抗-HCV阳性标本隔批拖带引起S/CO值升高结果分析

<正>随着全自动加样设备在血液检测中的广泛应用,其加样导致的阳性拖带现象已引起高度关注。拖带现象即遇到含高浓度抗原或抗体的标本时,同一加样针会使其后相邻的多个样本出现不同程度的污染。拖带现象发生在同一块酶标板上,国内已有多篇报道[1～4]。我们在进行血液标本加样     

血液检测HBsAg酶联免疫吸附试验拖带现象分析

目的通过对使用永久性钢针在酶免检测中出现阳性拖带现象进行分析,以寻找解决拖带现象的办法。方法采用同一份标本和相同试剂进行手工反复检测比较,分析酶免阳性标本拖带污染对其他标本结果的影响。结果对Metis 200-8全自动血库系统使用永久性钢针时阳性标本产生拖带污染的后续3个标本,经重新检测,结果均为阴性,证实为拖带现象所致。结论永久性钢针在检测过程中对其他标本会带来不同程度的拖带污染,可以通过对同一份标本进行对比检测,以保证结果的可靠性。     

全自动加样系统抗-HIV阳性样本拖带现象对试验的影响及其解决方案

RSP全自动加样系统使用固定加样针,当在抗-HIV等酶免试验中分配样本时,分配完阳性样本的加样针会使其后的多个样本出现不同程度的污染,引起假阳性结果,这就是通常说的拖带现象。云南省是我国艾滋病的高发地区,在工作中,我们经常遇到HIV阳性样本拖带现象,导致大量样本待查和试验     

检测抗-HIV抗体时出现交叉污染分析

目的分析抗-HIV检测中出现的拖带污染现象。方法选用本地区无偿献血者血浆,用ELISA双抗原夹心法检测抗-HIV。结果同列连续4份标本初、复检阳性,双孔复试仍为阳性,重新采血样和血袋样本一起送市疾病预防控制中心确认,结果除D8对应标本阳性外,其余均为阴性。结论全自动酶免分析系统存在样本污染情况,定期用0．1N的HCI和NaOH切底冲洗和浸泡加样器管道,增加洗针液量可以有效避免标本污染。     

梅毒螺旋体和乙肝表面抗原检测中阳性拖带现象与钩状效应的关系

目地探讨采用一步法检测梅毒螺旋体和乙肝表面抗原并发生阳性拖带现象时是否存在钩状效应。方法将出现阳性拖带现象的第一个阳性孔标本及反应板上其对应位置的前一个标本各34例分成I、Ⅱ两组,分别用一步法和二步法进行复检,并将一步法阴性而二步法阳性的标本进行倍比稀释后用一步法检测,直至检出阳性。结果复检后,I组34例标本有5例为阴性,Ⅱ组中有4例因钩状效应呈假阴性,并且这4例标本造成阳性拖带现象。结论采用酶联免疫反应（ELISA）一步法检测时可因钩状效应使强阳性标本漏检,如果用固定加样针加样还可能造成交叉污染使其后的标本出现阳性拖带。     

加样针污染致不同项目拖带情况分析

目的探讨不同项目、不同值域的拖带规律,为制订拖带克服措施和献血者(血液)保留淘汰策略提供依据。方法各个项目均用RSP100(4针型)全自动加样仪加样,用同样的冲洗程序和冲洗量进行加样针冲洗,用FAME16/20全自动酶免分析仪进行后处理,从第2列开始,以列为序,阳性孔后每间隔3孔有1孔有反应,取原标本和重采标本经手工加样复检阴性即纳入拖带污染统计。将阳性孔按S/CO值进行分组,对不同阈值造成拖带的情况进行评价。结果不同项目的拖带程度和频率有明显差异,抗-HIV项拖带最为严重,抗-HCV项次之,TP和HBsAg最低,拖带率随着S/CO值的升高而升高,当样本测定值在Cut off值的20倍以上时,抗-HIV项可有80%的样本发生拖带,抗-HCV项可有40%的样本发生拖带。结论加样针老化是造成拖带率逐年上升的主要原因,各项目拖带情况不一与样本的阳性程度、试剂灵敏度、加样量有关,拖带的预防应从做好仪器维护保养、加大加样针的洗涤时间和洗涤量、推广使用一次性加样针、献血前进行快速检测筛除阳性程度较高的标本等方面进行考虑。     

