缺氧诱导因子-1α、血管内皮因子与宫颈癌血管生成的关系

目的 探讨宫颈癌中缺氧诱导因子-1α(hypoxia include 1α,HIF-1α)的表达及其与血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)、微血管密度(microvessel density,MVD)的相关性,分析与宫颈癌等生物转移行为的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测HIF-1α、VEGF的表达;用CD34单克隆抗体标记肿瘤微血管密度(MVD).结果 宫颈癌组织HIF-1α及VEGF与正常宫颈组织差异有显著性(P＜0.05);HIF-1α及VEGF表达呈一致性,呈正相关;HIF-1α或VEGF阳性肿瘤组织的MVD值显著高于阴性组织.结论 HIF-1α参与了诱导VEGF表达并促进肿瘤血管生成,提示检测HIF-1α和VEGF,对于早期诊断宫颈癌有重要意义.     

PI3Kα抑制剂BYL719抑制脐静脉血管内皮细胞增殖及血管生成的研究

目的 探讨PI3Kα抑制剂BYL719对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖与血管生成的影响。方法 采用MTT法测定BYL719对HUVEC活力的抑制作用;用流式细胞术检测BYL719对其细胞周期的影响;体外小管形成实验观察BYL719对血管生成的影响;western blot检测Akt、p-Akt、cyclinD1和CDK4蛋白表达水平的变化。结果 BYL719抑制了HUVEC中Akt的磷酸化水平;BYL719作用细胞后,HUVEC的细胞活力显著降低;BYL719能够通过下调cyclinD1和CDK4的表达而阻滞细胞于G1期,进而抑制HUVEC的增殖;HUVEC经BYL719处理后,体外小管形成能力受到显著抑制。结论 BYL719降低了HUVEC中Akt的磷酸化水平,能够抑制HUVEC的细胞增殖和血管生成。     

放线菌素D不能抑制α-双炔失碳酯诱导的白血病K562细胞凋亡

目的：研究放线菌素Ｄ（ＡｃｔＤ）对α－双炔失碳酯（α－ａｎｏｒｄｒｉｎ，ＡＮＯ）诱导的人白血病Ｋ５６２细胞凋亡的影响。方法：用光学显微镜观察细胞形态学变化；用流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳分别检测ＤＮＡ含量和ＤＮＡ断裂。结果：ＡＮＯ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理人白血病Ｋ５６２细胞２４ｈ引起大约１０％Ｋ５６２细胞产生凋亡。同时加入ＲＮＡ合成抑制剂ＡｃｔＤ０．００５μｍｏｌ·Ｌ－１不能抑制ＡＮＯ诱导的凋亡，相反地，ＡｃｔＤ加强ＡＮＯ的这一作用，使凋亡细胞从１０％上升到２０％。ＡｃｔＤ０．５μｍｏｌ·Ｌ－１本身可诱导约３２％的Ｋ５６２细胞凋亡。Ｓ期细胞对ＡＮＯ诱导的凋亡较敏感，而ＡｃｔＤ则较易诱导Ｓ期和Ｇ２－Ｍ期细胞凋亡。结论：ＡＮＯ诱导的Ｋ５６２细胞凋亡不依赖于新的ＲＮＡ合成。     

血管生成因子与肿瘤血管生成和抑制的研究

近年来肿瘤血管生成已经成为肿瘤学研究的一个重要领域,迄今,人们已经发现了大约12种有血管生成活性的因子,这些因子可通过一种或几种不同的途径来诱导血管生成。本文总结了这些血管生成因子及其促血管生成的研究新进展,同时也对血管生成抑制剂的研究作了简述。     

内皮抑制素通过抑制基质金属蛋白酶-2而抑制血管新生(英文)

