HQ0805对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究中药提取物HQ0805对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2的影响.方法:无菌制备小鼠脾淋巴细胞,分别用不同浓度的HQ0805作用于静止状态及ConA活化的脾淋巴细胞,用MIT法测定HQ0805对淋巴细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测HQ0805对脾细胞培养上清液中细胞因子IL-2的影响.结果:HQ0805明显抑制静止状态与活化状态T淋巴细胞的增殖,并呈剂量依赖性;抑制IL-2的分泌.结论:HQ080抑制小鼠脾淋巴细胞的增殖,可能与抑制IL-2有关.     

雷公藤免疫抑制作用研究进展

传统中药雷公藤Tripterygium wilfordii为卫矛科雷公藤属植物，在我国的使用已有几千年的历史。其化学成分复杂，具有多种药理活性，是目前国内外研究的热点天然药物之一。近年来，雷公藤的各种提取物及有效成分在各类免疫性疾病中得到了广泛应用并取得了很好的疗效。现综述近几年国内外对雷公藤免疫抑制活性成分、免疫抑制机制研究的进展和临床应用的状况，并认为雷公藤作为一种极有潜力的免疫抑制药物，其应用前景十分广阔，值得对其进行深入的开发研究。     

雷公藤甲素对小鼠腹腔巨噬细胞杀伤活性的影响

目的 :观察雷公藤甲素 (TP)对小鼠腹腔巨噬细胞 (M)杀伤活性的影响。方法 :分离、纯化巨噬细胞 ,给予不同浓度TP进行不同时间共培养 ,以MTT法检测M杀伤活性。结果 :TP在浓度 1～ 10 μg/L范围内、时间 4～ 2 4h范围内对静止及活化的M杀伤活性具有显著抑制作用 (P <0 0 1) ,且分别呈剂量和时间依赖关系。结论 :TP可以抑制M杀伤活性     

雷公藤多苷片中雷公藤甲素与体外肝毒性相关性研究

目的:采用永生化人肝HepaRG细胞明确雷公藤多苷片制剂(Tripterygium Glycoside Tablets,TPT中主要成分雷公藤甲素(triptolide,TP)与肝毒性的相关性。方法:HepaRG细胞经不同浓度TP及TPT作用24 h后,采用细胞计数试剂盒法(cell vounting kit-8,CCK-8)分别测定TP和来自不同厂家的TPT对HepaRG细胞存活率的影响;采用流式检测法测定TP及TPT的对细胞凋亡率的影响;收集细胞培养液检测谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和谷氨酰转肽酶(GGT)等与肝毒性相关的生化指标,并以实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(Real-time PCR)法测定白细胞介素-6 (IL-6)、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子表达水平。结果:TP的半数抑制浓度(the half maximal inhibitory concentration,IC_(50))为15.14 nmol·L~(-1)。重点考察不同生产企业间TP含量与毒性差异之间的关联,结果发现,TP含量与细胞毒性、细胞凋亡、ALP、CK、TNF-α和IFN-γ变化直接相关,AST、LDH、TNF-α和IFN-γ是检测TP导致的肝细胞毒性较为灵敏的指标。结论:TP为不同企业TPT制剂中主要肝毒性成分。TPT中其他成分仍存在肝毒性风险,值得进一步研究。     

雷公藤甲素对体外培养的变应性接触性皮炎小鼠Th细胞Fas表达的影响

目的 为了探讨雷公藤甲素对体外培养的变应性接触性皮炎(ACD)小鼠Th细胞Fas表达的影响.方法 以二硝基氯苯(DNCB)制作小鼠ACD模型,分离ACD小鼠淋巴细胞,不同浓度雷公藤甲素体外作用48 h后,利用流式细胞仪检测Th细胞Fas表达率.结果 雷公藤甲素3个浓度组体外培养的ACD小鼠淋巴细胞Fas表达均高于对照组(P＜0.01),高浓度组与中浓度和低浓度比较Fas表达水平显著升高(P＜0.01),中浓度与低浓度比较表达水平差异具有显著性(P＜0.05).结论 雷公藤甲素可以促进体外培养的ACD小鼠淋巴细胞Fas的表达,可能是治疗ACD的机理之一.     

