Establishment and application of immunofluorescence using monoclonal antibody in diagnosis of gastric cancer

Monoclonal antibodies against gastric cancer(MG)were purified by ion-exchangechromatography on DEAE-cellulose(DE-52)column and coupled with CNBr-activated Sepharose4B.The Sepharose 4B linked with MG monoclonal antibodies was then incubated with serum andascitic fluid of patients with gastric cancer and benign diseases for 2h.After being blocked by nor-mal mouse serum,the MG-Sepharose was mack to react with the MG-labeled with fluoresceinisothiocyanate for 30min.According to immunoaffinity chromatography principle,the MG-labeledwith fluorescein isothiocyanate was separated from the MG-Sepharose with 0.01 mol/L of PBS-3mol/L of KCNS solution and then detected with a fluorospectrometer.The amount of fluorescencein the solution of separation represented the amount of the antigens defined by MG monoclonalantibodies.The mean value plus 2 standard deviations of the benign disease group was arbitrarilyset as their positive threshold.The positivity rates were 61.1%(22/36)in serum and 75%(18/24)inascitic fluid of patients with gastric cancer.It suggests that the determination of MG-Ags in the se-rum and ascitic fluid of patients may be helpful for the diagnosis of gastric cancer.     

凝集素—胃癌单克隆抗体血清诊断的方法及临床应用

作者根据鼠抗MG7胃癌单克隆抗体相应抗原能与刀豆素A专一性结合的特性,建立了一种凝集素-单抗ELISA检测方法,并用于MG7相应抗原的血清和胃液检测。结果显示,血清MG7相应抗原检测胃癌阳性率为41.1％(37/90);肿瘤切除后10～20d阳性率降至5.9％(1/17).良性疾病患者为4.4％(4/90).胃液中相应抗原检测胃癌阳性率为40.4％(21/52),良性胃病患者假阳性率为3.2％(1/31).故认为MG7相应抗原的检测对胃癌的诊断具有一定帮助。     

新单克隆抗体荧光诊断法的建立及在胃癌诊断中的应用

作者取含鼠抗人胃癌单克隆抗体(单抗)MG小鼠腹水,经DEAE-52离子交换层析后,获得纯化的单抗(IgG),与溴化氰活化的Sepharose 4B偶联制备免疫吸附剂,取免疫吸附剂分别与检测的血清或腹水混合反应后,用标记荧光的单抗MG识别。根据免疫亲和层析的原理,解离荧光抗体并用荧光分光光度计检测荧光强度,分别以良性病组相对荧光强度的均数加2个标准差之和(血清组(?)+2S=2.8AU,腹水组(?)±2S=3.7AU)作为判断肿瘤阳性的阈值。结果:胃癌患者血清MG-Ag检出阳性率为61.1％(22/36),腹水为75.0％(18/24);而良性患者血清假阳性率为7.7％(2/26),腹水为6.7％(2/30)。实验结果证实MG-Ag的检测对胃癌的诊断具有一定价值,本方法是一种准确而灵敏的新方法。     

肿瘤相关寡糖分子纯化及检测意义

用亲和层析法纯化出胃癌组织ConA识别的糖蛋白,经SDS-PAGE鉴定及检测活性后,用辣根过氧化物酶进行标记,建立了一种新的ELISA结合抑制寡糖分析方法。经351例肿瘤患者,126例良性疾病患者和100例正常人血清检测证实:肿瘤患者血清中ConA识别的寡糖分子水平增高。11种肿瘤检测平均阳性率为52.1％(185/351);诊断符合率为61.8％。提示肿癌相关寡糖的研究对于寻找新的肿瘤相关抗原和血清诊断有一定帮助。     

圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——诊断结果的薄层扫描定量分析

以囊尾蚴囊液抗原做圆斑酶联免疫吸附试验,对几组血清进行检测,５４例囊虫病患者中５０例呈阳性反应,阳性率９２．５９％（阳性终点滴度１∶５０～１∶６４００）,４５例健康人中１例呈假阳性反应,假阳性率为２．２２％（终点滴度１∶５０～１∶１００）。在血清１∶２００稀释时阳性率为８３．３３％,无假阳性反应。除包虫病患者血清与囊液抗原有较高交叉反应外（１２／２０）,其它疾病与囊液抗原均无交叉反应。应用薄层扫描技术,以峰面积比值（Ｐ／Ｎ值）为指标,对结果进行定量分析并取得良好结果,解决了该方法不能定量分析的不足。     

