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为了寻求一种简便、快速的痢疾带菌者的检查方法,我们设计了一种增菌培养基。用增菌后的菌液与标记了痢疾杆菌抗体的含A蛋白的葡萄球菌行协同凝集试验(简称CA),作为筛选手段,对阳性标本再进一步分离菌株和进行鉴定.此法简便有效,未见漏检. 相似文献
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目的 考察黄连化浊胶囊对分泌及Ras相关GTP酶1A (sar-1A)敲除诱导的外被蛋白Ⅱ(COP-Ⅱ功能障碍胰岛β细胞内质网应激的干预效果。方法 将小鼠胰岛β细胞Min6分为空白组(Min6细胞无任何干预)、阴性对照(NC)组(Min6细胞转染sar-1A-NC-siRNA)及sar-1A siRNA组(Min6细胞转染sar-1A siRNA)。收集sar-1A siRNA转染的Min6细胞,分为空白血清组(用含10%大鼠空白血清的培养基培养),5%、10%、20%黄连化浊胶囊组(分别用含5%、10%、20%黄连化浊胶囊含药血清的培养基培养),以及罗格列酮组(用含10%罗格列酮含药血清的培养基培养)。采用qPCR检测Min6细胞中sar-1A miRNA的表达、免疫荧光法检测sec31蛋白的表达,蛋白质印迹法检测胰岛素原、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eIF2α)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、X盒结合蛋白1(XBP1)、肌醇需求酶1(IRE1)、 X盒(X-box)蛋白的表达。结果 空白组与NC组Min6细胞中sar-1A m RNA、sec31蛋白及胰岛素原、p-eIF2α... 相似文献
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通过体外实验观察不同培养条件下,不同性状的表皮葡萄球菌(saphylococcusepidermidis,SE)对不同预处理的涤纶材料表面细菌生物膜(bacterialbiofilm,BF)形成的影响,以及兔抗细菌胞外粘质物(extracellularslimesubstance,ESS)抗体对涤纶材料细菌生物膜形成的影响,为临床以生物材料为中心的感染(biomaterialscenteredinfection,BCI)提供有益的思路.用生物膜形成阳性的表皮葡萄球菌RP62A和生物膜形成阴性的表皮葡萄球菌M7,在普通液体培养基及其调整浓度后的培养基(2%Nacl,3%葡萄糖)中,对以血浆预处理和未处理的涤纶材料进行体外动态的生物… 相似文献
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葡萄球菌A蛋白(SPA)在布鲁氏菌病诊断中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
A 蛋白是大多数葡萄球菌细胞壁的主要成份,它能与人及其它哺乳类动物 IgG 的 Fc段可以发生非特异性结合,因此葡萄球菌A 蛋白(SPA)作为免疫试剂而被广泛应用。Coombs 试验,即抗人球蛋白试验,是布鲁氏菌病重要诊断方法之一。抗人球蛋白血清生产方法有多种,比较费时、费事,一般还要作异嗜性凝集素吸收,加之抗血清纯度和效价不同的影响容易引起非特异性凝集,致使该方法推广使用及诊断均存在一定困难。我们利用产生 A 蛋白的葡萄球菌CowanⅠ株,制成固定液,代替抗人球蛋白血清作 Coomb S 试验,取得了令人满意的结果。现报告如下。材料和方法含 SPA 的 CowanⅠ株及不含 SPA 的Wood 46株均由北京生物制品检定所提供,参照遵义医学院加热浸取法制备SPA,即以 PH5.9PB 制成10%(V/V)菌悬 相似文献
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近年来利用葡萄球菌表面 A 蛋白的 FC受体与抗体结合,进行协同凝集试验,在细菌学和免疫学领域中的应用日益广泛。此项工作中之含 A 蛋白的葡萄球菌稳定液是试验成败的关键之一。我们利用实验室已有的,着色的免疫皂土与葡萄球菌 A 蛋白上的 FC受体结合而发生凝集的这一现象,将其用来定量检测 A 蛋白。经试验,方法简便,结果稳定可靠,有一定的实用意义,特摘要报告如下: 相似文献
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白细胞介素-4对肺泡上皮细胞钠离子通道β亚基调控研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 研究不同时间不同剂量白细胞介素-4(IL-4)作用下A549细胞钠离子通道β亚基(β-ENaC)的变化情况.方法 以A549细胞为模型,在含IL-4培养基不同时间不同剂量培养下,分别用免疫印迹法以及RT-PCR法测定β-ENaC蛋白表达以及mRNA变化转录情况.结果 IL-4可以呈剂量、时间依赖性的下调β-ENaC的表达,这种蛋白表达的下调作用是通过基因涮控起作用的.IL-4(1 ng/ml)培养A549细胞3 h,β-ENaC蛋白及mRNA开始下降,在6 h后出现显著差异(P<0.05),不同剂量的IL-4(0.1、10、100 ng/ml)培养A549细胞12 h在0.1 ng/ml时即出现显著的差异(P<0.05).结论 IL-4可通过下调β-ENaC的表达抑制肺泡水肿液清除能力,从而不利于急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征的预后. 相似文献