淫羊藿提取物对小鼠T淋巴细胞体外活化和增殖的影响

目的研究淫羊藿水溶性提取物对刀豆蛋白A(ConA)刺激的小鼠T淋巴细胞体外早期活化和增殖的影响。方法无菌分离小鼠各部位淋巴结,制备单细胞悬液,加入不同终质量浓度(5、25、50mg/L)的淫羊藿提取物,以MTT法检测药物对T细胞活性的影响;利用流式细胞术(FCM)结合双色荧光抗体染色技术检测早期活化标志CD69分子的表达;运用流式细胞术结合活体染料CFDA-SE染色技术和荧光抗体染色技术检测T细胞增殖。结果MTT法检测淫羊藿提取物在50mg/L时细胞存活率达52.36%。ConA作用6h后,对照组CD69 表达率为(4.61±0.85)%,ConA组CD69 T细胞的比率上升至(38.30±2.54)%,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L时均抑制ConA诱导的CD3 T淋巴细胞CD69的表达(P<0.01),其表达率分别下调为(36.16±2.14)%,(30.5±1.72)%,(15.99±0.87)%。培养48、72后,对照组增殖指数(PI)分别为1.01±0.01和1.05±0.01,ConA组PI分别达到1.42±0.01、2.32±0.01,淫羊藿提取物在终质量浓度5、25、50mg/L均抑制T淋巴细胞增殖(P<0.01),48h时PI分别为1.28±0.01、1.26±0.01、1.21±0.01;72h时PI分别为2.30±0.03、2.13±0.02、2.10±0.01。结论淫羊藿提取物能明显抑制ConA刺激的小鼠T淋巴细胞的早期活化和增殖,并呈剂量依赖性。     

雷公藤提取物对正常小鼠免疫功能的影响

目的:通过观察雷公藤各提物对正常小鼠免疫功能的影响,探讨雷公藤抑制免疫与剂量的关系.方法:以生理盐水作为空白对照,以环磷酰胺作为抑制免疫研究的阳性对照,对雷公藤的石油醚、乙酸乙酯、乙醇及水溶部位的提取物首次进行药理学筛选,通过观察其对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,检测其胸腺和脾脏的病理改变.观察雷公藤各提物对正常小鼠免疫功能的影响.结果:以大剂量的雷公藤乙酸乙酯和醇提物抑制免疫作用最强,与环磷酰胺的作用相似.小剂量雷公藤乙酸乙酯和醇提物还能增强正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能.结论:雷公藤提取物抑制免疫的作用与剂量有关.     

昆明山海棠片对小鼠淋巴细胞体外增殖活化影响的研究

目的：研究昆明山海棠片对小鼠脾淋巴细胞增殖、活化标志CD69和CD25及细胞因子IL-4及IFN-γ的影响。方法：无菌分离小鼠脾淋巴细胞,加入不同浓度的昆明山海棠溶液,MTT法检测刀豆蛋白A刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖;流式细胞仪检测活化标志CD69及CD25;酶联免疫法检测细胞因子IL-4及IFN-γ。结果：昆明山海棠片对脾淋巴细胞增殖活化及分泌均有抑制作用。     

雷公藤甲素对体外培养大鼠气道平滑肌细胞增殖及原癌基因的影响

 目的探讨雷公藤甲素(triptolide,TL)对培养的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)增生及原癌基因c-fos与c-jun表达的影响。方法按不同药物分为6组，TL组(浓度分别为5，20，80，320，1 280 μg·L_-1)及地塞米松1 mg·L_-1组，采用MTT法检测不同浓度药物对ASMC增殖的影响，同时进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组c-fos，c-jun 的 mRNA表达水平。结果MTT方法显示TL对ASMC增殖有明显抑制作用，并呈剂量依赖性，TL的IC₅₀为51.52 mg·L_-1；RT-PCR方法显示TL浓度分别为80，320，1 280 μg·L_-1和地塞米松1 mg·L_-1能显著抑制c-fos，c-jun mRNA表达。结论TL有抑制ASMC增生的作用，其机制可能与下调c-fos和c-jun表达有关。     

