丹酚酸A对氧自由基引起的大鼠心脏和肝脏线粒体损伤的保护作用(英文)

已往的研究表明丹酚酸A有很强的抗氧化活性。本文研究了丹酚酸A对氧自由基引起的大鼠心脏和肝脏线粒体损伤的保护作用。结果表明,丹酚酸A可抑制铁一半胱氨酸引起的线粒体脂质过氧化和ATP酶活性的丧失。脂质过氧化引起的心脏和肝脏线粒体肿胀以及肝脏线粒体膜流动性下降均可被丹酚酸A抑制。同时丹酚酸A对超氧阴离子和羟自由基具有清除作用。进一步证明丹酚酸A具有抗氧化活性。     

丹酚酸B镁盐抑制低氧诱导内皮细胞钙内流和一氧化氮释放

AIM: To investigate the inhibitory effect of magnesium lithospermate B (MLB) on hypoxia-induced elevation of intracellular calcium concentration ([Ca2+]i) and nitric oxide (NO) release in endothelial cells. METHODS: The cultured human umbilical vein endothelial cells (ECV304) were cultured for 30 min under 95 % N(2) and 5 % CO2. Cell injury was evaluated by dye exclusion test and lactate dehydrogenase (LDH) assay. [Ca2+]i was determined by Fura 2-AM. NO content was examined by the NO assay kit. Endothelial nitric oxide synthase (eNOS) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) mRNA expressions were measured by semi-quantitative RT-PCR. RESULTS: Cell viability was decreased from (93.0 +/- 2.6) % in normoxia to (85.5 +/- 2.1) % in hypoxia (P < 0.01), and LDH release was increased from (41 +/- 28) U/L in normoxia to (141+/-68) U/L in hypoxia (P < 0.01) in ECV304 cultured under calcium conditions. MLB 5 and 10 mg/L improved cell viability and inhibited LDH leakage in ECV304. In addition, hypoxia increased [Ca2+]i, NO release, and eNOS and iNOS mRNA expressions in ECV304 (P < 0.01). These increases could be inhibited by MLB 5 and 10 mg/L (P < 0.01), but they were unaffected by hypoxia under calcium-free conditions. CONCLUSION: MLB attenuates hypoxia-induced cell injury and inhibits hypoxia-induced increases of [Ca2+]i, NO release, and eNOS and iNOS mRNA expressions in ECV304 in Krebs'solution containing calcium. The decreases of NO production and eNOS mRNA expression are possibly associated with inhibition of extracellular calcium influx in MLB-treated ECV304     

丹酚酸B镁盐对缺氧复氧内皮细胞内钙和一氧化氮的影响

目的:研究丹酚酸B镁盐对缺氧复氧引起的内皮细胞内钙升高和一氧化氮释放增加的影响.方法:培养的人脐静脉内皮细胞(ECV304)暴露在95％ N_2 5％CO_2条件下缺氧30分钟,后在含5％CO_2的空气中复氧30分钟.内皮细胞的损伤用染料排除实验、SOD的活性和MDA的生成来评价.胞内游离钙浓度用钙荧光探针Fura 2-AM测定.一氧化氮含量用一氧化氮试剂盒测定.内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达用半定量逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测.结果:缺氧复氧引起内皮细胞的活力由正常条件下(93.1±1.2)％降至(88±3)％(P<0.01),SOD的活性也由(0.24±0.07)kNU/L下降到(0.18±0.03)kNU/L(P>0.05),但其使内皮细胞MDA的生成由(1.12±0.06)mmol/L增至(3.78±0.03)mmol/L(P<0.01).丹酚酸B镁盐2.5,5,10 mg/L能明显降低缺氧复氧引起的内皮细胞MDA生成量的增加,并且显著提高细胞活力和SOD的活性.同时,缺氧复氧还增加内皮细胞的胞内游离钙浓度(F_(340)/F_(380)由 1.65±0.16增至 1.89±0.28)和一氧化氮释放[由(7.5±1.3)μmol/L增至(16±5)μmol/L],并上调其eNOS mRNA的表达,但降低iNOS mRNA的表达(P<0.05).但在无钙的条件下,缺氧复氧对内皮细胞的胞内游离钙浓度、一氧化氮含量、eNOSnRNA和iNOS mRNA表达     

