健脾止动汤对多发性抽动症模型小鼠纹状体多巴胺及其受体含量的影响

目的观察健脾止动汤对多发性抽动症(TS)模型小鼠纹状体内多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)及多巴胺受体(D1R、D2R)表达水平的影响。方法 24只雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、模型组、泰必利组、健脾止动汤组(简称中药组),每组6只。腹腔注射亚氨基二丙腈,350 mg/kg,每天1次,连续7 d,建立TS小鼠模型。造模后,空白对照组和模型组给予生理盐水灌胃,其余2组分别给予泰必利(50 mg/kg)和健脾止动汤煎剂(19 g/kg),连续给药6周后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠纹状体内DA、HVA、D1R、D2R含量。结果与模型组比较,DA含量在泰必利组、中药组和空白对照组中呈高表达(P<0.05);HVA含量各组比较无统计学差异(P>0.05);中药组与模型组比较,D1R含量升高(P<0.05);D2R含量各组比较无统计学差异(P>0.05)。结论健脾止动汤可能通过影响D1R表达发挥抗抽动效应。     

健脾止动汤对多发性抽动症模型小鼠抽动行为及纹状体内氨基酸递质的影响

目的 研究健脾止动汤对多发性抽动症(Tourette syndrome,TS)模型小鼠抽动行为及纹状体内氨基酸递质的影响,探讨健脾止动汤的作用机制.方法 40只小鼠分成四组:空白对照组、模型组、健脾止动汤组(中药组)、泰必利组(西药组).除空白对照组外,其余三组采用亚氨基二丙氰(IDPN)腹腔注射建立TS小鼠模型.造模成功后,模型小鼠进行行为学测试并重新分组.空白对照组和模型组给予生理盐水灌胃,西药组和中药组分别给予泰必利(50 mg/kg)和健脾止动汤汤(20 g/kg),连续给药6周后,对小鼠再次进行行为学测试并用高效液相色谱法(HPLC)检测小鼠双侧纹状体内氨基酸递质的含量.结果 行为学结果显示,中药组、西药组治疗前(1.90±1.80,2.05±1.40)与治疗后(1.15±1.67,1.00±1.08)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).与空白对照组比较,模型组、西药组小鼠Glu(1858.33 ±203.00,1744.53±234.01)和GABA(261.24±47.31,258.57±57.64)均呈高表达状态(P＜0.05),中药组Glu含量(1595.88±218.23)与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.05),其余各组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).模型组、西药组、中药组Glu/GABA(7.32±1.49,6.90±0.85,7.38±1.08)与空白对照组(7.55±0.75)相比,均有下降趋势,但各组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 健脾止动汤可能通过调节纹状体内Glu、GABA含量的变化,保持两者的动态平衡而发挥抗抽动效应.     

健脾止动汤对多发性抽动症模型鼠自主活动的影响及其作用机制的研究

目的明确泻肝法治疗多发性抽动症(TS)的作用,揭示其作用机制。方法将90只小鼠随机分为空白组、模型组、泰必利组、健脾止动汤组、六君子汤组、泻青丸组。除空白组外,其余5组小鼠给予腹腔注射亚氨基二丙腈造模,造模同时除空白组和模型组予生理盐水灌胃外,其余4组分别予相应药物灌胃。比较各组小鼠自主活动次数、血浆神经递质含量变化。结果造模后第1天,自主活动模型组较空白组增加(P<0.01),健脾止动汤组、泻青丸组较模型组、泰必利组减少(P<0.05,P<0.01),健脾止动汤组较六君子汤组减少(P<0.01)。造模后第21天,自主活动模型组较空白组增加(P<0.01),健脾止动汤组、泻青丸组较模型组、泰必利组、六君子汤组减少(P<0.05,P<0.01)。模型组与空白组比较,血浆多巴胺(DA)、二羟苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、去甲肾上腺素(NE)含量增加(P<0.05);健脾止动汤组与模型组比较,血浆DA,DOPAC,HVA,NE含量降低(P<0.05);健脾止动汤组与泰必利组比较,血浆HVA含量降低(P<0.05);健脾止动汤组与六君子汤组比较,血浆DA,HVA含量降低(P<0.05)。结论健脾止动汤、泻...     