血清抗幽门螺杆菌抗体类型与相关疾病关系的研究

目的：分析中国人民血清抗幽门螺杆菌（ＨＰ）抗体类型，探讨其与疾病的关系。方法：收集１４３例血清，应用蛋白质印迹方法检测抗体类型。结果：患者血清中主要存在１２．８万，１１６万，９．１万，８．７万，６．８万，６．６万，６．２万和３．５万等多条抗体带，其中以ＨＰ６．６万最多见，高达９１％。良性胃病与胃癌血清中前４条抗体带存在状态差别，但胃炎和消化性溃疡的血清类型无明显差别。结论：蛋白质印迹方法检测抗ＨＰ     

幽门螺杆菌VacA基因型与胃疾病

目的:探讨幽门螺杆菌(H.pylori)VacA基因型在各种胃肠疾病中的分布及关系.方法:从胃十二指肠疾病患者胃粘膜标本中分离培养H.pylori,PCR测定VacA基因型.结果:108株H.pylori菌株,VacA s1a阳性为85株(79%),VacA s1b阳性22株(20%),VacA m1阳性29株(27%),VacA m2阳性77株(71%),VacA s1a/m2阳性66株(61.1%),未发现s2型菌株.其中,慢性胃炎患者VacA s1a阳性率为65.4%(34/52),消化性溃疡患者VacA s1a阳性率为90%(36/40),胃癌患者VacA s1a阳性率为94%(15/16).结论:H.pylori菌株VacA基因型绝大多数为s1a/m2型,该型菌株存在于各种胃肠疾病中,无s2型.     

胃癌病人血清睾酮值变化的研究

目的 :为研究胃癌与激素之间的关系 ,本研究探讨了胃癌病人血清睾酮变化及其机理。方法 :应用放免法测定正常人、胃良性疾病和胃癌病人的血清睾酮、促间质细胞激素 (ICSH)。结果 :男性胃癌及胃良性疾病组血清睾酮、ICSH水平明显降低 ,但胃癌病人伴有出血和梗阻者血清睾酮、ICSH水平较同样胃良性疾病组病人降低更为明显。胃癌病人有出血和梗阻者血清睾酮、ICSH水平较不伴有并发症者降低更为明显。 期胃癌病人血清睾酮、ICSH水平与正常对照组对比显著降低。胃癌及胃良性疾病组血清睾酮、ISCH变化有显著相关性。结论 :1血清睾酮、ICSH水平可作为胃癌诊断的一个参考指标。 2胃癌及良性疾病血清睾酮、ICSH水平明显降低是由性腺轴抑制所引起。     

TRAP法测定胃癌端粒酶的意义

目的　观察良恶性胃病端粒酶活性的表达。方法　TRAP法测定端粒酶活性。结果　胃癌组端粒酶阳性率为80 8%(2 1/2 6 ) ,慢性萎缩性胃炎伴中、重度不典型增生端粒酶阳性率为 44 4 %(8/18) ,慢性浅表性胃炎组无端粒酶表达 (0 /13) ,三组间差异显著 (P >0 0 5 )。结论　胃癌端粒酶活性高度表达 ,癌前病变组已有表达端粒酶活性 ,而正常组织不表达端粒酶活性 ,提示端粒酶可作为胃肠道肿瘤诊断的有力生物标志 ,对端粒酶活性阳性癌前病变进行监测有助于早期发现胃癌。     

流式细胞术检测胃癌术中腹腔冲洗液CEA的临床意义

目的探讨检测胃癌患者腹膜微转移的方法。方法收集50例胃癌和9例胃良性病变患者的术中腹腔冲洗液,采用流式细胞学（FCM）方法检测腹腔冲洗液中癌胚抗原（CEA）,采用HE染色进行腹腔冲洗液细胞学检查,并结合临床病理资料进行分析。结果胃癌患者腹腔冲洗液中CEA的检出率为46%（23/50）,明显高于细胞学检查的检出率（20%,10/50）,且阳性率随肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移及浆膜受累程度增加而增加。9例良性病变患者FCM及细胞学检查结果均为阴性。结论流式细胞学方法检测腹腔冲洗液CEA是检测腹腔游离癌细胞和预测腹膜转移的有效方法。     

