骨髓间充质干细胞移植治疗Tourette综合征大鼠实验研究

目的 考察骨髓间充质干细胞(Mescenchymal Stem Cell,MSC)移植治疗Tourette综合征( Tourette syndrome,TS)大鼠的可行性及其作用机制.方法 建立TS大鼠自身免疫动物模型,采用立体定向脑内注射法将用BrdU标记的MSC移植到TS大鼠纹状体内,观察大鼠刻板行为改善情况.通过免疫组化双染分析MSC在TS大鼠脑内存活、分化情况.结果 流式细胞仪示MSC表面标记阳性率CD2995.2％,CD44 96.3％,CD105 97.2％,CD106 94.1％.MSC移植组大鼠在细胞移植后10d和14d的刻板行为总分[分别为(95.5±6.6)分、(73.1±6.5)分]低于对照组[(114.1±6.0)分、(108.0±6.4)分],差异具有显著性(P＜0.01).MSC在TS大鼠脑内生长存活并分化为神经前体细胞、神经元或星形胶质细胞.结论 纹状体内MSC移植可减少TS大鼠的刻板行为.MSC移植可能对TS具有一定的治疗作用.     

骨髓间充质干细胞移植促进糖尿病大鼠β细胞再生的机制

目的探索骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stemcells,BMSCs）移植促进糖尿病大鼠模型中β细胞再生的机制。方法正常sD大鼠给予单次大剂量链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）（65mg／kg）注射,3d后开始监测血糖,连续3d随机血糖〉28mmol／L者选为实验对象。所有实验对象随机分为对照组（n=15）,BMSC移植组（n=15）,BMSC培养上清移植组（n-15）以及BMSC示踪组（以Dil染料标记BMSCs,n=5）,分别接受PBS、MSC、MSC培养上清及Dil—BMSC的移植。结果BMSC移植后30d左右血糖水平有明显改善[（20．4±0．98）mmol／L,n=15],胰岛素水平有明显提高[（0．99±0．23）ng／ml,n=15],p细胞质量明显增长。富含BMSC分泌因子的BMSC上清输注后,糖尿病大鼠血糖有一定程度的降低[（26．2±1．53）mmol／L,n=15],胰岛素水平有所恢复[（0．341±0．08）ng／ml,n=15],母细胞质量较对照组有所增加。在胰腺仅检测到小部分BMSC,这部分归巢于胰腺的BMSC中检测不到与胰岛素的共标。结论BMSC的分泌效应为BMSC促进糖尿病动物模型中β细胞再生的机制。     

移植骨髓间充质干细胞对帕金森大鼠旋转行为的影响

目的研究经侧脑室移植骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）对帕金森（Parkinson’s disease,PD）大鼠行为能力及中脑黑质TH表达的影响。方法雄性SD大鼠36只,随机分为假手术组（Sham组）,PD模型组（PD组）,MSCs移植组（MSCs组）。采用6-OHDA制备PD大鼠模型,经侧脑室移植骨髓MSCs,术后2周、4周、8周,腹腔注射阿朴吗啡诱导PD大鼠旋转行为,采用Western blot方法测定中脑黑质TH蛋白的表达。结果移植术后2周、4周、8周,MSCs组与PD组比较,旋转次数明显减少（P〈0.05）,移植细胞干预PD模型8周后中脑黑质TH表达,MSCs组较PD组明显增高（P〈0.05）。结论经侧脑室移植骨髓MSCs通过提高中脑黑质TH的活性,改善PD大鼠的行为能力。     

大鼠骨髓间充质干细胞移植后肝内定居的实验研究

目的探索大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)同种异体移植后在受体大鼠模型肝内定居分布情况。方法利用密度梯度离心法分离、纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞。取第三代MSCs经CFSE标记后从门静脉植入同种异体正常组和肝损伤组大鼠体内,于移植后的第14d取出的肝脏,通过冰冻切片行荧光检测,研究MSCs在大鼠肝脏内定居分布情况。结果经门静脉移植的MSCs在正常组和肝损伤组的肝脏内均能定居,且定居的细胞数量上肝损伤组明显多于正常组。结论经门静脉移植的MSCs可以定居于肝脏内,且定于肝脏的干细胞数量与肝脏是否损伤密切相关。     

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑梗死的研究

目的 研究探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)对SD大鼠脑梗死的治疗效果.方法 分离培养SD大鼠BMSCs,并建立大脑中动脉栓塞实验动物模型;尾静脉注射BMSCs并设立PBS对照组,观察大鼠神经损伤程度和测定脑梗死体积.结果 BMSCs移植组大鼠神经功能评分比同时间点PBS对照组大鼠明显下降(P＜0.05);BMSCs移...     