丹酚酸B镁盐对兔洗涤血小板聚集和5-HT释放反应的影响(英文)

AIM: To study the effects and mechanism of magnesium lithospermate B(MLB) on rabbit platelet aggregation and 5-HT release. METHODS: The platelet aggregation was determined by Born's method. Release of serotonin (5-HT) and formation of thromboxane A2 (TXA2) were measured by fluorophotometry and radioimmunoassay (RIA) respectively. Cytoplasmic free Ca2+ concentration ([Ca2+]i) in platelets was measured by Fura 2-AM fluorescence technique. RESULTS: In washed platelets, thrombin (200 U/L) or arachidonic acid (AA) (30 mumol/L)-induced aggregation was inhibited by MLB 50-800 mg/L in a concentration-dependent manner. In addition, MLB had more inhibitory effects on platelet aggregation in the absence of extracellular calcium with IC50 of 102 mg/L than in the presence of CaCl2 1 mmol/L with IC50 of 194 mg/L. MLB concentration-dependently decreased the thrombin-activated release of 5-HT, whereas it did not affect the formation of TXA2 in platelets. Furthermore, MLB not only inhibited the rise of [Ca2+]i in thrombin stimulated platelets, but decreased the [Ca2+]i in resting platelets. CONCLUSION: MLB inhibited the aggregation and 5-HT release in rabbit platelets and it is probably by attenuating intracellular calcium concentration.     

丹酚酸B热稳定性研究

目的：考查不同因素对丹酚酸B溶液稳定性的影响,为工业化生产应用提供实验依据。方法：通过HPLC检测溶液中丹酚酸B的含量变化。结果：温度和加热时间对丹酚酸B的稳定性有较大的影响,乙醇溶液比水溶液更有利于丹酚酸B的稳定。结论：生产过程中应将浓缩温度控制在60℃以下,时间在4 h以内,且溶液中丹酚酸B浓度高有利于稳定。     

丹酚酸B的药理研究进展

丹酚酸B是传统中药丹参水溶性成分中活性最强的成分之一,是由三分子3,4-二羟基苯基乳酸和一分子咖啡酸缩合而成的一低聚体型化合物。该化合物中有多个酚羟基,具有很强的抗氧化性。     

总丹酚酸的抗脑缺血研究

目的探讨总丹酚酸对脑缺血的影响及其相关机制。方法脑缺血模型采用ＭＣＡＯ,离体测定总丹酚酸对脂质过氧化、超氧阴离子、羟自由基的作用。结果发现在ＭＣＡＯ模型上,总丹酚酸１２５～２５ｍｇ·ｋｇ－１有缩小脑梗塞面积、减轻脑水肿之功效,离体研究发现,总丹酚酸抗氧化作用极为明显,５～５０ｍｇ·Ｌ－１时可抗Ｆｅ２＋ 半胱氨酸诱导的肝微粒体脂质过氧化、清除黄嘌呤 黄嘌呤氧化酶体系产生的超氧阴离子、清除Ｆｅ２＋ Ｈ２Ｏ２体系产生的羟自由基作用,且同等剂量下均强于对照药ＶｉｔＥ。结论总丹酚酸有抗脑缺血作用,机制与抗氧化有关。     

不同提取条件对丹酚酸B和E相对含量的影响

通过HPLC、LC-MS等手段确定了丹参提取物中的小组分丹酚酸E,并考察了加水量、提取温度、时间和pH对丹酚酸B、E相对含量及丹酚酸B提取率的影响。结果显示:不同提取条件下,丹酚酸B、E相对含量变化显著,推测两者存在一定转化机制。丹酚酸B的最佳提取工艺为:丹参药材中加入8倍体积水,用1 mol/L盐酸调至pH 4 0,70℃提取60min,丹酚酸B的收率大于90%。     

四氢原小檗碱同类物抑制脂质过氧化和清除羟自由基(英文)

