐药性,其机制可能是通过抑制细胞的GSH合成、诱导细胞凋亡而实现的。     

槲皮素逆转肿瘤多药耐药机制的研究进展

恶性肿瘤已成为当今威胁人类健康的重大疾病.目前,肿瘤的治疗主要是以手术为主的综合治疗,其中化疗药物的应用可明显抑制肿瘤生长、改善患者预后,但肿瘤的多药耐药严重阻碍了其治疗效果.槲皮素是广泛存在于植物中、具有生物活性的黄酮类化合物,具有抗肿瘤等多种药理学作用.目前,槲皮素逆转肿瘤多药耐药作用已引起广泛关注.研究发现,其可通过抑制多种耐药相关蛋白、诱导细胞凋亡、抑制热休克蛋白功能、逆转上皮间质转化等作用,从而逆转肿瘤多药耐药.本文主要综述槲皮素逆转肿瘤多药耐药的分子机制及其临床应用前景,以期为逆转肿瘤多药耐药的基础及临床研究提供新思路.     

氧化苦参碱逆转多药耐药细胞系K562/A02耐药性的研究

目的: 观察非细胞毒性浓度(生长率>95%)氧化苦参碱对耐阿霉素的人白血病细胞系K562/A02多药耐药性的逆转作用,并探讨其逆转机制。 方法: 采用MTT法测定氧化苦参碱的细胞毒性及其对K562/A02细胞敏感性的影响,用流式细胞仪检测非细胞毒性浓度的氧化苦参碱处理后K562/A02细胞膜表面糖蛋白P170表达的变化与细胞内柔红霉素的浓度,应用SPSS13.0软件包对实验结果进行统计学处理。 结果: 氧化苦参碱对K562/A02细胞有一定的细胞毒作用,其非细胞毒性浓度为50μg/ml,低细胞毒性浓度(生长率为85%～90%)为135μg/ml,把非细胞毒性剂量的氧化苦参碱作为最佳逆转浓度,非细胞毒性浓度氧化苦参碱可显著降低阿霉素对K562/A02细胞的IC₅₀,使K562/A02细胞的IC₅₀由原来的(34.9±0.21)μg/ml降低至(13.3±0.21)μg/ml,其逆转倍数为2.62倍;氧化苦参碱作用于K562/A02细胞后,细胞膜糖蛋白P170的表达从90.22%下调至44.24%(P<0.01);柔红霉素外渗试验显示,氧化苦参碱作用于K562/A02细胞后,细胞内化疗药物的浓度明显增加。 结论: 氧化苦参碱可部分逆转人白血病K562/A02细胞对阿霉素的耐药性,氧化苦参碱通过下调K562/A02细胞膜糖蛋白P170的表达,使其将化疗药物泵出细胞外的功能受到了抑制,使化疗药物在白血病细胞内能达到有效浓度,从而可以杀灭耐药的白血病细胞,达到逆转白血病细胞耐药性的目的。     

复方三根制剂逆转多药耐药的实验研究

[目的]探讨复方三根制剂逆转K562／ADR、K562／VCR细胞株耐药性的机制。[方法]细胞K562、K562／ADR、K562/VCR培养于RPMI-1640安全培养液中。MTT法测定两株细胞的抗药性。RT—PCR法测定给药处理后24h,48h,72k后两耐药细胞株MDR1表达量。[结果]复方三根制剂和维拉帕米对K562／ADR和K562／VCR不同时段表达MDR1的量有显著差异。[结论]推测复方三根制剂逆转多药耐药机制为在转录水平下调MDR1 mRNA．从而降低多药耐药细胞P—gp的表达。     

SiRNA逆转T24/ADM细胞耐药性的研究

目的探讨siRNA（small interfering RNA）对膀胱癌多药耐药性的逆转作用。方法设计针对MDR1基因的siRNA,转染膀胱癌T24/ADM细胞,应用RT-PCR分析MDR1 mRNA的表达,免疫印迹检测MDR1蛋白表达,流式细胞仪检测细胞内阿霉素积累量。MTT法检测阿霉素对T24/ADM细胞的半数抑制浓度（IC50）。结果 3条siRNA均能不同程度地逆转T24/ADM细胞的多药耐药性,使MDR1基因的mRNA及蛋白表达水平下调,细胞内阿霉素积累量显著增加（P〈0.05）。结论 siRNA可逆转膀胱癌的多药耐药性。