骨髓微核试验程序的探讨

微核试验作为检测遗传损伤的方法,在国内外已广泛用于毒理学研究。检查微核有多种方法:小鼠骨髓嗜多染红细胞微核,淋巴细胞微核,哺乳动物胎肝血细胞微核,哺乳动物组织、器官细胞微核,近来又提出末梢血成红细胞微核。已被公认和经常应用的是小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核试验,这种方法在国际上已被欧州共同体(EEC)     

迷迭香酸对γ射线致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的保护作用

目的研究迷迭香酸对γ射线致小鼠骨髓嗜多染红细胞微核的保护作用。方法以骨髓嗜多染红细胞微核形成率为观测指标,C57BL/6J小鼠经60Coγ射线1～3 Gy照射24 h后观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化以选择合适的照射剂量;C57BL/6J小鼠经60Coγ射线2Gy照射后不同时间观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化以选择照射后取骨髓的时间;2 Gy照射前经迷迭香酸处理的C57BL/6J小鼠照后24 h观察骨髓嗜多染红细胞微核发生率的变化,以确定迷迭香酸对小鼠微核保护作用的剂量效应与时间效应。结果 2 Gy照射24 h后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核发生率增加比较明显,适合作为小剂量照射条件;照射后24 h或48 h骨髓嗜多染红细胞微核发生率增加比其他时间明显;经迷迭香酸100 mg/kg连续7次处理后的受照射小鼠骨髓细胞中,微核发生率（6.50‰）明显低于单纯照射组（23.65‰）。结论迷迭香酸对γ射线致骨髓嗜多染红细胞微核具有保护作用。     

人羊水中脱落细胞微核的制备法

七十年代初,Matter 等建立了微核测定方法。十多年来,微核分析技术不断发展,迄今已建立了人类的外周血淋巴细胞、某些哺乳动物的骨髓和血液的多染红细胞、肝细胞以及生精细胞等的微核测定方法。但有关人类羊水脱落细胞微核的资料尚未见报道。本文报道羊水脱落细胞微核的制备方法如下。对象:羊水取自中期妊娠引产的健康妇女,共20名,年龄22～38岁,均无烟酒嗜好、无遗传病家族史,近三个月无放射线接触史、病毒感染史及致畸药物接触史。方法:1.穿刺前嘱孕妇充分振摇腹部,然     

氯化汞诱发非整倍体效应的微核试验和CREST染色的研究

目的探讨低浓度氯化汞在体外试验中对V79细胞非整倍体诱发效应。方法体外培养条件下,低浓度氯化汞(0.005~10.0μmol/L)染毒V79细胞,然后进行微核形态学分析并计算微核率;同时用CREST染色计算微核着丝粒阳性率。本试验采用SPSS11.5进行统计分析。结果V79细胞经氯化汞染毒后,各剂量组的微核率均明显增加,呈现剂量-效应关系,也存在时间-效应关系;微核形状以圆形为主,与染色体断裂剂诱导的微核形状相似,但大微核发生率与VCR相似,即21.4%~27.9%。HgCl2各剂量组微核着丝粒阳性率为47.4~56.3%。结论氯化汞在低浓度下依然造成细胞染色体的损伤,具有一定的非整倍体毒性和染色体断裂效应,但以非整倍体毒性为主。     

海洛因依赖者外周血淋巴细胞染色体畸变和微核的观察

应用常规染色体畸变分析和胞浆分裂阻微核法检测了海洛因依赖者外周血淋巴细胞染色体畸变率和微核率，并将海洛因依赖组微核率和微核细胞率与正常对照相比较。结果表明，海洛因依赖组微核细胞率和微核率显著高于对照，但不能排除吸烟的影响；在海洛因依赖组中所观察到的染色体畸变主要为单间隙。     

海洛因依赖者外周血淋巴细胞染色体畸变和微核的观察

应用常规染色体畸变分析和胞浆分裂阻滞微核法检测了海洛因依赖者外周血淋巴细胞染色体畸变率和微核率，并将海洛因依赖组微核率和微核细胞率与正常对照相比较。结果表明，海洛因依赖组微核细胞率和微核率显著高于对照，但不能排除吸烟的影响；在海洛因依赖组中所观察到的染色体畸变主要为单间隙．     