多发性抽动症大鼠皮质及纹状体强啡肽表达特点及健脾止动汤干预作用

目的研究多发性抽动症(TS)模型大鼠皮质及纹状体区内源性阿片肽——强啡肽(Dyn)及其前体物质强啡肽原(PDyn)的表达情况,以及中药组方健脾止动汤对二者的干预作用。方法 60只健康雄性SD大鼠,随机分为造模组(45只)和空白对照组(15只),造模组采用亚氨基二丙腈(IDPN)腹腔注射法建立TS动物模型。造模成功后的动物纳入实验,随机分为模型组、泰必利组、健脾止动汤组,每组15只。模型组和空白对照组给予生理盐水灌胃,其余2组分别给予等体积的泰必利混悬液(21 mg/kg)和健脾止动汤颗粒溶液(16 g/kg),连续给药6周,每周末次给药后记录TS大鼠刻板行为积分情况。6周给药结束后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)和实时定量荧光PCR(RT-PCR)分别检测大鼠皮质区、纹状体区Dyn和PDyn表达。结果 (1)泰必利组和健脾止动汤组TS大鼠刻板行为积分均值呈下降趋势,末次观察结果显示,2组积分均低于模型组(P0.05),其中健脾止动汤组积分低于泰必利组(P0.05);(2)组间比较,皮质区Dyn含量和PDyn mRNA相对表达量无显著差异性(P0.05);与空白对照组比较,模型组纹状体区Dyn含量和PDyn mRNA相对表达量显著升高(P0.05);给药后,泰必利组和健脾止动汤组Dyn含量和PDyn mRNA相对表达量低于模型组(P0.05),2组与空白对照组之间无显著差异性(P0.05)。结论纹状体区Dyn和PDyn表达增加可能参与TS大鼠刻板行为发生,健脾止动汤抗抽动机制可能与抑制纹状体区Dyn过表达、降低直接通路的易化作用有关。     

母爱剥夺对成年大鼠情绪及多巴胺转运蛋白基因表达的影响

目的：研究母爱剥夺对雄性大鼠成年后情绪及脑纹状体多巴胺转运蛋白（dopamine transporter,DAT）基因表达的影响,探讨DNA甲基化是否参与调控DAT基因的表达。方法：新生幼鼠随机分为实验组和对照组,实验组出生后第1至14天,每天母子分离6 h。12周龄时,采用高架十字迷宫、旷场实验评定2组大鼠的情绪水平,采用RT-PCR法检测纹状体DAT mRNA表达水平,亚硫酸测序法检测DAT基因启动子区DNA甲基化水平。结果：实验组大鼠在新异环境中的探索能力下降、焦虑水平较低,大脑纹状体DAT mRNA表达显著低于对照组(P＜0.05),DAT基因启动子区的DNA甲基化水平差异没有统计学意义（P＞0.05）。结论：母爱剥夺对雄性大鼠成年后的情绪有持久的影响,且抑制纹状体DAT mRNA的表达;DNA甲基化可能不是DAT表达下降的机制。     

帕金森病猴模型多巴胺转运蛋白显像的实验研究

帕金森病(ＰＤ)是黑质纹状体多巴胺(ＤＡ)能神经元及其通路变性性疾病,黑质ＤＡ能神经元缺失,突触前膜的多巴胺转运蛋白(ＤＡＴ)会发生相应的密度变化,其变化将是反映ＤＡ能神经系统功能的一个重要指标,对于探讨ＰＤ的发病机制、早期诊断、监测治疗效果及预后的判断等均具有重要的意义。本研究采用放射性ＤＡＴ配体123ＩβＣＩＴ[甲基3β(4碘苯基)托烷2β羧酸盐][1]观察偏侧ＰＤ猴模型ＤＡＴ的变化,以探讨123ＩβＣＩＴ单光子发射计算机体层摄影术(ＳＰＥＣＴ)临床应用价值。一、材料与方法1偏侧ＰＤ猴模型制备:正常恒河猴3只(Ｍ1Ｍ3),年龄8…     