复方昆明山海棠颗粒对小鼠淋巴细胞体外增殖活化影响的研究

目的：研究复方昆明山海棠颗粒（composite tripterygium hypoglaucum hutch，CTHH）对小鼠脾淋巴细胞增殖、活化标志CD69和CD25及细胞因子IL-4及γ-IFN的影响，为阐明其免疫抑制作用提供分子药理学依据。方法：无菌分离小鼠脾淋巴细胞，加入不同浓度的复方昆明山海棠颗粒溶液，MTT法检测ConA刺激的小鼠脾淋巴细胞增殖；流式细胞仪检测活化标志CD69及CD25；酶联免疫法检测细胞因子IL-4及γ-IFN。结果：CTHH对脾淋巴细胞增殖活化及分泌均有抑制作用。     

黄芪糖蛋白对小鼠脾淋巴细胞的体外作用

 目的 研究黄芪糖蛋白（Huangqi glycoprotein,HQGP）对小鼠脾淋巴细胞体外增殖、细胞周期、分泌白介素2（IL-2）的影响。方法 MTT法测定不同浓度黄芪糖蛋白对ConA、LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应以及对混合淋巴反应（MLR）的影响;流式细胞法测定黄芪糖蛋白对细胞周期、脾细胞分泌IL-2的影响。结果 黄芪糖蛋白明显抑制ConA、LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖,抑制混合淋巴反应;细胞周期分析表明,黄芪糖蛋白抑制T淋巴细胞增殖于G₀G₁期;抑制培养的脾细胞分泌IL-2。结论 黄芪糖蛋白在体外具有抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的作用,其机制可能与抑制IL-2的分泌有关。     

点腺过路黄免疫调节成分的提取及对小鼠淋巴细胞增殖的影响

目的：观察点腺过路黄提取成分体外对小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法：用极性递增的溶剂顺次萃取出全草的脂溶性及水溶性成分，并分别研究它们对小鼠淋巴细胞增殖的影响。结果：氯仿提取部分（10^-10-10^-6g/ml)可显著增强活化的淋巴细胞的增殖，正丁醇提取部分（10^-10-10^-6g/ml)可显著抑制活化的B淋巴细胞的增殖，在10^-6g/ml时可显著增强活化的T淋巴细胞的增殖，而在10^-8-10^-6g/ml时则显著抑制活化的T淋巴细胞增殖。结论：点腺过路黄全草的氯仿及正丁醇部分提取物可能具有免疫调节功能。     

中国弯颈霉胞外多糖对小鼠免疫细胞影响的初步研究

目的:测定中国弯颈霉(Tolypocladium sinense)胞外多糖对体外小鼠免疫细胞功能的影响.方法:将中国弯颈霉在适宜的条件下进行培养,收集培养液并提取胞外多糖(EPS).采用细胞培养的方法测定EPS对体外培养的小鼠巨噬细胞、胸腺和脾脏淋巴细胞的影响.结果:EPS不仅能够显著提高小鼠巨噬细胞吞噬中性红的能力和对肿瘤细胞的杀伤能力(P＜0.05),而且还能显著促进小鼠胸腺淋巴细胞的增殖(P＜0.05),但EPS对体外培养的小鼠脾脏淋巴细胞的增殖没有显著影响.结论:胸外多糖EPS在一定程度上对小鼠的细胞免疫功能有增强作用.     