牵张微应变对人退变髓核与纤维环细胞增殖的影响

摘要 目的：探讨循环牵张微应变对体外培养的人退变髓核与纤维环细胞增殖的影响。方法：人退变椎间盘组织来源于1例29岁腰椎间盘突出症患者的手术取材,病理学诊断评估其退变程度,无菌条件下酶消化法分别原代培养髓核与纤维环细胞,并对细胞系进行鉴定。将第3代细胞接种于硅橡胶膜载体上,利用EF3200力学试验仪搭载的BioDynamic生物反应舱系统,对其施加频率为0.25 Hz,应变为0、5万、10万和15万με的加载3 h,应用流式细胞仪检测不同微应变环境下2种细胞的增殖活性。结果：退变髓核与纤维环细胞应力加载后生长状态良好。随着微应变的增加,髓核细胞S期细胞比例在10万με、15万με时均高于纤维环细胞,差异有统计学意义（P<0.01）;纤维环细胞PI值在各微应变加载组均高于髓核细胞,差异有统计学意义（P<0.05）。结论：微应变刺激对人退变髓核与纤维环细胞的增殖总体效应是一致的,但是相同的微应变刺激对纤维环细胞增殖的促进效应明显高于髓核细胞。 关键词 椎间盘移位 流式细胞术 椎间盘退变 髓核细胞 纤维环细胞 牵张微应变 增殖指数     

X射线工作人员淋巴细胞微核率观察

我们以某地区接触X射线的60名医务人员和18名工业探伤工作人员为观察组,年龄为20～60岁,工龄为1～30年,某地区献血员80名为对照组,年龄为20～50岁,半年内未进行过X射线检查,作淋巴细胞微核率(MNCF)的分析,采用甲基纤维素法静脉血肝素抗凝恒温37℃培养0.5小时,常规制片,微核的标准:(1) 微核必须在胞浆完整的间期细胞中、形状为园形或椭园形;(2)直径小于主核的言;(3)与主核完全脱离;(4)染色与主核一致;(5)微核的计数:在高倍镜下每例计数2000个细胞,结果以含微核细胞的千分率表示。 观察组微核率的检出与对照组相比有显著     

过滤前后香烟烟雾凝聚物的致微核作用

用双核细胞微核法测定了香烟烟雾凝聚物对BALB/C3T3细胞微核率的影响,并用此指标研究了不同滤咀对香烟烟雾中诱变物质的清除效果。结果发现,不管加与不加S_9,香烟烟雾凝聚物诱发的微核率基本一致,S_9本身对微核率并无影响。用未     

外周血红细胞与骨髓红细胞微核率的比较研究

微核试验能够预测染色体损伤.Schmid首先提出染色体断裂和纺锤体损伤是微核形成的基础,并指出它能正确地反映染色体损伤效应.测试微核可用骨髓红细胞和外周血红细胞作为检测对象.前者用于人时,取骨髓麻烦,且病人难以接受.过去有很多学者认为:由多染红细胞变成正染红细胞的过程中,微核由于尚不清楚的原因,有部分消失.本实验目的在于再次比较外周血红细胞和骨髓红细胞微核率和灵敏度的差别.     

叶绿酸对某些毒物所致微核率的影响

叶绿酸是存在于天然食物和植物中叶绿素的钠、铜盐,是一种抗氧化剂。本研究用体外细胞系的双核微核试验法,研究叶绿酸对香烟烟雾凝聚物、苯并(a)芘、丝裂霉素C及硫酸镍微核率的影响。用上述毒物在加叶绿酸与不加叶绿酸条件下处理BALB/373细胞或CHL细胞,然后计数1000个双核细胞中的微核数。实验结果表明:叶绿酸具有抗香烟烟雾凝聚物微核形成的作用,并存在明显的剂     

BDT滤嘴对香烟烟雾凝聚物诱发微核率的降低作用

用双核微核法测定香烟烟雾凝聚物对ＢＡＬＢ／ｃ－３Ｔ３和ＣＨＬ细胞的致微核作用，结果发现香烟烟雾凝聚物可使两种细胞的微核率升高，不需Ｓ９的活化，比较不同滤嘴对香烟烟雾凝聚物中诱变物质的清除效果，发现普通滤嘴不能有效地降低微核率，而ＢＤＴ滤嘴则能使微核率降低了一半左右。     

放射工作人员外周血淋巴细胞微核分析

目的 对425名放射工作人员进行微核率的观察.方法 微核测定采用常规培养法,判断标准依据.结果 观察组与对照组的微核细胞率和微核率分别为1.07‰和1.11‰及O.40‰和0.42‰,两组比较差异有统计学意叉,P<0.01.结论 淋巴细胞微核率是评价放射工作人员所受辐射损伤的一项非常有意叉的指标.     