PD小鼠模型的多巴胺转运蛋白mRNA转录

目的 分析帕金森病（PD）小鼠模型中脑黑质多巴胺转运蛋白（DAT）基因转录状况。方法 用1－甲基－4－苯基－1,2,3,6－四氯吡啶（MPTP）腹腔注射C57BL小鼠,制作PD鼠模型,分10、18d两种;用相同体积生理盐水腹腔注射作为正常对照。以Dot-Blot方法检测小鼠中脑黑质部位DAT基因转录。结果 与正常对照相比,MPTP组小鼠行为异常,中脑黑质部位TH（＋）细胞减少,DATmRNA转录降低（P＜0．05）。正常对照组中小脑部位DATmRNA转录低于黑质部位（P＜0．05）。结论 多巴胺能神经元及其DAT mRNA转录量随PD的发生而减少或降低。DATmRNA转录量可反映残存多巴胺神经元量或功能状况,反映PD的状况,高DATmRNA转录的细胞对MPTP毒物敏感性增强。     

祛风止动方对抽动障碍大鼠纹状体中DRD1/DRD2 mRNA表达的影响

目的：探讨祛风止动方对抽动障碍（TD）大鼠纹状体神经递质基因表达的影响。方法：按照SPSS程序将SD大鼠随机分为正常组、模型组、中药大剂量组、中药常规剂量组及西药对照组,采用阿扑吗啡（APO）腹腔注射给药建立TD大鼠模型。中药组灌胃祛风止动方、西药组灌胃氟哌啶醇,正常组、模型组均予同等剂量生理盐水。药物干预4周后,断头处死实验大鼠,解剖脑组织并分离纹状体,采用RT-PCR检测各组大鼠纹状体中多巴胺受体D1/D2（DRD1/DRD2）mRNA表达水平。结果：腹腔注射APO后,经刻板行为验证显示模型大鼠能再现TD的特征性行为变化,且3周后模型组大鼠纹状体DRD2 mRNA明显上调、DRD1 mRNA明显下调,与正常组比较差异均有显著意义（P〈0.05）;经4周药物干预,西药组、中药大剂量组可显著上调DRD1 mRNA表达,明显优于中药常规剂量组（P〈0.05）;中药大剂量组可显著下调DRD2mRNA表达,明显优于西药组与中药常规剂量组（P〈0.05）。结论：祛风止动方可调节纹状体的DRD1/DRD2 mRNA表达水平。     

PD小鼠模型的多巴胺转运蛋白mRNA转录

目的分析帕金森病(PD)小鼠模型中脑黑质多巴胺转运蛋白(DAT)基因转录状况.方法用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)腹腔注射C57BL小鼠,制作PD鼠模型,分10、18d两组;用相同体积生理盐水腹腔注射作为正常对照.以Dot-Blot方法检测小鼠中脑黑质部位DAT基因转录.结果与正常对照相比,MPTP组小鼠行为异常,中脑黑质部位TH(+)细胞减少,DATmRNA转录降低(P＜0.05).正常对照组中小脑部位DAT mRNA转录低于黑质部位(P＜0.05).结论多巴胺能神经元及其DAT mRNA转录量随PD的发生而减少或降低.DAT mRNA转录量可反映残存多巴胺神经元量或功能状况,反映PD的状况,高DAT mRNA转录的细胞对MPTP毒物敏感性增强.     

宁动颗粒对抽动-秽语综合征模型大鼠行为学的影响

目的观察宁动颗粒对抽动-秽语综合征(TS)模型大鼠抽动刻板和认知行为的影响。方法24只Wistar TS大鼠随机分为阿朴吗啡组(CTR,n=8)、氟哌啶醇组(Hal,n=8)和宁动颗粒组(NDG,n=8),均腹腔注射阿朴吗啡,诱导出抽动症状,随机抽取两组造模同时分别给予氟哌啶醇和宁动颗粒。3组模型分别进行抽动行为、开场试验和Morris水迷宫实验监测,观察药物干预后对行为学的影响。结果药物干预第5周后,Hal组和NDG组与CTR组比较刻板活动明显减弱(P<0.05),且第8周后差异最大,Hal组和NDG组比较差异无统计学意义。干预后,NDG组大鼠在中央停留时间显著增加,穿越格子数、直立次数和修饰次数显著减少(P<0.05),而Hal组均无明显变化。3组大鼠经多次练习,找到平台的时间均减少,与第1天比较差异有统计学意义(P<0.05),NDG组找到平台的时间较Hal组和CTR组改善更明显。结论宁动颗粒能有效抑制TS模型大鼠抽动等刻板行为,并改善TS模型大鼠多动及学习记忆能力。     