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金黄色葡萄球菌细胞壁的主要成分 A 蛋白(Staphylococcal Protein A,简称 SPA)能与正常人及多种哺乳动物血清中 IgG 分子 Fc 段非特异结合,而 IgG 的 Fab 段则暴露于外,并保持其正常抗体的活性,当与特异性抗原相遇时,则抗原与 IgG 的 Fab 段相结合。如将含 A 蛋白葡萄球菌本身作为载体,用特异抗体致敏,如遇特异抗原,则能引起协同凝集反应。协同凝集反应已在细菌学上应用于细菌的分型,但大多属于实验室方面的研究,正式作为诊断试剂应用于临床的报告不多。 相似文献
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《中国医学创新》2019,(18)
目的:研究Eravacycline体外诱导金黄色葡萄球菌耐药菌株的核糖体30S亚基16S rRNA基因和核糖体蛋白变异特点,阐明金黄色葡萄球菌Eravacycline耐药机制。方法:选择3株金黄色葡萄球菌株,采用Eravacycline不同压力浓度下逐渐诱导Eravacycline耐药金黄色葡萄球菌耐药菌株,挑取诱导菌株单克隆,采用琼脂平板稀释法测定母株及诱导系列的Tigecycline和Eravacycline的MIC值;通过PCR扩增其5个拷贝的16S rRNA基因(RR1-RR5)和30S核糖体蛋白基因,将诱导的Eravacycline耐药株扩增产物测序后与母株序列比较,获得该基因片段突变位点。结果:经过体外Eravacycline不同浓度梯度多步诱导共挑取6株Eravacycline耐药菌株,这些菌株的Tigecycline和Eravacycline的MIC值范围分别为8~16μg/mL和32~64μg/mL。16S rRNA基因PCR测序分析提示该基因的主要突变位点分别为RR1(T170G)、RR2(A1124G,G77A)、RR3(C810T)、RR4(G185A,G1036A),30S亚基核糖体蛋白S3蛋白没有突变,30S亚基核糖体蛋白S10基因多个位点突变。结论:金黄色葡萄球菌Eravacycline诱导耐药后可导致Tigecycline和Eravacycline的交叉耐药及16S rRNA基因和30S亚基核糖体蛋白S10位点突变。 相似文献
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我们在做产肠毒素大肠杆菌(ETEC)质粒电泳分析过程中,建立了金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)协同凝集试验检测大肠杆菌不耐热肠毒素(LT),现将结果报告如下。材料和方法一、菌种:5株ETEC标准株来自中国药品生物制品检定所,24株人源ETEC菌株分别来自军事医学科学院、解放军302医院和本所。二、培养基:SPA协同凝集试验和兔肠结扎用Biken NO_2产毒培养基。质粒电泳用LB培养基。三、SPA协同凝集试验:将ETEC标准株,待检株和阴性对照株分别接种1ml Biken NO_2产毒培养基,37℃振荡培养6~7小时,15000rpm离 相似文献
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siRNA沉默CTGF表达对高糖诱导人肾小管上皮细胞转分化的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨针对结缔组织生长因子(CTGF)基因的siRNA对高糖条件培养下的人肾小管上皮细胞株HK-2细胞向间充质细胞转分化(EMT)的影响。方法将体外培养的HK-2细胞分为6组:(1)正常对照组,培养基含D-葡萄糖1g/L;(2)等渗对照组,培养基含D-葡萄糖1g/L,甘露醇3.5 g/L;(3)高糖组,培养基含D-葡萄糖4.5 g/L;(4)高糖+空白对照组:细胞转染空白质粒后于高糖培养基中培养;(5)高糖+阴性对照组:细胞转染含无关序列的重组质粒后于高糖培养基中培养;(6)高糖+干扰组:细胞转染针对CTGF的siR-NA表达质粒后于高糖培养基中培养。应用RT-PCR检测CTGF mRNA水平,Western blot法检测CTGF、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白水平。结果高糖刺激可上调HK-2细胞的CTGFmRNA及蛋白水平,并呈时间依赖性降低HK-2细胞的E-cadherin蛋白表达水平,升高α-SMA蛋白表达水平。而通过特异性siRNA抑制CTGF mRNA表达后,细胞的CTGF蛋白表达随时间延长进行性降低,同时伴有细胞E-cadherin蛋白表达升高,α-... 相似文献
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近年来,国外在检测血小板表面相关IgG(PAIgG)的技术方面有很大进展,采用的方法很多。我们利用葡萄球菌蛋白A能和IgG结合的特性,应用~(125)Ⅰ标记葡萄球菌蛋白A(简称~(125)Ⅰ-SPA)的方法检测血小板表面相关IgG,并观察了正常人59例和各种疾 相似文献