永久性加样针造成标本交叉污染及其解决办法

目前,自动加样器在国内采供血机构的使用越来越普及,使用的自动加样器型号主要有ML ATPLUS、TECAN GENESIS RSP及DYNEX VI-VACE等。各实验室对全自动酶免分析系统的性能评价,主要集中反映为减轻工作人员劳动强度,提高工作效率和实验的灵敏度以及精密度等方面。本实验室在使用TECAN GENESIS RSP200型自动加样器时,发现由于使用永久性的加样针,可造成标本交叉污染,导致出现阳性拖带现象。为解决这一问题,笔和厂家技术人员共同探讨解决方法,取得了比较满意的结果。现以抗-HIV的检测为例报告如下。     

29例抗-HIV初筛试验阳性结果分析

目的 对29例抗-人类免疫缺陷病毒(HIV)初筛试验阳性进行结果分析.方法 分别用北京万泰和上海科华两家酶联免疫吸附(ELISA)夹心法抗-HIV(1 2)检测试剂对21 796份无偿献血标本进行AT-2全自动加样系统和FAME酶免分析系统的全自动检测.结果 21 796份标本中共检出29例初筛阳性标本,其中北京万泰试剂检出29例,上海科华试剂检出3例,将此29例初筛阳性标本送中国医学科学院输血研究所艾滋病确认实验室,用蛋白印迹法(WB)确认,反馈结果显示:2例为阳性,4例不确定,其余23例为阴性.结论 初筛实验室与确认实验室的结果有差异,初筛实验室的假阳性过高,应引起注意.     

对抗-HCV阳性标本的结果分析

目前血站对抗-HCV检测主要是用ELISA法[1]检测抗-HCV。由于在工作中存在着许多影响ELISA法检测结果的因素,从而经常导致检验结果出现误差。笔者从7860份无偿献血的标本中初检出现-HCV阳性标本86份,对每一份阳性标本用两种不同试剂做双孔复试,结果及分析报告如下:1资料方法1.1标本来源本市无偿献血者。1.2试剂丙肝病毒抗体酶联免疫疫试剂盒厂家:(1)北京万泰;(2)北京金豪。以上试剂均经中国药品生物制品检定所鉴定合格,并在有效期内使用。1.3仪器(1)“AT”全自动加样系统;(2)“FAME”全自动加样系统。1.4方法及操作“ELISA’’法,严格按照试剂操说明书在仪器上编辑工作程序。用“AT”加样器对标本进行加样处理,用“FAME”全自动酶免系统进行试验操作。初检试剂为万泰试剂,复检试剂为金豪试剂。用两种试剂各双孔进行检测。2结果初检:以临界值(CO)为界判定抗-HCV阳性标本86份。复检:以CO值为界值,两种试剂检测,只要有一种检测结果呈阳性反应判为阳性。结果判定阳性标本25份(OD值见附表),阴性标本61份,初筛和复检结果符合率为29.1%。经信反馈,电话随访,25份抗-HCV检测阳性献血...     

全自动加样仪使用一次性加样针的必要性

近年来,全自动加样仪在血站血液标本检测中被广泛应用,全自动加样仪避免了检验人员手工加样易出现的错加,漏加样本、试剂以及加样精度不够而导致的差错和误差,确保了加样的准确性,大大提高了血站检测工作的效率,得到检验人员充分认可。但日常工作中,我们发现使用永久性钢针会造成拖带现象的发生,拖带现象不但会造成假阳性,更可怕的是造成假阴性,引起输血传播疾病。为彻底解决拖带现象,我们建议全自动加样仪使用一次性加样针。     