目的　研究内皮抑制素抑制血管新生作用的机制。方法　用碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)处理体外原代培养人脐静脉内皮细胞 ;用三维胶原模型研究bFGF诱导的血管新生作用 ;用明胶电泳和蛋白印迹法研究分泌于培养基中的基质金属蛋白酶的活性和含量 ;RT PCR法研究基质金属蛋白酶的mRNA水平。结果　内皮抑制素显著抑制bFGF诱导的内皮细胞血管新生能力 ;抑制内皮细胞分泌的基质金属蛋白酶 2的表达及其mRNA的水平。结论　内皮抑制素通过抑制基质金属蛋白酶 2的表达而抑制血管新生     

肿瘤血管生成抑制因子及Endostatin研究进展

1肿瘤血管生成抑制因子 新生血管对于肿瘤的生长、浸润和转移有重要意义.许多正性和负性因素参与调节肿瘤的血管生成状态,血管生成因子与抑制因子在其中发挥重要作用.     

抑制肿瘤血管生成疗法的研究进展

简要回顾抗血管生成疗法在肿瘤治疗中的重要成果,着重概括抑制血管生成的四主要环节:中和血管形成促进物、使用血管形成抑制物、调节血管抑素和内皮抑素、靶向肿瘤内皮细胞,并列举了部分进入临床试用的抗血管药。在综述既往研究成果的基础上,提出抗肿瘤血管疗法的未来展望。     

λ-卡拉胶禀糖体外对血管生成的抑制作用

为探讨λ-卡拉胶寡糖体外对血管生成的抑制作用，采用鸡胚尿囊膜模型（CAM）观察λ-卡拉胶寡糖对CAM血管发育的抑制，发现该寡糖可明显抑制CAM微血管生成，在200μg·egg^-1时，抑制率达54．90％。随后采用MTT法测定λ-卡拉胶寡糖对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖的影响，发现该寡糖的细胞毒作用在不同的细胞间具有选择性．对HUVEC的抑制最强，高浓度时（1mg·mL^-1）能明显抑制其增殖．但低浓度（〈250μg·mL^-1）对细胞几乎无毒。对寡糖的细胞迁移和侵袭抑制作用进行检测，并测定其对HUVEC表达基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的影响。结果表明，λ-卡拉胶寡糖能有效减缓HUVEC的迁移、侵袭能力，并具有抑制HUVEC中MMP-2表达的作用。该研究说明λ-卡拉胶寡糖通过抑制内皮细胞的增殖、细胞侵袭和迁移达到血管生成抑制的作用。     

α-双炔失碳酯对前列腺癌LNCaP裸鼠移植瘤生长影响的研究

目的研究α-双炔失碳酯(α-anordrin)对前列腺癌雄激素依赖细胞系LNCaP裸鼠皮下移植瘤生长的影响并探讨其作用机制。方法建立前列腺癌雄激素依赖细胞系LNCaP裸鼠皮下移植瘤模型,将27只荷瘤裸鼠按肿瘤体积大小平均分为3组:对照组、α-双炔失碳酯1mg.kg-1组、5mg.kg-1组。皮下注射给药,隔天一次,给药周期30天,每隔5天测量肿瘤体积。于末次给药24h后摘眼球取血,测量血浆睾酮(T)、前列腺特异膜抗原(PSA)水平;取睾丸、精囊腺和前列腺称重;取肿瘤称重,并对瘤组织进行组织病理学检查和免疫组化Ki67、PCNA检测。计算肿瘤体积,抑瘤率,绘制生长曲线。结果α-双炔失碳酯给药组肿瘤体积、重量均小于给药组,1mg.kg-1组抑瘤率为34%(P<0.05),5mg.kg-1组抑瘤率为25%(P>0.05);给药组和对照组间血浆PSA含量无明显差别,PCNA和Ki67阳性表达率亦无差别。给药组裸鼠血浆T水平、睾丸、精囊腺重量显著低于对照组(P<0.01),前列腺重量亦有减轻。结论α-双炔失碳酯在低剂量下即可对前列腺癌雄激素依赖细胞系LNCaP裸鼠皮下移植瘤的生长产生抑制作用,并能显著降低裸鼠血浆T水平,抑制其性腺的正常生长。其抗肿瘤的机制可能与抑制体内雄激素分泌有关。     

靶向血管内皮生长因子/血管内皮生长因子受体-2的血管生成抑制剂

血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)是调节血管生成、内皮细胞增殖和迁移等的关键调控因子。通过阻断VEGF与VEGFR-2的结合可抑制新生血管形成,而新生血管的形成是肿瘤生长和转移的基础。介绍VEGF/VEGFR-2在血管形成中的作用,以及具有抗肿瘤作用的靶向VEGF/VEGFR-2的血管生成抑制剂的研究近况。     

C肽对高糖状态下人脐静脉内皮细胞体外表达eNOS的影响

目的 :探讨在高糖状态下C肽对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)体外表达内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)的影响。方法 :将培养成功的HUVEC在不同浓度的C肽和葡萄糖环境下孵育72h ,提取细胞总RNA ,应用半定量逆转录聚合酶链反应 (SQ -RT -PCR)法 ,检测eNOSmRNA表达的情况。结果 :生理浓度葡萄糖 (5 5mmol/L)状态下 ,低浓度的C肽 (0 3nmol/L)使HUVECeNOSmRNA表达减弱(P<0.01) ,生理浓度 (3nmol/L)和高浓度(30nmol/L)的C肽可使eNOSmRNA的表达明显增强(P<0.01) ;高浓度葡萄糖(33.3mmol/L)状态使HU VECeNOSmRNA表达减弱(P<0.01) ,加入生理浓度或高浓度C肽后 ,eNOSmRNA表达增强(P<0.01)。结论 :HUVEC体外eNOSmRNA表达可受C肽浓度影响 ;高浓度或生理浓度C肽可缓解高糖对HUVECeNOS表达的抑制作用。提示C肽可能对防治糖尿病大血管病变具有重要作用     

Antiangiogenic effect of licochalcone A

To date, no antiangiogenic activity has been demonstrated for licochalcone A (LicA), a major phenolic constituent of Glycyrrhiza inflata, although it shows significant antitumor activity in human malignant cell lines. Our previous work demonstrated that LicA down-regulates inflammatory responses to lipopolysaccharide in murine macrophages. The purpose of the present study was to evaluate whether LicA inhibits angiogenesis, which is crucial for cancer development and progression. LicA significantly inhibited proliferation (20 μM), migration (5-20 μM), and tube formation (10-20 μM) of human umbilical vascular endothelial cells (HUVECs) as well as microvessel growth from rat aortic rings (10-20 μM). Furthermore, LicA significantly inhibited the growth of CT-26 colon cancer implants in BALB/c mice, with fewer CD31- and Ki-67-positive cells but more apoptotic cells. The underlying antiangiogenic mechanism of LicA correlated with down-regulation of vascular endothelial growth factor receptor (VEGFR)-2 activation. Our findings provide the first evidence that LicA inhibits angiogenesis in vitro and in vivo, perhaps by blocking VEGF/VEGFR-2 signaling. Inhibition of tumor growth may be attributed, at least in part, to decreased angiogenesis in LicA-treated mice. These findings emphasize the potential use of LicA against tumor development and progression in which angiogenesis is stimulated.     

沙利度胺联合曲安奈德抑制人脐静脉内皮细胞增殖的研究

目的:研究沙利度胺(thalidomide)联合曲安奈德对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的药物作用.方法:Ⅰ型胶原酶消化法原代培养HUVEC, Ⅷ因子相关抗原检测法鉴定细胞.沙利度胺溶于0.5%二甲基亚砜(DMSO)中,分为3组.A组为沙利度胺组,分4个浓度梯度,分别为10、25、50和75 mg/L;B组为沙利度胺+曲安奈德组,为含1 mg/L曲安奈德的各浓度沙利度胺;C组为对照组.HUVEC传代植入96孔板,细胞密度为1×10~4/mL,过夜,加入不同浓度的药物,处理72 h; 在酶标仪570 nm波长处读取吸光度(A)值. 结果: 2组药物均对HUVEC的增殖有明显的抑制作用 (P < 0.01),抑制作用与药物浓度呈正相关;与A组相比,B组对HUVEC抑制作用更强(P < 0.05).结论:沙利度胺及曲安奈德对血管内皮细胞增殖有明显作用,这两类药物在治疗新生血管性疾病中可发挥一定作用.     