慢性应激抑郁模型大鼠海马突触素及多巴胺转运体mRNA表达的初步研究

目的 观测抑郁模型大鼠海马突触素、多巴胺转运体mRNA的表达,探讨抑郁症的发病机制.方法 采用慢性应激复制抑郁大鼠模型.将20只大鼠随机分为正常组、抑郁模型组,以RT-PCR法研究抑郁模型大鼠海马突触素、多巴胺转运体mRNA的表达.结果 正常组海马突触素、多巴胺转运体mRNA的平均光密度值分别为0.84±0.08和1.24±0.08;模型组两者的平均光密度值1.24±0.12和1.85±0.09,2组比较差异有统计学意义(t值分别为8.87和16.50,P<0.01).结论 抑郁模型大鼠海马突触素、多巴胺转运体mRNA表达较正常大鼠显著增加.     

MPTP对小鼠行为学及脑纹状体多巴胺含量的影响

目的：观察不同剂量对1－甲基－4－苯基－1,2,3,6－四氢吡啶（MPTP）小鼠行为学及脑纹状体多巴胺（DA）去甲肾上腺素（NE）,5－羟色胺（5－HT）及其代谢产物含量的影响,探讨MPTP致帕金森病（PD）样小鼠模型的最佳条件。方法：C57BL小鼠分别给予MPTP不同单日剂量（20－40mg/kg),不同给药次数（1－7）天处理,测定各组小鼠爬杆时间检测动物运动协调性,测定自发活动记数评价动物神经兴奋性,测定通道式水迷宫游出时间评价各组小鼠空间学习记忆能力。应用高效液相色谱法检测动物纹状体内DA,NE,5－HT及其代谢产物含量。结果：MPTP30mg /kg腹腔注射1天,3天,7天及40mg/kg腹腔注射1天,3天后小鼠都再现不同程度爬杆时间延长,自发活动次数减少,但不鼠水迷宫游出时间在给药前后未见明显改变。MPTP处理组与对照组相比DA及其代谢产物3,4－二羟基苯乙酸（DOPAC）含量都有明显降低,而NE,5－HT,及其代谢产物5－羟吲哚乙酸（5－HIAA）含量均未见明显改变。结论：MPTP处理可造成小鼠的帕金森病样症状,但不伴有明显智力障碍,在此种动物模型中,应根据科研目的选择MPTP的应用剂量和给药途径。     

骨髓间充质干细胞移植后Tourette综合征大鼠刻板行为及多巴胺含量的变化

目的 观察骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)移植对Tourette综合征(Tourette syndrome,TS)大鼠刻板行为的改善及体内多巴胺(dopamine,DA)含量的影响.方法 48只Wistar大鼠被分成假模型组、模型组和MSC移植组(每组n=16),建立TS大鼠自身免疫动物模型,采用立体定向脑内注射法将BrdU标记的MSC移植到TS大鼠纹状体内,观察大鼠刻板行为改善情况.通过高效液相色谱-电化学法检测大鼠纹状体及血浆中的DA含量.结果 MSC移植组大鼠在细胞移植后7d、14d和28d的刻板行为总分[分别为7d:(117.3±8.4)分,14d:(94.8±7.9)分,28d:(78.8±7.4)分]及纹状体多巴胺含量[分别为7 d:(898.2±143.2)ng/g,14d:(812.4±92.2) ng/g,28d:(757.9±82.4) ng/g]均低于模型组[分别为7d:(129.3±9.8)分,14d:(116.5±8.5)分,28 d:(106.8 ±6.4)分;7d:(1209.3±182.3) ng/g,14d:(1033.5±114.7) ng/g,28 d:(994.8±112.6) ng/g,P＜0.01],在MSC移植后7d、14d移植组大鼠血浆DA 的含量低于模型组[分别为7 d:(530.2±86.2) ng/g,14 d:(562.4±64.2) ng/g,7d:(690.3±72.7)ng/g,14d:(689.4 ±83.9)ng/g,P＜0.01].结论 MSC移植能减少TS大鼠的刻板行为,影响多巴胺的代谢.     