利用流式细胞术检测两种药物致大鼠外周血微核的发生率

目的:利用流式细胞术外周血微核试验方法,研究环磷酰胺(cyclophosphamide,CP)和甲磺酸乙酯(ethyl methanesulfonate,EMS)致大鼠外周血微核的发生率。方法:对SD雄性大鼠分别给予不同剂量的CP和EMS处理,在给药前和给药后24,48,72和96 h实施尾静脉采血,对血样进行固定、转移、洗脱、标记和染色后,利用流式细胞仪对样本进行测定。计数20 000个网织红细胞中含微核细胞的数量,计算微核细胞百分率和网织红细胞占全血的比率,并对数据进行统计分析。结果:CP和EMS均可诱发外周血网织红细胞比率下降和微核细胞率增加,伴随时间延长两项指标均可恢复至给药前水平,给药后48 h是检测微核的最佳时间。结论:CP和EMS可以对大鼠外周血网织红细胞微核率产生显著影响。     

市售染发剂的体外微核实验

目的检测市售的3件染发剂的遗传毒性。方法使用以小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y)为细胞系的体外微核实验方法检测3件市售染发剂作用于细胞后的产生的微核率。经过细胞制片、染色、显微镜计算双核细胞的微核率进行结果分析。结果 3件染发剂与对照组比较均有显著性差异(P0.05),确定体外微核试验为阳性。结论此次检测的3件市售染发剂体外微核实验结果均为阳性。     

市售染发剂的体外微核实验北大核心CSCD

目的检测市售的3件染发剂的遗传毒性。方法使用以小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y)为细胞系的体外微核实验方法检测3件市售染发剂作用于细胞后的产生的微核率。经过细胞制片、染色、显微镜计算双核细胞的微核率进行结果分析。结果 3件染发剂与对照组比较均有显著性差异(P<0.05),确定体外微核试验为阳性。结论此次检测的3件市售染发剂体外微核实验结果均为阳性。     

诊断级超声波对小白鼠细胞的致突变作用的研究

本文通过小白鼠微核试验，探索了诊断级Ｂ型超声波辐射的致突变效应，试验结果表明：相同辐射时间，不同探头频率的诊断级Ｂ型超声波（以下简称Ｂ超）辐射小白鼠，细胞微核率无显著性差异；不同辐射时间，不同辐射频率，细胞微核率无显著差异，均为Ｐ＞０．０５，提示Ｂ超对小白鼠细胞微核率无影响。     

环磷酰胺对小鼠外周血微核红细胞率的影响

骨髓多染红细胞微核试验(MT)具有简易、快速和敏感的特点,但存在着不能结合亚慢性或慢性毒性试验观察微核细胞率动态变化的缺点。本文试图以外周血微核正染红细胞千分率(MNNCE率)及微核多染红细胞千分率(MNPCE率)为指标,检测已知断裂剂环磷酰胺(CP)的断裂作用,弥补MT的不足,报道如下。取健康雌雄小鼠各20只,按性别随机分入CP5、10、20和40mg/kg四个剂量组和一个生理盐水对照组。动物隔天腹腔注射CP或生理盐水一次共八次。定     

免疫荧光染色微核试验检测非整倍体诱变剂

采用免疫荧光染色技术显示微核中的着丝粒，发现纺锤体毒物秋水仙碱诱发Ｖ７９，ＣＨＬ双核细胞徽核着丝粒阳性率分别在７６Ｖ和６６％以上，长春新碱诱发ＢＡＬＢ／ｃ小鼠骨髓红细胞微核着丝粒阳性率在７０％以上；而染色体断裂剂丝裂霉素Ｃ诱发Ｖ７９，ＣＨＬ双核细胞微核着丝粒阳性率分别低于２７％和２１％，环磷酞胺诱发ＢＡＬＢ／ｃ小鼠骨髓红细胞微核着丝粒阳性率低于１５％表明将免疫荧光染色技术与微核试验相结合，计数微核着丝粒阳性率，能够区分微核主要来源于染色体断裂剂引起的无着丝粒断片或纺锤体毒物造成的滞留在胞质中的整条染色体，从而达到简便、快速检测非整倍体诱变剂的目的．     

褪黑素对化学诱变剂诱发微核形成的保护作用

目的 通过体内和体外实验观察褪黑素(MT)对化学诱变剂诱发的人双核淋巴细胞微核和小鼠骨髓嗜多染红细胞微核形成的影响。方法 (1)以丝裂霉素(MMC)为阳性对照，观察用3种浓度MT预处理人淋巴细胞的双核细胞微核率；(2)以环磷酰胺(CP)为阳性对照，分别用3种剂量MT给小鼠灌胃，观察小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率。结果 (1)0．0l、0．10和1．00mmol／L MT MMC处理组的双核淋巴细胞微核率与MT浓度呈负相关；(2)0．1、1．0和10．0mg／kg MT CP处理组的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率均呈剂量依赖性降低。结论 MT呈现明显的抗诱变作用。