样本检测结果假阳性8例

血站标本的全自动检测提高了检测效率和精确性，降低了经输血传播疾病的危险。但笔者在检测过程中发现，由于加样仪钢针的污染、酶免分析仪清洗单元的堵孔以及试剂盒灵敏度的不同，会造成样本检测结果的假阳性，现报告如下。     

影响FAME全自动酶免分析系统检测因素探讨

目的　探讨 3种常见的影响全自动酶免分析系统检测结果的因素 ,提高 ELISA法检测结果的准确性。方法　 ( 1 )随机选择对照组和实验组各 44份无偿献血者血样 ,分别进行两种不同方式的抗凝 ,应用 FAME全自动酶免分析系统进行 HBs Ag、抗 -HCV、抗 -HIV、TP4个项目检测 ,比较两组检测结果。 ( 2 )在全自动加样仪的加样高度设置中 ,不断增加加样高度 ,观察 FAME对 4个质控血清平行孔的检测效果。( 3 )在不同温度的 FAME洗液下 ,对 88份正常的无偿献血者血样进行 4个项目检测 ,观察不同温度的洗液对检测结果的影响。结果　 ( 1 )除抗 -HCV外 ,实验组中其他 3项检测结果均有假阳性出现 ,且阴性标本的 S/CO值明显高于对照组 ( P<0 .0 0 1 )。( 2 )当加样高度低于 9.1 mm时 ,抗 -HCV有假阴性出现 ,4项检测的 CV值均较高 ,均一性差。 ( 3 )洗液温度低于 1 4℃时 ,除抗 -HCV外 ,其他 3项检测结果有假阳性出现 ,CV值较高 ,均一性差。结论　标本的抗凝效果、全自动加样仪的加样高度和洗液温度对全自动酶免检测结果均有影响 ,只有在血样充分抗凝、加样高度和洗液温度适当等条件下 ,才能获得准确的检测结果     

全自动加样仪引起抗-HIV拖带阳性分析

目前 ,全国许多血站都使用微机控制的全自动加样器ML/AT进行血液标本加样 ,大大减少了劳动强度 ,避免了手工加样的人为误差 ,提高了血液检测的质量和水平。但偶尔在检测到HIV抗体强阳性标本时 ,可能会在加样、洗涤时污染到邻近标本。笔者在使用该仪器的过程中也遇到 2起共 4例标本 ,因ML/AT加样拖带而引起的抗 HIV阳性 ,现报道如下。1　材料与方法1 1　仪器、软件　ML/AT plus2全自动加样仪和用户软件(瑞士 ) ;AWI自动洗板机 (奥地利 )。1.2　试剂　抗 HIV试剂 (北京金豪 ,批号 :2 0 0 1112 9;厦门新创 ,批号 :2 0 0 110 0 6 0 …     

小型血站实验室设备性能比对方法探讨

目的探讨小型血站血液检测实验室设备性能比对的方法。方法比较2台不同型号的全自动加样仪、2台同系列全自动酶免后处理系统检测性能的一致性:使用4种ELISA检测试剂,分别检测HBs Ag、抗-HCV、抗-HIV、梅毒定值质控品和20份常规献血者标本,应用χ2检验和Kappa检验,比较上述2组设备检测结果的一致性。结果1)2台全自动加样仪抗-HCV、抗-HIV定性检测加样的一致性较好。2)2台同系列全自动酶免后处理系统,4种试剂一致性均为100%(40/40),经χ2检验一致性无统计学差异(P0.05)。结论小型血站实验室可以通过对定值质控品,和常规献血者标本的检测结果进行处理分析,比对酶免检测设备之间的性能是否一致。     

全自动酶免系统对血液标本的要求

血液标本是血站检验科实验工作的基础，也是全自动系统得以顺利运行的前提。只有提供符合要求质量合格的血液标本，才能提高检测质量，最终得出准确的实验结果。根据我检验科使用的澳斯邦生物工程有限公司提供的加样系统STAR和酶免系统FAME，本文就近年来在工作中的体会，就全自动加样和酶免系统对血液标本的要求，总结如下。     