Changes of dopamine transporter function in striatum during acute morphine addiction and its abstinence in rhesus monkey

Background Although dopamine transporter （DAT） is essential for addiction, the effect of additive drugs on DAT function is still controversial, especially for opiates. We investigated the functional changes of dopamine transporter in striatum of rhesus monkeys during acute morphine injection and its abstinence. Methods Four rhesus monkeys, 6 to 9 years old, two male and two female, were examined for 12 days. Single photon emission computed tomography （SPECT） was performed with ^99Tc^m-TRODAT-1 as the radiopharmaceutical dopamine transporter agent during different stages of acute morphine injection and its abstinence. The ratios of SPECT signal between striatum and cerebellum （ST/CB） were calculated. Results The ST/CB ratio declined significantly on the first day of morphine injection and continued declining with more morphine injections. After abstinence, the ratio increased with time, but was still significantly lower on the 5th day of abstinence than the normal level. Conclusions In rhesus monkey, acute morphine injection has both rapid and lasting effects on DAT by downregnlating its function. The decline was partially reversible following morphine abstinence. The results suggest that striatum is one effective target of morphine and that the DAT function in striatum is one indicator for morphine addiction.     

脑络欣通方对大鼠脑缺血后纹状体中5-HT、DA、NE、5-HIAA的影响

目的研究脑络欣通方对大鼠脑缺血再灌注损伤的作用机制。方法雄性SD大鼠100只,随机分为假手术组、模型组、预处理组、治疗3 d组、治疗7 d组,每组20只。复制MCAO(脑中动脉栓塞)/R大鼠模型。治疗3 d组造模后连续给予脑络欣通方3 d、治疗7 d组造模后连续给予脑络欣通方7 d,预处理组造模前给予脑络欣通方药7 d,3组每天灌胃给药2次,8.54 m L/kg。假手术组及模型组予以等量生理盐水灌胃7 d。解剖大鼠并取出脑组织,分离纹状体。采用激光多普勒血流仪(LDF)测定梗死侧纹状体局部脑血流量(r CBF);采用TTC染色法检测大鼠脑梗死体积;采用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)测定5-HT(5-羟色胺)mRNA、DA(多巴胺)mRNA、NE(去甲肾上腺素)mRNA、5-HIAA(5-羟吲哚乙酸)mRNA的表达含量。结果与假手术组比较,模型组发生明显缺血现象,脑血流量显著降低,脑梗死体积显著升高(P0.01),其纹状体中的5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA表达水平显著降低(P0.01);与模型组比较,脑络欣通方预处理组、治疗3 d、治疗7 d组脑血流量明显恢复,脑梗死体积显著下降(P0.01),纹状体中的5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA表达水平显著升高(P0.01)。结论脑络欣通方具有明显预防和治疗MCAO大鼠脑损伤的作用,通过增加MCAO/R大鼠的脑血流量,降低MCAO/R大鼠脑梗死体积,提高MCAO/R大鼠的纹状体组织中5-HT mRNA、DA mRNA、NE mRNA、5-HIAA mRNA单胺类递质的表达,从而起到抑制缺血后再灌注对大脑纹状体的损伤作用。     

千金文武汤对胰岛素抵抗模型大鼠瘦素mRNA表达水平的影响

[目的]观察千金文武汤对胰岛素抵抗模型大鼠瘦素表达水平的影响.[方法]用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型.给予千金文武汤干预治疗,以罗格列酮作为阳性对照组,采用高胰岛素-正常血糖钳夹实验检测大鼠葡萄糖输注率(GIR).取材附睾旁脂肪组织进行瘦素PCR,以观察千金文武汤对胰岛素抵抗大鼠模型的敏感性和脂代谢的影响.[结果]经钳夹鉴定胰岛素抵抗模型建立,千金文武汤组与罗格列酮组的GIR较模型对照组显著增高(P<0.05,P<0.01),瘦素PCR扩增后积分光密度表达、mRNA表达水平间差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).[结论]千金文武汤提高胰岛素抵抗大鼠模型的胰岛素敏感性,改善瘦素水平的高表达.与罗格列酮组相比较在脂代谢和瘦素调节上存在差异,与千金文武汤的作用靶点在调节脂代谢和脂肪因子有关联.