薯蓣皂苷体外抑制肿瘤细胞增殖的研究

目的通过体外细胞培养技术,研究薯蓣皂苷对多种实体瘤细胞的抑制效应,为进一步开展移植性动物模型研究、抗肿瘤机制探讨以及新药研发提供依据。方法按Mosmann氏MTT比色法略加改进,观察薯蓣皂苷干预后对实体瘤细胞抑制率。结果薯蓣皂苷对A549等6种实体瘤细胞均有不同程度的抑制作用。其中,对A549、KB抑制效果最为显著;Smmc-7721、MCF-7次之,QBC、PC3抑制较弱。结论薯蓣皂苷有抑制多种实体瘤细胞增殖效应,但并无明显选择性,说明薯蓣皂苷抗瘤谱较为广泛,有可能研发成为抗肿瘤新药。     

紫草素对银屑病T淋巴细胞增殖、活化的影响

目的:研究具有凉血、解毒作用的中药单体紫草素对银屑病病理状态下异常活化的T淋巴细胞功能及相关信号转导通路的影响。方法:选取Jurkat E6-1 T淋巴细胞,以佛波醇酯和离子霉素活化Jurkat E6-1 T淋巴细胞,同时将0. 5～2μg/m L浓度的紫草素作用于细胞,采用CCK-8法检测T淋巴细胞增殖能力;流式细胞术检测细胞膜CD69的表达及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的变化;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测T淋巴细胞释放白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;用Realtime-PCR和Western blotting法分别观察核转录因子mRNA及蛋白的表达影响。结果:不同浓度的紫草素均可明显抑制细胞增殖、CD69表达及Th1类细胞因子分泌;均可有效降低[Ca2+]i和蛋白激酶C(PKC)磷酸化蛋白的水平;显著降低核转录因子NF-AT mRNA的表达,下调c-Jun的mRNA及蛋白表达并可抑制核因子-κB蛋白的表达。以上各项指标均有一定量效关系。结论:紫草素可以通过抑制过度活化的T淋巴细胞功能从而发挥免疫调控作用,为紫草素治疗银屑病的作用机制及应用前景提供实验依据。     

雷公藤内酯醇对人结肠癌细胞株SW-480、HT-29体内外作用的研究

 目的 探讨雷公藤内酯醇（triptolide,TPL）在体内外对人结肠癌细胞株SW-480、HT-29的作用。方法 体外运用噻唑蓝（MTT）比色法检测TPL对SW-480、HT-29的增殖抑制作用,细胞DNA片段化及Annexin-Ⅴ/FITC流式细胞术检测TPL对SW-480、HT-29细胞诱导凋亡的作用;体内建立荷人结肠癌细胞裸鼠模型,观察不同浓度TPL静脉注射治疗对肿瘤生长的影响。结果 在体外,TPL在10 μg·L-1时即对2种结肠癌细胞具有明显的抑制生长作用,且呈时间和剂量依赖性,40 μg·L-1时具有明显的诱导凋亡作用,凋亡比例分别达22.2%和27.3%;在体内,TPL能显著抑制2种肿瘤的生长,隔日0.4 mg·kg-1静脉给药时其抑瘤率分别达93.7%和94.5%。结论 TPL在体内外均具有明显的抗结肠癌作用。     

雷公藤、防己醇提物对淋巴细胞和环氧化酶的影响

目的:探讨雷公藤、防己醇提取物对淋巴细胞和环氧化酶的影响.方法:测定两种药物的醇提物引起小鼠胸腺淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖的变化,新生小公牛颈动脉内皮细胞的6-keto-PGF1α和小鼠腹腔巨噬细胞的PGE2含量.结果:雷公藤和防己醇提物对小鼠胸腺淋巴细胞和脾脏淋巴细胞的增殖有抑制作用.雷公藤醇提物对环氧化酶-1(COX-1)和环氧化酶-2(COX-2)有不同程度的抑制作用.防己醇提物对COX-1有抑制作用,而对COX-2无抑制作用.结论:两种药物的祛风湿的部分机理可能是由于抑制淋巴细胞增殖和环氧化酶而介导的.     

炙甘草和甘草酸对翻转小鼠离体小肠糖-钠转运电位的影响

利用翻转小鼠离体小肠囊的方法，观察炙甘草和甘草酸对葡萄糖－钠转运电位的影响，借以了解炙甘草和甘草酸对与糖－纳转运电位密切相关的Na＋、K＋－ATP酶的影响。结果100g／L炙甘草和2．5mmol／L甘草酸均可降低PD（P＜0．01），推测炙甘草和甘草酸可对Na＋、K＋－ATP酶产生抑制作用。