青岛地区291782例无偿献血者艾滋病检测结果分析

目前,国家规定采供血机构对采集的所有血液,使用两种不同厂家ELISA试剂,进行艾滋病抗体初筛检测,以阻断艾滋病的输血传播。笔者对青岛地区2004~2007年的291782份无偿献血者血液的HIV检测结果进行了分析,ELISA实验结果阳性141例,上报确认实验室用确认实验方法确认,8例为阳性,抗体不确定19例,其余114例均为阴性。现分析报告如下:1材料与方法1.1标本来源2004年1月1日~2007年8月30日初复检291782份无偿献血者的标本。1.2检测仪器和试剂Freedom evo200和RSP150全自动加样仪(德国帝肯),FAME2430酶免系统(瑞士)。国产酶免抗-HIV试剂(珠海丽珠)、第四代进口酶免HIV检测试剂(生物梅里埃),WB确认试剂(美国MP生物医学),2NCU抗-HIV室内质控血清购自卫生部临床检验中心。1.3 HIV初筛检测严格按照各厂家提供的试剂说明书进行操作,试剂均经国家生物制品检定所批检合格,并且在试剂的有效期内使用。使用全自动加样仪和全自动酶免系统,用国产酶免抗-HIV试剂(珠海丽珠)和第四代进口酶免HIV检测试剂(生物梅里埃),同时对无偿献血者标本进行两遍抗-HIV检测...     

全自动加样器阳性拖带现象产生原因及解决方法

目前，国家加大了对采供血机构的监管，对血液的质量要求越来越高，手工检测手段已不能满足更高的血液质量管理要求和实验室自动化、标准化需求。本站于2007年8月购进全自动加样器（Xantus 44 OH），其在检验科的日常工作中发挥着重要作用，不但大大降低了劳动强度，而且避免了手工加样中容易出现的差错，提高了血液检测质量，但有时强阳性标本会产生拖带现象。     

献血者血液样本手工检测与全自动酶免分析系统操作结果比较

目的：献血者血液样本手工检测与全自动酶免分析系统操作结果分析比较。方法：对全自动酶免分析系统测定HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、TP抗体结果为阳性的样本进行留样。再次分别用全自动酶免分析系统和手工法同种试剂双孔检测，确认结果后进行分析比较。结果：全自动酶免分析系统FAME（24／20）测定结果：HBsAg阳性率99．8％；HCV抗体阳性率99．5％；HIV抗体阳性率100％；TP抗体阳性率98．8％，手工法测定结果HB8鲰阳性率90．8％；抗-HCV阳性率93．1％；抗-HIV阳性率97．3％；TP阳性率92％。全自动酶免分析系统以其高灵敏度和精密度更加适合采供血机构大批量样本的检测。结论：全自动酶免分析系统检测结果符合预期值，避免了手工操作的误差，实验重复性好。但因全自动酶免分析系统灵敏度较高，假阳性出现频率略高于手工法。     

ELISA—STAR全自动酶标分析仪的使用与维护

随着医学科技的不断发展，临床标本的检测均采用自动化程序化，为适应大量检测标本的需要，本科室引进了瑞典的ELISA-STAR（酶免之星）全自动酶标分析仪。它集合了标本一控制品的加注，试剂的加注，微板的孵育，微板的洗涤，条码的读取和比色结果判读功能于一体，是新一代的全自动酶免分析一体机。该仪器主要由六大部分组成：（1）加样系统一加样臂和加样针，钢针洗涤工作站；     

HBsAG检测中拖带污染的分析

目前各级血站对HBsAG检测所用的方法是ELISA法[1],该方法敏感度高,特异性强,操作简单,被广泛应用,由于现在各级血站采用的是全自动加样系统,一旦防污染功能不完善,就会出现拖带污染现象[2],笔者对2008年下半年8000分无偿献血者标本HBsAG检测中出现的拖带污染现象分析如下: