长链非编码RNA对耐药非小细胞肺癌细胞生物学特性的影响

目的 探讨转录失调的长链非编码RNA(LncRNA)对耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞生物学特性的影响及作用机制。方法 选择2019年4月至2021年2月秦皇岛市第一医院收治的对化学治疗药物耐药的NSCLC患者61例为研究对象。采用经皮肺穿刺的方法获取患者的肺癌组织和癌旁组织,并采用转录组测序及LncRNA表达定量分析方法筛选出2种组织中差异表达的LncRNA。将肺癌组织和癌旁组织中LncRNA表达量比较差异有统计学意义的HOXA11-AS转染A549/DDP细胞(HOXA11-AS转染组),另取A549/DDP细胞转染空载体作为对照组。采用噻唑蓝法检测2组细胞的增殖能力,划痕愈合实验检测2组细胞的迁移能力,Transwell法检测2组细胞的侵袭能力,Western blot法测定2组细胞中磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白的表达。结果 共筛选出311个差异表达LncRNA,共表达最多的前10个LncRNA中,HOXA11-AS在肺癌组织中的表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。培养1 d时,2组细胞的增殖能力比较差异无统计学意义(P>0.05)...     

长链非编码RNA MUC5B-AS1在人肺腺癌细胞系中的功能研究

目的 研究lncRNA MUC5B-AS1基因在肺腺癌中的表达情况及对肺腺癌细胞系生物学行为的影响.方法 利用RT-PCR、qRT-PCR检测肺腺癌细胞系中MUC5B-AS1基因的表达情况;构建MUC5B-AS1过表达载体,通过转染构建MUC5B-ASI过表达细胞系;采用CCK-8检测肺腺癌细胞的增殖情况;应用Transwell小室检测MUC5B-AS1过表达对肺腺癌细胞系迁移和侵袭的影响.结果 检测了MUC5B-AS1在4株肺腺癌细胞系(A549、SPCA1、H1975和H1299)和1株肺正常上皮细胞系(HBE)中的表达情况,发现MUC5 B-AS1在H1299细胞系中表达最低,同时A549细胞系表达最高;通过转染构建MUC5B-AS1过表达H1299、A549细胞系,利用qRT-PCR检测细胞系中MUC5B-AS1基因的表达,与对照组比较,MUC5B-AS1基因在H1299、A549细胞系均升高,且有统计学差异(P ＜0.05);CCK-8检测细胞增殖,与对照组比较过表达MUC5B-AS1对H1299、A549细胞生长并无影响(P＞0.05);应用Transwell小室检测MUC5B-AS1过表达对肺腺癌细胞系迁移和侵袭,过表达MUC5B-AS1促进H1299、A549细胞的迁移和侵袭,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 MUC5B-AS1可能在肺癌的迁移和侵袭发挥重要作用,但对肺腺癌细胞的增殖能力没有显著影响.     

长链非编码RNA对化疗耐药作用的研究进展

肿瘤细胞对化疗药物产生的耐药性常影响疗效,导致肿瘤治疗失败;药物外排增加、药物靶点突变和DNA损伤修复增强等是导致肿瘤耐药的主要机制。长链非编码RNA （lncRNA）在表观遗传修饰、转录以及转录后水平广泛的调控基因的表达,对肿瘤耐药的发生和发展发挥重要作用。本文将综合肿瘤耐药及lncRNA对耐药调控机制做一综述。     

长链非编码RNA在胃癌耐药中研究进展

<正>胃癌是威胁人类健康最常见的恶性肿瘤之一,全亚洲其致死率居恶性肿瘤第2位[1-3]。虽近年来在胃癌综合治疗方面取得了长足的进展,但总体预后并不乐观。其中,肿瘤细胞对化疗药物耐药是导致临床治疗失败的主要原因之一。已有大量关于蛋白编码基因在耐药中的研究,较少从非编码基因层面探讨肿瘤耐药机制。而近年研究发现非编码基因也参与了耐药过程[4-6]。其中,长链非编码RNA(Long noncoding RNA,     