目的:研究THPB对大鼠肝、脑脂质过氧化(LPO)和氧自由基的影响。方法:体外测定大鼠肝、脑匀浆LPO和Fe~(2 )-Vit C诱导肝、脑线粒体LPO产生的MDA,Fenton反应产生OH和邻苯三酚氧化产生O_2~-。结果:(1)THPB减少肝匀浆和线粒体MDA,其中l-THPB-18和SPD的IC_(50)为3.1和12.7μmol·L~(-1)。SPD减少脑匀浆和脑线粒体MDA,IC_(50)分别为102和35.0μmol·L~(-1)。(2)THPB能清除OH~-,其中I-THPB-18和SPD的IC_(50)为0.21和3.8μmol·L~(-1);但对O_2无抑制作用。结论:THPB能减少MDA和清除OH~-,其中THPB-18作用最强。     

丹酚酸A对小鼠脑缺血再灌注致学习记忆功能障碍的改善作用及作用机制

本实验采用脑缺血再灌注损伤造成小鼠学习记忆功能障碍模型。通过跳台和避暗实验法研究了丹酚酸对记忆获得功能障碍的改善作用。结果表明丹酚酸Ａ３，１０ｍｇ·ｋｇ－１ｉｖ可以减轻脑缺血再灌注导致的小鼠学习记忆功能障碍状态。并使小鼠脑缺血再灌注后脑组织中脂质过氧化产物ＭＤＡ含量明显降低。体外实验表明丹酚酸Ａ１０－８～１０－７’ｍｏｌ·Ｌ－１可以抑制大鼠脑组织匀浆脂质过氧化反应和羟自由基（·ＯＨ）的生成，表现出较强的抗氧化作用，提示丹酚酸改善脑缺血再灌注损伤的主要机制可能与其抗氧化作用有关。     

Pharmacokinetics of magnesium lithospermate B after intravenous administration in beagle dogs

AIM: To develop a specific liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) method for the phar-macokinetic study of magnesium lithospermate B (MLB), and study the pharmacokinetics of MLB after iv administration in beagle dogs. METHODS: Each beagle dog was iv administered MLB 3, 6, and 12 mg/kg random. The serum drug concentration was determined by specific liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/ MS) assays. The pharmacokinetic parameters were calculated by Drug and Statistics version 1.0 program. RESULTS: The calibration curve for MLB was linear over a range of 16-4096μg/L with coefficients of correlation >0.999. The intra- and inter-day precisions (CV) of analysis were <10 %, and accuracy ranged from 90 % to 113 %. After iv administration of MLB at the doses of 3, 6, and 12 mg/kg, the C0 values for MLB were estimated to be of 24, 47, and 107 mg/L, respectively. The AUC increased with the increasing doses for iv administration, and the mean AUC0-t values were 109.3, 247.9, and 5     

云南甘草总皂甙清除氧自由基和抗脂质过氧化作用

云南甘草总皂甙(SGY)对Fenton反应生成的·OH具有较强的直接清除作用,其IC_(50)为29mg·L~(-1).且作用明显强于·OH特异性清除剂甘露醇(其IC_(50)为2.27×10~(-2)mol·L~(-1).即4315mg·L~(-1))。SGY对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶系统产生的O_2~+也有较强的清除作用·其IC_(50)为89mg·L~(-1)SGY对自由基发生系统(FRGS)诱导离体大鼠心肌匀浆组织产生的脂质过氧化(LPO)作用有明显的抑制效应.对FRGS诱导离体大鼠心肌线粒体膜LPO也有一定的抑制作用。结果提示SGY的抗脂质过氧化作用与其清除氧自由基作用有关。     

黄皮酰胺抗脂质过氧化及对氧自由基清除作用

黄皮酰胺是一种生物碱,可抑制铁-半胱氨酸体系引起的大鼠脑,心,肝和睾丸微粒体脂质过氧化,电子自旋共振法研究表明,黄皮酰可清除由佛波醇豆蔻酸乙酸酸酯(PMA)刺激人多形核白细胞(PML)所产生的氧自由基,自旋探针测氧法结果表明,对PMA刺激PML时的氧消耗无影响,在Fenton反应体系中,对羟自由基的清除率为36.6％,在黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶和光照核黄素体系中,对超氧阴离子的清除作用分别为21.2％和16.2％。结果提示黄皮酰胺对氧自由基的直接捕捉作用是其抗脂质过氧化作用的机理之一。     

