血液制品抗HCV酶免疫检测方法探讨

目的通过对各种抗HCV酶免疫试剂检测效果的比对分析,寻求合适的检测方法.方法抗HCV阳性血清,分别用国产第二代抗HCV ELISA试剂、进口第三代抗HCV ELISA试剂进行测定,结果分别与分片段试剂及RT-PCR测定结果进行比较;在此基础上进行配对组合,以达到较高的检出率.结果以RT-PCR测定结果为标准,国产试剂平均检出率为65.24%,进口试剂平均检出率为80.32%,两者比较P＜0.01;以分片段试剂测定结果为标准,进口试剂与国产试剂对HCV-C区、NS5区检出率比较,P＜0.01;二种试剂配对检测提高了检出率.结论进口第三代试剂比国产试剂检出率高,血站进行HCV检测宜用进口试剂;采用二种互补性好的试剂联合检测有助于提高检出率.     

套式RT—PCR在丙型肝炎诊断中的应用

目的：探讨逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）在丙型肝炎诊断中的应用。方法：应用套式RT－PCR检测肝炎病人血清中HCVRNA,并同时用固相放射免疫法（RLA）检测病人血清中抗HCVRNA抗体。结果：193份肝炎病人血清中11．9％（23／193）可检出HCVRNA,10．9％（21／193）可检出抗HCVRNA抗体,两种检测结果相符率达98．4％,结论：套式RT－PCR对诊断丙型肝炎快速、特异性高,同时该检测法可避免放射性损伤和污染,在临床上对丙型肝炎的诊断有很大的应用价值。     

HCV慢性患者干扰素治疗前后血清HCV RNA水平的变化

目的 探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因含量与干扰素疗效的关系。方法 采用“ＥＬＩＳＡ模式”化的ＨＣＶ－ＲＮＡ聚合酶链反应－杂交定量（ＰＣＲ－Ｈｙｂ）检测了１９例慢性丙型肝炎患者α－干扰素治疗前后的血清中的ＨＣＶ－ＲＮＡ的水平。结果 ３ＭＵ、６ＭＵα－干扰素治疗,分别是１１例、８例,完全反应者分别占７２．５％、７５％,部分及无效反应者分别占２７．５％、２５％（Ｐ〉０．０５）。两种剂量的完全反应者治疗前     

慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染

研究45例慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染。病例均为后发抗HCV阳性的慢性HBsAg携带者,无先抗HCV阳性而后HBsAg阳性的个案,这可能反映HBV和HCV两种病毒感染的先后次序、不同传播方式及HBV对HCV易感性的增进作用。用RT-PCR检出30/45例血浆HCV RNA阳性,不仅确证HCV重叠感染诊断,还证实HCV复制及传染性。23/30例HCVRNA阳性者有输血史,提示输血是其获得HCV重叠感染的主要途迳。用PCR检出25/45例血清HBV DNA阳性,其中抗HBe阳性者的HBV DNA检出率为42.9％(12/18),明显低于(P<0.001)我们前文报道,提示重叠HCV感染对HBV复制有抑制作用。此外有9例抗HBe阳性者,其HBV DNA阴性但HCV RNA阳性,反映HCV可能已取代HBV成为致肝损害的主要病因。     

HBV DNA和HCV RNA检测试剂抗干扰能力验证

目的:评估乙型肝炎病毒(HBV)脱氧核糖核酸(DNA)和丙型肝炎病毒(HCV)核糖核酸(RNA)定量检测试剂的抗干扰能力.方法:选择高、低浓度HBV DNA和HCV RNA阳性血清标本,采用实时荧光定量PCR技术检测不同浓度血红蛋白(hemoglobin,Hb),总胆红素(total bilirubin,TBIL)和甘油三酯(triglyceride,TG)对2种阳性血清标本检测的干扰.以偏差<±7.5％ 为可接受范围.结果:HBV DNA检测,当Hb浓度≤4.5 g/L时,各样本均未受到干扰,Hb浓度≥8.1 g/L时,各样本受到不同程度的干扰;当TBIL浓度≤370μmol/L时,高浓度样本检测未受到明显干扰,TBIL浓度≥666μmol/L,各样本受到不同程度的干扰;TG浓度≤12.6 mmol/L时,未对检测造成干扰.HB≤8.1 g/L,TBIL浓度≤666μmol/L,TG浓度≤12.6 mmol/L均未对HCV RNA检测造成干扰.结论:HBV DNA和HCV RN A定量检测试剂具有一定的抗干扰能力.     