自体骨髓间充质干细胞介入移植治疗脑梗死临床研究

目的:观察应用自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)介入移植治疗脑梗死的临床疗效和安全性。方法:选择脑梗死患者120例,随机分为干细胞移植组和对照组各60例。对照组给予常规药物治疗,治疗组在常规药物治疗基础上给予重组人粒细胞集落刺激因子150μg皮下注射,待血常规白细胞升高达30×109/L左右后可抽取自体骨髓200 ml。自体骨髓经干细胞分离试剂盒处理获取间充质干细胞。采用自体骨髓间充质干细胞进行干细胞介入移植术,将间充质干细胞超选入脑病变供血动脉。于治疗前、治疗后1个月、6个月进行神经功能FIM评分,应用国际通用的功能独立性评定量表评定其运动和认知能力。结果:120例患者全部进入结果分析,移植组治疗后1个月、6个月功能独立性评定量表评分显著高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.01),两组均无不良反应发生。结论:BMSCs移植可以一定程度地改善脑梗死患者症状,提高脑梗死患者的运动和认知功能,自体骨髓干细胞移植是安全有效的。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠溃疡性结肠炎的修复

目的：观察移植骨髓间充质干细胞（BMSCs）对溃疡性结肠炎（UC）大鼠结肠病变的修复.方法：分离培养、荧光标记SD大鼠BMSCs.A,B,C组大鼠制作UC模型,D组为非模型组.4组大鼠均经尾静脉注射1 mL液体：A组为生理盐水;B,D组为BMSCs;C组为加表皮生长因子（EGF）的BMSCs.移植后3,7,14 d各处死5只大鼠,荧光显微镜下观察荧光标记BMSCs在结肠的分布,光镜观察结肠病变以及TNF-α和IL-10的表达.结果：移植第3日各组均可见BMSCs分布于结肠黏膜,病灶处多于正常结肠黏膜.移植第14日,B,C组结肠BMSCs高于D组（P〈0.05）;与A组比较,B,C组结肠黏膜高表达IL-10,低表达TNF-α,其黏膜损伤修复程度也明显优于A组.B,C组间差异不明显（P〉0.05）.结论：移植BMSCs可促进UC大鼠结肠损伤的修复.单次给予EGF不能促进BMSCs向病灶的迁移和损伤的修复.     

NGF联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤

目的 骨髓间充质干细胞(BMSC)移植同时应用神经生长因子(NGF),观察两者对脑损伤大鼠恢复的影响.方法 健康Wistar大鼠60只,雌雄各半,体重300～350 g.采用液压颅脑损伤仪,给予2.5～3.0 atm液压冲击力,制成重型液压颅脑损伤模型,随机分成3组.伤后6h给予相应治疗:A组为培养液移植组,B组为单纯骨髓干细胞移植组,C组为骨髓干细胞联合NGF组.TBI后24 h,3d及伤后1～4周行动物神经学缺损评分,在TBI后21～28 d进行Morris水迷宫(Morris Water Maze,MWM)试验.4周后处死行免疫组织化学、HE染色.结果 移植后1～4周,大鼠神经学缺损评分B低于A组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.01).各组平均潜伏时间均逐渐缩短,C组3～5d时平均潜伏时间较B组缩短(P<0.05),较A组明显缩短(P<0.01).C组穿越平台次数及在目标象限游泳距离与总距离百分比均高于A组、B组(P<0.05).结论 骨髓间质干细胞移植可明显改善重型颅脑损伤后大鼠的神经学功能,联合应用NGF有协同效果.     

骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑出血实验研究

目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植后,对大鼠脑出血模型脑组织损伤的修复作用.方法 制备大鼠脑出血模型,随机分为两组,实验组在脑出血部位附近注入MSCs,对照组注入生理盐水.采用Menzies量表进行神经功能缺损评分.应用组织学检查,观察脑损伤部位的病理变化.结果...     

骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展

现代交通业、建筑业及体育事业等的飞速发展极大的便利了人们的生产生活 ,但由此引发的健康和安全隐患也日益突出。脊髓损伤 (spinalcordinjurySCI)的持续高发就是其在日常生活中的显著表现之一。目前 ,发达国家的脊髓损伤发病率在2 8.3～ 45人 /百万人·年 ,我国每年约有五万人发病 ,以青少年为主 ,呈每年递增 10 %的上升趋势。由于脊髓损伤治疗困难 ,终身致残率较高 ,这无疑给家庭及社会带来了沉重的负担。一个多世纪以来 ,医疗界先后采用了手术吻合、手术减压、药物治疗、局部冷冻、物理康复、大网膜移植、以及应用酶试剂来抑制和消除…     

大鼠骨髓间充质干细胞适宜分离和培养条件的研究

目的 :寻求适宜有效的大鼠骨髓间充质干细胞 (mensechymalstemcell,MSCs)体外分离、纯化和培养的条件 ,为MSCs进一步的实验研究打下基础。方法 :分别用贴壁筛选法和密度梯度离心法来分离和纯化MSCs ,并用不同的接种密度、不同的血清浓度和不同的培养基检测细胞的生长情况 ,绘制出细胞的生长曲线 ;流式细胞仪检测MSCs生长周期。结果 :细胞贴壁呈纤维状生长 ,以 2× 10 9的浓度接种 ,在含 10 %胎牛血清的DMEM /F12培养基中 ,37℃、5 %CO2 细胞培养箱中 ,细胞生长状况良好 ;细胞在培养的最初几天处于生长的潜伏期 ,而后呈指数级生长 ,随着时间的延伸 ,细胞的生长速度减慢 ;而流式细胞仪检测示细胞大多处于G0 G1期。结论 :在适宜的培养条件下 ,MSCs在体外培养的过程中生长状态良好 ,增殖速度快 ,为进一步的研究打下了基础。     

间充质干细胞与调节性T细胞的研究进展

间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）无免疫原性,且具有免疫调节的功能。调节性T细胞（regulatory T cell,Treg）是一类具有负性免疫调节作用的T细胞亚群,MSCs和Treg通过复杂的作用机制维持免疫耐受,限制效应细胞的应答程度,从而纠正和防止过度免疫反应。同时大量研究表明MSCs在体外和体内都能上调Treg水平,并以此来发挥免疫抑制作用,治疗移植物抗宿主病（GVHD）、系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿关节炎（RA）、1型糖尿病（T1DM）等自身免疫性疾病。     

异基因造血干细胞移植治疗骨髓增生异常综合征临床疗效分析

回顾性分析异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的适应证、治疗时机、移植物的选择、移植预处理方案的选择和移植疗效。22例患者中21例获得造血重建,1例非血缘脐血移植(UCBT)未获得植入的成人患者,于非血缘脐血移植(UCBT)后38 d进行母亲HLA4/6相合的外周血联合骨髓造血干细胞移植解救治疗获得植入。22例中死亡3例,无1例复发。MDS患者何时进行Allo-HSCT需依据国际预后积分系统(IPSS)对患者分组,评分属于高危组的患者宜在疾病确诊后尽早进行移植,而低危组的患者可在其他药物治疗效果不佳的时候进行;不仅可选择血缘关系的骨髓移植(BMT)和外周血造血干细胞移植(PBSCT),也可进行非血缘人类白细胞共同抗原(HLA)不全相合的UCBT;移植预处理如采用减低强度的方案(RIC)并不影响移植效果。     

脉冲电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞的影响

目的 探讨不同场强、频率的脉冲电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞影响。方法 用全骨髓贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞，对生长良好的第三代细胞进行不同场强、不同步率的脉冲电磁场刺激，MTT法则定细胞增殖水平，流式细胞仪法测定细胞周期变化。结果 大鼠骨髓间充质干细胞经脉冲电磁场刺激5d（1次／1d，每次3h）后，各实验组细胞增殖水平和（S＋G2／M）期细胞数量均有不同程度提高，差异有显著性意义（p〈0．05）。结论 大鼠骨髓间充质干细胞经脉冲电磁场刺激后，能促进体外培养该细胞的增殖水平，磁场参数对实验结果有影响。     

同期输注供者骨髓间充质干细胞对肝移植大鼠免疫的影响

目的 探讨肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞对受体肝移植免疫的影响.方法 实验分为空白对照组(A组)、移植组(B组)和输注供者骨髓间充质干细胞组(C组).A组SD大鼠5只,只行剖腹探查,B,C组Wistar和SD大鼠各10只.行Wistar-SD大鼠肝移植同时,C组提取供体骨髓间质干细胞同期输注给受者,B组给予输注生理盐水.观察术后第7天肝功能的变化、病理改变和受体生存期.结果 肝移植同时输注供者骨髓间充质干细胞,ALT,AST,TBIL,ALB较B组显著降低,生存期明显延长,病理改变仅呈急性轻度排斥反应,而单纯移植组呈急性重度排斥反应.结论 肝移植同时输注骨髓间充质干细胞促进受体对移植肝的免疫耐受.     