茶多酚清除氧自由基及抑制脑脂质过氧化反应的体外试验

目的研究茶多酚对羟自由基（·ＯＨ）、超氧阴离子自由基（Ｏ·２）的清除作用及其对脂质过氧化的抑制作用。方法茶多酚与自由基发生体系或大鼠脑线粒体共浴后，比色法测定·ＯＨ、Ｏ·２及丙二醛生成量。结果茶多酚对Ｆｅｎｔｏｎ反应生成的·ＯＨ及黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶系统产生的Ｏ·２具有较强的清除作用，ＩＣ５０分别为９１９．６ｍｇ·Ｌ－１和８３６ｍｇ·Ｌ－１。茶多酚对·ＯＨ诱导的离体大鼠脑线粒体产生的脂质过氧化有明显的抑制作用。结论茶多酚的抗脂质过氧化作用与其清除氧自由基作用有关     

丙丁酚抑制巨噬细胞脂质过氧化并调节其分泌功能(英文)

目的:研究丙丁酚(probucol,PBC)的抗动脉粥样硬化机理。方法:采用Cu~(2 )(10μmol/L)处理巨噬细胞,并观察了丙丁酚对巨噬细胞脂质过氧化及其介导的低密度脂蛋白氧化的抑制作用和对巨噬细胞分泌功能的影响。结果:10-80μmol/L PBC能抑制Cu~(2 )诱导的巨噬细胞脂质过氧化(MDA从15.30抑制到7.74μmol/g cell protein,P<0.01),且PBC处理的巨噬细胞介导的低密度脂蛋白氧化较对照组低(MDA从5.18到1.65μmol/g cell protein,P<0.05)。PBC对Cu~(2 )诱导的巨噬细胞分泌IL-1β抑制45％,apo E分泌增加65％。结论:丙丁酚在体外能抑制巨噬细胞脂质过氧化及其介导的低密度脂蛋白氧化,并调节巨噬细胞的分泌功能。     

肉桂酸衍生物清除羟基自由基活性研究

目的:比较研究咖啡酸、氯原酸、连翘酯苷、阿魏酸、对-羟基香豆酸、邻-羟基香豆酸、间-羟基香豆酸、肉桂酸等中草药有效成分对HO·的清除能力.方法:利用邻菲罗啉化学发光体系.结果:咖啡酸、氯原酸、连翘酯苷、阿魏酸对HO·具有较强的清除能力,对-羟基香豆酸、邻-羟基香豆酸、间-羟基香豆酸对HO·的清除能力较弱,而肉桂酸对HO·的清除作用很小.结论:肉桂酸衍生物的酚羟基邻位有含孤对电子的杂原子取代基(-OH,-OCH3)时,清除HO·的能力可被提高;在-CHCHCOOH的对位含有酚羟基的化合物比在邻位或间位含有酚羟基化合物的活性强.     

依达拉奉清除自由基机制及临床应用

研究证实,多种人类疾病的发生与机体过量自由基的产生相关,过量自由基损伤脂质,蛋白质和DNA等生物大分子,导致对机体的有害作用。依达拉奉(edaravone)为强效自由基清除剂,于2001年在日本上市,临床上主要用于治疗急性缺血性脑中风。本文对依达拉奉清除自由基的机制和治疗多种人类疾病的研究进展作简要概述,主要介绍了依达拉奉在治疗脑、心脏等多器官的缺血/再灌注损伤,肌萎缩侧索硬化症(ALS)、帕金森病(PD)、阿尔茨海默病(AD)、多发性硬化症等神经性疾病,癫痫,动脉粥样硬化,肝、肺纤维化病变,类风湿性关节炎和突发性耳聋等多种人类疾病中的应用,为进一步开发依达拉奉在临床上的新用途提供参考。