长链非编码RNA DNM3OS在胃癌中的研究

目的 本研究旨在探讨DNM3OS对胃癌细胞的作用及其对胃癌患者预后预测的作用。方法 选取2012年1月~2016年1月在笔者医院接受手术的胃癌患者,提取总RNA,检测DNM3OS的水平,随访患者预后。同时培养胃癌细胞AGS和MKN45细胞系,采用DNM3OS干扰RNA沉默DNM3OS,通过Tunel方法检测胃癌细胞的凋亡水平,通过MTT实验检测细胞活性;采用免疫印迹法检测信号通路。结果 与癌旁组织比较,DNM3OS在胃癌组织中的表达显著上调(P＜0.05),且DNM3OS高表达患者肿瘤浸润深度,淋巴结转移和TNM分级与DNM3OS低表达患者比较,差异有统计学意义(P＜0.05);DNM3OS高表达患者病死率明显高于DNM3OS低表达患者(P＜0.05)。在胃癌细胞AGS和MKN45细胞系中沉默DNM3OS后,DNM3OS沉默组细胞活性较对照组明显降低(P＜0.05),细胞凋亡较对照组明显增加(P＜0.05);免疫印迹法结果显示,DNM3OS沉默组细胞Akt的活化较对照组明显降低(P＜0.05)。结论 DNM3OS的表达与胃癌患者预后明显相关,其通过增加Akt的活化促进胃癌细胞的生存。     

长链非编码RNA PCAT-1对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响及作用机制研究

目的 研究长链非编码RNA前列腺癌相关转录本1(lncRNA PCAT-1)对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法 qRT-PCR检测lncRNA PCAT-1在胰腺癌细胞系Capan-1、Capan-2、PANC-1、SW1990和正常胰腺细胞hTERT-HPNE中的表达水平.lncRNA PCAT...     

长链非编码RNA与肺癌的关系研究进展

长链非编码RNA是一类长度大于200个核苷酸、因缺少有意义的开放阅读框而不具有编码蛋白功能的非编码RNA分子。近年来的研究表明,长链非编码RNA在肿瘤的发生、发展过程中起着重要的作用。本文就长链非编码RNA在肺癌中的异常表达、与肺癌发生和转移的关系、在肺癌患者早期诊断和判断预后中的意义等研究进展做一综述,为肺癌的早期诊断和治疗提供新的思路。     

长链非编码RNA的保守性及其在非模式生物长链非编码RNA筛选中的应用

长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)的保守性表现在一级结构、空间结构、转录位置、剪接模式及组织分布等方面,是目前lncRNA研究的热点和难点.不断深入的lncRNA保守性研究可应用于参考基因组相对匮乏的非模式生物lncRNA的筛选过程,并且极大地提升了非模式生物lncRNA数据库建立的完整性和准确性.借助针对开放阅读框长度、密码子分布与出现频率、功能性结构域等保守信息开发而来的lncRNA筛选工具或流程如CPC、PLAR(pipeline for lncRNA annotation from RNA-seq data)等,已成为目前非模式生物lncRNA的筛选及其参考数据库构建的新策略.本文就lncRNA的保守性及其在非模式生物lncRNA筛选中的应用作一综述,并简要介绍了一种运用其保守性的筛选方法——PLAR.     

长链非编码核糖核酸牛磺酸上调基因1在乳腺癌中的表达及其对细胞增殖凋亡的影响

目的  探讨长链非编码核糖核酸（lncRNA）牛磺酸上调基因1（TUG1）在乳腺浸润性导管癌（IDC）中的表达及其对乳腺癌细胞增殖及凋亡功能的影响。方法  筛选2013年1月~12月该院乳腺病科行手术切除并经病理检查证实为IDC患者的乳腺癌及对应癌旁组织40例。运用荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测lncRNA-TUG1在IDC患者肿瘤及癌旁组织中的表达水平,整理分析lncRNA-TUG1表达与患者临床病例资料间的相关性;采用lncRNA-TUG1特异性siRNA转染人乳腺癌MCF-7细胞,采用CCK-8试验检测转染siRNA后MCF-7细胞增殖能力的变化;流式细胞仪检测转染后MCF-7细胞凋亡变化。采用qRT-PCR、Western-blot检测转染后P27表达变化。结果  lncRNA-TUG1在IDC组织中表达水平显著高于对应癌旁组织（t =4.273,P <0.001）,IDC组织中lncRNA-TUG1高表达与肿瘤直径增大（P =0.033）及高TNM分期（P = 0.045）显著相关;lncRNA-TUG1特异性siRNA转染MCF-7细胞后可显著抑制细胞增殖（P =0.041）并上调凋亡细胞比例（t =3.206,P =0.007）;qRT-PCR及Western-blot结果证实,沉默lncRNA-TUG1后可显著促进P27 mRNA及蛋白表达水平（P <0.001）。结论  lncRNA-TUG1在IDC组织中表达上调并与肿瘤恶性临床病理特征有关,lncRNA-TUG1可能通过下调抑癌基因P27的表达来促进IDC生长。