高血糖、高胰岛素对内皮细胞凋亡及Mn-SOD表达的研究

目的：了解糖尿病高胰岛素及高血糖的改变对内皮细胞凋亡及Mn-SOD表达的影响。方法：在高糖、高胰岛素及对照培养环境,分别孵育内皮细胞72h测定细胞凋亡情况并检测Mn-SOD的表达水平。结果：内皮细胞在高糖、高胰岛素条件下凋亡显著增加（P〈0.05）,同时Mn-SOD表达下降（P〈0.05）。结论：在高胰岛素血症而血糖没有升高到糖尿病标准的阶段,就会有内皮细胞凋亡显著增加,从而促进动脉粥样硬化形成,同时还有Mn-SOD表达水平的下降,病损持续存在于2型糖尿病进展的各个阶段。     

黄樟素氧化物对去除成纤维细胞生长因子所诱导的血管内皮细胞凋亡及生长的影响

目的:研究黄樟素氧化物对去除成纤维细胞生长因子(FGF)诱导的血管内皮细胞凋亡及生长的影响.方法:光学显微镜观察细胞形态学变化;MTT法测定细胞生长;DNA电泳和荧光显微技术检测DNA断裂;流式细胞术测定细胞周期分布.结果:黄樟素氧化物5-25mg/L处理去除FGF的血管内皮细胞24h,细胞铺展和生长被促进,细胞脱壁和DNA片段化被抑制,黄樟素氧化物10mg/L对细胞周期分布无明显影响.黄樟素氧化物50-100 mg/L促进血管内皮细胞的脱壁和DNA片段化,黄樟素氧化物100mg/L将细胞周期阻断于G_2-M期.结论:黄樟素氧化物在10mg/L时抑制血管内皮细胞凋亡,而在100mg/L时促进其凋亡,该药物对血管内皮细胞生长和凋亡有重要影响.     

β肾上腺素受体激动对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶磷酸化的影响

目的：观察血管内皮β肾上腺素受体激动对内皮一氧化氮合酶（eNOS）蛋白表达及磷酸化水平的影响,阐明β受体激动后eNOS调节的分子机制。方法：异丙肾上腺素（ISO）1μmol/L与培养的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）孵育30min后,裂解细胞并用免疫沉淀法分离eNOS蛋白,运用同位素两步色谱法（L-[^3H]精氨酸转化法）检测eNOS活性;蛋白免疫印迹增强化学发光法检测eNOS表达水平和eNOS蛋白丝氨酸磷酸化水平,并观察高选择性β1或β2肾上腺素受体阻断剂对上述作用的影响。结果：ISO与内皮细胞孵育30min引起eNOS活性增高;不影响eNOS蛋白表达,但丝氨酸磷酸化水平明显增加;选择性β2受体阻断剂ICI 118551可完全阻断ISO的作用,而选择性β1受体阻断剂CGP 20712A无影响。结论：ISO通过提高eNOS丝氨酸磷酸化水平增加eNOS活性,这种作用是通过β2肾上腺素受体介导的。     

栀子苷对氧化应激损伤血管内皮细胞的保护作用

目的研究栀子苷对体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)氧化损伤的保护作用。方法采用过氧化氢(Hy-drogen peroxide,H2O2)建立体外培养的HUVEC细胞氧化应激损伤模型。将细胞分为正常对照组、H2O2氧化损伤组、H2O2加栀子苷低、中、高剂量组,其中后3组给予栀子苷预培养24h后加入400μmol.L-1H2O2,然后继续培养12h。MTT法检测细胞存活率;检测各组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)水平和培养液中一氧化氮(NO)水平;检测细胞内活性氧簇(ROS)水平;用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期改变。结果栀子苷能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率,提高细胞内SOD、GSH-Px、NOS活性,使培养液中NO含量增加,降低细胞内ROS水平,减少H2O2诱导的细胞凋亡率,恢复血管内皮细胞增殖。结论栀子苷具有较强的抗氧化能力及内皮细胞保护作用,可减轻血管内皮细胞的氧化损伤。     