胃癌腹腔冲洗液肝素酶和存活素的相关研究

目的探讨检测胃癌腹膜转移的方法。方法收集50例胃癌患者及8例胃良性病变患者的腹腔冲洗液。采用流式细胞术（FCM）检测胃癌患者术中腹腔冲洗液肝素酶（HPA）和存活素（Survivin）的表达情况,并采用薄层液基细胞制片术进行腹腔冲洗液细胞学（PLC）检查。结果 50例胃癌患者腹腔冲洗液中HPA阳性表达为52.0%（26/50）;Survivin阳性表达率58.0%（29/50）,HPA和Survivin联合检测阳性率为68.0%（34/50）,两者阳性率皆高于PLC 22.0%的阳性率（P〈0.01）;HPA的阳性率与浸润深度、组织分化程度以及TNM分期呈正相关;Survivin的阳性率与肿瘤浸润深度、组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期呈正相关。8例良性病变患者腹腔冲洗液中HPA和Survivin无阳性表达。结论 （1）腹腔冲洗液HPA和Survivin的检测可作为判断肿瘤恶性程度和预后的一项指标。（2）FCM方法检测腹腔冲洗液HPA和Survivin可能成为临床预测胃癌腹膜转移的一种方法。     

胃癌患者血清P_(53)抗体的临床意义

目的 :研究胃癌患者血清P53 抗体与临床病理特征之间的关系 ,以及手术前后血清P53 抗体的动态变化规律。方法 :采用ELISA方法对原发胃癌患者 4 6例 ,良性胃部疾病患者和正常人各 30例 ,以及胃癌患者术前和术后 7d进行血清P53 抗体检测。结果 :4 6例原发胃癌患者中有 12例血清P53 抗体阳性 ,阳性率为 2 6 1%。胃癌患者血清P53 抗体指数和吸收率与肿瘤的病理分期、淋巴结转移有密切的关系 (P <0 0 5 )与患者性别、年龄、原发肿瘤大小、部位无明显的关系 (P >0 0 5 )。术后 7d较术前血清P53 抗体指数、吸收率和阳性率明显下降 ,有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论 :血清P53抗体用于胃良恶性疾病的诊断和鉴别诊断 ,具有良好的特异性。术后血清P53 抗体水平明显下降 ,动态检测血清P53 抗体水平 ,对于判断预后可能有一定的帮助     

胃癌患者胃肠激素及胃电参数的变化研究

目的：探讨胃癌患者胃肠激素及胃电参数的变化情况。方法：选取2011年10月～2013年9月本院收治的85例胃癌患者为观察组,并以同时期的85例体检健康的同龄人为对照组,比较两组胃黏膜组织胃肠激素阳性率、血清胃肠激素水平及胃电参数指标,并比较不同分期者的上述检测指标。结果：观察组胃黏膜组织胃泌素（GAS）、胃动素（MTL）及生长抑素（SS）阳性率及血清GAS、MTL及SS水平均高于对照组,而胃黏膜组织胆囊收缩素（CCK）阳性率、血清CCK水平均低于对照组,胃电参数指标则均低于对照组,且不同分期者上述指标也存在较大的差异,差异均有统计学意义（P均〈0．05）。结论：胃癌患者胃肠激素及胃电参数的变化较大,且其中较多指标受疾病严重程度影响较大。     

HMGB1与MMP-9在早期胃癌患者血清中的表达及其临床意义

目的 探讨血清高迁移率族蛋白B1（HMGB1）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在早期胃癌中的表达及临床意义。 方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测92例早期胃癌患者血清HMGB1和MMP-9水平,并与40例胃良性病变患者和30例健康对照者比较。 结果胃癌组患者血清HMGB1与MMP-9水平明显高于胃良性病变组和健康对照组（P均<0.05）,而胃良性病变组与对照组差异不明显（P>0.05）;相关分析显示,胃癌患者血清HMGB1和MMP-9水平之间呈正相关（P<0.01）,血清HMGB1和MMP-9的表达水平与淋巴结转移和胃癌的分化程度密切相关（P<0.05）,胃癌患者手术后HMGB1和MMP-9水平较手术前明显下降（P<0.05）。 结论HMGB1和MMP-9与早期胃癌的发生发展有关,检测血清HMGB1和MMP-9水平对于早期胃癌的辅助诊断、疗效监测及预后判断具有重要的临床意义。     

~（99m）Tc－ccM_4（鼠／人嵌合抗体）胃癌放射免疫显像的研究

采用￣（９９ｍ）Ｔｃ－ｃｃＭ４ＭｃＡｂ对１０例胃癌病人、４例非胄癌病人进行放射免疫显像（ＲＩＳ）研究，观察了血清ＴＡＧ－７２抗原量、抗体注入量对ＲＩＳ阳性检出率的影响。结果表明注入￣（９９ｍ）Ｔｃ－ｃｃＭ４后，胃癌阳性检出率６０％，肝转移阳性检出率５０％，全部良性病变显示阴性结果。注入抗体８ｈ后为最佳显像时间，给予一定量抗体后，增加抗体用量并不提高ＲＩＳ的阳性检出率。血清ＴＡＧ－７２抗原含量与ＲＩＳ肿瘤阳性检出率明显相关。     