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[目的]建立细胞培养基中马兜铃酸A高效液相色谱(HPLC)法的测定方法,考察在细胞培养条件下马兜铃酸A在培养基中的稳定性。[方法]样品经甲醇沉淀蛋白,10 000 r/min,离心5 min,取上清液进样。采用HPLC法,Waters C18柱(150 nm×4.6 nm,5μm),甲醇-水(含3%的冰醋酸)(70∶30,V/V)为流动相;检测波长260 nm,柱温30℃,流速1 mL/min。[结果]马兜铃酸A在0.5~50 mg/L范围内线性良好,相关系数r=0.999 8;日内、日间精密度相对标准偏差(RSD)分别为0.96%、1.92%;回收率为94.01%~104.34%。[结论]马兜铃酸A在培养基中3 d内含量稳定,该法简便、灵敏、特异性强,适用于细胞培养基中马兜铃酸A含量的测定。 相似文献
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众所周知,金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)转肽酶A (Sortase A)在致病中起着不可或缺的作用,已成为重要研究的靶酶。虽然已有多种实验方法用于Sortase A的原核表达纯化,但由于缺乏通用的技术来得到理想的目的蛋白,因此应当结合使用多种方法以降低误差。对不同的技术在金黄色葡萄球菌Sortase A原核表达过程的优缺点进行比较分析,并针对性地提出比较理想的解决方案,可为Sortase A作为靶酶的研究提供一些参考。 相似文献
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国外对金黄色葡萄球菌A蛋白(SpA)及其应用,已进行了广泛的研究。我们从收集到的金黄色葡萄球菌中,选出了含有丰富A蛋白的Z_5和No.1800株及不含A蛋白的Z_(12)株,经特异性抗体标记后的协同凝集反应,证明Z_5和No.1800株结合IgG的效果良好,可以替代国外标准株Cowan Ⅰ,而Z_(12)株因不含A蛋白,不能结合IgG,故可替代国外标准株Wood 46。Z_5和No.1800株及Z_(12)株的建立为开展SpA在免疫学方面的研究提供了必要条件。 相似文献
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近年来,采用葡萄球菌 A 蛋白柱进行体外免疫吸附治疗,已用于产生抗体或循环免疫复合物(CIC)的恶性肿瘤、自身免疫性疾病及部分血液系统疾患,并初步取得一定疗效。本文就该疗法在血液系统疾患治疗中的应用作一概述。一、制备及作用机理以高度提纯的葡萄球菌 A 蛋白50mg 或200mg共轭吸附于硅质柱,制成 A 蛋白柱(PROSORBA柱)。用4L 无菌盐水冲洗柱,然后用0.5L 含5000U肝素的无菌盐水灌洗柱。采集患者血浆250~2000ml 通过该柱,继以10~20ml/min 速率由静脉回输给患者,或使用血浆分离器作连续治疗,每周1~3次,每例至少4次,总次数10~15次,每次治疗需更换柱。血浆中的正常成分可回输给患者,不 相似文献
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游苏宁 《中华医学信息导报》1994,(11)
据《中华内科杂志》1994年33卷第6期报道第一军医大学南方医院消化科周殿元等,为减少序贯普查便隐血试验(FOBT)对大肠癌筛检的漏检率,将人血红蛋白抗血清包被的含A蛋白葡萄球菌(SPA)进行免疫便隐血试验(SPA试验)和直肠粘液T抗原检测(即Shams试验)联合用于大肠癌普查初筛,以验证两者的互补效果。 相似文献
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目的 探讨肿瘤坏死因子-α (TNF-α)对NIH3T3细胞成熟化所起的作用.方法 体外培养NIH3T3成纤维细胞,将细胞分为空白对照组(A组)、TNF-α组(B组)及TNF-α+Anti-TNFRSF1B组(C组).细胞制成 2×108/L的细胞悬液后,接种于25 cm2培养瓶中,待细胞呈汇合状态时,换用无血清DMEM高糖培养基培养12~16 h.然后A组换用含体积分数0.02胎牛血清的DMEM高糖培养基继续培养;B组换用含100 μg/L TNF-α的培养基培养;C组先加入浓度为50 μg/L的Anti-TNFRSF1B作用1 h后,倒出培养基后再加入含100 μg/L TNF-α的培养基继续培养.然后采用RT-PCR方法测定各组Ⅰ型胶原和基质金属蛋白酶3(MMP3)mRNA的表达,Western Blot方法测定各组Ⅰ型胶原蛋白和MMP3蛋白的表达.结果 B、C组 MMP3 mRNA及蛋白的表达较A组升高,差异均有显著意义(t=-13.413~5.076,P<0.05);B组较C组升高,差异也具有显著意义(t=4.441~5.076,P<0.01);B、C组Ⅰ型胶原的表达较A组降低,差异也均有显著性(t=-4.950~5.808,P<0.05),B组较C组降低,差异也均有显著性(t=-4.950~-3.823,P<0.05).结论 TNF-α可促进NIH3T3细胞活化. 相似文献