     

长链非编码RNA BCYRN1对SKOV3细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨长链非编码RNA brain cytoplasmic RNA 1在卵巢癌组织中的表达及对SKOV3细胞恶性生物学行为的影响.方法 选取温州市中心医院2017年3月-2019年3月收治的32例卵巢癌患者癌组织及其相应的 癌旁组织标本,正常卵巢上皮细胞系IOSE和卵巢癌细胞系(SKOV3、HO8910、A2780...     

长链非编码RNA肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肌动蛋白纤维相关蛋白1-反义RNA1(AFAP1-AS1)对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法将人绒毛膜癌细胞JEG-3随机分为空白对照组、空白载体组和LncRNA AFAP1-AS1过表达组。空白对照组细胞未做任何处理,空白载体组细胞转染空白载体,LncRNA AFAP1-AS1过表达组细胞转染LncRNA AFAP1-AS1过表达载体。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot法检测JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白的表达,采用细胞计数试剂盒-8实验、Transwell小室实验及流式细胞术检测JEG-3细胞的增殖、迁移和凋亡情况。结果 LncRNA AFAP1-AS1过表达组JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA和蛋白相对表达量均高于空白对照组和空白载体组(P <0. 05);空白对照组和空白载体组JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P> 0. 05)。LncRNA AFAP1-AS1过表达组细胞增殖能力、透过分子筛的细胞数显著低于空白对照组和空白载体组,细胞凋亡率显著高于空白对照组和空白载体组(P <0. 05);空白对照组与空白载体组细胞增殖能力、透过分子筛的细胞数及细胞凋亡率比较差异均无统计学意义(P>0. 05)。结论 LncRNA AFAP1-AS1可上调人绒毛膜癌JEG-3细胞中Caspase-3、Caspase-9 mRNA及蛋白水平,对JEG-3细胞的增殖及迁移有抑制作用,同时可诱导其凋亡。     

长链非编码RNA调节脂肪发育与形成的研究进展

长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)曾一度被认为是基因组转录“噪音”,然而近年来大量研 究证实其能调节基因表达,参与人类众多疾病的发生发展。LncRNA可分别与蛋白、DNA和RNA相互作用,通过表 观修饰水平、转录水平、转录后水平调节以及充当生物媒介等方面参与基因表达的调控。近年来随着肥胖及相关 疾病的发生率越来越高以及其对人类健康和社会发展产生的严重影响,科学家们也试图进一步从非编码RNA领域来 探索肥胖的发病机制。越来越多的lncRNA被证实参与对脂肪组织(白色脂肪和棕色脂肪)成脂、发育以及能量代谢的 调控。     

长链非编码RNA HCG18对肝癌细胞生物学活性的影响

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)人类白细胞抗原复合体(HCG18)在肝癌细胞中的表达及作用。方法选取23对来自郑州大学第一附属医院的肝癌、癌旁组织和购自中国科学院细胞库的人肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H和正常肝细胞LO2作为研究对象。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肝癌和癌旁组织及肝癌细胞系和正常肝细胞中HCG18的表达。采用小干扰RNA(siRNA)技术沉默MHCC97H和Hep3B细胞中HCG18的表达,同时分别设置阴性对照组,采用si-NC对其进行转染。采用克隆实验、Transwell体外迁移实验、流式细胞周期和凋亡实验检测细胞增殖能力、侵袭能力、细胞周期和凋亡率。结果肝癌组织中HCG18表达量较癌旁组织高,差异有统计学意义(P<0.001),肝癌细胞系Hep3B、MHCC97H中HCG18表达量均较正常肝细胞LO2高,差异有统计学意义(均P<0.01)。转染HCG18 siRNA后,肝癌细胞MHCC97H和Hep3B的增殖、侵袭能力均低于转染si-NC的阴性对照组。HCG18 siRNA转染的MHCC97H和Hep3B细胞被阻滞在G_0/G_1期,凋亡率高于转染si-NC的阴性对照组,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 HCG18在肝癌细胞中高表达,其可促进肝癌细胞的增殖和侵袭,有望成为肝癌治疗的新靶点。     