ANALYSIS OF THE N－GLYCOSYLATION OF THE SERUM GLYCOPROTEINS DEFINED BY CON A，PHA－E，RCA1 AND WGA IN CHINESE PATIENTS WITH GASTR

ＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＴＨＥＮ－ＧＬＹＣＯＳＹＬＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＳＥＲＵＭＧＬＹＣＯＰＲＯＴＥＩＮＳＤＥＦＩＮＥＤＢＹＣＯＮＡ，ＰＨＡ－Ｅ，ＲＣＡ１ＡＮＤＷＧＡＩＮＣＨＩＮＥＳＥＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨＧＡＳＴＲＯＩＮＴＥＳＴＩＮＡＬＤＩＳＥＡＳＥ...     

Subtypes of intestinal metaplasia and gastric carcinoma. A clinicoendoscopic follow-up of 112 cases.

Nine tumor-associated antigens (MG7-, MGdl-, MC3-corresponding antigens, CEA, P21ras, Sialoglycoprotein, CA 19-9-like, Sialo-Tn and Le8-like antigens) were investigated on biopsy specimens of different types of intestinal metaplasia (types I, II and III) taken from 112 patients with benign gastric conditions. The incidence of positive staining for 9 antigens except for P21ras in type III intestinal metaplasia was significantly higher than that in types I and II (P less than 0.05-0.01). These 112 patients were clinicoendoscopically followed up for 15-70 months. Five of them were found to develop gastric carcinomas within 25-60 months, giving a cancer detection rate of 4.5%. They were detected from type III (16.1%) patients, but none was found in patients of types I and II, and the differences were significant (P less than 0.05-0.01). Our results indicate that type III intestinal metaplasia has a higher potentiality in developing malignancy and that MG7, MGd1, MC3, CEA, CA19-9-like and Sialo-Tn antigens are valuable tumor markers in defining the high-risk group of gastric carcinoma.

     

联合检测血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶与胆碱酯酶对胃癌的诊断价值

目的:探讨血清中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)与胆碱酯酶活力测定对胃癌的诊断价值.方法:采用速率法联合检测76例经内镜活检及外科手术病理证实的胃癌患者血清中的GPDA及胆碱酯酶含量(选50例正常人血清作对照),并对胃镜检查及外科手术中癌肿生长情况进行分析.结果:76例胃癌患者中,血清GPDA值较平均值明显下降者60例(79%),与未下降者比较差异有显著性(P<0.05);胆碱酯酶值较平均值明显下降者65例(86%),与未下降者比较差异有显著性(P<0.01);66%胃癌患者血清中GPDA及胆碱酯酶含量同时明显降低,与未同时下降者比较差异有显著性(P<0.05);而正常对照组几乎正常或仅轻度降低.胃镜检查中发现,血清中GPDA及胆碱酯酶明显降低的患者癌肿多浸润超过一个解剖分区,且手术中发现,胃癌浸润深度多已超过浆膜层,并多有局部及(或)远处淋巴结转移.结论:血清中GPDA及胆碱酯酶可作为胃癌的标志物,对胃癌的筛查及胃癌患者预后的判定都有着重要的临床意义.     

血清胃蛋白酶原及CA199、CA242、CEA联合检测在胃癌早期诊断中的价值

目的 研究联合检测血清胃蛋白酶原(PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ)及糖蛋白抗原199(CA199)、糖脂类抗原242(CA242)、癌胚抗原(CEA)在胃癌早期诊断中的临床应用价值。 方法 血清中的胃蛋白酶原PG用乳胶增强免疫比浊法,CA199、CA242、CEA用化学发光微粒子免疫法,分别检测130例胃癌患者(均有病理学诊断明确为胃癌患者)、30例胃部良性疾病患者、120例正常健康体检人群的水平,统计学分析3组间的差异;并比较上述各单一肿瘤指标与联合肿瘤指标检测的灵敏度、特异度的差异。 结果 相较于胃部良性疾病患者组和正常健康体检对照组,胃癌组血清中各肿瘤标志物PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA含量水平差异均有统计学意义(P＜0.01)。与所有单项肿瘤标志物检测的灵敏度相比较,联合检测5项肿瘤标志物的灵敏度为86.1%,差异均有统计学意义(P＜0.01),而特异度降低差异无统计学意义(P＞0.05)。 结论 胃癌患者血清PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA联合检测的灵敏度远远高于单一肿瘤标志物项目检测的灵敏度,血清的PGⅠ及PGⅠ/PGⅡ和CA199、CA242、CEA的联合检测有助于胃癌的早期诊断。联合检测对提高早期胃癌患者的检出率具有临床实用价值。