HCV NS-5区分型引物法检测新疆两城市HCV基因型

目的：了解新疆两城市丙型肝炎病毒感染者中存在哪些基因型，以便为今后防治ＨＣＶ感染提供依据。方法：用ＲＴ－ＰＣＲ技术，选择ＨＣＶＮＳ－５区设计的分型引物（１ａ、１ｂ、２ａ和２ｂ）进行基因分型。结果：我们检测了１２８例（乌鲁木齐市９７例，克拉玛依市３１例）已证实为丙型肝炎病毒感染者的血清，其中基因分型检测出的９８例中可分为１ａ型１４例（１４．３％）、１ｂ型５８例（５９．３％）、２ａ型１１例（１１．８％）、２ｂ型１０例（１０．３％），混合感染５例（５．２％）（１ａ＋１ｂ型４例，１ｂ＋２ａ型１例）。在乌鲁木齐市和克拉玛依市的ＨＣＶ感染者中１ａ型分别为１１／７３例和３／２５例，１ｂ型分别为４６／７３例和１２／２５例。结论：表明新疆至少存在ＨＣＶ１ａ、１ｂ、２ａ和２ｂ基因型，但以１ｂ基因型感染为主。比较乌鲁木齐市和克拉玛依市两城市的ＨＣＶ基因型分布显示１ａ型和１ｂ型分布有明显差别（χ２＝３６，Ｐ＜０．００１）。另３０例用本方法未能检出分型，提示可能还有其它基因型存在     

RT－PCR检测HCV RNA假阳性结果分析

ＲＴ－ＰＣＲ检测ＨＣＶＲＮＡ假阳性结果分析宋燕斌，崔晓红，潘卫，王锦红，戚中田丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是新近认识的一种单股正链ＲＮＡ病毒，在感染者外周血中的含量低［１］，目前认为逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ是诊断ＨＣＶ感染的最敏...     

HCV感染者血清及外周血单个核细胞HCV RNA检测及其意义

目的：探讨同时检测HCV感染者血清及外周血单个核细胞（PBMC）中HCVＲＮＡ的意义。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ方法对３１例ＨＣＶ感染者进行血清及ＰＢＭＣ ＨＣＶ ＲＮＡ检测。结果 ＰＢＭＣ ＨＣＶRNA阳性率（74．19％,23／31）显著高于血清HCV RNA阳性率（23．03％,9／31）。结论：同时检测HCV感染者血清及外周血单个核细胞（PBMC）中HCV RNA可减少漏诊,PBMC中的HCV可能是HCV感染慢性化的重要之一。通过对HCV感染者同时进行血清及PBMC中HCV ＲＮＡ检测,可为丙型肝炎的诊断、治疗及预后的判断提供较为可靠的指标,对丙型肝炎慢性化机制的研究具有重要意义。     

应用巢式PCR检测原发性肝癌患者血清中HCV—RNA

为了探讨原发性肝癌的发生是否与丙型肝炎病毒有关,应用巢式PCR技术和ELISA检测40例原发性肝癌患者及50例除外肝病患者血清中HCV—RNA及抗HCV抗体和乙肝二对半。结果:原发性肝癌组中,乙肝二对半阳性37例(92.5％),抗HCV阳性8例(20％),HCV—RNA阳性13例(32.5％),HCV总感染率为35.0％(14例);对照组分别为16例(40.0％),2例(4.0％)及3例(6.0％)。在3例HBV—M阴性PHC患者中,HCV—RNA阳性2例。结论:在我国PHC的发生不仅与乙肝病毒感染有关,还与丙型肝炎病毒有关。     