雷帕霉素洗脱支架损伤血管内皮的作用机制探讨

目的探讨雷帕霉素洗脱支架损伤血管内皮的作用机制。方法（1）对兔行局部肌肉注射雷帕霉素（雷帕霉素组）,模拟雷帕霉素洗脱支架安全性评价中的肌肉植入,同时设正常对照组和丙酮对照组。观察各组形态变化及测定匀浆液钙含量。（2）采用雷帕霉素0.1、1、10 及100 μg/L 处理人脐静脉内皮细胞（HUVEC）48 h 及1 μg/L 雷帕霉素处理HUVEC 6、12、24 及48 h,采用MTT 法检测细胞存活率,分析细胞存活率与药物浓度及处理时间的关系。（3）HUVEC 分设正常对照组、1 μg/L 雷帕霉素组。48 h 后HE 染色观察细胞形态变化,用NO 检测试剂盒测定细胞培养液NO 含量,采用Fluo-3/AM 荧光探针标记细胞内Ca2+。结果（1）雷帕霉素组出现支架植入类似的蓝染表现,雷帕霉素组较正常对照组和丙酮对照组钙含量升高（P < 0.05）。（2）雷帕霉素处理HUVEC 后,细胞存活率随浓度增加和时间延长均呈逐渐降低趋势（P < 0.01）。（3）雷帕霉素组细胞胞浆出现空泡、核固缩及核碎裂,与正常对照组比较,细胞培养液NO 含量降低,细胞内游离Ca2+含量增高（P < 0.05）。结论雷帕霉素洗脱支架中抗增殖药雷帕霉素对血管内皮有损伤作用,其机制可能与引起细胞内钙升高有关。     

沙蟾毒精抑制血管生成的作用

探讨沙蟾毒精(arenobufagin)对体内外血管生成的抑制作用。采用MTT法检测沙蟾毒精对人鼻咽癌细胞(CNE-2)、人喉癌细胞(Hep2)、人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)、人结肠癌细胞(LOVO)、人前列腺癌细胞(PC-3及DU145)和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的细胞毒性及运用光学显微镜观察细胞形态的变化,发现沙蟾毒精剂量依赖性抑制CNE-2、Hep2、SH-SY5Y、LOVO、PC-3、DU145和HUVECs增殖,且在对人癌细胞亚细胞毒浓度下能够有效抑制HUVECs的增殖。采用鸡胚尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM)模型观察新生血管的生成,结果发现沙蟾毒精作用24 h后,尿囊膜新生血管生成明显减少。采用细胞周期分析法观察到沙蟾毒精阻滞HUVECs于G2/M期,且随着浓度增加,细胞出现sub-G1凋亡峰。运用流式细胞术检测沙蟾毒精作用HUVECs后的凋亡现象以及线粒体膜电位的变化,确证沙蟾毒精呈时间和剂量依赖性诱导HUVECs凋亡,同时检测到线粒体膜电位下降。Western blotting检测发现,沙蟾毒精作用HUVECs后,凋亡标志...     

槲皮素对培养内皮细胞产生和释放内皮素和环磷酸鸟苷的影响

槲皮素对培养内皮细胞产生和释放内皮素和环磷酸鸟苷的影响赵雪英，顾振纶（苏州医学院药理学教研室，苏州２１５００７，中国）关键词槲皮素；脐静脉；血管内皮；培养的细胞；凝血酶；血小板；内皮素；环鸟苷一磷酸目的：研究槲皮素（Ｑｕｅ）对不同状态下的内皮细胞形成...