小剂量托吡酯治疗Tourette综合征疗效观察

目的：探讨托吡酯治疗Tourette综合征的临床效果及合适剂量。方法：本组79例Tourette综合征患儿均应用托吡酯单药治疗,起始剂量0．5mg·kg^-1·d^-1,滴定法加量,每周加量0．5mg·kg^-1·d^-1,最大剂量为3mg·kg^-1·d^-1,2次／d,用药3个月后依据抽动控制情况评定疗效,并观察药物不良反应。结果：79例中除2例出现明显药物不良反应而退出观察外,余77例于治疗后2^-14周症状均获显著改善,抽动完全控制47例（61．03％）,显效24例（31．16％）,无效6例（7．79％）,总有效率为92．19％。治疗早期3例出现疲乏,3例体重下降,2例出汗减少,继续用药后症状有所缓解,患儿均能耐受并逐渐缓解。结论：托吡酯治疗Tourette综合征疗效好,所需剂量小,不良反应轻,可作为治疗该病的首选药物之一。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脑梗死的治疗作用

目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对缺血性脑损伤的保护和修复作用,探讨不同时间点移植BMSCs对大鼠脑梗死治疗效果的差异。方法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,在MCAO术后3、6、12、24、72 h这5个时间点经尾静脉移植BMSCs到脑梗死大鼠,并与PBS移植组和空白对照组进行脑梗死体积和神经损伤严重程度评分(NSS)比较。结果MCAO术后28 d,TTC染色显示:与PBS移植组和空白对照组比较,BMSCs移植组的脑梗死体积明显减小(P<0.05);随着细胞移植时间推后,梗死体积逐渐增大,BMSCs 3、6、12、24、72 h移植组脑梗死体积分别为(40±27)、(80±25)、(123±21)、(161±19)和(202±27)mm3。BMSCs移植组大鼠NSS明显低于PBS移植组和空白对照组(P<0.05),并且BMSCs移植越早,NSS越低。结论在MCAO术后3~72 h移植BMSCs对大鼠脑梗死都有治疗效果,并且移植越早,治疗效果越好。     

骨髓间充质干细胞治疗早期股骨头坏死的实验研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSC)治疗早期股骨头坏死的疗效及机制. 方法:60只新西兰大白兔造模后选取其中确诊为股骨头坏死的36只,随机分为3组:对照组:不予以任何处理;单纯减压组和减压+MSC移植组.术后4周及8周各组随机挑选6只兔先行MRI扫描,之后处死动物取股骨头行常规H-E染色及CD34免疫组化染色,用扫描电镜观察超微结构. 结果:术后第8周,减压+MSC移植组MRI示低信号区明显缩小,组织病理学及扫描电镜表现空骨陷窝减少,成骨细胞多,新骨形成,空骨陷窝阳性数和微血管密度与单纯减压组和对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05). 结论:MSC移植能促进兔股骨头坏死的修复.     

骨髓间充质干细胞移植对急性期脑梗死大鼠的干预作用

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对急性期脑梗死大鼠的干预作用。方法按随机化原则将50只脑梗死大鼠模型随机分为BMSCs移植组、上清液移植组各22只及对照组6只。BMSCs组在脑梗死大鼠模型成功后3 h经静脉注入BMSCs 1 ml,上清液组注入上清液1 ml,对照组注入磷酸盐缓冲液(PBS)1 ml。术后28 d检测PBMSc在脑内的存活转化情况。分别于0、7、14及28 d观察记录各组大鼠的神经损伤严重程度评分(NSS)。结果 28 d后,BMSCs脑梗死灶边缘可见少量BrdU阳性细胞表达神经元特异性烯醇化酶(NSE),而上清液组及对照组病灶边缘则无NSE;细胞移植后,各组神经功能均有不同程度的恢复;从第7天起,BMSCs移植组NSS评分明显低于上清液组及对照组(P<0.05),而后2组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论骨髓间充质干细胞移植入急性脑梗死大鼠体内后,可存活、移行至梗死灶周围,并分化为神经元细胞,而且能够减轻脑梗死大鼠的神经损伤程度。