长链非编码RNA BANCR对非小细胞肺癌增殖和侵袭的影响

目的:探讨长链非编码RNA BANCR在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及细胞系中的表达水平,以及BANCR对NSCLC细胞增殖和侵袭的影响?方法:用定量PCR技术检测NSCLC组织及细胞系中BANCR的表达水平;通过转染pcDNA-BANCR上调BANCR的表达水平,并通过qPCR检测转染效率?用Transwell实验检测上调BANCR的水平对SPC-A1细胞和A549细胞增殖和侵袭能力的影响,Western blot检测这2种细胞中上调BANCR的水平对上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达水平的影响?结果:相比正常肺组织及细胞,在NSCLC组织和细胞中BANCR的表达出现显著下调?MTT实验显示,上调BANCR的表达能降低SPCA1细胞和A549细胞的增殖和侵袭能力?BANCR过表达能通过上调E-cadherin表达并下调Vimentin表达,影响EMT?结论:BANCR可通过影响EMT,抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭?     

c-myc RNA干扰增强肺腺癌细胞对吉西他滨的敏感性

目的：探讨c-mycRNA干扰后肺腺癌细胞A549对吉西他滨敏感性的改变。方法：构建c-myc特异RNA小干扰（siRNA）的表达载体,转染A549细胞,G418筛选出稳定表达c-myc特异siRNA的细胞株,荧光实时定量RT-PCR和免疫印迹检测c-myc基因表达水平。吉西他滨作用于干扰有效A549细胞,分为GE＋siRNA组、GE组、siRNA组和空白对照组。每组12例,四甲基偶氮唑蓝法检测吸光度,流式细胞仪测凋亡率。结果：成功构建c-myc-siRNA表达载体。c-myc基因mRNA和蛋白表达下降71.9%和85.6%。吉西他滨作用于c-myc-siRNA细胞其吸光度在各时间点较单用吉西他滨组、单用c-myc-siRNA组以及对照组均下降（P＜0.01）,凋亡率增加（P＜0.01）。结论：c-mycRNA干扰后A549细胞的增殖减慢,对吉西他滨的敏感性增加。     

长链非编码RNA HOTAIR 对胃肠间质瘤 细胞化疗敏感性的影响

目的 研究长链非编码RNA（lncRNA）HOTAIR 对胃肠间质瘤细胞伊马替尼化疗敏感性的影响, 并探讨其作用机制。方法 首先在胃肠间质瘤组织中检测HOTAIR 的表达水平。选择胃肠间质瘤细胞GIST-T1 为研究对象,si 干扰HOTAIR 后,采用dUTP 缺口末端标记测定法（TUNEL）和半抑制浓度（IC50）法检 测GIST-T1 对伊马替尼化疗敏感性的变化。通过实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）法、RNAhybird 软件分析和荧光素酶报告法,筛选并验证与HOTAIR 存在内源性竞争关系的miRNAs。最后将miRNA 与 HOTAIR 共转染,观察HOTAIR 与miRNA 的竞争性结合能否改变GIST-T1 细胞对伊马替尼的化疗敏感性。 结果 HOTAIR 在胃肠间质瘤组织中表达含量高于正常组织（P <0.05）。伊马替尼药物作用下,si-HOTAIR 组细胞IC50 低于si-NC 组（P <0.05）;TUNEL 阳性细胞比例高于si-NC 组（P <0.05）;差异有统计学意 义。qRT-PCR 结果显示,si-HOTAIR 组细胞miRNA-21 表达水平高于si-NC 组（P <0.05）;RNA hybird 分析及荧光素酶验证结果显示HOTAIR 与miR-21 核心序列区存在碱基互补。将miRNA-21 与HOTAIR 共转染GIST-T1 细胞后,与miRNA-21+HOTAIR- 突变型组比较,miRNA-21+HOTAIR- 野生型组细 胞IC50 增高（P <0.05）;TUNEL 阳性细胞比例降低,差异有统计学意义（P <0.05）。结论 长链非编码RNA HOTAIR 可通过内源性竞争结合miRNA-21,降低胃肠间质瘤细胞对伊马替尼的化疗敏感性。