丙型肝炎患者唾液和尿HCV－RNA检测及其意义

采用套式聚合酶链反应检测丙肝患者血清，唾液和尿各５２份。结果血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性３９例，２３例分别在尿和唾液中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ；１３份血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者中，尿和唾液均未检出ＨＣＶ－ＲＮＡ，有非常显著差异（Ｐ＝０．０００１）。血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者分ＡＬＴ正常组和异常组，尿和唾液ＨＣＶ－ＲＮＡ阳检率分别为１８％和７５％，亦有非常显著差异（Ｐ＝０．００１）。对照组１３例正常人血清、唾液和尿ＨＣＶ－ＲＮＡ均为阴性。表明丙肝患者尿和唾液中能否检出ＨＣＶ－ＲＮＡ与病毒血症及ＡＬＴ有关，提示丙肝患者的尿和唾液可能为ＨＣＶ感染的传播媒介。     

应用聚合酶链反应进一步探讨原发性肝癌与HBV,HCV感染的关系

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测原发性肝癌（ＰＨＣ）及肝硬化（ＬＣ）患者血中ＨＢＶ－ＤＮＡ及ＨＣＶ－ＲＮＡ，同时检测血中乙肝５项标志及抗－ＨＣＶ。结果５６例ＰＨＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者４３例（７６．７８％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者４２例（７５．００％），两种方法联合应用阳性率为４９例（８７．５％）；其中３４例检测ＨＣＡ－ＲＮＡ阳性者８例（２３．５３％）。６２例ＬＣ中，ＨＢＶ５项标志阳性者３５例（５６．４５％），ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性者３８例（６１．２９％），二者联合应用阳性数为４５例（７２．５８％），其中３４例检测ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性数为９例（２３．６８％）。ＰＨＣ组ＨＢＶ感染率显著高于ＬＣ组（Ｐ＜０．０５），ＨＣＶ感染率两组差异无显著性（Ｐ＜０．０５）。并对ＨＢＶ、ＨＣＶ感染与ＬＣ、ＰＨＣ的发生发展作进一步讨论。     

丙型肝炎病毒感染与原发性肝癌的关系——不同人群血清HCV RNA的调查

本文以聚合酶链反应(PCR)对重庆地区各种慢性肝病(CLD,n=182)和献血员(n=35)血清HCV RNA的存在状况进行了初步调查。结果发现:①HCV RNA在原发性肝癌(PHC)、肝硬化(LC)、慢性肝炎(CH)及献血员中的检出率分别为36.6％(34/93)、31.7％(20/63)、15.4％(4/26)和2.9％(1/35);②多数HCV RNA阳性CLD(41/58)与HBsAg或HBV DNA双阳性,单纯HCV RNA阳性见于15.1％(14/93)PHC、3.2％(2/63)LC和3.8％(1/26)CH。此资料提示约20％PHC可能与HCV-HBV双重感染有关,约15％PHC可能与单独HCV感染有关。     

丙型肝炎病毒的垂直传播

丙型肝炎病毒的垂直传播陈伟红，周永兴，阎荣，姚志强（西京医院传染病科，唐都医院传染病科）关键词丙型肝炎病毒，垂直传播，逆转录－聚合酶链反应中图法分类号Ｒ５１２．６３Ｇｅｒｓｏｎ等［１］报道丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染者约５０％转为慢性，其中２０％转为肝...     

聚合酶链反应技术在丙型肝炎病毒检测中的应用

探讨聚合酶链反应技术在丙型肝炎病毒检测中的应用。对ＨＣＶ抗体阳性的献血员８８例同时检测ＰＣＲ与ＡＴＬ。结果；ＡＬＴ增高组ＰＣＲ９０％阳性，而ＡＬＴ正常组ＰＣＲ仅５１．７％阳性。说明肝细胞损伤与ＨＣＶ基因在体内存在有密切关系，ＰＣＲ的检测有助于对病情与疗铲的了解及献血员的筛选。     

PCR技术在传染病病原诊断中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction，PCR)，最初由Mullis等于1985年首先建立，是一种在体外模拟自然DNA复制过程，用聚合酶催化物扩增核酸分子的新技术。PCR技术以其快速、简便、敏感度高、特异性强等优点，而广泛应用于分子生物学、医学、农业和法医等领域。